大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核浅层内谷氨酸能、γ-氨基丁酸能和甘氨酸能终末的中枢起源

三叉神经脊束核尾侧亚核浅层（I、II层）内有较密集的谷氨酸样、γ-氨基丁酸样和甘氨酸样阳性终未。这些终未除分别来自外周初级传入或局部神经元外，还可能来自脑干的核团。为了探讨这些阳性终未的脑干起源部位，本研究用荧光金逆行追踪与免疫荧光组织化学染色相结合的双标技术对三叉尾侧亚核浅层内谷氨酸能、γ-氨基丁酸能和甘氨酸能终未在脑干的起源部位进行了追踪。结果表明：大鼠脑干向三叉尾侧亚核发出谷氨酸能、γ-氨基丁酸能和甘氨酸能投射的神经元主要位于构成下行抑制系统的中脑中央灰质、中缝大核及其周围的网状结构、中缝苍白核和中缝隐核。本研究的结果提示，除已知的5-羟色胺和P物质外，谷氨酸、γ-氨基丁酸和甘氨酸也可能参与下行抑制系统，对面口部伤害性刺激信息传递发挥调控作用。     

大鼠三叉神经脊束核吻侧亚核背内侧部向三叉神经中脑核的回返…

既往的研究证明，由支配咬肌的三叉神经中脑核神经元到丘脑腹后内侧核存在着一条由四级神经元组成的传递本体觉信号的中枢通路。此通路的第二级神经元位于三叉神经脊束核吻侧亚核背内侧部和邻接的小细胞网状核的一部分，第三级神经元存在于沿三叉神经感觉主核内缘伸延的“带状区”。本研究将ＰＨＡ－Ｌ注入第二级神经元所在区域，不仅在“带状区”发现有很多标记终末，而且在三叉神经中脑核区域内也发明较密集的ＰＨＡ－Ｌ阳性终末，     

大鼠三叉神经尾侧亚核内甘氨酸受体和甘氨酸阳性神经元的分布

目的 研究大鼠三叉神经尾侧亚核内甘氨酸受体和甘氨酸阳性神经元的分布及其匹配关系,方法：免疫细胞化学染色技术,结果：甘氨酸受体免疫组化染色阳性胞体和纤维分布于三叉神经尾侧亚核各层,尤以浅层密集,甘氨酸阳性胞体在每层均有广泛分布,甘氨酸阳性纤维及终末密集分布于三叉神经脊束核尾侧亚核的浅层,深层的阳性纤维及终末呈散在线性分析,结论 上述结果表明在三叉神经尾侧亚核浅层甘氨酸阳性纤维和终末的分布与甘氨酸受体     

利用GAD67-GFP基因敲入方法显示小鼠脊髓内表达GFP的GABA能神经元的分布(英文)

γ-氨基丁酸 (GABA)是脊髓背角、前角内主要的抑制性神经递质。为了更好地观察脊髓背角内 GABA能神经元的形态和功能 ,本研究使用了两种谷氨酸脱羧酶 67-绿色荧光蛋白 (GAD67-GFP)基因敲入小鼠 ,并观察了敲入小鼠脊髓内的 GFP表达状况。用免疫荧光组织化学双标记方法显示脊髓内所有的 GF P阳性神经元基本上都呈 GAD67和 GABA阳性 ;GFP阳性神经元在脊髓背角的 ～ 层最为密集 ,背角深层内侧部及中央管周围呈中等密度分布 ,而在脊髓背角其它部位及前角则呈散在分布。脊髓内 GFP阳性神经元的分布与 GABA能神经元的分布一致。本文作者等还进一步在 GAD67-GFP敲入小鼠中观察了 GFP和神经元标志物神经元核蛋白 (Neu N )的共存状况。脊髓背角内 GFP阳性神经元分别占 、 和 层的 Neu N阳性神经元的 3 1.5 %、3 3 .3 %和 44 .7% ,与以往的 GABA免疫组化研究结果基本一致。本研究表明 GAD67-GFP基因敲入小鼠脊髓内的 GFP在GAD67启动子的调节下正确地表达于 GABA能神经元 ,该基因敲入小鼠可用于脊髓 GABA能神经元的形态学特征和生理学特性及其发育规律等方面的研究     

