雌激素受体β蛋白及其同分异构体mRNA在女性慢传输性便秘患者乙状结肠壁内的表达

目的 研究雌激素受体β(estrogen receptor β,ERB)蛋白及其同分异构体mRNA在女性慢传输性便秘(slowtransit constipation,STC)患者乙状结肠的表达.方法 采用RT-PCR及Western blot技术检测20例女性STC患者以及20对照组乙状结肠ERβ蛋白及其同分异构mRNA的表达.结果 ERβ1、ERβ2及ERβ5mRNA在女性STC患者及对照组乙状结肠均有表达,ERβ3及ERβ4 mRNA在两组中均无表达,STC组ERβ1、ERβ2及ERβ5mRNA表达量均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01).Western blot结果显示STC组乙状结肠ERβ蛋白表达较对照组明显降低,差异有统计学意义(P<0.01).结论 ERβ与STC的发病有关.     

生白术对慢传输型便秘大鼠c-kit mRNA表达的影响

目的观察生白术对慢传输型便秘(STC)大鼠酪氨酸激酶生长因子受体(c-kit mRNA)表达的影响。方法 Wistar雄性大鼠30只,随机分为正常对照组、模型组、生白术治疗组,每组10只。正常对照组不造模,模型组及生白术治疗组采用大黄酸粉悬液灌胃制备STC大鼠模型。造模成功后正常对照组和模型组给予生理盐水灌胃,生白术治疗组给予生白术水提物溶液,各组连续灌胃给药2周。活性炭末灌胃测定肠道传输功能,并通过RT-PCR技术测定c-kit mRNA的表达情况。结果模型组与生白术治疗组大鼠大便性状较正常对照组明显变硬,且活性炭末长度及推进率明显低于正常对照组,差异有统计学意义(P0.05)。经生白术治疗后活性炭末长度及推进率较模型组增加(P0.05),模型组活性炭末长度及推进率明显低于正常对照组,差异有统计学意义(P0.05)。模型组大鼠小肠、结肠c-kit mRNA表达明显低于正常对照组,差异有统计学意义(P0.05),而胃窦c-kit mRNA表达与正常对照组比较无明显差异(P0.05)。生白术治疗组与模型组比较,结肠c-kit mRNA表达明显增加(P0.05),而胃与小肠c-kit mRNA表达的变化则无明显差异(P0.05)。结论大剂量生白术治疗便秘的机制,可能是通过促进结肠组织c-kit mRNA表达,进而修复结肠Cajal间质细胞(ICC),恢复胃肠慢波节律的起搏,使结肠收缩活性增强,蠕动增加,加速结肠运动,最终治疗便秘,这可能是其治疗STC的机制之一。     

乙酰胆碱和异丙肾上腺素在慢传输性便秘发生中的作用

目的　探讨慢传输性便秘病人乙状结肠中的M、β受体的变化 ,离体结肠肌条对乙酰胆碱和异丙肾上腺素的反应。方法　选择 9例慢传输性便秘病人为便秘组 ,对照组 7例 ,采用M、β受体的受体放射分析法 ,电刺激离体肌条收缩反应方法。结果　便秘组乙状结肠平滑肌细胞膜M、β受体的最大结合数目显著低于对照组 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ,解离常数无明显变化 (P >0 .0 5 )。便秘组病人乙状结肠肌条频率和振幅显著低于对照组 (纵行肌P <0 .0 5 ,环行肌P <0 .0 1)。应用乙酰胆碱和异丙肾上腺素后 ,慢传输性便秘病人纵行和环行肌收缩波振幅显著低于对照组 (P <0 .0 1)。而离体肌条的收缩频率与对照组相比无明显差异 (P >0 .0 5 )。结论　慢传输性便秘病人结肠细胞膜M、β受体的变化 ,是引起慢传输性便秘病人结肠的动力学改变的重要因素之一。乙酰胆碱和异丙肾上腺素参与了慢传输性便秘结肠的动力学的调节     

慢传输型便秘患者结肠组织中肥大细胞浸润与microRNA-128表达的关系

目的:探讨慢传输型便秘患者结肠组织中肥大细胞浸润及microRNA-128表达的关系及其临床意义。方法:通过免疫组织化学技术检测慢传输型便秘患者结肠组织肥大细胞浸润,通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测慢传输型便秘患者结肠组织microRNA-128表达情况,并分析两者表达的相关性。结果:与正常结肠组织比较,慢传输便秘患者结肠组织内肥大细胞浸润显著增加(P<0.05),microRNA-128表达水平显著降低(P<0.05),且两者呈显著负相关(P<0.01)。结论:结肠组织内肥大细胞浸润增加及microRNA-128表达降低可能参与了慢传输型便秘的发病机制。     

