微生物源追踪技术在不同污染水体中的应用评价

目的建立南京秦淮河上游中山河和淮河流域桂五水库的微生物源追踪抗生素敏感性分析（antibiotic resistance analysis,ARA）数据库,追踪水体中的污染来源,探讨该方法在不同水体中追踪微生物污染源的应用价值。方法采集目标水体周边自然村中人、家畜、家禽等的粪便标本及生活和工业污水排放口直接排放的污水,分离并确认指示菌,建立已知源微生物源追踪数据库。按计划采集未知源水样,分离指示菌并使用JMP7．0软件进行污染源追踪及效果评价。结果秦淮河上游中山河水体污染源主要为工业及生活污水和狗的粪便污染。淮河流域桂五水库环境水污染源则主要为人和羊的粪便污染。结论微生物源追踪方法不仅可以应用于原生态水体,而且可以应用于受生活、工业双重污染水体的微生物污染源追踪,均能取得较好的效果。     

水库水非点源粪便污染微生物源追踪法鉴定

目的应用细菌基因组重复序列PCR技术(rep-PCR)微生物源追踪方法对江苏省盱眙县桂五水库中粪便污染来源进行追踪。方法分别采集不同季节水库周边已知来源粪便标本,分离大肠埃希菌作为指示菌,建立已知污染源指示菌rep-PCR特征指纹库,用基因聚类分析软件计算平均正确归类率,进行判别分析和多元方差分析;同期采集水库水样,分离并确认指示菌,进行rep-PCR扩增,与已知污染源数据库进行对比,判断水样中指示菌污染来源。结果将已知源数据库分为2,3,4,5和9类时,平均正确归类率分别为89.19%,77.58%,76.69%,75.25%和70.92%;已知源数据库可区分指示菌的不同来源。对534株水库水样指示菌微生物源追踪结果显示,人、鸡、鸭、鹅、狗、猪、牛、羊和野生动物各占26.49%,14.74%,7.77%,5.78%,3.98%,7.97%,10.96%,8.76%和8.57%。结论桂五水库粪便污染来源种类繁多,其中人、鸡和牛为主要污染源;该方法为查找水体粪便污染来源及污染整改效果评估提供了新技术。     

rep-PCR基因指纹图微生物源追踪方法建立的研究

[目的]建立重复序列聚合酶链反应(rep-PCR)微生物源追踪方法,应用于淮河流域某水库的粪便污染来源追踪.[方法]采集已知来源的人和动物粪便标本以及水样标本,分离并确认指示菌大肠杆菌,以BOXA1R为引物进行PCR扩增;用Bionumerics 4.0软件对rep-PCR基因指纹图进行判别分析和多元方差分析并计算各源种类的正确归类率.[结果]2分类、4分类和10分类的正确归类率分别为:85.60%、79.20%和70.98%.判别分析和多元方差分析结果显示rep-PCR基因指纹图能将已知源不同来源指示菌区分开.水样中主要粪便污染来源为猪、鸡和人.[结论]建立的rep-PCR微生物源追踪方法能较好地区分水体中指示菌的不同来源,该方法的建立为查找水体中粪便污染来源以及水体治理提供了新技术.     

应用rep-PCR微生物源方法追踪夏秋季桂五水库粪便污染来源

目的：应用重复序列聚合酶链反应（rep-PCR）微生物源追踪方法，追踪夏秋季江苏桂五水库的粪便污染来源追踪。方法：采集已知来源的人和动物粪便标本以及夏秋两季水样标本，分离并确认指示菌大肠杆菌，以BOXAIR为引物进行PCR扩增；用Bionumerics4．0软件对rep-PCR基因指纹图进行判别分析和多元方差分析并计算各源种类的正确归类率。结果：10、5、3和2分类法平均正确归类率分别为68．13％、74．76％、82．36％和86．03％。判别分析和多元方差分析结果显示rep—PCR基因指纹图能将已知源不同来源指示菌区分开。水样中主要粪便污染来源为人、鸡和牛。结论：建立的rep—PCR微生物源追踪方法能较好地区分水体中指示菌的不同来源，水体标本监测显示桂五水库粪便污染来源种类多，其中人、鸡和牛相对较多，提示应对桂五水库地区加强人、家禽和家畜动物粪便的无害化管理。     

