双靶向5-氟尿嘧啶纳米粒对小鼠原位肝癌模型的抑制作用

目的观察双靶向5-氟尿嘧啶(5-FU)纳米粒的体内靶向性,其对小鼠原位肝癌模型的抑制作用及其可能的机制。方法半乳糖(LA)和甘草次酸(GA)这两个配体与壳聚糖(CTS)成功合成乳糖酸化甘草次酸壳聚糖(GCGA),并将GCGA和5-FU合成GCGA/5-FU纳米粒。建立小鼠原位肝癌移植模型,将实验模型分对照组(Control组),GCGA组,5-FU组,CTS/5-FU组,GA-CTS/5-FU组和GCGA/5-FU组,除Control组采用生理盐水静脉注射外,其余各组均采用对应药物尾静脉注射,剂量均为200μl。观察GCGA/5-FU纳米粒体内靶向作用及其对小鼠原位肝癌模型的抑制作用。结果 GCGA/5-FU纳米粒的粒径为239.9 nm,多分散指数为0.040,Zeta电势为+21.2 m V,载药量为3.90%。肝脏组织中的5-FU浓度浓度由高到底依次为GCGA/5-FU组,GA-CTS/5-FU组,CTS/5-FU组和5-FU组;GCGA/5-FU纳米粒在体内分布表明,肝脏的5-FU浓度最高,具有明显的肝脏靶向性。GCGA/5-FU纳米粒具有明显抑制小鼠原位肝癌抑制模型的作用,延长小鼠的生存期,并且发现GCGA纳米粒具有缓解5-FU的毒副作用,GCGA纳米粒具有促进5-FU抑制肿瘤生长作用,与缓解5-FU对机体免疫抑制有关,主要通过缓解机体的Treg细胞的比率升高,缓解CTL和NK细胞的比率降低和促进活化,同时缓解机体的IL-2和IFN-γ水平的下降有关。结论GCGA/5-FU纳米粒具有明显的肝脏靶向性,对小鼠原位肝癌模型具有明显的抑制作用,具有提高机体的细胞免疫功能的作用。     

黄芪注射液对荷结肠癌小鼠免疫功能低下的正向调节作用研究

目的探讨黄芪注射液对荷结肠癌小鼠5-氟尿嘧啶化疗后免疫功能的调节作用。方法建立人结肠癌裸鼠原位种植转移模型40只,采用5-氟尿嘧啶化疗,将其随机分为两组,每组20只。分为黄芪注射液组、0.9%氯化钠溶液组,分别腹腔注射黄芪注射液及0.9%氯化钠溶液。测量瘤体体积并称重,测量各组的T淋巴细胞亚群数量、CD4/CD8比例、NK细胞杀伤活性、CTL的杀伤活性和第35天时各组裸鼠的死亡数目。结果黄芪注射液组的平均移植瘤瘤体积(936±158 mm3)小于0.9%氯化钠溶液组(1 493±364 mm3);黄芪注射液组的CD3、CD4的百分率(90.34%±4.62%)明显大于0.9%氯化钠溶液组(55.19%±7.18%);黄芪注射液组的CD4/CD8比例(3.56±0.61)大于0.9%氯化钠溶液组(2.38±0.46);黄芪注射液组的NK杀伤功能检测(34.92±3.62)和CTL杀伤功能检测(36.92±5.69)大于0.9%氯化钠溶液组(21.92±4.68,25.61±4.91);黄芪注射液组的病死率(10.0%)小于0.9%氯化钠溶液组(40.0%)。以上数据的差异具有统计学意义(P<0.05)。结论黄芪注射液对荷结肠癌5-氟尿嘧啶化疗后小鼠免疫功能低下具有正向调节作用。     

