生长激素对大鼠阿霉素性心肌病心肌细胞凋亡的影响

目的探讨生长激素（Growth hormone，GH）对大鼠阿霉素（Adriamycin，ADR）心肌病心肌细胞凋亡及其相关基因蛋白BCL-2、BAX表达的影响。方法30只雄性Wistar大鼠，体重200—250g，随机分为3组：对照组、ADR组和GH＋ADR组。用原位末端标记法（TUNEL）标记凋亡的心肌细胞，用免疫组织化学方法检测BAX和BCL-2的蛋白表达。结果与对照组比较，ADR组心肌细胞凋亡指数明显升高（P〈0．05），GH＋ADR组细胞凋亡指数低于ADR组（P〈0．05）。ADR组BAX蛋白表达明显高于对照组（P〈0．05），BCL-2蛋白表达明显低于对照组（P〈0．05）。GH＋ADR组BAX的蛋白表达明显低于ADR组（P〈0．05），但高于对照组（P〈0．05）；BCL-2的蛋白表达明显高于ADR组（P〈0．05），接近对照组。结论心肌细胞凋亡是导致阿霉素心肌病的主要原因，GH干预治疗可减少阿霉素心肌病的心肌细胞凋亡，这可能与GH能提高BCL-2/BAX比值有关。     

1,6-二磷酸果糖减轻STZ致大鼠胰岛细胞凋亡

目的 探讨1,6-二磷酸果糖（FDP）对链脲佐菌素（STZ）致胰岛细胞凋亡的保护作用与血红素加氧酶/一氧化碳（HO-1/CO）、抗氧化以及NOS/NO系统的关系。 方法 用离体培养乳鼠胰岛细胞,分别检测STZ、FDP作用后细胞形态、细胞活性、细胞凋亡率、细胞HO-1的活性和细胞培养上清液中胰岛素的基础和高糖刺激分泌量以及CO的含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）、诱生型一氧化氮合酶（iNOS）和NO的变化。结果：STZ作用后,胰岛细胞活性降低,基础和高糖刺激胰岛素分泌减少,胰岛细胞凋亡率明显增加（p＜0.01）;细胞HO-1活性有所下降,上清液中CO生成减少（p＜0.01）,SOD、GSH-PX活性水平降低、iNOS增多、NO增加。与FDP孵育后细胞活性显著升高,胰岛素基础和高糖分泌量增多,胰岛凋亡率明显降低, HO-1活性和CO生成明显提高（p＜0.01或p＜0.05,同时 SOD、GSH-PX活性水平明显增强、iNOS活性降低、NO生成减少,并且具有剂量依赖性。 结论 FDP能显著改善STZ致胰岛细胞凋亡,其机制可能与增加HO-1/CO系统水平 ,提高抗氧化酶SOD、GSH-PX的活性以及降低iNOS活性,从而减少NO的生成等途径有关。     

大鼠急性心肌梗死后的心肌细胞凋亡和凋亡相关基因表达的变化

目的： 观察大鼠急性心肌梗死（AMI）后的心肌细胞凋亡和caspase-3、Bcl-2和Bax表达的变化。 方法: 105只雌性SD大鼠，随机取78只结扎左冠状动脉建立AMI模型，24 h存活43只作为心肌梗死组（MI组）；另27只设为假手术组（S组）；两组再按观察时点随机分为48 h和4周两亚组，即：MI 48 h（n=11）和MI 4周（n=13）组，S48 h（n=10）和S4周（n=10）组。末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导的dUTP切口末端标记技术（TUNEL）和DNA凝胶电泳检测心肌细胞凋亡。免疫组化方法和Western blotting检测caspase-3、Bcl-2和Bax的表达。 结果： MI 48 h组动脉收缩压（SBP）、舒张压（DBP）、平均压（MAP）、左心室收缩压（LVSP）和左心室内压最大上升下降速率（±dp/dt）均显著低于S组（P<0.05, P<0.01），左心室舒张末压（LVEDP）显著高于S组（P<0.05）；MI 4周组除SBP、DBP和MAP无显著差异（均P>0.05）外，上述其它指标的变化与MI 48 h组相同，且LVEDP升高更为显著（P<0.01）；MI 48 h和4周两组梗死/疤痕区、梗死边缘区和非梗死区的心肌细胞凋亡指数均显著升高P<0.05,P<0.01），心肌细胞中“凋亡执行因子”caspase-3和“凋亡促进基因”Bax的表达亦均显著增高（P<0.05,P<0.01），而“凋亡抑制基因”Bcl-2仅在MI 48 h组梗死区心肌细胞中表达增加，“抑制凋亡复合基因”Bcl-2/Bax的比值仅在MI 48 h组降低。 结论： 大鼠AMI后，梗死区及其边缘区和非梗死区均有心肌细胞凋亡发生，伴“凋亡执行因子”caspase-3和“凋亡促进基因”Bax的表达增加；AMI早期，“凋亡抑制基因”Bcl-2在梗死区表达增加，但“抑制凋亡复合基因”Bcl-2/Bax的比值下降。     

