银杏叶提取物对糖尿病性脑病大鼠的保护作用

目的：研究糖尿病性脑病与海马区神经元型一氧化氮合酶（nNOS）表达及一氧化氮（NO）、丙二醛（MDA）含量的关系及应用银杏叶提取物（EGb）治疗的效果和机制。方法：雄性Wistar大鼠30只随机分为3组各10只，A组为正常对照大鼠，B、C组按链脲佐菌索（STZ）制成糖尿病大鼠模型，C组应用EGb治疗。1个月后水迷宫试验观察3组大鼠行为学改变，免疫组化检测海马nNOS表达，脑组织匀浆检测NO、MDA水平。结果：①水迷宫试验，B组大鼠出现学习、记忆功能障碍，C组则明显减轻（P〈0．01）。②nNOS表达，A组无显示，B组海马区呈强阳性表达，C组表达低于B组（P〈O．01）。③NO、MDA水平，B组均明显升高，C组显著低于B组（P〈0．01）。结论：海马区nNOS表达升高是糖尿病性脑病发生的重要因索，EGb可下调nNOS表达，对糖尿病性脑病有较好的治疗作用。     

胎儿生长受限孕妇血及脐血内脂过氧化物和一氧化氮水平

目的探讨母血及脐血中脂质过氧化物（LPO）和一氧化氮（NO）水平与胎儿生长受限（FGR）发生的关系及其临床应用价值。方法取38例妊娠合并FGR（FGR组）及50名正常孕妇（对照组）肘静脉血及其新生儿脐血，应用改良的硫代巴比妥酸（TBA）法测定血清LPO水平；应用硝酸盐还原酶法测定血清NO水平。结果FGR组患者血LPO和NO水平与对照组相比均显著升高（P〈0．01），其新生儿脐血LPO和NO水平也显著升高（P〈0．001）。两组孕妇母血、脐血中LPO和NO水平均呈正相关（P均〈0．01）。结论LPO和NO均可能参与了FGR的发病，检测母血及脐血中LPO和NO水平可作为FGR的辅助诊断指标之一。     

碱性成纤维细胞生长因子对人晶体上皮细胞增殖及一氧化氮和诱导型一氧化氮合酶的影响

目的：探讨碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对人晶体上皮细胞内一氧化氮（NO）含量和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）活性、基因及蛋白表达的影响。 方法：以含10％胎牛血清（FBS）与100mg／L青霉素和100mg／L链霉素的DMEM培养液培养及传代人晶体上皮细胞。用0．001，0．01，0．1，1，10和100μg/L浓度的bFGF作用于晶体上皮细胞，用MTT法检测晶体上皮细胞的增殖情况；用Griess法测定NO含量；分别用RT—PCR方法及western blot法检测iNOS基因及蛋白的表达。 结果：①bFGF对细胞增殖的影响：与对照组比较，除100μg/L以组外，其余浓度为0．001～10μg／L的bFGF对人晶体上皮细胞的增殖效应均大于对照组，其中0．01～10μg/L的bFGF对人晶体上皮细胞的增殖效应差异显著（P〈0．05）。②bFGF对晶体细胞NO水平、NOS活性及iNOS的基因和蛋白表达的影响：对照组和0．001，0．01，0．1μg/L bFGF组NO水平较低，而在1μg/L以和10μg/L以的bFGF使人晶体上皮细胞的NO含量增高，0．1～10μg/L的bFGF使人晶体上皮细胞的NOS活性增高、使iNOS的基因和蛋白表达增强。 结论：可以促进人晶体上皮细胞的增殖，使NO含量和iNOS的活性和蛋白表达增高。     