NK 细胞上清液提高CTL 细胞对肝癌细胞杀伤力的研究

目的：研究用白细胞介素2（IL‐2）联合IL‐12、IL‐18以及三者共同活化NK细胞所提取的上清液与肝癌细胞共培养是否能提高AFP特异性的细胞毒性T细胞（CTL）对小鼠肝癌细胞的杀伤性。方法提取NK 细胞,分别用IL‐26000 IU／mL、IL‐26000 IU／mL＋ IL‐1210 ng／mL、IL‐26000 IU／mL＋IL‐l8100 ng／mL、IL‐26000 IU／mL＋IL‐1210 ng／mL＋IL‐18100 ng／mL活化NK细胞,3 d后提取上清液,ELISA检测上清液IFNγ表达量,然后将上清液与Hepa1‐6细胞培养过夜,流式细胞仪检测肿瘤细胞表面I类组织相容性抗原（M HC I）表达,以其为靶细胞检测AFP特异性的CTL细胞对 Hepa1‐6细胞杀伤率。结果NK＋IL‐2＋IL‐12、NK＋IL‐2＋IL‐18、NK＋IL‐2＋IL‐12＋IL‐18上清液的IFNγ含量高于NK＋IL‐2上清液的IFNγ含量（P＜0．05）,并且上述三组能有效提高小鼠 Hepa1‐6细胞表面M HC I的表达（P＜0．05）,从而显著提高了AFP特异性的CTL细胞对靶细胞的杀伤活性,然而阻断IFNγ分泌,AFP特异性的CTL细胞对靶细胞的杀伤活性降低。结论 NK 细胞上清液能够增强AFP特异性的CTL对肝癌细胞的杀伤作用。     

NK细胞对妊娠期糖尿病高脂血症的影响

目的 探讨自然杀伤细胞(NK)对妊娠期糖尿病高脂血症患者的影响.方法 选择2012年1月至2013年12月确诊的妊娠期糖尿病高脂血症患者108例作为观察组,同期健康孕妇108例作为对照组.采用流式细胞术检测NK细胞,ELISA检测γ干扰素(IFN-γ),全自动生化检测仪检测血糖、血脂各项指标.分析和比较两组孕妇的NK细胞活性及血糖、血脂情况.结果 与对照组比较,观察组的NK细胞数量、CD4 +/CD3+、CD4 +/CD8+和CD56++CD4 +/CD3+水平均降低(P均＜0.01);CD8 +/CD3+、CD19 +/CD3+、CD18 +/CD8+水平均升高(P均＜0.01);CD28 +/CD8+水平与对照组无统计学差异(P＞0.05).与对照组比较,观察组孕妇IL-2水平降低(P＜0.01),IL-6水平升高(P＜0.01),IFN-γ水平降低(P＜0.01).观察组空腹血糖、餐后2h血糖、糖化血红蛋白、体质指数以及甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)等水平均较对照组升高(P均＜0.01),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平较对照组降低(P＜0.01).NK细胞数量与TG(r=-0.603)、TC(r=-0.541)、LDL-C(r=-0.498)均呈负相关(P均＜0.05),与HDL-C水平(r=0.537)呈正相关(P＜0.05).结论 妊娠期糖尿病孕妇的NK细胞数量减少、活性降低,可能通过改变不同表型细胞的含量参与免疫反应,引发其调节血脂能力降低,影响妊娠糖尿病高脂血症的发生.     

高强度聚焦超声制备抗原致敏树突状细胞及其诱导细胞毒性T淋巴细胞杀伤效应的研究

目的 探讨高强度聚焦超声(HIFU)制备抗原致敏树突状细胞(DC)及其诱导细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的杀伤效应.方法 应用小鼠重组GM-CSF和IL-4培养小鼠骨髓DC,用HIFU制备CT26肿瘤细胞抗原致敏DC疫苗,用3H-TdR法检测T细胞增殖反应的能力,标准的4 h 51Cr 释放测定法检测CTL杀伤活性.结果 HIFU组、肿瘤细胞冻融组、肿瘤上清组和PBS组的DC在体外均可以诱导CTL增殖,但HIFU组、肿瘤细胞冻融组的DC体外诱导CTL增殖能力明显高于肿瘤上清组和PBS组(P＜0.05).HIFU组和肿瘤细胞冻融组DC体外诱导的CTL对CT26结肠癌均有明显的细胞毒性作用,与肿瘤上清组DC和PBS组比较差异有统计学意义(P＜0.05),HIFU组体外诱导的CTL杀伤活性与肿瘤细胞冻融组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 HIFU制备抗原致敏DC可以诱导CTL大量增殖,并能诱导出杀伤效应较强的CTL.     

