三联抗原酶免疫试验诊断日本血吸虫病

用血吸虫成虫—卵—尾蚴三联抗原EIA,检测类卵阳性患者血清94份、非疫区有疫水接触史皮试阳性者血清190份、基本消灭血吸虫病地区人群血清205份,阳性率分别为100％、27.9％及10.2％。69份肝吸虫病人血清,虫卵抗原EIA假阳性率为1.4％;与72份肺吸虫病人血清未显交叉反应;153份献血员血清,其虫卵及尾蚴抗原EIA假阳性率分别为1.3％和2.6％。用三联抗原EIA、成虫粗抗原ELISA、COP及CHR检测94份粪卵阳性患者血清,仅卵抗原EIA 阳性率明显高于COP;成虫及尾蚴抗原 EIA的阳性率分别和成虫粗抗原 ELISA、CHR 的阳性率相同。     

应用三种酶联免疫吸附试验（ELISA）诊断肺螨病的比较观察

应用三种酶联免疫吸附试验:Dot——ELlSA、ABC——ELISA和SPA——ELISA分别检测相同类型45份肺螨病患者血清尘螨性抗体,结果阳性率分别为93.33％,83.24％和51.11％(同Dot——ELISA比P<0.05)。肺螨病患者阳性血清的几何平均滴度分别为295.43,191.12和112.54。因而Dot——ELISA的敏感度为ABC——ELISA和SPA——ELISA的1.70倍和2.88倍。实验结果证明Dot—ELISA在诊断肺螨病中有较高的敏感性和特异性。     

慢性丙型肝炎患者血清中HCV核心抗原的定性检测

目的:应用酶联免疫吸附试验(enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA)定性检测血清中丙型肝炎病毒(hepatitisCvirus,HCV)核心抗原,分析和评价HCV核心抗原检测的临床价值。方法:应用ELISA方法定性检测慢性丙型肝炎患者149份血清中的HCV核心抗原,以健康人血清20份,慢性乙型肝炎患者血清20份作为对照,以证明方法的特异性;并同时应用RT-PCR和ELISA方法分别检测血清中的HCVRNA和抗HCV。结果:健康人血清和慢性乙型肝炎患者血清HCV核心抗原定性检测均呈阴性反应,检测值(OD值)分别为0.022±0.017,0.001±0.012;149份慢性丙型肝炎患者血清HCV核心抗原阳性者74例,阳性率49.66%,阳性检测值(OD值)为0.534±0.457,与阴性检测值比较其差异有统计学意义。HCVRNA和HCV核心抗原检测有54.36%的符合率,两种检测方法之间检测的差异性无统计学意义(P>0.05)。149份抗HCV阳性血清中HCVRNA阳性率为55.03%(82/149),HCV核心抗原阳性率为49.66%(74/149),两者比较无统计学意义(P>0.05)。结论:HCV核心抗原定性检测特异性强,慢性丙型肝炎患者血清中阳性率为49.66%,与HCVRNA有一定的相关性,可能也是反映HCV病毒血症的血清学标志。与HCVRNA同时检测,可提高对慢性丙型肝炎患者的病毒血症和病毒复制诊断率,但其检测的灵敏性还有待进一步提高。     

RpN47重组抗原的表达及其产物反应原性的初步鉴定

目的探讨梅毒螺旋体外膜蛋白（TpN47）重组抗原及其临床意义。方法采用PCR技术扩增TpN47重组抗原,再进行T-A克隆及测序,然后亚克隆至原核表达载体中,以亲和层析法纯化重组蛋白。将重组蛋白作为抗原制备酶联免疫吸附试验（ELISA）检测试剂盒,对正常人血清200份、类风湿性关节炎（RA）阳性血清55份、系统性红斑狼疮（SLE）阳性血清34份及梅毒可疑患者阳性血清135份进行检测,其结果与梅毒血凝试验（TPHA）、梅毒甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）的检测结果进行比较。结果成功地构建了pET32-TpN47重组表达载体,重组的TpN47蛋白在大肠杆菌BL21中得到稳定表达。对梅毒可疑阳性血清采用ELISA、TPHA、TRUST检出阳性率分别为81.48%、98.52%、71.11%;TRUST测出的8份可疑阳性样品及31份阴性样品TPHA检测结果均为阳性,而ELISA检测结果阳性19份。ELISA检测阳性率与TRUST和TPHA比较,差异均有统计学意义（均P〈0.01）。结论TpN47重组抗原具有较好的免疫反应活性,ELISA试剂特异性、敏感性次于TPHA,但明显高于TRUST。     