慢传输性便秘结肠Cajal间质细胞减少与细胞凋亡的关系

目的　探讨慢传输性便秘 (slowtransitconstipation ,STC)结肠Cajal间质细胞 (interstitialcellsofCajal,ICC)减少是否与细胞凋亡有关。方法　收集 12例STC患者和 8例对照组乙状结肠标本 ,用免疫组化方法检测ICC分布情况 ,用原位末端标记法 (TUNEL)检测结肠壁黏膜层、黏膜下层和肌层的原位细胞凋亡情况 ,记数凋亡指数 ,半定量分析。结果　ICC分布于结肠肌层 ,包括黏膜下环肌层表面、环肌层、肌间神经丛、纵肌层四个区域 ,STC乙状结肠上述四个区域ICC分布均明显减少。原位细胞凋亡检测发现黏膜层和黏膜下层细胞凋亡明显增多 (P =0 .0 0 2 ) ,而肌层和肌间神经丛与对照组无显著差异。结论　STC患者乙状结肠ICC减少可能与凋亡无关。     

化瘀通便汤对慢传输型便秘大鼠结肠水通道蛋白1和水通道蛋白3影响

目的:探讨化瘀通便汤对慢传输型便秘大鼠结肠水通道蛋白1(AQP1)和水通道蛋白3(AQP3)蛋白表达的影响。方法:72只雄性大鼠随机分为空白对照组,模型对照组,化瘀通便汤低、中、高剂量组,西药对照组,每组12只,采用大黄粉灌胃制造慢传输型便秘模型,计算各组大鼠碳末推进率,Western blot法检测大鼠近端结肠AQP1和AQP3蛋白(相对灰度值)的表达。结果:与空白对照组比较,模型对照组碳末推进率明显降低,大鼠结肠AQP1和AQP3表达升高,均有显著统计学意义(P0.01);与模型对照组比较,化瘀通便汤中、高剂量组,西药对照组碳末推进率明显升高,各治疗组大鼠结肠AQP1和AQP3表达降低,均有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论:慢传输型便秘大鼠便秘的发生可能与结肠组织中AQP1和AQP3的表达升高有关,化瘀通便汤治疗慢传输型便秘的机制可能通过降低结肠组织中AQP1和AQP3的表达来实现。     

慢性便秘患者的结肠传输时间及其临床意义

目的　检测慢性便秘患者的总结肠传输时间 (Colontransittime ,CTT)与分段CTT ,并探讨其临床意义。方法　对 60例慢性便秘患者分别进行结肠传输试验和排粪造影 (Defecography ,DFG)检查。受试者分为 3组 :第 1组 19例 ,为慢传输性便秘 ,表现为排便频率减低 ,而DFG未见异常 ;第 2组 2 2例 ,DFG表现为直肠套叠 ;第 3组 19例 ,DFG表现为直肠外脱垂或耻骨直肠肌痉挛综合征。结果　第 1组 ,平均总CTT是 96.2h ,平均分段CTT是 :右半结肠 3 5 .3h( 3 6.7% )、左半结肠3 0 .8h( 3 2 .0 % )、直肠乙状结肠 3 0 .1h( 3 1.3 % )。第 2组 ,平均总CTT( 5 7.8h)正常 ,而直肠乙状结肠CTT[平均 13 .8h( 2 3 9% ) ]相对减少。第 3组 ,平均总CTT( 175 .1h)和直肠乙状结肠CTT[115 .8h( 66.1% ) ]均明显延长。平均总CTT和直肠乙状结肠CTT在 3组间均相差非常显著 (P <0 .0 1)。结论　通过检测总CTT和直肠乙状结肠CTT有助于明确慢性便秘的病因学类型和进一步认识其潜在的病理生理学发病机制     

慢传输性便秘患者乙状结肠动力的测定

本研究利用结肠测压研究慢传输性便秘(STC)患者乙状结肠压力的变化情况,以了解STC的发病与结肠压力变化的关系,为结肠测压应用于STC诊断提供依据.     