小鼠肝素酶H-2Kb限制性CTL表位的实验鉴定

目的实验鉴定H-2Kb限制性小鼠肝素酶(mHpa)CTL表位。方法5条mHpa表位分别负载C57BL/6小鼠骨髓来源树突状细胞,并进一步诱导产生表位特异性的效应细胞,采用标准4 h51Cr释放试验检测效应细胞对不同靶细胞的免疫杀伤效应;采用ELISPOT检测效应细胞分泌IFN-γ的能力。结果5条mHpa CTL表位中,仅mHpa398-405和mHpa519-526可以诱导小鼠产生特异性CTL,对同来源的B16黑色素瘤细胞、Lewis肺癌细胞和EL-4淋巴瘤细胞具有明显的免疫杀伤效应,而对H-2Kb阴性的P815肥大细胞瘤细胞不具有免疫杀伤效应,进一步研究发现,上述多肽特异性CTL对自体淋巴细胞和DC细胞不具有杀伤效应,另一方面,mHpa398-405和mHpa519-526还可促进效应细胞分泌IFN-γ的能力。结论mH-pa398-405、mHpa519-526为小鼠肝素酶来源且受H-2Kb限制性CTL表位,小鼠体内可以诱导产生表位特异性的CTL反应。     

肾移植患者外周血人巨细胞病毒特异性CD8+T淋巴细胞频率及其γ干扰素分泌功能的初步研究

目的 研究肾移植患者外周血人巨细胞病毒(HCMV)特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)的频率及其γ干扰素(IFN-γ)分泌功能,以期探讨HCMV活化感染的免疫学机制.方法 选取HCMV血清学阳性的HLA-A*0201肾移植患者和健康对照者,将其分为3组:存在HCMV活化感染的肾移植组(9例)、无HCMV活化感染的肾移植组(29例)和健康对照组(54名);运用HLA-A2-NLVPMVATV-五聚体检测外周血中总的HCMV NLVPMVATV特异性CTL,同时以NLVPMVATV体外刺激PBMC,检测IFN-γ分泌性CTL.结果 在健康对照组、元HCMV活化感染的肾移植组和存在HCMV活化感染组中,HCMV特异性CTL频率中位数分别为1.19%(0～19.42%)、1.20%(0～18.40%)和3.2%(0.51%～18.90%),差异无统计学意义(H=5.34,P＞0.05);IFN-γ分泌细胞频率中位数分别为0.72%(0～0.70%),0.47%(0～5.61%)和0.67%(0.07%～4.00%),差异无统计学意义(H=0.58,P＞0.05),但HCMV特异性CTL中IFN-γ分泌细胞的比例分别为(60.18±19.16)%,(39.19±17.22)%和(20.02±13.26)%,组间比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 肾移植组外周血中HCMV NLVPMVATV特异性CTL频率较健康对照组并无降低,但其分泌IFN-γ的比例降低,出现HCMV活化感染组IFN-γ分泌CTL比例降低更为明显.HCMV特异性CTL的IFN-γ分泌功能受损可能是造成肾移植患者HCMV活化感染的因素之一.     

季德胜蛇药对小鼠细胞免疫功能的影响

目的：研究季德胜蛇药对小鼠细胞免疫功能的调节作用。方法：48只BALB-c小鼠随机分为4组,每组各12只,分别为对照组、环磷酰胺模型组、治疗1组、治疗2组。除对照组外各组小鼠均予以环磷酰胺30mg/kg皮下注射,连续7d制备免疫功能低下模型,第8天开始各组均灌胃给药,2次/d,连续14d,治疗组分别给予相应剂量的季德胜蛇药治疗,正常对照组和环磷酰胺模型组给予同体积的0.9%氯化钠液。用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测自然杀伤细胞（NK）的活性;用酶联免疫吸附分析（ELISA）法检测细胞因子白细胞介素2（IL-2）、白细胞介素4（IL-4）和γ干扰素（IFN-γ）的浓度。结果：季德胜蛇药治疗组小鼠的NK细胞杀伤活性较模型组显著增高。与模型组比较,治疗组小鼠血清IL-2、IFN-γ水平显著升高（P〈0.05）。结论：季德胜蛇药可提高免疫抑制小鼠的细胞免疫功能。     