IEST和快速ELISA诊断华支睾吸虫病的效果比较

应用成虫石蜡切片抗原作免疫酶染色试验(IEST)和快速酶联免疫吸附试验(Q—ELISA)对比检测了52份华支睾吸虫病患者和50份健康人血清,两法的阳性率分别为96％和94％,假阳性率分别为4％和6％。应用IEST和Q—ELISA检测50份血吸虫病患者和20份卫氏并殖吸虫病患者血清,其交叉反应率分别为6％、8％和5％、5％。结果表明两法诊断华支睾吸虫病均有较高的敏感性和特异性。Q—ELISA更适台于现场应用。     

不同免疫检验方式在HIV检测中的可靠性对比分析

目的对金免疫层析试验、间接酶联免疫吸附试验和双抗原夹心ELISA法三种免疫检验方法检测抗HIV结果的可靠性进行对比分析。方法选用卫生部全国血站系统免疫检验2012年室间质量评价血清工30份以及卫生部不定量临床检验中心定值参比血清和无偿献血血清120份,分别采用三种不同的免疫检验方法进行抗HIV结果检测,对三种方法的具体测抗结果及其可靠性进行对比分析。结果采用双抗原夹心ELISA法检测室间质量评价血清的阳性率为100.0%,检测2NCU/m L血清的阳性率为100.0%,检测4NCU/m L血清的阳性率为100.0%,检测无偿献血者血清的阳性率为0.0%,间接酶联免疫吸附试验测抗HIV结果的四项阳性率为别为86.7%、90.0%、100.0%、2.5%,金免疫层析试验对四项血清阳性率的诊断结果为96.7%、100.0%、90.0%、0.8%。双抗原夹心ELISA法其可靠性明显高于其他两种方法袁差异显著袁具有统计学意义(P0.05)。结论在三种不同的免疫检验方法中,双抗原夹心ELISA法在测抗HIV的诊断过程中,准确性最高,可靠性最强,应当在测抗HIV结果的临床诊断活动中得到广泛应用。     

鸡卵核中72000蛋白的纯化及其对混合性结缔组织病的诊断价值

目的：纯化鸡卵核中72000蛋白，并探讨该抗原对混合性结缔组织病(MCTD)的诊断价值。方法：以常规SDS—PAGE和电洗脱技术相结合，分离纯化鸡卵核中72000蛋白，并用于Dot—BLISA诊断MCTD。结果：用该技术分离纯化了鸡卵核中72000蛋白，获得约2000μg具有明显免疫反应性的高纯度抗原。用于检测MCTD病人血清78份，阳性63份，阳性反应率为80．77％；正常人血清100份未发现假阳性；对皮肌炎和多发性肌炎(DM／PM)72份，硬皮病(PSS)48份和系统性红斑狼疮(SLE)126份血清亦无交叉反应出现。结论：以纯化的鸡卵核中72000蛋白为抗原，建立的Dot—ELISA方法，用于诊断MCTD具有良好的特异性和敏感性。     

ABC—ELISA检测抗HBs的初步报告

本文报道用ABC—ELISA和ELISA检测309份血清标本的抗HBs,结果表明ABC—ELISA检出抗HBs阳性标本58份,阳性率为18.8%,ELISA检出阳性标本48份,阳性率为15.5%,ABC—ELISA阳性检出率比ELISA阳性检出率高20.8%.本法具有灵敏性和特异性新方法,可应用于乙型肝炎病的实验室诊断。     

间接免疫荧光法检测麻疹抗原在麻疹早期诊断中的临床应用

目的:探讨间接免疫荧光法(Indirect immunofluorescence Assay,IEA)检测麻疹病毒抗原对儿童麻疹病毒(measles virus,MV)感染的早期诊断价值.方法:观察86例临床诊断麻疹的患儿,在发病的不同阶段IFA检测痰液MV抗原和酶联免疫吸附试验(engymelinked imgmunosorbent assay,ELISA)检测血清中MV特异性LgM抗体,采集30份上呼吸道感染患者痰液进行IFA麻疹病毒抗原检测,比较分析检测结果.结果:86例中发病7 d内IFA测抗原ELISA测抗体两种方法的阳性率为分别为97.1%和16.2%;7 d后为33.3%和88.9%,P均＜0.01.IFA测抗原阳性率与检测时间的相关系数为-0.91,P=0.02;ELISA测抗体阳性率与检测时间的相关系数为0.97,P=0.04.30份对照组的标本MV抗原检测均为阴性,IFA测抗原的特异性与敏感性分别是100%和97.1%.结论:IFA测抗原在疾病早期检出阳性率高,阳性检出率与检测时间成负相关,IFA测抗原痰液麻疹病毒抗原是一种早期快速、特异敏感的实验室检测方法.     

