神经节苷脂GM1在BMSCs向神经细胞分化的作用

目的 研究体外使用神经节苷脂GM1诱导骨髓间充质干细胞(BMSCs)向神经细胞分化的作用.方法 从健康志愿者髂骨处抽取骨髓5 mL,体外分离、培养、扩增后,用含有10 μg/mL、60 μg/mL、90 μg/mL GM1的无血清培养基诱导BMSCs向神经细胞方向分化.0.5 h、3 h、6 h、24 h后使用倒置显微镜和免疫细胞化学方法观察诱导前后细胞的变化.结果 诱导6 h后各组均有部分细胞胞体收缩、伸长突起,表现出神经细胞的形态.0.5 h、3 h NF、MAP-2阳性细胞比例无统计学意义(P>0.05),6 h、24 h NF、MAP-2阳性细胞比例无统计学意义(P>0.05),6 h、24 h分化率高于0.5 h和3 h(P<0.05),含60 μg/mL GM1的无血清培养基诱导后细胞的分化率高于10 μg/mL组和90 μg/mL组.结论 含60 μg/mL GM1的无血清培养基可以有效地诱导BMSCs向神经细胞分化.     

芹灵冲剂在2215细胞培养内对HBsAg,HBeAg的抑制作用

目的在乙型肝炎病毒(HBV)基因转染的人肝癌细胞系(HepG2)的2215细胞培养中,观察芹灵冲剂(Qinling Chongji,QL)对细胞的毒性和对乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)和e抗原(HBeAg)的抑制效果.方法①2215细胞培养:将配制成细胞(1×105个/mL)接种细胞培养板,96孔板每孔0.2 mL,24孔板每孔1 mL,37℃50 mL/L CO2培养24 h,细胞长成单层后进行实验.②药物对细胞毒性试验:QL 12 g/L用培养液2倍稀释成6个浓度:8,4,2,1,0.5 g/L,加入96孔细胞培养板,每浓度4孔,每4 d换同浓度药液,培养12 d,观察药物对细胞的毒性,设无药物细胞对照.③药物对HBsAg,HBeAg抑制试验:在无毒浓度以下2倍稀释试验药液,3个稀释度分别为4,2,1,0.5 g/L,每浓度3孔,37℃50mL/LCO2培养,每4 d收取培养液,换原浓度药液培养,将d8,d12收集的培养液同时测定HBsAg和HBeAg.④HBsAg和HBeAg测定:用固相放射免疫测定盒测定,方法见说明书,用γ-计数器测定每孔药液cpm值.结果 QL4 g/L加入细胞培养8 d和12 d,三批实验对细胞的半数中毒浓度(TC50)平均为8.7 g/L±0.3 g/L,最大无毒浓度(TC0)为4 g/L在最大无毒浓度(4 g/L)时对细胞分泌HBeAg平均抑制率(8 d)为51.1%±2%和(12 d)为65.0%±1.9%,半数有效剂量(IC50)平均(8 d)为3.1 g/L±0.8 g/L和(12 d)为9.1 g/L±0.9 g/L,与细胞对照比较有显著和非常显著性意义,P＜0.05和P＜0.01;对细胞分泌HBsAg的平均抑制率(8 d)为55.0%±3.9%和(12 d)为61.4%±0.98%,半数有效剂量(IC50)平均(8 d)为3.0 g/L±0.8 g/L和(12 d)为1.7 g/L±0.2 g/L,与细胞对照比较,P值分别为＜0.05和＜0.01,差别有显著性.结论实验表明QL在2215细胞中培养12 d,最大无毒浓度可明显抑制HBeAg和HBsAg的分泌.     

ACM对tbOOH致原代神经细胞损伤及凋亡的影响

目的　探讨星形胶质细胞条件培养液 (ACM)对叔丁基脂氢过氧化物 (tb OOH)诱导的原代神经细胞损伤和凋亡的影响。方法　分离培养 SD大鼠大脑皮层星形胶质细胞和神经细胞 ,以 ACM和 /或 tb OOH处理神经细胞后 ,采用 MTT法和光镜评估细胞的生存力 ,Hoechst332 5法观察细胞凋亡 (率 )的变化 ;共聚焦显微镜检测细胞内 Bcl- 2表达。结果　与 tb OOH处理组相比 ,ACM可降低神经细胞损伤和凋亡 (P<0 .0 5) ,增加细胞内 Bcl- 2表达。结论　 ACM有保护氧自由基 tb OOH诱导的神经细胞损伤和凋亡作用 ,Bcl- 2表达增加可能参与了 ACM的抑制凋亡。     