弓形虫SAG1、GRA2单基因疫苗及SAG1-GRA2复合基因疫苗的免疫效果观察

目的 检测SAG1和GRA2基因编码的单基因及复合基因疫苗诱导小鼠的免疫应答,评价其抗弓形虫感染的保护性免疫效果.方法 大量制备pcDNA3.1-SAG1、pcDNA3.1-GRA2、pcDNA3.1-SAG1-GRA2真核表达重组质粒,肌内注射BALB/c小鼠,分别于2周、4周后加强免疫一次.另设立pcDNA3.1及PBS对照组.于3次免疫后4周作免疫指标测定(包括ELISA法测定小鼠血清IgG抗体及细胞因子IFN-γ、IL-4,MTT法测定小鼠淋巴细胞增殖能力及NK细胞杀伤活性),并观察弓形虫速殖子攻击感染后小鼠的生存时间.结果 SAG1-GRA2组小鼠血清IgG抗体、IFN-γ、淋巴细胞增殖能力及NK细胞杀伤活性均高于SAG1及GRA2组(P＜0.05);各组均未检测到IL-4;复合基因组小鼠生存时间较单基因疫苗组延长(P＜0.01).结论 弓形虫SAG1-GRA2复合基因疫苗较SAG1、GRA2单基因疫苗具有更好的免疫保护性.     

rhG-CSF动员的健康供者外周血采集物和骨髓采集物中NK细胞亚群的对比研究

目的 研究人重组粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)动员的健康供者外周血采集物(G-PB)和骨髓采集物(G-BM)中NK细胞亚群的异同.方法 2009年7月至9月在北京大学血液病研究所接受异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)的28名亲缘供者,采用流式细胞术测定两种移植物中淋巴细胞、NK细胞及NK细胞中IFN-γ(NK1)、IL-13(NK2)、TGF-β和IL-10(NKr)四种细胞因子的分泌情况.结果 G-PB中淋巴细胞占有核细胞百分比显著高于G-BM(P＜0.01).G-BM中NK细胞、NK1、NK2、NKr占淋巴细胞百分比明显高于G-PB(P＜0.05),NK2、NKr占NK细胞的比例亦明显高于G-PB(P＜0.01),但NK1占NK细胞的比例在二者之间差异并无明显统计学意义.G-BM中IL-13与IFN-γ比值、TGF-β与IFN-γ比值、IL-10与IFN-γ比值亦明显高于G-PB(P值分别为0.010、0.002、0.000).结论 尽管G-BM与G-PB中NK1的比例相近,但G-BM中NK2及NKr的比例上调进一步解释了G-BM较G-PB具有更低的免疫反应性.

Abstract：

Objective To analyze the difference in NK cell subsets between recombination human granulocyte colony -stimulating factor (rhG-CSF) mobilized peripheral blood grafts (G-PB) and bone marrow grafts(G-BM) from healthy donors. Methods From July 2009 to September 2009, G-PB and G-BM from 28 related donors were collected to analyze lymphocytes, NK cells and NK cell secretion of interferon-γ(IFN-γ,NK1 ), interleukin-13 (IL-13, NK2 ), transforming growth factor-β (TGF-β) and interleukin-10 ( IL-l0,NKr) by flow cytometry. Results The percentage of lymphocytes in G-PB was significantly higher than that in G-BM(P＜0.01). The proportions of NK cells and NK1, NK2, NKr subsets among lymphocytes were significantly higher in G-BM than in G-PB(P＜0.05 ), and so were the percentage of NK2, NKr cells among NK cells (P＜0.01 ), but no significant difference in the percentage of NK1 cells among NK cells between G-PB and G-BM. The ratios of IL-13 and IFN-γ, of TGF-β and IFN-γ, or of IL-l0 and IFN-γ in G-BM were significantly higher than those in GPB ( P = 0. 010, 0. 002, or 0. 000, respectively). Conclusion The increased proportion of NK2 and NKr in G-BM might be helpful to explain the lower immunoreactivity of G-BM than that of G-PB, although the proportion of NK1 in G-BM and G-PB is similar.     

乙型肝炎肝纤维化患者血清转化生长因子1、白细胞介素10及干扰素y的表达及临床意义

目的探讨血清转化生长因子B1（TGF-B1）、白细胞介素10（IL-10）及干扰素1（INF．1）在肝纤维化患者中的变化及其与肝纤维化的相关性。方法选取2007—2013年在我院就诊的133例乙型肝炎肝纤维化患者为研究对象（观察组）,分别对肝组织进行分期诊断,以酶联免疫吸附法对患者血清中的TGF-B1、IL-10及IFN-y的浓度进行测定,并选取21名健康体检者作为健康对照组。结果观察组血清TGF—b1及IL-10的浓度比健康对照组明显增高[血清TGF-131：（217．4±7．5）、（57．2±4．8）ng/L,f=15．61、P〈0．01;IL-10：（29．6±3．2）、（15．1士7．5）ng／L,t=11．44、P〈0．01],而IFN-1的浓度则比健康对照组低[（51．9-I-3．5）、（75．8±5．9）ng／L,P=0．03]。血清TGF-B1、IL-10及IFN-1与肝纤维化分期之间存在一定的相关性,相关系数分别为0．786、0．644、-0．822,P均〈0．05。结论肝纤维化患者血清中的TGF-131、IL-10及INF-1的浓度对判别肝纤维化患者的发展趋势及预后具有较大的应用价值。     