老年大鼠不完全性脑缺血小鼠iNOS,nNOS的表达

目的：探讨诱导型一氧化氮合酶（induced nitric oxide synthase,iNOS),神经型一氧化氮合酶（neuronal nitric oxide synthase,nNOS)对老年大鼠不完全性脑缺血小鼠的影响。方法：建立老年大鼠不完全性脑缺血动物模型,应用免疫组织化学染色方法检测iNOS,nNOS在小脑的表达,用透射电镜观察小脑的超微结构变化。结果：缺血30min后再灌注6,12,24,48h组浦肯野细胞nNOS活性显著升高（P＜0．001）,假手术组,缺血30min立刻取材、缺血30min后灌注1h和96h组nNOS微量表达;而iNOS在小脑皮质不表达,髓质中有少量神经细胞中度表达。电镜下48h和96h组浦肯野细胞损伤较重。结论：由nNOS诱导的一氧化氮（nitric oxide,NO)是脑缺血后神经元迟发性损伤的重要因素之一。     

红光激光对内皮细胞一氧化氮分泌及表达的影响

目的研究红光激光对血管内皮细胞一氧化氮（NO）分泌及表达的影响。方法应用红光激光分别照射体外培养的血管内皮细胞10min、20min和30min后，分别于照射后15min、30min、1h、3h和6h检测培养上清液中NO的含量，并应用免疫组化方法检测内皮细胞内诱生型一氧化氮合酶（iNOS）和内皮型一氧化氮合酶（eNOS）的表达。结果2mW红光激光分别照射10min、20min、30min可使内皮细胞内eNOS表达增强，分泌NO水平上升，并于1h后达峰值，随后逐渐降低，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05），其中照射30min组作用最明显；红光激光照射对内皮细胞内iNOS的表达各组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论红光激光可通过增强内皮细胞内eNOS的表达来促进NO的分泌；红光激光对内皮细胞内iNOS的表达无明显影响。     

实验性急性肺损伤一氧化氮氧化产物NO_2~-的变化

一氧化氮（NO）具有强烈的血管扩张作用。由于NO半衰期短，测定较为困难，因此要通过测定一氧化氮氧化产物（NO2-）间接反映NO的含量。为了探索NO在急性肺损伤发病中的作用，我们应用油酸型急性肺损伤模型动态观察NO2-的变化，并用西门子900C呼吸机机械通气，常规容量控制通气（吸呼比为1：2）与反比通气（吸呼比为2：1）比较，结果表明，急性肺损伤各时相点NO2-均高于急性肺损伤前，差异显著（P＜0．05-0．01），但组间差异不明显（P＞0．05）。提示血浆NO增加可能是急性肺损伤继发低血压的一个重要原因。应用一氧化氮合成酶抑制剂抑制一氧化氮的合成，降低一氧化氮的舒血管效应无疑是治疗急性肺损伤继发性低血压的一个新的重要的途径。     

高原红细胞增多症患者血清同型半胱氨酸与一氧化氮、一氧化氮合酶水平的变化

目的探讨高原红细胞增多症（HAPC）患者体内同型半胱氨酸（Hey）与一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）水平的关系。方法在海拔3300m地区选择HAPC患者和健康人各50例进行血清Hey、NO含量和NOS活性的检测。结果与健康人比较，HAPC患者血清Hey水平显著升高（P〈0．01），NO含量和NOS活性明显降低（P〈0．01）；相关分析结果表明，在HAPC患者中血清Hey水平与NO含量和NOS活性呈显著负相关（r=-0．947、-0．925，P〈0．01）。结论血清Hey水平与NO含量和NOS活性的变化可能与HAPC的发病有关。     

高血压患者血清一氧化氮的变化

目的探讨高血压患者血清中的一氧化氮（N0）含量变化。方法应用硝酸还原酶法检测高血压患者血清中NO的含量。结果急性期高血压患者血清中NO明显低于缓解期（P〈0．05），而在缓解期高血压患者血清中NO也明显低于健康对照组（P〈0．05）。结论血清中NO的含量改变对于高血压的早期诊断、治疗和监测有极其重要的意义。     