化瘀通便汤对慢传输型便秘型大鼠结肠PI3K/AKT信号传导通路的影响

目的:观察化瘀通便汤对慢传输型便秘模型大鼠肠道动力及PI3K/AKT信号传导通路功能及表达的干预作用,探讨化瘀通便汤发挥通便效应的作用机制。方法:84只SD大鼠随机分为7组,分别是正常对照组两组、造模组5组,每组12只,采用大黄粉混悬液建立慢传输型便秘模型,从造模5组里,每组各取2只,共10只,与正常对照组中的其中一组一并处死,比较大鼠的一般情况、首次黑便时间、肠道传输功能以验证模型。适应性喂养2周后,造模组5组分模型对照组、化瘀通便汤低剂量组、化瘀通便汤中剂量组、化瘀通便汤高剂量组,西药对照组,每组10只,正常对照组和模型对照组用蒸馏水灌胃,化瘀通便汤组分别给予对应的低、中、高剂量的化瘀通便汤灌胃,西药对照组给予枸橼酸莫沙必利灌胃,共2周。所有大鼠处死前均用10%活性炭混悬液灌胃,测定碳墨推进率。采用梯度PCR法检测PI3K、AKT mRNA表达,应用Western Blot法检测慢传输型便秘大鼠结肠PI3K、AKT蛋白表达。结果:造模后大鼠的体质量均增加无统计学意义(P0.05),首次黑便时间延长,肠道传输时间延长(均P0.05)。化瘀通便汤干预慢传输型便秘大鼠,可加快肠道传输,下调PI3K mRNA及蛋白表达水平(均P0.05),且化瘀通便汤中剂量组优于化瘀通便汤低剂量组(P0.05),中剂量组与高剂量组、西药对照组无显著差异(P0.05)。化瘀通便汤干预慢传输型便秘大鼠,下调AKT mRNA及蛋白表达水平(均P0.05),且化瘀通便汤中剂量组优于化瘀通便汤低剂量组(P0.05),中剂量组与高剂量组、西药对照组无显著差异(P0.05)。结论:化瘀通便汤可下调慢传输型便秘大鼠结肠中PI3K、AKT mRNA及蛋白表达水平,提示化瘀通便汤对慢传输型便秘PI3K/AKT信号通路具有一定的调控作用。     

结肠慢传输性便秘的诊断及手术疗效评价

目的 探讨各种有关结肠慢传输性便秘的诊断及治疗方法。方法 回顾性分析我院1987－2001年治疗的结肠慢传输性便秘20例患者的临床资料。结果 7例单纯性结肠慢传输性便秘患者结肠切除术治愈率100％，术后排便每日1－3次，13例合并出口梗阻性便秘的患者治愈率84．6％（11／13），术后排便每日1－3次，无效7．7％（1／13）。结论 对单纯性结肠慢传输性便秘的患者和合并出口梗阻性便秘的结肠慢传输性便秘的患者，结肠切除术是一种理想的手术方式。     

慢传输型便秘大鼠结肠黏膜下调蛋白质组的分离鉴定及其功能分析

目的 研究慢传输型便秘大鼠结肠黏膜下调蛋白质的整体变化特性,并对明确的蛋白质进行功能分析,为探讨慢传输型便秘大鼠结肠黏膜损害的发病机制提供理论依据.方法 利用复方苯乙哌啶建立大鼠慢传输型便秘模型,利用高分辨双向电泳(2-DE) 对STC大鼠结肠黏膜组织进行蛋白质分离, ImageMaster 2D Elite 图像分析软件进行分析,应用生物质谱、蛋白质库及文献分析等技术对差异蛋白质中的下调蛋白质组进行鉴定、功能和临床意义分析.结果 慢传输型便秘在其发生过程中有显著的蛋白质表达差异.主要差异表达的蛋白质有肥大细胞蛋白酶(A1)、非特异性二肽酶(A2)、线粒体脱氢酶前体(A3), A1、A2、A3在便秘大鼠的胶图中表达明显下调.结论 这些下调的蛋白质的表达改变提示慢传输型便秘大鼠结肠组织免疫反应性减弱,线粒体氧化还原功能障碍在慢传输型便秘的发生、发展中可能起重要作用,慢传输型便秘大鼠肠道蛋白质的消化、吸收功能可能存在一定程度的障碍.     

不同类型功能性便秘患者肛门直肠动力和感觉功能的研究

目的:通过对不同类型功能性便秘(FC)患者肛门直肠动力和感觉功能的研究,比较不同类型FC患者病理生理机制上的异同.方法:根据结肠转运时间(CTT)和传输指数(TI)对FC患者进行分型,分为传输时间正常型(NTC)、慢传输型(STC)、出口梗阻型(OOC)和混合型(MC);用肛门直肠测压的方法测定不同类型FC患者的肛门直肠动力及感觉功能,同时选择健康人作对照组.结果:与健康对照组相比,FC患者肛管静息压降低,排便感觉阈值和最大耐受容量均增高(P<0.01);各型FC患者肛管静息压均降低(P<0.01);NTC组和OOC组排便感觉阈值和最大耐受容量增高(P<0.01);STC组引起直肠肛门抑制反射的最低容量(MRV)降低,初始感觉阈值降低、排便感觉阈值增高(P<0.05);各组间肛管静息压、缩榨压、排便感觉阈值比较均未见明显异常.结论:肛门直肠动力和感觉功能异常,是FC患者发病的一个重要的病理生理机制.NTC患者和OOC患者在动力和感觉功能上表现出一定的共性,推断其病理生理机制可能存在一定的联系.STC患者的发病是多因素造成的动力紊乱.     