ITP患者血清IL-2、4、6、10及TNF-α、IFN-γ测定的临床意义分析

目的观察特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者治疗前、后血清白细胞介素(IL)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与γ-干扰素(IFN-γ)水平的变化。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定53例ITP患者治疗前、后及50名正常对照者血清IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α、IFN-γ水平,并对检测结果进行分析。结果 53例ITP患者治疗前血清IL-2 IL-6、TNF-α及IFN-γ水平明显高于治疗后及正常对照组(P<0.05、P<0.01);血清IL-4、IL-10水平明显低于治疗后及正常对照组(P<0.01)。ITP患者治疗后除IL-6外,其余各项指标均恢复至正常对照组的水平(P>0.05)。结论 ITP作为一种自身免疫性疾病,存在多种细胞因子的异常,有效治疗后则多数细胞因子恢复至正常。因此,临床上对ITP患者应定期观察其血液中IL、TNF-α和IFN-γ水平变化,以判断其病情变化、治疗效果及其预后。     

^18F-FDG、^18F-FLT细胞结合评价肺腺癌5-Fu化疗早期反应的细胞学研究

目的：通过测定^18F-氟代葡萄糖（FDG）和^18F-氟代胸苷（FLT）细胞结合率的变化来评估不同浓度氟尿嘧啶（5-Fu）对肺腺癌A-549细胞化疗早期反应的疗效并对两种显像剂进行初步比较。方法不同浓度（0.125、0.25、0.5、1.0 mg/mL）5-Fu 1.0 mL分别与肺腺癌A-549细胞共同孵育24 h、48 h,测定细胞对^18F-FDG和^18F-FLT的细胞结合变化并与MTT法测定的存活细胞数目和细胞抑制率比较。结果（1）5-Fu作用24 h和48 h后,^18F-FDG和^18F-FLT细胞结合率均随药物浓度的增加而下降,两者与药物浓度均呈负相关（24 h：^18F-FLT r=-0.950,P＜0.01,^18F-FDG r=-0.844,P＜0.01;48 h：^18F-FLT r=-0.939,P＜0.01,^18F-FDG r=-0.786,P＜0.01）;48 h与24 h相比,两种显像剂细胞摄取率均降低;（2）24 h和48 h MTT细胞抑制率与^18F-FDG和^18F-FLT细胞结合抑制率均呈正相关（24 h：^18F-FLT r=0.897,P＜0.01,^18F-FDG r=0.978,P＜0.05;48 h：^18F-FLT r=0.876,P＜0.01,^18F-FDG r=0.910,P＜0.01）;（3）^18F-FDG细胞结合抑制率与^18F-FLT细胞结合抑制率呈正相关（24h：r=0.657,P＜0.01;48 h：r=0.432,P＜0.05）。结论（1）^18F-FDG和^18F-FLT摄取变化可以早期评价5-Fu对肺腺癌A-549细胞的化疗疗效;随着5-Fu化疗时间的延长,肺腺癌A-549细胞摄取率下降更明显;（2）^18F-FDG和^18F-FLT相比,^18F-FDG细胞结合抑制率与^18F-FLT细胞结合抑制率呈正相关,且24 h较48 h相关性高;^18F-FLT早期摄取率与药物浓度的关系更密切,下降趋势更加明显,与MTT的关系更显著。因此,^18F-FLT联合^18F-FDG用于评价化疗疗效和指导用药将成为一种新的思路。     