GAD67-GFP基因敲入小鼠三叉上核内向三叉神经运动核投射的GFP阳性神经元表达c-fos的研究

本文综合应用逆行束路追踪(将四甲基罗达明-TMR注入一侧三叉神经运动核)和免疫荧光组织化学三重标记技术,在激光共聚焦显微镜下对谷氨酸脱羧酶67-绿色荧光蛋白(GAD67-GFP)基因敲入小鼠在口周部给予伤害性刺激时,三叉上核(Vsup)内向对侧三叉神经运动核(Vmo)投射的呈GFP阳性的GABA能神经元表达c-fos的情况进行了研究。结果显示:(1)Vsup内可观察到许多GFP阳性神经元,细胞较小;(2)也可观察到许多TMR或c-fos单标神经元较密集地分布于Vsup内,其中c-fos阳性产物只见于神经元的胞核,在胞浆内未见表达;(3)在激光共聚焦显微镜下可进一步观察到部分神经元同时呈GFP/TMR、TMR/c-fos、GFP/c-fos双重标记或GFP/TMR/c-fos三重标记。其中GFP/TMR双标神经元分别占GFP或TMR阳性神经元的17.8%和19.2%;TMR/c-fos双标神经元分别占TMR或c-fos阳性神经元的34.9%和31.3%;GFP/c-fos双标神经元分别占GFP或c-fos阳性神经元的21.2%和20.5%;而GFP/TMR/c-fos三标神经元分别占GFP、TMR或c-fos阳性神经元的11.1%、12%和10.8%。以上结果表明小鼠Vsup内部分GABA能神经元可接受来自同侧的口面部伤害性信息,并对这些信息进行整合后,直接发出投射纤维至Vmo;故Vsup内部分GABA能运动前神经元可能参与口面部伤害性反射局部环路的构成。     

三叉神经尾侧脊束核胶状质亚核内连续性突触的亚显微结构研究

本文用电镜观察了小鼠三叉神经尾侧脊束核胶状质亚核内的突触联系。该核内的连续性突触有:1.树—轴—树突触(D-A-D_1):树突D内只含少量扁圆形突触小泡,与轴突A形成树-轴突触(D-A);而轴突A又与树突D_1形成轴-树突触(A-D_1)。2.轴-树-树突触(A-D-D_1):轴突终末A与Ⅱ型树突D形成轴-树突触(A-D);而树突D又与Ⅱ型树突D_1形成树-树突触(D-D_1)。3.轴-轴-树突触(A-A_1-D):轴突终末A与轴突终末A_1形成轴-轴突触(A-A_1);而轴突终末A_1与Ⅱ型树突D形成轴-树突触(A_1-D)。     

GAD67-GFP基因敲入小鼠5-羟色胺样和P物质样阳性终末与三叉神经中脑核神经元的联系

本研究应用免疫荧光组织化学三重标记技术,在激光共聚焦显微镜下观察了GAD67-GFP基因敲入小鼠三叉神经中脑核(Vme)内5-HT样和P物质(substanceP,SP)样阳性终末分别与小白蛋白(parvalbumin,PV)样和GFP阳性神经元之间的联系。结果显示:(1)Vme内有较多的PV样阳性神经元,这些神经元绝大多数为大、中型的假单极神经元,直径约为18～40μm;也可观察到少量的GFP阳性神经元,多为小的多极神经元,直径约为8～15μm;(2)5-HT样阳性终末广泛分布于Vme内,其中有部分阳性终末分别聚集在PV样或GFP阳性的Vme神经元的胞体周围,计数结果表明:大约有77.7%和22.3%的5-HT样阳性终末分别与PV样或GFP阳性胞体相接触;(3)SP样阳性终末也广泛分布于Vme内,并分别与PV样或GFP阳性神经元的胞体形成密切接触,其中有78.2%和21.8%的阳性终末分别与PV样或GFP阳性胞体相接触。以上结果提示,在口面部本体感觉信息向更高一级中枢传递过程中,5-HT能和SP能神经终末不仅对初级传入发挥直接的调控作用,还可能通过影响Vme内的GABA能神经元的活动,从而间接对该信息的传递发挥调控作用。     