急性胰腺炎患者血清瘦素、NO变化的临床意义

【目的】探讨急性胰腺炎（AP）患者血清瘦素和一氧化氮（NO）变化的临床意义。【方法】采用放射免疫法测定48例AP患者急性期和恢复期的血清瘦素水平,同时采用硝酸还原酶法检测NO水平。【结果】AP急性期组血清瘦素及NO水平显著高于AP恢复期组及正常对照组（P均〈0．001）,AP恢复期组血清瘦素及NO水平与正常对照组比较无明显差异（P均〉0．05）;AP患者血清瘦素与体重指数呈正相关（γ=0．685,P〈0．01）;与脂肪含量呈正相关（γ=0．456,P〈0．01）;与血清NO水平呈正相关（γ=0．474,P〈0．01）。【结论】血清瘦素和NO与AP的病情发展、转归有密切关系;瘦素对AP的保护作用与NO密切相关。     

一氧化氮在先天性心脏病伴肺动脉高压中的表达

目的：探讨一氧化氮（NO）在先天性心脏病（CHD）伴肺动脉高压（PH）形成和发展中的作用。方法：采用分光光度法分别检测22例CHD伴PH（PH组）及17例CHD不伴PH（对照组）患者肺动、静脉血清NO的含量，并进行比较分析。结果：（1）PH组肺动、静脉血清NO含量明显高于对照组（P〈0．01）；（2）PH组肺静脉血清NO含量明显高于肺动脉（P〈0．05，P〈0．01）；（3）PH组肺动、静脉血清NO含量与平均肺动脉压力（MPAP）均呈正相关（P〈0．01）。结论：NO在CHD伴PH的形成和发展中起保护作用。     

键合紫杉醇纳米胶束增强替莫唑胺抑制胶质瘤细胞的实验研究

目的在体外研究键合紫杉醇聚合纳米胶束联合替莫唑胺抑制C6胶质瘤的效果和作用机制。方法应用不同浓度的键合紫杉醇聚合胶束及替莫唑胺组合处理C6细胞,应用MTT法观察药物对细胞的增殖抑制作用,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,激光共聚焦显微镜检测caspase-3蛋白的表达。结果相对于键合紫杉醇纳米胶束和替莫唑胺药物分单独别作用,1．25～20μg／ml的键合紫杉醇聚合胶束＋替莫唑胺组可明显抑制C6胶质瘤细胞的增殖（P〈0．01）。且呈明显剂量依赖关系;流式细胞仪检测,键合紫杉醇聚合胶束＋替莫唑胺细胞凋亡率增高（P〈0．01）。激光共聚焦显微镜检测caspase-3蛋白表达。结果联合药物组与键合紫杉醇纳米胶束、替莫唑胺药物组比较,caspase-3表达明显增加（P〈0．01）,结论键合紫杉醇聚合胶束可提高替莫唑胺对C6胶质瘤细胞增殖抑制和诱导凋亡作用,且这种作用是通过上调caspase-3蛋白的表达,诱导凋亡实现的。     