牛磺酸对烧伤大鼠心肌细胞凋亡的影响及其机制

目的:观察牛磺酸（Tau）对烧伤后心肌细胞凋亡的影响并探讨其作用机制。方法:选健康Wistar大鼠50只，随机分为对照组、烧伤组（造成30%TBSAⅢ度烧伤）、烧伤+牛磺酸组（烫伤后即刻腹腔注射牛磺酸，200 mg/kg）、烧伤+牛磺酸(Tau)+SB202190组及烧伤+SB202190组（烫伤后立即注射SB202190，10 mg/kg）。末端标记（TUNEL）法检测凋亡细胞，放射免疫法测定TNFα含量，荧光分析法测定caspase-3活性及免疫组化分析心肌Fas、caspase-8、Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果:烧伤组心肌细胞凋亡指数（18.69±2.47）显著高于对照组（0.48±0.05）（P<0.01），心肌Fas、caspase-8、TNF-α和Bax蛋白水平及caspase-3活性也显著高于对照组，但Bcl-2蛋白表达显著低于对照组（P<0.01）。Tau组和Tau+SB202190组心肌细胞凋亡指数分别为3.15±0.41和1.63±0.31，显著低于烧伤组。心肌TNFα、Fas、caspase-8和Bax蛋白表达及caspase-3活性均不同程度低于烧伤组（P<0.05）,但Bcl-2蛋白表达则显著高于烧伤组（P<0.05）。结论:牛磺酸对烧伤后心肌细胞凋亡有较好的抑制作用，其机制可能是牛磺酸调控了部分凋亡相关基因的表达和减少TNF-α的生成。     

糖尿病心肌病变过程中心肌细胞凋亡的变化及意义

目的观察糖尿病大鼠心肌病变过程中是否存在心肌细胞凋亡，探讨细胞凋亡在糖尿病心肌病变中的作用及意义。方法建立糖尿病大鼠模型．分别饲养12周及24周．采用核苷酸末端转移酶介导DUTP缺口翻译法（TUNEL）及透射电子显微镜技术，检测糖尿病大鼠心肌病变过程中左室心肌的凋亡细胞。结果STZ糖尿病大鼠12周时出现心功能异常并可见凋亡的心肌细胞．随病变的加重，24周时凋亡细胞数目明显增多：透射电镜检查，糖尿病大鼠左室心肌组织中亦可见凋亡的心肌细胞（具有凋亡形态学特征）。结论糖尿病心肌病变过程中存在心肌细胞凋亡且有加速趋势．心肌细胞凋亡可能是导致糖尿病心脏功能障碍的重要原因之一。     

1，6—二磷酸果糖对烧伤大鼠血液流变学特性的影响

１，６－二磷酸果糖对烧伤大鼠血液流变学特性的影响第三军医大学生理教研室（重庆４０００３８）阎淑枝萧家思李敏万子兵严重烧伤后心泵功能显著下降，虽经研究，至今仍有许多问题尚未澄清。本文选用１，６－二磷酸果糖（ｆｒｕｃｔｏｓｅ－１，６－ｄｉｐｈｏｓｐｈａｔ...     

大鼠肠系膜动脉血流短暂阻断对缺血/再灌注心肌细胞凋亡及Bcl-2表达的影响

目的: 探讨短暂阻断肠系膜动脉血流(MAO)对大鼠缺血再灌注(I/R)心肌细胞凋亡及bcl-2表达的影响。方法: 采用TUNEL法观察心肌细胞凋亡数以及免疫组化和原位杂交方法检测Bcl-2蛋白及其mRNA表达。结果: ①MAO+IR_3h组TUNEL法阳性心肌细胞核数量及阳性心肌细胞核占总心肌细胞核数的百分比均明显少于IR_3h组(P＜0.01);②MAO+IR_3h组表达Bcl-2蛋白阳性的心肌细胞数及阳性心肌细胞占心肌细胞总数的百分比均明显高于IR_3h组(P＜0.01);MAO+IR_1h组表达bcl-2mRNA阳性的心肌细胞数及阳性心肌细胞占心肌细胞总数的百分比均明显高于IR_1h组(P＜0.01)。结论: ①大鼠MAO能够显著减少I/R心肌细胞凋亡;②MAO通过上调凋亡抑制基因bcl-2基因表达、提高心肌中Bcl-2蛋白量可能是其减少I/R心肌细胞凋亡的机制之一。     