抗生素敏感性微生物源追踪方法建立

目的 建立抗生素敏感性微生物源追踪方法,以分析淮河流域某水库粪便污染来源.方法 采集水库周边已知来源粪便标本,分离指示菌,接种至含抗生素的培养基,筛选能区分不同来源指示菌的抗生素浓度,用YMP7.0软件进行判别分析检验效果.同时采集水样进行粪便污染来源追踪.结果 筛选的不同抗生素及其浓度能将已知来源指示菌正确归类率分别为93.05%(2分类)、85.75%(3分类)和78.53%(9分类).100株指示菌中有58株来自家畜,25株来自家禽,11株来自狗,4株来自人,2株来自野生动物.水样标本中主要的粪便污染来源为猪、牛、鸡,分别占水样分离指示菌总数的36%,17%和15%.结论 所筛选的抗生素浓度均能较好地区分指示菌的不同来源,该方法的建立可以为查找水体粪便污染来源以及水体治理提供参考与帮助.     

应用不同微生物源追踪方法追踪水库中粪便污染来源

目的:用两种不同的微生物源追踪(Microbial source tracking,MST)方法对江苏省盱眙县桂五水库粪便污染来源进行追踪。方法:于春、夏、秋、冬4季分别采集水库周边已知来源粪便标本,分离大肠埃希菌并作为指示菌,分别建立已知源指示菌细菌基因组重复序列PCR(repetitive Extragenic Palindromic-Polymerase chain reaction,rep-PCR)特征指纹库和已知源指示菌抗生素敏感性(Antibiotic Resistance Analysis,ARA)数据库,并分别用统计分析及试验设计软件(JMP7.0软件)和基因聚类分析软件(Bionumerics 4.0软件)计算平均正确归类率(Average Rate of Correct Classification,ARCC),以检验各自的宿主来源区分效果。同期采集水样,膜过滤法分离并确认指示菌,分别进行rep-PCR扩增和ARA试验,并分别与已知源指示菌rep-PCR特征指纹库和ARA数据库进行统计学比对,判断桂五水库中粪便污染来源。结果:将已知源指示菌rep-PCR特征指纹库和ARA数据库分别分为2、...     

基于分离培养的微生物源追踪方法的研究进展

微生物源追踪是从水体粪便污染研究开始发展起来,该文对基于分离培养的微生物源追踪部分方法 的原理、应用及进展进行了综述.随着研究技术的不断发展,微生物源追踪的研究范围也逐渐扩大,包括食物、空气等.众多的方法 中,基因型方法 在未来微生物源追踪研究中会有更广阔的应用前景.     

肠道厌氧菌在水体粪便污染源及病原微生物监测中的应用

动物粪便直接排放不仅会造成水体中氮磷含量的升高,同时也造成了病原微生物的传播以至危害人体健康。因此,对水体中生物性污染来源的确定是采取有效防治措施的前题。厌氧菌是动物体肠道的主要菌种,而且部分菌种具有高度的宿主特异性,同时厌氧菌与某些病原微生物在自然环境中具有一定的关联性,因此是水体粪便污染源的良好指示菌。该文对主要的肠道厌氧菌进行介绍,并就其与常见的病原微生物在水体中的生存状况及其关联进行概述。     

微生物源追踪研究方法探讨

粪便污染水体是一个世界范围的问题,粪便中致病性细菌、病毒和原虫的介水传播,引起水源性疾病。固定污水排放点的点源污染,如下水道、废水处理厂及工业水的排泄等,或者无固定污水排放点的非点源污染,     