异甘草酸镁上调血红素氧合酶-1对巨噬细胞过度分泌炎症因子的作用研究北大核心CSCD

目的探讨异甘草酸镁（MgIG）在脂多糖（LPS）刺激的RAW264．7巨噬细胞中是否能通过上调血红素氧合酶-1（HO-1）起到抑制高迁移率族蛋白B1（HMGB1）和一氧化氮（NO）释放的作用。方法用LPS刺激小鼠巨噬细胞RAW264．7制作炎症细胞模型。①先用不同浓度的MgIG与LPS合并处理24h,分别为Control组、LPS组和LPS＋MglG不同剂量组（O．01mg／mL、0．10mg／mL、0．50mg／mL和1．00mg／mL）;②再将培养细胞随机分为不同处理组（每组n=5）：Control组、LPS组、LPS＋MdG（1．00mg／mL）和LPS＋MdG（1．00m∥mL）＋血红素氧化酶抑制剂[ZnPPIX（10μmol／L）]组。用ELISA方法测定上清HMGBl浓度,用Griess法测定上清液NO的浓度水平,用Western bolt检测细胞内HO-1和iNOS蛋白的表达。结果①与Control组比较,LPS能够明显增加上清液HMGB1和NO浓度（均P〈0．05）,并且在一定程度上增加细胞内HO-1的蛋白表达水平（P〈0．05）;与LPS组比较,LPS＋MgIG不同剂量组均减少了HMGB1和NO的释放（均P〈0．05）,并且随着剂量的增加,HMGB1和NO的上清液水平降低越明显,而HO-1的表达水平在LSP＋MgIG（0．10mg／mL、0．50mg／mL和1．00mg／mL）组均明显诱导增加（均P〈0．05）。②与Control比较,LPS同样明显增加上清液HMGB1和NO浓度（均P〈0．05）,以及明显增加细胞内HO-1和可诱导一氧化氮合酶（iNOS）蛋白表达水平（均P〈0．05）;与LPS组比较,LPS＋MgIG（1．00mg／mL）组上清液中HMGBl和NO浓度明显下降（均P〈0．05）,细胞内HO-1的蛋白水平明显增加（P〈0．05）,细胞内iNOS的蛋白水平则明显下降（P〈0．05）,而LPS＋MgIG（1．00mg／mL）＋ZnPPIX（10μmol／L）组上清液HMGB1和NO浓度、细胞内HO-1和iNOS的蛋白水平差异均无统计学意义（均P〉0．05）。结论MglG能抑制LPS刺激巨噬细胞过度释放HMGBl和NO,能明显抑制LPS诱导的iNOS表达,并且依赖于HO-1的上调。     

异丙酚对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤后nNOS表达的影响

目的探讨异丙酚对大鼠局灶性脑缺血．再灌注损伤后神经型一氧化氮合酶（nNOS）表达的影响及其可能的脑保护机制。方法78只雄性Wistar大鼠随机分为3组：假手术组（s组,n=6）;缺血．再灌注组（I-R组,n=36）;异丙酚干预组（P组,n=36）。I-R组和P组按不同再灌注时间又随机分为三个亚组：1h亚组、3h亚组、6h亚组（n=12）。采用右侧大脑中动脉线栓法（MCAO）建立大鼠局灶性脑缺血．再灌注模型。s组行假手术操作,但不行线栓法阻断血流及药物干预;I-R组于缺血2h后再灌注时即刻右侧侧脑室注射生理盐水（1mg／kg）;P组于缺血2h后再灌注时即刻右侧侧脑室注射1％异丙酚（1mg／kg）。所有大鼠于再灌注前进行神经学功能评分;分别于各再灌注时间点断头取脑组织,1Trc染色法测定脑梗死灶（n=6）;苏木精．伊红（HE）染色观察脑组织病理学变化（n=6）;免疫组织化学方法测定nNOS蛋白表达（n=6）。结果与I-R组比较,P组神经学功能评分降低（P〈0．05）。在I-R组内,与1h亚组比较,3h亚组和6h亚组脑梗死灶明显增大（P〈0．05）;P组3h亚组、6h亚组与I-R组同时间亚组比较．脑梗死灶减小（P〈0．05）。S组神经细胞结构完整;I-R组神经细胞结构破坏,有核分裂及核溶解;与I-R组比较．P组脑组织病理学改变减轻。s组仅有少量nNOS蛋白表达;在I．R组内,nNOS蛋白在1h亚组表达升高,在3h亚组表达到高峰,6h亚组与3h亚组比较表达降低（P〈0．05）;P组3h亚组、6h亚组与I—R组同时间亚组比较,nNOS蛋白表达减少（P〈0．05）。结论异丙酚抑制大鼠局灶性脑缺血．再灌注后nNOS蛋白的表达,可能是其脑保护作用机制之一。     