谷氨酸脱羧酶67-绿色荧光蛋白基因敲入小鼠三叉神经尾侧亚核内GFP阳性神经元的分布及与小白蛋白的共存

目的观察谷氨酸脱羧酶67-绿色荧光蛋白（GAD67-GFP）基因敲入小鼠三叉神经尾侧亚核（Vc）浅层内，表达GFP的GABA能神经元的分布及其与小白蛋白（PV）的共存。方法分别运用原位分子杂交与免疫组织化学相结合；GFP与神经元标记物——神经元核蛋白（NeuN）或PV免疫荧光染色相结合的双重标记方法，在光学显微镜和激光共聚焦显微镜下进行观察。结果1．Vc浅层内90％以上的GFP阳性神经元同时表达GAD67 mRNA，而几乎所有表达GAD67 mRNA的阳性神经元都呈GFP阳性；2．GFP阳性神经元主要分布于Ｖc的Ⅰ－Ⅱ层内，细胞较小，尤其在Ⅱ层内可见大量密集分布的GFP阳性细胞和突起。GFP阳性神经元分别占Ⅰ、Ⅱ层内NeuN阳性神经元总数的19．4％和24．3％；3．GFP／PV双标神经元主要分布于Ｖc的Ⅰ－Ⅱ层，这些双标神经元大约占PV阳性神经元的62．4％，占GFP阳性神经元的12．8％。结论在Ｖc表达GFP的GABA能神经元主要密集分布于与外周伤害性信息传递关系密切的板层内，且大部分PV样阳性神经元属于GABA能神经元。     

大鼠三叉神经节细胞向三叉神经脊束核各亚核的分枝投射

本文应用荧光素双标记与免疫荧光结合方法研究了单个含ＳＰ或ＣＧＲＰ的三叉神经节细胞向三叉神经脊束核的尾侧亚核、极间亚核和吻侧亚核的分枝投射。将ＤｉａｍｉｄｉｎｏＹｅｌｌｏｗ（ＤＹ）注入尾侧亚核，ＦａｓｔＢｌｕｅ（ＦＢ）分别注入吻侧亚核或极间亚核，发现ＤＹ／ＦＢ双标细胞占同侧三叉神经节内标记细胞总数的１３．２％（ＦＢ注入吻侧亚核例）和２．３％（ＦＢ注入极间亚核例）；双标细胞中含ＳＰ者分别为７４．４％和６９．６％；含ＣＧＲＰ者分别为７２．１％和６４．３％。将ＤＹ注入极间亚核，ＦＢ注入吻侧亚核时，ＤＹ／ＦＢ双标细胞占同侧三叉神经节标记细胞总数的１．６％，双标细胞中有６７．９％为ＳＰ阳性，７３．９％为ＣＧＲＰ阳性。多数的双标且呈ＳＰ或ＣＧＲＰ阳性的三叉神经节细胞直径约为２５～５０μｍ，为中、小型节神经元，而直径大于５０μｍ的大型细胞较少见。以上结果提示，三叉神经初级传入纤维进入脑干后的下降支分枝投射向三叉神经脊束核的各亚核，它们可能与面口部的痛信息传递有关。ＳＰ和ＣＧＲＰ是这些分支投射神经元的重要神经活性物质。     

外周伤害性刺激后颈髓和三叉神经脊束核尾侧亚核中向中缝背核投射神经元的 c-fos 表达

中缝背核是内源性镇痛系统中的重要核团之一,为了估价该核与外周伤害性信息的传递与调控之间的关系,文内采用荧光金逆行追踪与 FOS 免疫荧光标记相结合的方法进行研究,结果显示将荧光金注入中缝背核后,在三叉神经脊束核尾侧亚核和颈髓后角浅层中可观察到许多荧光金标记神经元的胞体,其中有一部分神经元在给予外周伤害性刺激后被激活而引起 c-fos 表达,该文进一步证明了来自脊髓和三叉神经脊束核尾侧亚核到中缝背核的直接投射至少有一部分与中缝背核的痛觉谓节机制有关。     

大鼠三叉神经节神经元向三叉神经脊束核尾侧亚核和孤束核的分支投射

为研究三叉神经节神经元向三叉神经脊束核尾侧亚核（ＶＣ）和孤束核（ＮＴＳ）的分支投射，用荧光素逆行追踪双标记方法，Ｆａｓｔｂｌｕｅ（ＦＢ）和Ｎｕｃｌｅａｒｙｅｌｏｗ（ＮＹ）分别注射入三叉神经脊束核尾侧亚核和孤束核后，荧光显微镜（３６０ｎｍ激发波长）下可见三叉神经节内的多种逆行标记神经元。ＦＢ显示明亮的蓝色标记胞浆，而ＮＹ标记则为黄绿色的圆形胞核。虽大多数神经元为单标记，但部分也呈黄色胞核，蓝色胞浆的双标记细胞。双标记细胞多为直径３０μｍ以下的中、小型，鲜见大型细胞。分支投射神经元可能扩散传递口、舌伤害性痛觉信息并在ＶＣ和ＮＴＳ内与其他来源的内脏、躯体感觉传入信息相互影响。     