TRUST和ELISA法检测供血浆者血液梅毒结果的比较

目的通过比较甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)和梅毒螺旋体双抗原夹心法试验(ELISA)两种方法的灵敏度、特异性,为单采血浆站选择适宜检测方法时提供依据.方法对2009年12月份我站采集的4214份供血浆者血清标本分别用甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)和梅毒螺旋体双抗原夹心法试验(ELISA)两种方法进行检测后对结果进行统计.结果4214份被检血清中,TRUST法阳性者6份,阳性率为0.14%,ELISA法阳性13份,阳性率为0.31%.4214份被检血清中,两种方法结果不一致的标本数为7份,比例为0.17%,结果一致的标本数为4207份,比例为99.83%,其中: TRUSA法和ELISA法均为阴性者为4201份,阴性率为99.69%,TRUSA法和ELISA法均为阳性者为6份,阳性率为0.14%.结论血液安全是我们必须重视的一个问题,加强血液安全,选择一个灵敏度高的方法是我们单采血浆站为确保血液制品安全应有的责任,因此,笔者建议选择ELISA法为献血(浆)者样本的筛查检测.     

日本血吸虫不同发育阶段抗原检测IgG及IgG_4的疗效考核价值

目的 :建立具有疗效考核价值的抗原 -抗体检测系统。方法 :用日本血吸虫不同发育阶段抗原 (AWA、AMA、AESA、SEA、SIEA)检测治疗前及治疗后不同时间慢性血吸虫病人血清中特异性IgG及IgG4 并测定肺吸虫病人、肝吸虫病人和健康人血清的交叉反应性。结果 :不同发育阶段抗原 -IgG检测系统间对慢性血吸虫病人、肺吸虫病人、肝吸虫病人和健康人血清测试的阳性率无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ,慢性血吸虫病人治疗后 12个月IgG的阴转率以SIEA最高 (90 .0 % ) ,其次为AMA(77.5 % ) ,最低为AESA(2 0 .0 % ) ;检测慢性血吸虫病人治疗前的特异性IgG4 的阳性率AWA最高 (85 .0 % ) ,其次为AMA(80 .0 % ) ,最低的为SIEA(37.5 % ) ,治疗后 12个月的IgG4 阴转率SIEA最高 (97.5 % ) ,其次为AMA(95 .0 % )和AWA(85 .0 % ) ,最低的为SEA(6 2 .5 % )。结论 :AMA -IgG、SIEA -IgG、AWA -IgG4 和AMA -IgG4 检测系统具有较好的疗效考核价值 ,且以SIEA -IgG和AMA -IgG4 两个检测系统最好。     

Dot—ELISA快速诊断日本血吸虫病的实验研究

目的：建立快速简便实用的血吸虫病诊断方法。方法：利用Dot-ELISA检测急性日本血吸虫病患者血清特异性IgG抗体。结果：Dot-ELISA和常规ILISA检测117例急性血吸虫病患者血清抗体的阳性率分别为94.0%和97.4%,高于粪便检测的阳性率（92.3%),两法检测结果的符合率达96.6%。108例粪检阳性患者,Dot-ELISA和常规ELISA的阳性率分别为94.4%和97.2%,两法检测结果的符合率为97.2%。25例肝吸虫病和50例正常人可出现不同程度的交叉反应。结论：两法在诊断的敏感性和特异性方面相似,检测结果无显著性差异,而Dot-ELISA操作简便,诊断快速,具有一定的实用诊断价值。     

日本血吸虫重组信号蛋白14-3-3对日本血吸虫病的诊断价值

目的 探讨纯化的日本血吸虫(中国大陆株)重组信号蛋白14—3—3(rSjl4—3—3)诊断血吸虫病的价值。方法 利用纯化的rSjl4—3—3抗原与成虫抗原，间接EUSA法检测急、慢性日本血吸虫病患者血清。结果 急、慢性血吸虫患者血清rSjl4—3—3抗体检出率为100％和92．0％，与正常人血清未出现交叉反应；抗AWA抗体检出率为98．0％和94．0％，与正常人有7．3％的交叉反应。结论 rSjl4—3—3为抗原诊断日本血吸虫病显示出高度的敏感性和特异性，具有实用价值。     

检测日本血吸虫病胶体碳试纸条的研制与初步应用

目的：开发一种快速检测血清中日本血吸虫抗体的免疫诊断方法。方法：用胶体碳标记日本血吸虫成熟虫卵可溶性抗原（SEA）,与待测血清中日本血吸虫抗体结合,再用SEA包被在硝酸纤维素膜（NC膜）上以捕捉碳标SEA-血吸虫抗体复合物,达到检测血吸虫抗体的目的。 结果：检测137份血清,与间接血凝法（indirect haemagglutination assay,IHA）检测结果一致性为98.54%,如经IHA试剂盒检测呈阳性者即视为阳性血清,则该方法的检测敏感性为98.99%,特异性为97.37%;且检测条带的灰度与血清效价具有曲线关系,因而可以对待测血清作半定量分析。 结论：胶体碳试条层析法操作简便,快速,具有较高的敏感性和特异性,适合作血吸虫现场检测。     