癫痫与热性惊厥患儿血清催乳素及一氧化氮/一氧化氮合酶测定的临床意义

目的探讨血清催乳素（PRL）、一氧化氮／一氧化氮合酶（NO／NOS）体系用于癫痫与热性惊厥的诊断和鉴别诊断的意义。方法分别采用化学发光法和分光光度法测定25例癫痫患儿、20例热性惊厥患儿及15例正常儿的血清PRL和NO／NOS水平。结果癫痫组血清PRL水平显著高于热性惊厥组和对照组（P〈0．05），癫痫组与热性惊厥组血清NO／NOS水平均显著高于对照组（P〈0．05），癫痫组显著高于热性惊厥组（P〈0．05）。结论检测癫痫与热性惊厥患儿血清中PRL、NO／NOS水平，可为临床诊断和鉴别诊断提供依据。     

iNOS、NO与卵巢癌的关系分析

一氧化氮(nitric oxide,NO)参与血管、神经系统功能等生理和病理生理过程的调节,并在较高浓度时具有细胞毒性作用.在哺乳动物体内,NO由一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)催化合成,NOS分为神经型一氧化氮合酶(neuronal nitricoxide synthase,nNOS)、血管型一氧化氮合酶(en-dothelial nitric oxide synthase,eNOS)和诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)3种亚型,其中nNOS和eNOS合称为结构型一氧化氮合酶,主要在神经和血管内皮细胞中表达,在生理状态下产生低浓度和中等浓度水平的NO.iN-OS主要由巨噬细胞产生并能够产生高浓度的NO[1].iNOS的表达和NO的产生在卵巢癌的发生、发展和转移中发挥着重要的作用,本文就目前的相关研究进展作一综述.     

白血病患者骨髓中CTGF、CYR61、VEGF-C、VEGFR-2mRNA、蛋白的表达及其临床相关性研究

本研究旨在探讨白血病患者骨髓单个核细胞中结缔组织生长因子（CTGF）、富含半胱氨酸蛋白61（CYR61）、血管内皮生长因子-c（VEGF—C）和血管内皮生长因子受体-2（VEGFR-2）mRNA及蛋白的表达水平以及它们在白血病发生、发展、浸润转移中的作用和临床意义。初发白血病100例患者,26例完全缓解后急性白血病患者,30例对照者纳入本研究。收集骨髓单个核细胞,应用realtimePCR和Westernblot分别检测白血病患者及对照者CTGF、CYR61、VEGF-C、VEGFR-2mRNA及蛋白的表达水平。结果表明,急性白血病患者骨髓中上述4种因子mRNA、蛋白水平明显高于对照组（P〈0．05）。急性白血病缓解后只有CTGFmRNA表达与对照组比较有差异（P〈0．05）,且CTGFmRNA表达在急性白血病不同骨髓增生中有统计学意义（P〈0．05）。CTGF蛋白表达在白血病不同染色体核型组有差异（P〈0．05）,CYR61和VEGF—C蛋白表达在急性白血病不同程度骨髓增生组中比较差异有统计学意义（P〈0．05）。CML组CTGF、CYR61、VEGF—CmRNA和蛋白表达高于对照组（P〈0．05）,CLL组CTGF和CYR61蛋白表达水平高于对照组。在性别、髓外浸润等因素分组比较中,上述4种因子mRNA和蛋白表达水平比较均无差异有统计学意义（P〉0．05）。在相关性分析中,白血病患者上述4种因子mRNA表达水平与骨髓原始细胞计数呈正相关（P〈0．05）,CTGF、CYR61、VEGF—C蛋白表达水平与其呈正相关（P〈0．05）。除了VEGFR-2与骨髓原始细胞计数无相关性外,这些因子的mRNA及蛋白表达水平与骨髓原始细胞计数呈正相关。结论：CYR61、CTGF、VEGF-C和VEGFR-2mRNA和蛋白表达在急慢性白血病中都有作用。在急性白血病（AML／ALL）中上述4种因子高表达,在CML中除了VEGFR-2外其他因子也高表达,多数因子的表达与骨髓原始细胞计数呈正相关。联合阻断这些相关的血管性因子可能对白血病靶向治疗有重要作用。     