大鼠三叉神经节及尾侧亚核内PPTA mRNA在伤害性刺激条件下的时程变化

将福尔马林注入大鼠一侧口周皮下，用原位杂交法观察三叉神经节和三叉神经脊束核尾侧亚核内PPTAmRNA表达的时程变化。证明：PPTAmRNA在三叉神经节内的表达于刺激后4h有明显增加，24h达到高峰，48h后恢复至正常；在尾侧亚核中，PPTAmRNA的表达及变化主要限于Ⅰ、Ⅱ层，其时程变化与在三叉神经节中的变化相似。PPTAmRNA表达的增加仅出现于刺激侧的三叉神经节和尾侧亚核，而对侧和对照组则无明显变化。提示伤害性刺激可直接或跨突触增强尾侧亚核PPTAmRNA的表达，意味着PPTA在西口部伤害性信息的传递和调控中起重要作用。     

大鼠三叉神经尾侧亚核和脊髓内离子型谷氨酸受体、GABA_A受体和甘氨酸受体的分布

为了搞清兴奋性和抑制性氨基酸受体在伤害性刺激信息传递和调制初级门户内的精确定位，本研究用免疫组织化学技术观察了大鼠三叉神经尾侧亚核（Ｖｃ）和脊髓内离子型谷氨酸受体（ＮＭ－ＤＡ受体、ＡＭＰＡ受体和Ｋａｉｎａｔｅ受体）、ＧＡＢＡＡ受体和甘氨酸（Ｇｌｙ）受体的分布。ＮＭＤＡ受体１亚型分布于Ｖｃ和脊髓的各层，ＮＭＤＡ受体２Ａ／Ｂ亚型、Ｋａｉｎａｔｅ受体和ＧＡＢＡＡ受体α亚单位散在性地分布于Ｖｃ和脊髓后角的Ⅰ层，ＧＡＢＡＡ受体α亚单位仅见于Ｖｃ和脊髓Ⅰ层内轴突样结构。ＡＭＰＡ受体、ＧＡＢＡＡ受体β亚单位和Ｇｌｙ受体较密集地分布于Ｖｃ和脊髓的各层，尤其是它们的浅层（Ⅰ和Ⅰ层）。结合机能学研究的结果，讨论了这些受体阳性神经元在伤害性刺激信息传递和调制方面的作用。     

大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核和脊髓向丘脑和臂旁核的谷氨酸能投射

本研究用荧光金逆行追踪与免疫荧光组比技术相结合的方法,对大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核和脊髓向丘脑和臂旁核的谷氨酸能投射进行了观察。磷酸激活的谷氨酸胺酶（PAG）是谷氨酸能神经元的特异性标识物。PAG样阳性胞体主要位于三叉神经脊束核尾侧亚核和颈髓背角的Ⅰ层,少量PAG样阳性胞体也见于它们的Ⅱ层外侧部及外侧网状核。将荧光金注入丘脑腹基底复合体后．荧光金逆标神经元主要见于对侧三叉神经脊束核尾侧亚核和颈髓背角的Ⅰ层及外侧网状核;将荧光金注入臂旁核后,荧光金逆标神经元也主要见于对侧三叉神经脊束核尾侧亚核和颈髓背角的Ⅰ层及外侧网状核。三叉神经脊束核尾侧亚核向丘脑腹基底复合体投射神经元的12．4％,向臂旁核投射神经元的13．2％呈PAG样阳性;颈髓背角浅层向丘脑瓜基底复合体投射神经元的12．7％,向臂旁核投射神经元的14．3％呈PAG样阳性。向丘脑腹基底复合体和臂旁核投射的PAG／荧光金双标神经元分别占三叉神经脊束核尾侧亚核浅层内PAG样阳性神经元总数的13％和24．6％,向丘脑腹基底复合体和臂旁核投射的PAG／荧光金双标神经元分别占颈髓背角浅层内PAG样阳性神经元总数的11．6％和30．1％。外侧网状核内的部分PAG样阳性神经元也向丘脑腹基底复合体或臂旁核投射。Ⅰ层内的双?