慢传输性便秘患者结肠黏膜DNA甲基转移酶表达显著增高

目的 研究DNA甲基转移酶(DNA methyltransferase,Dnmt)在慢传输性便秘(slow transit constipation,STC)结肠黏膜中的表达.方法 收集2015年9月至2017年6月我科收治的8例STC患者乙状结肠标本,采用免疫组织化学染色、Western blot检测Dnmt1、Dnmt3a、Dnmt3b蛋白在结肠黏膜的表达情况,real-time qRT-PCR检测结肠黏膜Dnmt1、Dnmt3a、Dnmt3b mRNA相对表达量.对照组标本采用直肠癌患者术中切除的远离癌灶的近端乙状结肠.结果 免疫组织化学染色结果显示:对照组Dnmt1、Dnmt3a、Dnmt3b IOD值分别为(705±362)、(538 ±206)、(359±238),STC组Dnmt1、Dnmt3a、Dnmt3b IOD值分别为(4077±1 219)、(4 214±1 858)、(3 026±1 619),两组比较差异有统计学意义(P＜ 0.05);Western blot检测结果显示:对照组Dnmt1、Dnmt3a、Dnmt3b蛋白相对表达量分别为(0.663±0.349)、(0.250 ±0.159)、(0.330±0.195),STC组Dnmt1、Dnmt3a、Dnmt3b蛋白相对表达量分别为(1.475±0.372)、(1.035±0.362)、(0.977 ±0.258),两组比较差异有统计学意义(P＜0.05);Real-time qRT-PCR结果显示:对照组Dnmt1、Dnmt3a、Dnmt3b mRNA相对表达量分别为(0.285 ±0.121)、(0.069±0.021)、(0.512±0.112),STC组Dnmt1、Dnmt3a、Dnmt3b mRNA相对表达量分别为(0.563±0.172)、(0.340±0.083)、(0.964±0.219),两组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 STC患者结肠黏膜Dnmt1、Dnmt3a、Dnmt3b表达显著增高,可能是STC发病的重要环节.     

枳术方对慢传输型便秘大鼠结肠5-HT4R及下游CaM-MLCK信号通路的影响

目的  通过观察枳术方对慢传输型便秘(STC)大鼠结肠组织中5-羟色胺4受体(5-HT₄R)、钙调蛋白(CaM)、肌球蛋白轻链激酶(MLCK)的影响, 探讨其作用机制。方法  将大鼠随机分为正常组、模型组、枳术方组及阳性药(普芦卡必利)组。采用复方地芬诺酯片建立STC模型, 枳术方组随后灌胃枳术方, 阳性药组灌胃普芦卡必利。检测各组大鼠粪便含水量, 肠道炭末推进率, 结肠组织中5-HT₄R、CaM、MLCK的mRNA及蛋白相对表达水平。结果  与正常组相比, 模型组大鼠粪便含水量和炭末推进率明显降低(P < 0.05,P < 0.01), 结肠组织中5-HT₄R、CaM、MLCK的mRNA和蛋白相对表达水平也明显降低(P < 0.01)。与模型组相比, 枳术方组和阳性药组大鼠粪便含水量和炭末推进率明显升高(P < 0.05), 结肠组织中5-HT₄R、CaM、MLCK的mRNA和蛋白相对表达水平明显升高(P < 0.05,P < 0.01)。枳术方组与阳性药组比较, 各项数据差异无统计学意义(P>0.05)。结论  枳术方能改善STC大鼠的便秘症状, 可能与上调大鼠结肠组织中5-HT₄R表达并激活下游CaM-MLCK信号通路有关。      

"泻剂结肠"大鼠结肠肌电活动及其对乙酰胆碱反应的变化

目的 探讨慢传输型便秘(Slow transit constipation，STC)的发生机制。方法 建立大鼠“泻剂结肠”模型，测定大鼠结肠肌电生理活动及其对乙酰胆碱(Ach)的反应变化。结果 “泻剂结肠”大鼠结肠慢波的频率减慢与振幅降低；结肠对Ach的反应性明显减弱。结论 长期服用接触性泻剂，对结肠ENS有损害作用，在STC的发生机制中具有重要意义。     