肠系膜淋巴管结扎对失血性休克大鼠肺组织一氧化氮及其表达的影响

目的 观察结扎肠系膜淋巴管对不同时期重症失血性休克大鼠肺组织一氧化氮（NO）及其表达的影响，探讨肠淋巴途径在休克大鼠急性肺损伤（ALI）中的作用。方法 雄性Wistar大鼠78只，按随机数字表法分为假手术组（n=6）、休克组（n=42）和结扎组（n=30）。休克组与结扎组复制重症失血性休克模型，结扎组于休克复苏后行肠系膜淋巴管结扎术；休克组于休克后90min、输液复苏后0h，休克组及结扎组于输液复苏后1、3、6、12和24h各时间点处死大鼠，制备肺组织匀浆，检测NO及其合酶的变化；用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）测定各组大鼠肺组织诱生型一氧化氮合酶（iNOS）．mRNA表达。结果 休克组大鼠复苏后3h肺组织NO含量、NOS活性及iNOSmRNA表达开始升高，复苏后6～12h持续在较高水平，均显著高于假手术组、休克后90min及复苏后0h（P〈0．05或P〈0．01）；结扎组仅于3h和6h增高，且结扎组复苏后6、12和24h肺组织NO含量、NOS活性以及iNOSmRNA表达均显著低于休克组相同时间点（P〈0．05或P〈0．01）。结论 肠系膜淋巴管结扎可降低重症失血性休克大鼠肺组织NO生成及iNOSmRNA表达，从而减轻肺损伤。     

复发性口疮患者雷公藤多甙治疗前后血清一氧化氮、一氧化氮合酶水平的变化

目的 观察复发性口疮（RAU）患者用雷公藤多甙治疗前后血清一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）水平的变化，为治疗及预后判断提供依据。方法 应用硝酸还原酶法对132例经临床确诊的RAU患者治疗前后和60名正常对照者血清NO、NOS水平分别进行检测。结果 在治疗前RAU患者血清NO、NOS水平明显高于正常人，经雷公藤多甙治疗症状缓解或消失后，血清NO、NOS下降至正常人水平，RAU患者治疗前后血清中NO、NOS水平差异有显著性（P〈0．01）。结论 NO、NOS的动态检测对其疗效判断有一定的价值。     

膜联蛋白A2基因对多发性骨髓瘤细胞的诱导凋亡作用及相关机制研究

本研究探讨膜联蛋白A2（AnxA2）基因诱导骨髓瘤U266、RPMl8226细胞凋亡的作用及相关机制。采用AnxA2siRNA转染人骨髓瘤U266、RPMl8226细胞,应用实时PCR和Westernblot检测AnxA2基因和蛋白的表达。应用流式细胞术检测细胞凋亡,应用实时PCR检测凋亡相关基因的表达水平。结果表明,AnxA2siRNA转染U266和RPMl8226后,AnxA2基因和蛋白表达水平均明显下调;细胞凋亡率增高（P〈0．05）,同时降低凋亡相关基因p65NF-κB、儿_2、IL-6的表达（P〈0．05）,增强P53基因的表达（P〈0．05）。结论：AnxA2基因沉默在骨髓瘤细胞U266和RPMl8226凋亡中起促进作用。     

三氧化二砷对大鼠C6胶质瘤细胞的诱导分化作用

目的：观察三氧化二砷对胶质瘤细胞诱导分化作用，为可能的临床应用提供实验依据。方法：采用SP免疫组化法，检测经三氧化二砷不同浓度、作用不同时间的大鼠胶质瘤细胞系C6细胞的GFAP及C-myc蛋白的表达变化。结果：在较低浓度时（0．5～2．0μmol／L）As20a均可引起大鼠C6细胞的GFAP及C—myc的表达的变化。表现为与空白对照组相比GFAP表达量显著增加（P〈0．05），C—myc蛋白表达量明显减少（P〈0．05）。结论：三氧化二砷可以有效诱导大鼠C6细胞分化，使胶质瘤细胞的恶性程度降低，促使其向高分化方向转变。