检测日本血吸虫病胶体碳试纸条的研制与初步应用（英文）

目的：开发一种快速检测血清中日本血吸虫抗体的免疫诊断方法。方法：用胶体碳标记日本血吸虫成熟虫卵可溶性抗原（SEA）,与待测血清中日本血吸虫抗体结合,再用SEA包被在硝酸纤维素膜（NC膜）上以捕捉碳标SEA-血吸虫抗体复合物,达到检测血吸虫抗体的目的。结果：检测137份血清,与间接血凝法（indirect haemagglutination assay,IHA）检测结果一致性为98.54%,如经IHA试剂盒检测呈阳性者即视为阳性血清,则该方法的检测敏感性为98.99%,特异性为97.37%;且检测条带的灰度与血清效价具有曲线关系,因而可以对待测血清作半定量分析。结论：胶体碳试条层析法操作简便,快速,具有较高的敏感性和特异性,适合作血吸虫现场检测。     

系统性红斑狼疮患者血清抗鸡卵核中42000 蛋白抗体的测定及其临床意义

目的:通过检测系统性红斑狼疮(SLE)患者血清抗鸡卵核42000蛋白抗体,研究其与SLE有关指标的关系,以探讨该抗体在SLE发病中的作用.方法:收集SLE患者、非SLE结缔组织病患者和正常人群血清.用Dot-ELISA方法测定抗鸡卵核42000蛋白抗体及其滴度.结果:116例SLE患者血清有78例检出该抗体,其阳性率为68.2%(78/116);正常对照人群100例未见假阳性;皮肌炎和多发性肌炎(DM/PM)76份、硬皮病(PSS)48份和混合性结缔组织病(MCTD)88份血清均无交叉反应出现.该抗体的几何平均倒数滴度(GMRT)在活动期高于缓解期,与疾病活动指数和ANA滴度呈显著正相关,与C3呈负相关,与抗ds-DNA抗体滴度无明显相关.结论:血清抗鸡卵核42000蛋白抗体的检测,对SLE诊断和随访可起到一定的临床提示作用.     

斯氏肺吸虫成虫10—30KD抗原蛋白的分离及在免疫诊断中的应用

在酶免疫转移印渍技术（EITB）分析斯氏肺吸虫虫体成份，显示10～30KD抗原蛋白（主带22、24和26KD）对该病具免疫诊断价值的基础上，将SDS－PAGE和电洗脱技术相结合，分离并纯化出斯氏肺吸虫成虫的10～30KD蛋白组份，采用Dot－ELISA方法免疫诊断肺吸虫。10～30kD的斯氏肺吸虫成虫抗原与斯氏、卫氏肺吸虫病人血清均呈阳性反应，与其它吸虫病和健康人血清末产生反应。该结果进一步表明10～30KD斯氏肺吸虫成虫抗原的Dot－ELISA为肺吸虫病高度特异、敏感的免疫诊断方法。并为两种肺吸虫的共同抗原，可用于免疫诊断斯氏、卫氏肺吸虫病。     

班氏丝虫宿主循环抗原的检测

应用兔抗牛丝虫抗体ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法检测安徽流行区人体班氏丝虫循环抗原。微丝蚴血症者血清总阳性率９６％（２４／２５），尿液总阳性率为６０％（１５／２５），４份乳汁阳性率均为１００％。１５份尿液阳性和４份乳汁阳性者与血清阳性结果的符合率分别为１００％（１５／１５）和７５％（３／４）。检测江苏非流行区正常人血清、尿液、乳汁共４３份，全部阴性。１１份肠道线虫感染者尿液全为阴性，血清Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ阴性。１０份肺吸虫感染者血清Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ阴性。结果表明，班氏丝虫循环抗原不仅存在于血清而且存在于尿液和乳汁中。     

免疫印渍试验在斯氏肺吸虫病血清学诊断中的意义

应用免疫印渍试验（Immunoblottingtest）分析斯氏肺吸虫成虫、幼虫和囊蚴期的虫体可溶性抗原．结果显示感染斯氏肺吸虫的人和动物血清可识别22、24和26KD抗原蛋白带．依据病人血清对上述抗原组仿的识别，用免疫印渍试验诊断24例斯氏肺吸虫病人，皆为阳性，而对照组显阴性．与Dot－ELISA比较试验的敏感性和特异性，两试验的阳性检出事无显著性差异（P＞0．05）．Dot-ELISA的交叉反应率为18．75％（6／32），而免疫印渍试验无交叉反应．表明斯氏肺吸虫的22、24和26KD蛋白带为特异性诊断抗原，免疫印渍试验为斯氏肺吸虫病的高度敏感和特异的血清学诊断方法．