心肌再灌注对抑郁大鼠心肌细胞凋亡以及bcl-2、bax和caspase-3表达的影响

目的: 探讨心肌缺血再灌注(I/R)对抑郁大鼠心肌细胞凋亡及凋亡基因bcl-2、bax和 caspase-3 的影响。方法: Wistar大鼠32只,随机分为4组,每组各8只。A组:非抑郁大鼠假手术组;B组:抑郁大鼠假手术组;C组:非抑郁大鼠心肌I/R组;D组:抑郁大鼠心肌I/R组。采用慢性轻度不可预知性应激结合孤养制备抑郁模型,用敞箱实验和液体消耗实验观察大鼠行为改变;运用结扎左冠状动脉前降支的方法复制心肌I/R模型。运用 TUNEL法检测心肌凋亡细胞;运用免疫组化法和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测bcl-2、bax和 caspase-3 的表达。结果: (1)与A、B组比较,C、D组心肌细胞凋亡数量显著增加(P<0.01),A、B两组间比较无显著差异;与C组比较,D组心肌细胞凋亡数量显著增加(P<0.05)。(2)与A、B组比较,C、D组Bcl-2、Bax和caspase-3蛋白和mRNA表达显著增加(P<0.01),A、B两组间比较无显著差异; 与C组比较,D组Bcl-2蛋白和mRNA表达显著减少(P<0.05),而Bax和caspase-3蛋白和mRNA表达显著增加(P<0.05)。结论: 心肌缺血再灌注可加重抑郁大鼠缺血心肌细胞凋亡,其机制可能与上调bax和 caspase-3 基因表达、下调 bcl-2 基因表达有关。     

内质网应激在创伤致大鼠心肌细胞凋亡中的作用

目的:探讨内质网应激(ERS)在创伤致大鼠心肌细胞凋亡中的作用。方法:应用Noble-Collip创伤仪构建机械创伤SD大鼠模型,并将大鼠随机分为伪创伤组(n=6),创伤组(创伤后0 h、3 h、6 h、12 h和24 h各时点n=6)和创伤+ERS抑制剂4-苯基丁酸(4-PBA)组(n=6)。用试剂盒检测大鼠心肌组织凋亡蛋白caspase-3活性;用Western blot检测大鼠心肌组织caspase-3的活化水平,ERS标志分子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、转录激活因子6(ATF6)、蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)和需肌醇酶1α(IRE1α)的表达或磷酸化水平,以及ERS相关凋亡分子C/EBP同源蛋白(CHOP)和caspase-12的表达或活化水平。结果:与伪创伤组相比,创伤组大鼠心肌组织caspase-3活性增强,cleaved caspase-3、GRP78、ATF6、磷酸化PERK、磷酸化IRE1α、CHOP和cleaved caspase-12蛋白水平均显著升高(P<0. 05或P<0. 01);而给予创伤大鼠4-PBA处理后,caspase-3活性...     

大鼠心肌缺血预适应对I/R心肌细胞凋亡及bcl-2表达的影响

目的:对缺血预适应(IP)第一保护窗对大鼠缺血再灌注(I/R)心肌细胞凋亡和凋亡抑制基因bcl-2表达的影响进行研究。方法:采用TUNEL法、免疫组化和原位杂交方法测定大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡和bcl-2的表达。结果:①IP+I/R_3h组TUNEL法阳性心肌细胞核数量及阳性心肌细胞核占总心肌细胞核数的百分比均明显少于I/R_3h组(P＜0.05,P＜0.01);②IP+I/R_3h组表达bcl-2蛋白阳性的心肌细胞数及阳性心肌细胞占心肌细胞总数的百分比均明显高于I/R_3h组(P＜0.01);IP+I/R_1h组表达bcl-2mRNA阳性的心肌细胞数及阳性心肌细胞占心肌细胞总数的百分比均明显高于I/R_1h组(P＜0.01)。结论:①大鼠心肌IP第一保护窗能够显著减少I/R心肌细胞凋亡;②IP通过上调凋亡抑制基因bcl-2基因表达可能是其减少I/R心肌细胞凋亡的机制之一。     