辣椒轻斑驳病毒作为水中粪便污染指示物研究进展

近年来,再生水中人类粪便污染问题日益突出,而常用的水质监测细菌指标粪便指示菌(FIB)并不能监测粪便中病毒的存在;常用病毒指标根据流行疾病的不同、季节性的变化有很大差异。因此需要一种高丰度且稳定粪便污染指示物和可靠的生活污水示踪剂来管理水源中微生物质量。辣椒轻斑驳病毒(PMMoV)是一种人类粪便中普遍存在的高浓度的植物病原体,已被纳入全球29项与水和食品相关的微生物质量和技术目录中。研究发现高丰度、低去除率和无明显季节性变化植物性病原体PMMoV可以敏感地指示水源中粪便污染的存在并追踪受污染的水,是一种有前景的粪便污染指示物。     

微生物源示踪技术在非点源粪便污染源检测中的应用

目的 探究以细菌基因组重复序列PCR技术(repetitive extragenic palindromic consensus sequence-PCR,REP-PCR)为手段的微生物源示踪技术对鉴别非点源污染中养殖动物粪便污染来源的应用价值.方法 采用针对大肠杆菌优化的分离与生化鉴定方法,从大连金州湾沿岸采集猪、牛...     

细菌源追踪技术及进展

细菌源追踪(Bacterial Source Tracking,BST)也称为微生物源追踪(Microbial Source Tracking,MST),是根据水域中指示菌追踪污染物来源,可以将非点源污染转化为点源污染,从而方便进行水环境监测和控制的一门技术。最早由弗吉尼亚理工学院George M·Sim-mons Jr教授提出,将其应用     

污水处理中微生物气溶胶扩散的检测

随着经济的发展和人民生活水平的提高 ,污水排出量增加 ,由污水引起水、食物的污染造成疾病的流行或爆发记述很多。但污水处理过程中微生物对空气的污染报道国内较罕见 ,我们对此进行了一些探讨。一、对象与方法1 污染指标菌选择 :选用大肠杆菌作为空气中来自污水的微生物指标 ,因其来源于粪便 ,污水中普遍大量存在 ,空气中正常情况下难以检出 ,故空气中检出时 ,应考虑污水气溶胶污染的可能。2 .对象 :安丘市污水处理厂曝气池 ,日处理污水 5 40 0ｔ,选择无污水流入的青云山公园人工湖作对照。3 .方法 :在对象下风向 1、2、5、10、2 0、5 0、…     

污水微生物气溶胶污染空气的指示菌选择

为了选择污水微生物气溶胶的现场调查指示菌,本文对曝气池、滴滤池及氧化塘三种类型污水处理厂附近空气中的细菌总数、真菌总数及肠道G(—)杆菌作了定量调查。结果表明以大肠菌群或肠道G(—)菌作为指示菌是适用的。     

医院污水污染水环境中耐热性大肠菌群耐药规律研究

目的:了解并比较医院污水污染前后水体中耐热性大肠菌群的耐药情况,初步探讨医院污水排放对自然水环境中微生物耐药性的影响。方法:于医院污水排放口上游100 m、下游0 m(排放口)、下游150 m、下游300 m采集水样,稀释并以0.45μm孔径的滤膜过滤,于m-FC培养基上培养分离耐热性大肠菌群,随机挑选50株采用API微生物分析系统进行菌种鉴定。同时挑选污水采样期间培养分离自该医院临床标本中的大肠埃希菌共40株。运用K irby-Bauer法对上述菌株进行耐药谱检测。结果:水中分离岀的50株耐热性大肠菌群中,大肠埃希菌是优势菌,比例达82%。医院污水排放后造成耐热性大肠菌群对11种抗生素中的5种耐药率升高(P<0.05),多重耐药率也升高(P<0.01);临床标本与污水排放环境中的大肠埃希菌的耐药谱具有良好的相关性(r=0.943,P<0.01)。结论:医院污水可以造成自然水体耐热性大肠菌群的耐药率增加,耐药谱增宽。     