rt-PA在血脑屏障氧糖剥夺体外模型中对神经细胞保护的研究

目的 观察重组组织型纤溶酶原激活剂(rt-PA)在体外血脑屏障氧糖剥夺模型中对神经细胞的影响,探讨rt-PA对脑缺血神经元的保护作用.方法 利用Transwell培养小室为支架,构成以人血管上皮细胞为基础的体外血脑屏障模型;利用厌氧培养箱及无糖培养液,建立体外缺血缺氧模型;在体外缺血缺氧模型基础上,采用组织培养技术,培养神经细胞,并在缺血缺氧条件下,使用MTT法进行检测不同剂量rt-PA对神经细胞活性的影响.结果 分别在氧糖剥夺实验(OGD)及非OGD条件下,在不同rt-PA药物的浓度作用下,低浓度(0.312 5 μg/mL)对非OGD条件下神经细胞的生长有促进作用,在OGD条件下,低浓度(0.625 μg/mL,0.312 5 μg/mL)对神经细胞同样具有保护作用.结论 rt-PA可能对脑缺血后神经细胞存在保护作用,并与rt-PA的剂量相关,在OGD条件下,低剂量rt-PA对神经细胞的保护作用更为显著.     

葡萄糖受体介导的肿瘤靶向2-DG修饰超顺磁性氧化铁的制备及体外实验

目的 合成一种2-脱氧-D-葡萄糖(2-DG)包被γ-Fe2O3纳米探针,检测其性质特征及对前列腺癌PC3细胞葡萄糖受体的靶向性摄取.方法 运用化学共沉淀法合成γ-Fe2O3@二巯基丁二酸(DMSA),再与2-DG共轭生成γ-Fe2O3@DMSA-DG,红外光谱和透射电镜检测粒子结构特征;噻唑蓝试验(MTT)法进行细胞毒性实验,分别加入含无糖DMEM的探针培养基γ-Fe2O3@DMSA、γ-Fe2O3@DMSA-DG、γ-Fe2O3@DMSA-DG+ 2-DG(4.5 mg/mL),将探针在不同时间( 10 min、20 min、1h、2h)孵育PC3细胞,运用普鲁士兰染色法和铁三嗪法分析PC3细胞对探针的吸收情况,并以体外MRI观察T2WI信号强度变化.结果 2-DG以酰胺键连接γ-Fe2O3@DMSA,粒子平均直径10 mm;探针未见明显毒性;γ-Fe2O3@DMSA-DG可被PC3细胞靶向摄取,并可在早期被2-DG抑制.结论 本研究成功合成γ-Fe2O3@DMSA-DG探针,其对PC3细胞葡萄糖受体有较好的靶向性,使用临床型MR仪可对其进行监测.     

Fe~(2+)对人脐静脉平滑肌细胞增殖及分泌基质金属蛋白酶-2的影响

目的探讨Fe2+对高糖预孵育的人脐静脉平滑肌细胞(human umbilical vascular smooth muscle cell,HUSMC)增殖及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)分泌的影响。方法取高糖DMEM培养液培养的原代HUSMC(3~5代),分为空白对照组(加DMEM培养液)、A组(100 mg/L Fe2+培养液)、B组(50 mg/L Fe2+培养液)、C组(25 mg/L Fe2+培养液)、D组(12.5 mg/L Fe2+培养液)、E组(6.25 mg/L Fe2+培养液)。干预24 h后,MTT比色法测定细胞增殖,ELISA检测MMP-2含量,激光共聚焦显微镜测定细胞内Ca2+浓度。结果除E组外其他各Fe2+组促血管平滑肌细胞(VSMC)增殖作用均高于空白对照组(P<0.01),A组、B组作用最强;各浓度Fe2+组MMP-2含量均高于空白对照组(P<0.05);A组细胞内Ca2+荧光强度较空白对照组强(P<0.01)。结论Fe2+能明显促进VSMC增殖,并促进分泌MMP-2,升高细胞内Ca2+浓度。     

As2O3与NaAsO2抑制HeLa细胞生长的研究

目的探讨As2O3和NaAsO2两种砷剂对HeLa细胞的抑制作用.方法培养HeLa细胞,使细胞悬液浓度为105个/mL,用四甲基偶氮唑蓝还原反应(MTT法),倒置显微镜观察两种砷剂对HeLa细胞的作用后细胞形态的变化.结果两种砷剂As2O3和NaAsO2对HeLa细胞均有抑制作用,随着药物浓度的增加,HeLa细胞存活率逐渐下降并存在剂量反应关系,显微镜下观察,三角形的活细胞逐渐减少而圆形的死亡细胞逐渐增加,As2O3的作用比NaAsO2作用强,对照组均未见上述变化. 结论两种砷剂对HeLa细胞均有抑制作用,As2O3的作用比NaAsO2作用强.     