白介素21对树突状细胞诱导的CTL抗白血病作用的影响

本研究探讨白介素21（IL-21）对树突状细胞（DC）诱导的CTL抗白血病的体外作用。以不同细胞因子诱导培养急性白血病（AL）患者缓解期外周血单个核细胞产生DC，自体AL细胞RNA作为抗原负载DC，与自体T淋巴细胞共培养诱导白血病特异性CTL产生；用LDH释放法检测CTL杀伤自体AL细胞的作用，并检测CTL产生IFN-γ和TNF-α的变化。实验共分2组：实验组，在DC—CTL共培养过程中加用IL-21（200ng／ml）；对照组，不加IL-21。同时对IL-21单独作用培养后成熟DC，检测其表面抗原表达变化以及诱导同种混合淋巴细胞反应能力。结果表明：对照组和实验组的CTL产生率分别为：（56．73±10．21）％，（73．43±18．01）％（P〈0．01）；培养上清中IFN-γ和TNF-α分别为：（154．91±67．20）ng／L，（310．62±141．15）ng／L（p〈0．01）和（8．77±5．09）μg/L，（15．25±6．56）μg／L（p〈0．01）。在效靶比为20：1时，两组对自体AL细胞的杀伤作用分别为（50．22±5．07）％，（75．38±9．47）％（P〈0．01）；IL-21作用后的成熟DC的CD1a、CD83、CD86、CD80和HLA—DR表达没有明显变化；诱导同种混合淋巴细胞反应能力亦没有明显不同。结论：IL-21可促进DC诱导的CTL增殖、增加IFN--γ和TNF—α产生从而增强其抗白血病作用；IL-21对成熟DC表面抗原表达及其免疫功能无明显影响；提示IL-21在白血病免疫治疗中发挥一定的作用，具有潜在的临床应用价值。     

消痰散结方干预对胃癌组织核转录因子NF-κB P~(65)蛋白表达影响的研究

目的通过建立裸鼠人胃癌MKN-45原位移植瘤模型,观察消痰散结方对胃癌组织核转录因子NF-κB P65蛋白表达的影响,探讨消痰散结方抑制胃癌细胞增殖的作用机制。方法采用OB胶粘贴法建立裸鼠人胃癌MKN-45原位移植模型,随机分成模型组,消痰散结低、中、高剂量组,5-Fu组,每组8只,观察消痰散结方干预对胃癌组织NF-κB P65蛋白表达的影响。结果①消痰散结方低、中、高剂量组抑瘤率分别为36.62%、44.82%、58.11%,呈现出剂量依赖效应,且消痰散结方高剂量组抑瘤率高于5-Fu组(51.82%),差异无统计学意义;②消痰散结方低剂量组NF-κB P65蛋白的阳性表达与模型组相比无统计学差异(P>0.05),消痰散结方中、高剂量组、5-Fu组NF-κB P65蛋白的阳性表达与模型组相比P<0.05,有统计学意义,但组间相比无统计学意义。结论消痰散结方对裸鼠人胃癌原位移植瘤有较好的抑制肿瘤生长作用,揭示其发挥作用的关键与抑制NF-κB P65蛋白的表达有关,从而阻断胃癌发展,控制肿瘤复发与转移。     

高渗盐水复苏缺血小肠对小肠免疫屏障和系统炎性反应综合征的影响

目的 本研究拟证实利用高渗盐水进行液体复苏可保护缺血-再灌注过程中的肠道黏膜屏障功能,并减轻该过程中机体系统性炎症反应综合征（SIRS）,从而为临床大出血、严重感染、大面积烧伤后肠功能障碍患者液体复苏方案的选择提供新的策略方法和理论依据.方法 ①选用清洁级雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠,体重250 g-300 g,通过肠系膜上动脉夹闭法建立大鼠小肠缺血-再灌注损伤模型.②选用清洁级雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠,随机分为假手术组（Sham组）,缺血-再灌注损伤组（IR组）和高渗盐水复苏组（HS组）.IR组夹闭肠系膜上动脉1h后开放并经尾静脉输入0.9％氯化钠溶液;HS组夹闭肠系膜上动脉1h后开放并经尾静脉输入7.5％氯化钠溶液;Sham组操作方法同IR组,但不进行肠系膜上动脉夹闭.再灌注6h后取标本.③免疫组化检测小肠粘膜内淋巴细胞（intra-epithelial lymphocyte,IEL）和固有层淋巴细胞（lamina propria lymphocytes,LPL）中T细胞亚群改变;流式细胞术检测大鼠外周血T细胞亚群及NK细胞.结果 ①肠黏膜上皮细胞层中的上皮内淋巴细胞（IEL）和位于疏松结缔组织中的固有层淋巴细胞（LPL）中CD4＋T细胞数量和CD8＋细胞数量,IR组和HS组显著高于Sham组,HS组显著高于IR组.②外周血T细胞亚群及NK分析：HS组CD3＋ CD8＋T细胞显著低于IR组和Sham组（P＜0.05）,HS组NK细胞比例显著低于IR组和NS组（P＜0.05）,余未见显著性差异.结论 利用高渗盐水复苏缺血小肠,可有效保护小肠免疫屏障,抑制全身炎性反应综合征.     