1,6-二磷酸果糖对阿霉素引起大鼠心肌细胞内游离钙和肌浆网Ca2+-ATP酶活性改变的影响

目的:探讨1,6-二磷酸果糖(FDP)对阿霉素(ADR)所引起的大鼠心肌细胞内游离钙及心肌肌浆网钙-ATP酶(SRCa²⁺-ATPase)活性变化的影响。方法: 给大鼠腹腔注射ADR(2.5 mg·kg^-1,隔日1次,共6次),给ADR处理的大鼠腹腔注射不同剂量的FDP(隔日1次,共21次)进行干预。采用双抗体双夹心ELISA法定量测定血清肌钙蛋白I(CTnI);采用抗肌酸激酶同工酶(CK-MB)单克隆抗体包被小球测定血清CK-MB;用荧光分光光密度计测定心肌细胞内游离钙(MyoCa²⁺)浓度;用无机磷酸根法测定心肌肌浆网钙-ATP酶(SRCa²⁺-ATPase)活性。结果:FDP(300、600、1 200 mg·kg^-1)干预ADR处理的大鼠后,可显著降低血清CtnI、CK-MB及心肌细胞内MyoCa²⁺值,显著增高SRCa²⁺-ATPase活性(P＜0.01)。结论: FDP能通过降低心肌细胞内游离钙和对SRCa²⁺-ATPase活性的改变,起到减轻ADR对心肌的毒性作用。     

细胞凋亡及其相关基因蛋白在阿霉素肾病中的作用

目的：探讨细胞凋亡及其相关基因蛋白在阿霉素（ADR）肾病发病中的作用及机制。 方法：复制ADR肾病模型，用超氧化物歧化酶（SOD）干预，用原位末端标记法、免疫组化法、原位杂交法分别检测细胞凋亡、基因蛋白表达、野生型p53 mRNA，同时测定肾皮质匀浆丙二醛（MDA）及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）水平。结果：模型组皮质部肾小球、近曲及远曲肾小管细胞凋亡数和c-Myc蛋白及野生型p53转录水平、近曲和远曲肾小管细胞Bax蛋白表达、肾皮质MDA水平明显高于对照组（P<0.01），肾皮质GSH-Px活性、近曲和远曲肾小管细胞Bcl-2蛋白表达明显低于对照组（P<0.01）；SOD组肾小球和近曲、远曲肾小管细胞凋亡数明显少于模型组（P<0.01）。结论：ADR肾病病鼠的发病与肾小球、近曲和远曲肾小管细胞凋亡有关，氧自由基（OFR）可能通过上调诱导细胞凋亡的基因蛋白表达，下调抑制细胞凋亡的基因蛋白表达而引起细胞凋亡。     

缺血预适应对大鼠心肌细胞凋亡及bcl-2、bax蛋白表达的影响

目的：探讨缺血预适应对大鼠心肌细胞凋亡及bcl-2、bax蛋白表达的影响。方法：以DNA电泳和TUNEL分析检测大鼠心肌组织的细胞凋亡情况，免疫组织化学方法检测bcl-2、bax蛋白的表达。结果：缺血再灌注组缺血区心肌DNA电泳呈现典型的DNA梯形，而缺血预适应组和假手术对照组未见梯形。缺血预适应组心肌细胞凋亡指数显著低于缺血再灌注组（P<0.01）。Bcl-2在各组均无阳性表达，bax在各组表达无显著差异（P>0.05）。结论：缺血预适应显著减少了缺血再灌注诱导的心肌细胞凋亡程度。     

大鼠淋巴滞留性脑病bcl-2、bax表达和细胞凋亡的动态变化

目的：研究大鼠淋巴滞留性脑病模型中大脑皮层bcl-2、bax基因表达和细胞凋亡的动态变化。 方法： 用阻断颈部淋巴引流的方法复制大鼠淋巴滞留性脑病模型，术后1、2、3、5、7和14 d处死动物，HE染色观察脑组织结构变化，TUNEL荧光标记检测原位细胞凋亡，RT-PCR检测大脑皮层凋亡相关基因bcl-2和bax的表达。 结果： 显微镜下见脑组织有水肿的结构变化, 第5 d最明显。大脑皮层TUNEL阳性细胞数和bax表达从术后2 d开始增多，5 d达最高峰，14 d降至对照组水平。bcl-2表达于术后1 d开始增高，5 d达最高值，第7 d下降至对照组水平。bax表达增高的程度大于bcl-2。 结论： 阻断颈部淋巴引流可导致淋巴滞留性脑病，大脑皮层神经细胞死亡以凋亡为主并与bcl-2和bax的表达增加有关。