胚胎大鼠神经干细胞培养方法的改进

分别以DMEM/F12、2?7、20 ng/ml的碱性成纤维细胞生长因子、20 ng/ml的表皮生长因子无血清培养液和5%胎牛血清培养液预先培养大鼠神经干细胞(NSCs)2~3 d后,换为无血清培养液;应用倒置显微镜和免疫细胞化学法对其进行观察和比较。结果用含胎牛血清培养液培养的NSCs聚球速度较无血清培养液明显加快,可提前3~4 d观察到NSCs球。细胞染色证实细胞系巢蛋白阳性,经血清培养液诱导分化后部分呈抗神经元特异性烯醇化酶(NSE)阳性,部分呈抗胶质纤维酸性蛋白阳性,表明可分化为神经元和胶质细胞。认为含血清培养液预先培养可以加快细胞培养速度,是获得NSCs的经济有效方法。     

红霉素等四种抗生素体外抗弓形虫作用的研究

目的比较红霉素、阿奇霉素、磺胺嘧啶和大蒜素体外抗弓形虫的效果。方法用弓形虫RH株速殖子感染培养在盖玻片上的人包皮成纤维细胞(HFF),每一种药物设立2～3个浓度,分别在速殖子侵入细胞前和侵入细胞后作用于虫体,每隔1hr在倒置显微镜下观察细胞、弓形虫的形态及生长情况,3d后经吉氏染色,镜下观察,并将培养液注入小鼠腹腔,观察发病情况。结果红霉素的浓度在100μg/mL和150μg/mL时可抑制弓形虫的生长与繁殖,与剂量大小相关。阿奇霉素的浓度在20μg/mL时具有致虫体死亡的作用,>40μg/mL时对HFF有明显的毒性,其对弓形虫的作用效果与剂量大小相关。没有观察到100μg/mL、200μg/mL的磺胺嘧啶和20μg/mL、40μg/mL的大蒜素对弓形虫生长繁殖的抑制作用。结论红霉素在浓度大于100μg/mL时,可抑制弓形虫生长繁殖。阿奇霉素具有明显的杀灭速殖子的作用,但对细胞的毒性较大。磺胺嘧啶、大蒜素对弓形虫的生长抑制作用弱或无。     

过氧化氢对PC12细胞活性的调控及脑活素的抗氧化效能

目的　探讨活性氧对神经细胞活性的调控及脑活素的抗氧化功效。方法　以过氧化氢 (H2 O2 )作为活性氧 ,应用四甲基偶氮唑 (MTT)比色法 ,观察对培养的PC12细胞生长活性的调控和脑活素的抗氧化活性。结果　以 0 .0 3mmol LH2 O2 对PC12细胞具有促进生长的作用 ( P <0 .0 5 ) ,0 .1～ 1.0mmol LH2 O2 可导致PC12细胞不同程度的氧化损伤 ;脑活素浓度在 0～ 10g L对细胞的生长无明显影响 ,当浓度超过 2 0g L后 ,可导致细胞生长受抑制 (P <0 .0 1) ,10～ 2 0g L脑活素可有效保护PC12细胞免受氧化损伤。结论　活性氧对神经细胞的生长具有双重作用 ,脑活素具有保护PC12细胞免受氧化损伤的效能。     

State of knowledge of helminth fauna of freshwater fishes of Poland

A total 89 fish and lamprey species has been recorded from Polish freshwater habitats. Twenty-seven of them (30.3%) have not been surveyed for parasitic helminthes. Some of the latter fishes are either rare or not easily accessible. Other live only in specific habitats in scattered localities. An important obstacle for studying parasite faunas of some fishes may be their status on an endangered species. Among the non-surveyed fishes, are those which have been relatively recently introduced to Poland or migrated there on their own. The present paper attempts to review all hitherto not studied helminthologically fish species, their habitats, localities and current protection status.     

高血压降压治疗目标的再认识

根据传统的高血压水平的定义,1993年WHO高血压治疗指南提出血压控制目标为<140/90mm Hg(1mm Hg=0.133kPa),但是并非所有患者都必须将血压降至同一水平,而应根据患者情况进行个体化治疗。Framingham进行的一项长达10～12年的心血管事件研究发现,第5年后,正常上限血压[收缩压(SBP     

Lack of correlation of degree of villous atrophy with severity of clinical presentation of coeliac disease

BACKGROUND AND AIM: Both the clinical presentation and the degree of mucosal damage in coeliac disease vary greatly. In view of conflicting information as to whether the mode of presentation correlates with the degree of villous atrophy, we reviewed a large cohort of patients with coeliac disease. PATIENTS AND METHODS: We correlated mode of presentation (classical, diarrhoea predominant or atypical/silent) with histology of duodenal biopsies and examined their trends over time. RESULTS: The cohort consisted of 499 adults, mean age 44.1 years, 68% females. The majority had silent coeliac disease (56%) and total villous atrophy (65%). There was no correlation of mode of presentation with the degree of villous atrophy (p=0.25). Sixty-eight percent of females and 58% of males had a severe villous atrophy (p=0.052). There was a significant trend over time for a greater proportion of patients presenting as atypical/silent coeliac disease and having partial villous atrophy, though the majority still had total villous atrophy. CONCLUSIONS: Among our patients the degree of villous atrophy in duodenal biopsies did not correlate with the mode of presentation, indicating that factors other than the degree of villous atrophy must account for diarrhoea in coeliac disease.