大肠菌群评价饮用水卫生安全的探讨

卫生指示菌-大肠菌群是在饮用水卫生监测中,用以指示饮用水（样品）卫生状况及安全性的指示性微生物。检测大肠杆菌的目的,是以大肠菌在饮用水中存在与否以及数量多少为依据,对照国家卫生标准,对饮用水的卫生安全性做出评价。大肠菌群是反映饮用水受粪便污染的标志,它的检出标志着饮用水受过人、畜粪便的污染,而且有肠道病原微生物存在的可能性。     

水环境中粪便污染的微生物溯源技术及研究进展

人畜粪便是造成水体病原菌污染的主要因素之一,快速、正确地判别水体污染的来源对保障饮用水及环境水体安全尤为重要。近年来,利用微生物进行水体病原菌污染的溯源分析已成为国际上的研究热点。该文简要介绍微生物溯源技术的基本原理,着重阐述了该技术的方法学,并进一步提出了微生物溯源技术与应用结合的未来研究方向,以期为同领域专家学者提供参考,促进微生物溯源技术在我国的应用。     

污水等环境中O157大肠杆菌的研究

「目的」了解生活及养殖污水等环境中是否存在Ｏ１５７大肠杆菌。「方法」选市区、郊区饲养场、屠宰场、农贸市场、医院和居民生活污水等作为调查对象,按季节定时定点采集污水、禽畜粪便和市场丰板等标本进行Ｏ１５７大肠杆菌分离培养、鉴定。「结果」从养猪场、屠宰场、市场污水和生活污水以及猪粪、鸡粪、猪肉砧板中检出２类Ｏ１５７大肠杆菌（Ｏ１５７：Ｈ７和Ｏ１５７：ＮＭ）。并发现夏秋季污水等环境中Ｏ１５７大肠苗菌检出率     

污水中微生物生态系统的不同生理类群细菌的监测

生活污水、工厂排放的生产用水中各生理类群细菌及其它微生物的活动是外环境水体恶化而污染环境的重要原因之一。寻求简便、易行的方法 ,开展对这些细菌的监测 ,可以为制定预防和治理水污染措施提出科学依据。　　对外环境水中各生理类型细菌研究的常规技术是先分离培养细菌 ,后再分类鉴定并测定其生理生化功能 ,过程繁琐费时。 2 0世纪 80年代Ｋａｕｒｉ[1] 提出多点接种法确定土壤细菌的生理类群及其动态变化 ,其过程仍不简易。由于Ｋａｕｒｉ法的启示 ,我们借鉴微生态学研究中的滴种法[2 ] ,将其用于环境污水中微生物生态系统各生理类群…     

珠江水域微生物的分布特征

目的 了解珠江水域指示菌和常见致病菌的时空分布规律以及相关性.方法 分别于2010年7月(丰水期)和2011年3月(枯水期)采集珠江水域上游、中游和下游5个断面的岸边和中心共20个水样,分别对水样中5种卫生指示菌(菌落总数、总大肠菌群、粪大肠菌群、大肠埃希菌和肠球菌)和4种常见致病菌(沙门菌、志贺菌、弧菌和大肠杆菌O157∶H7)进行检测和分析.结果 珠江水域中除菌落总数和肠球菌外,各项指示微生物指标均呈现下游＞中游＞上游的规律.水体上、中和下游总大肠菌群(4.20× 103～9.49× 104 cfu/ml)、粪大肠菌群(1.84×103～3.09×104 cfu/ml)和大肠埃希菌(6.45× 102～ 1.30× 104 cfu/ml)均存在统计学差异(P＜0.05).珠江岸边指示菌和致病菌均高于中心,丰水期的指示菌和致病菌均不低于枯水期,但差异均无统计学意义(P＞0.05).除菌落总数外,总大肠菌(P＜0.05)、粪大肠菌群(P＜0.01)、大肠埃希菌(P＜0.01)和肠球菌(P＜0.01)均与致病菌总数呈正相关.结论 珠江水域从上游至下游其微生物污染逐渐加重,指示菌与致病菌呈一定的相关性.