大鼠"泻剂结肠"模型的动力学研究

目的：探讨慢传输性便秘（slow transit comstipation,STC）的发生发展机制及与接触性泻剂的关系。方法：以临床上常用的接触性泻剂大黄建立大鼠“泻剂结肠”模性，应用传输试验的肌条收缩反应试验对大鼠结肠动力及对已酰胆碱反应性进行了检测。结果：（1）大鼠饲以大黄3个月后，肠道传输明显减慢。（2）“泻剂结肠”大鼠对已酰胆碱反应性明显降代。结论：（1）长期服用接触性泻剂，可至结肠动力减弱。（2）STC的发病与平滑肌及壁内神经病变有关，大鼠肠道内乙酰胆碱受体的变化可能是其中的一个因素。     

Colectomy for idiopathic slow transit constipation

Objective:To evaluate the intervention of colectomy on a group of patients with idiopathic slow transit constipation(STC).Methods:Thirty-four patients with STC,underwent colectomy during recent 10 years in our department,were subjected and followed for a mean length of 34 months,and their colon transis,defecograms,colonoscopic examination,sex hormone detection,and immunohistochemical studies were retrospectively reviewed.Results:The colonic transit time ranged from 96 to 240h,with a mean time of 136h.Eighty-five percent of patients(29/34) accom panied with outlet obstructed constipation,and 50%(17/34) showed abnormal sex hormone levels.Colectomy obtained satisfactory results in most-patients,except,excpet one case of recurrence.Moreover,more neurons positive to nitric oxide synthase(NOS) and lesser to vasoactive intestinal polypeptide(VIP) were seen in the colonic myenteric plexus.Conclusion:Colectomy produces a satisfactory functional outcome in the majority of patients undergoing surgery for slow transit constipation,but accompanied pelvic dysfunction must be corrected simultaneously.     

Proteomic analysis of down-regulated proteins in colonic mucosa of chronic slow transit constipation rats

Objective： To investigate the alternations of proteins in the colonic mucosa of chronic slow transit constipation （STC） rats with a 2-DE-based proteomic method and analyze the function of these down-regulated proteins so as to provide theoretical basis for the pathogenesis of intestinal mucosa of chronic STC rats. Methods： STC model was established by feeding rats with 8 mg/（kg＇d） diphenoxylate for 120 d. An experimental model of chronic STC rat was used for separation of proteomics from colonic mucosa using two-dimensional electrophoresis （2-DE）. Proteins altered in expressional level were identified by Image Master 2DElite, mass spectrometry, and bibliometrics were applied to identify the differential protein expression and their clinical s observed in the pathogenesis lgn of ificance and function were analyzed. Results： Obvious differential protein expression was STC, including mast cell protease （A1）, non-specific dipeptidase （A2） and chondrosome succinate dehydrogenase precursor （A3）. The expressions of A1, A2 and A3 were down-regulated in the gel graph of STC rats Conclusion： The down-regulation of chondrosome succinate dehydrogenase, mast cell protease as well as non-specific dipeptidase in rat colon suggests the functional impairment of the oxidoreduction of mitochondrion is very important in the genesis and development of STC. The immunological reaction of STC rats is weakened, and the function of digesting and absorbing protein may be damaged to some extent.     

益气开秘方对结肠慢输型便秘大鼠肠动力和肠神经肽的影响

目的:探讨益气开秘方对结肠慢输型便秘大鼠肠道动力和肠神经肽的影响。方法:共纳入80只无特定病原体级大鼠,将60只造成结肠慢输型便秘模型,并随机分为模型组、西沙比利组和益气开秘方组(简称中药组),其余20只设为正常对照组。以碳末推进百分率、离体肠肌条收缩频率及振幅、一氧化氮合酶1(nitricoxide synthase-1,NOS1)和P物质为观察指标。结果:模型组的碳末推进百分率较正常对照组明显降低(P<0.05),中药组和西沙比利组均明显高于模型组(P<0.05)。模型组与正常对照组相比,其各肠段肠肌条收缩的频率和振幅明显降低,中药组和西沙比利组与模型组比较均有提高(P<0.05)。模型组结肠肠壁组织NOS1阳性细胞面积百分比明显高于正常对照组、西沙必利组和中药组,中药组与正常对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。模型组P物质阳性细胞面积百分比较正常对照组明显下降,中药组与正常对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:益气开秘方可通过提高大鼠肠道平滑肌收缩的频率和振幅来促进肠道动力。其作用途径与调控肠神经丛NOS1和P物质阳性表达有关。