不同剂量致敏原对小鼠过敏性哮喘模型特异性抗体和炎性细胞因子的影响

目的 观察不同剂量致敏原对小鼠过敏性哮喘模型血清特异性抗体IgE、IgG2a和白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-5（IL-5）、白细胞介素-12（IL-12）、γ-干扰素（IFN-γ）等炎性细胞因子的影响.方法 45只雌性BALB小鼠随机分为4组,空白对照组腹腔注射不含鸡卵蛋白（OVA）的PBS缓冲液,低、中、高剂量组分别注射含10、100、1 000 μg OVA的PBS缓冲液,第15 ～20天以雾化吸入OVA生理盐水激发致敏,制备过敏性哮喘模型.结果 各给药组均出现不同程度炎细胞浸润,低剂量组最为显著;低、中、高剂量组血清IgE、IL-4、IL-5水平呈递减趋势,组间差异显著（P＜0.01）,且均显著高于对照组（P＜0.01）;各实验组血清IgG2a、IL-12及IFN-γ水平呈递增趋势,组间差异显著（P＜0.01）,且与对照组差异显著（P＜0.05或P＜0.01）.结论 不同剂量的OVA可能影响小鼠过敏性哮喘模型所产生的细胞因子类型,低剂量OVA造模的效果最为显著,高剂量OVA可能导致小鼠发生免疫耐受.     

纳米粒子介导Egr-1 DNA酶转染抑制移植静脉内膜增生

背景：应用基因防治移植血管狭窄、闭塞现已被普遍公认,但如何增加其转染效率现已成为焦点及热点问题。目的：观察以纳米粒子为载体的外源性Egr-1 DNA酶局部转染对移植静脉内膜增生的影响。方法：构建Egr-1DNA酶,应用聚乳酸聚乙醇酸共聚物和聚乙烯醇包载Egr-1 DNA酶,制备纳米级粒子混合物。建立自体静脉移植模型210只,随机分成3组,转基因组转染以纳米粒子为载体的Egr-1 DNA酶,空载体组单纯转染纳米粒子包载的空载体,对照组不予特殊处理。结果与结论：转基因组内膜中Egr-1基因的mRNA及蛋白产物表达较其他两组明显减少（P〈0.05）;在术后7,14,28d,转基因组内膜增生厚度较其他两组明显减少（P〈0.01）;转基因组血管平滑肌细胞凋亡百分比较其他两组明显增高（P〈0.05）。结果表明Egr-1DNA酶的表达能有效抑制自体移植静脉内膜的增生及促进血管平滑肌细胞凋亡。     

白细胞介素4、白细胞介素8、白细胞介素10在哮喘和慢性阻塞性肺疾病发病中的作用

目的:探讨外周血白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素8(IL-8)、白细胞介素10(IL-10)在哮喘和慢性阻塞性肺疾病(COPD)发病中的作用。方法:采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测急性发作期和缓解期哮喘患者各50例(哮喘组)、急性加期和缓解期COPD患者各50例(COPD组)及健康志愿者50例(健康对照组)血清中IL-4、IL-8、IL-10的水平。结果:哮喘组急性发作期IL-4、IL-8水平均显著高于缓解期(P<0.01),且2期均显著高于正常对照组(P<0.01);哮喘组急性发作期IL-10水平显著低于缓解期(P<0.01),且2期均显著低于健康对照组(P<0.01)。COPD组急性加重期IL-4、IL-8水平均显著高于缓解期(P<0.01),且2期均显著高于健康对照组(P<0.01)。哮喘组急性发作期IL-10水平显著低于缓解期(P<0.01),且2期均显著低于健康对照组(P<0.01)。哮喘急性加重期IL-4水平显著高于COPD急性加重期(P<0.01);COPD急性加重期IL-8水平高于哮喘急性发作期(P<0.01);哮喘急性发作期IL-10水平显著低于COPD急性发作期(P<0.01)。结论:IL-4、IL-8、IL-10均参与了哮喘和COPD的气道炎性反应,IL-4、IL-8是促炎因子,而IL-10是抑炎因子。IL-4在哮喘的气道炎症形成中起重要的作用。而IL-8、IL-10为COPD的主要炎症因子。