改良血清粘蛋白测定

原理：以0.6mol／L过氯酸沉淀血清中蛋白质，而粘蛋白溶解在滤波中，加铜离子得以加强显色效果，然后以当量酸试剂测定其中粘蛋白含量．1）1．8mol／L过氯酸：取含量为70－72％过氨酸28ml，加蒸馏水稀释至200ml并标定之．2）硫酸铜储存液：CuSo45H2O2．5g酒石酸钾销5．0g，用0．2N氢氧化钠补足量500ml3）硫酸铜应用液：碳酸钠50g加N氢氧化钠90ml，加蒸馏水800ml，加上述储存液40ml加蒸馏水至1000ml（有沉淀不能用应弃掉）4）当量酚试剂：取浓酚试剂（自制或上海购来均可，其含量为2．4N，取5ml＋H2O7ml即可．标定：取盼试剂5ml＋H2O20…     

DIFA检测非放射性斑点印迹技术的探讨

为提高分子生物学的实验效率和节省昂贵的试剂，将核酸分子或蛋白质分子预先结合于硝酸纤维素膜（ＮＣＭ）上，应用自制的ＤＩＦＡ装置检测非放射性斑点印迹。结果表明：此技术可快速检测生物活性试剂的效价及工作浓度；选择研究样本及试验条件；鉴定探针灵敏度等。     

DIFA检测非放射性斑点印迹技术的探讨

为提高分子生物学的实验效率和节省昂贵的试剂，将核酸分子或蛋白质分子预先结合于硝酸纤维素膜（ＮＣＭ）上，应用自制的ＤＩＦＡ装置检测非放射性斑点印迹。结果表明：此技术可快速检测生物活性试剂的效价及工作浓度；选择研究样本及试验条件；鉴定探针灵敏度。     

夹心斑点杂交放大技术的建立和初步应用

夹心斑点杂交放大技术的建立和初步应用①周元平②姚集鲁彭文伟黄仰苏（中山医科大学传染病学教研室；广州，５１０６３０）主题词肝炎病毒，乙型／分离和提纯；克隆，分子／方法中图号Ｒ５１２．６３采用分子生物学方法，在核酸分子杂交中构建了重组单链一级探针和二级标...     

灯盏花素对离体大鼠胸主动脉环的作用

采用雄性大鼠胸主动脉环，研究灯盏花素舒张血管的机制。结果表明，灯盏花素（1×10－6mol／L～1×10－3mol／L）对去甲肾上腺素（1×10－6mol／L）的收缩反应呈剂量依赖性的松弛作用，与内皮无关，也不受普萘洛尔（1×10－6mol／L）所影响。灯盏花素能拮抗去甲肾上腺素诱发的依外钙与依内钙的双相反应，而且对后者的抑制作用较强。揭示灯盏花素诱发血管舒张可能与受体操纵性钙通道和细胞内Ca2 释放的抑制有关。灯盏花素作用后不同时间未引起肌条cAMP、cGMP含量的规律性改变。在高钾所致的主动脉环收缩反应中，灯盏花素在正常的Kred's液中表现出兴奋作用，不受酚妥拉明（1×10－5mol／L）影响。     

超敏心肌肌钙蛋白Ⅰ试剂性能评价

目的：评价拜耳新一代超敏肌钙蛋白Ⅰ（TnI-Ultra）试剂性能指标，探讨其临床应用可行性。方法：利用ADVIACentaur全自动化学发光仪对TnI-Ultra试剂进行一系列方法学评价实验，同时与原用肌钙蛋白I试剂（cTnI）作比较。结果：TnI-UItra试剂的重复性和稳定性优于cTnI试剂，尤其在低值，其精密度可达5、1％；TnI-Ultra在回收试验中低、中、高浓度平均回收率为95．9％；比对实验中与其它系统及试剂相关性良好；当样品中血红蛋白达5000mg／l，胆红素达1000μmol／L时均不干扰TnI-Ultra试剂的检测结果（影响度均〈5％），三酰甘油达5mmol／L时对TnI-Ultra测定结果有一定影响，但影响度明显小于cTnI；对系列稀释的标本TnI-Ultra比cTnI有更优的灵敏度。结论：TnI-Ultra试剂各方面性能指标优异。较原用cTnI试剂更适于临床应用，建议推广使用。     

简易的原位杂交技术

简易的原位杂交技术高凌云黄培生关键词原位核酸分子杂交；探针福建医科大学病理解剖学教研室（福州３５０００４）近年来，一种迅速发展起来的分子生物学新技术——原位核酸分子杂交已广泛应用于临床诊断和科研。原位杂交技术要求严格，操作程序繁杂，需较长时间。１年来...     

单侧延长臂分子信标探针芯片在结核杆菌检测中的运用研究

目的分子信标探针在芯片表面的固定结合是限制其在芯片技术领域运用的难题。本研究拟寻找一种将分子信标探针固定在芯片表面的新方法,同时对其中重要影响因素进行优化探讨。方法本实验设计一种带单侧延长臂分子信标探针,固定在芯片表面进行杂交、扫描等后续实验。提高杂交效率部分优化包括：分子信标探针浓度;杂交温度、杂交时间;杂交液配方;4种分子对分子信标荧光信号比较。结果较理想区分阴阳性信号强度理想的探针浓度：Cy3-BDH分子信标探针浓度约10μmol/L,FAM-DABCLYE约15μmol/L。讨论单侧延长臂分子信标特异性高、敏感性高、技术难度低,对中、高密度芯片杂交可做到“点对点杂交”。     

冠心病患者妊娠相关血浆蛋白A含量与血管内皮功能关系探讨

 【目的】探讨冠心病患者血循环妊娠相关血浆蛋白A（PAPP—A）水平与内皮功能的关系。【方法】64例冠心病患者，其中稳定型心绞痛组34例，急性冠脉综合征组30例，分别检测其相关内皮功能，包括肱动脉血流介导的血管舒张反应（FMD）和高敏C-反应蛋白（hs—CRP）、内皮素（ET）、一氧化氮（NO）水平，并用酶联免疫法检测血清PAPP—A。【结果】稳定型心绞痛组患者同急性冠脉综合征组相比PAPP—A[（6×10^-3±5×10^-1U／L与（19×10^-3±13×10^-3）U／L，P〈0．05]、hs-CRP[（0．5±0．3）mg／L与（3．6±2．2）mg／L，P〈0．01]、NO[（57±4）μmol／L与（45±5）μmol／L，P〈0．05]和FMD（6．0％±0．8％与3-3％±1．2％，P〈0．05）的差异有统计学意义。逐步选择多重回归分析，按α=0．10水准，发现PAPP—A与hs—CRP和FMD存在直线关系，Lnhs—CRP的偏相关系数为0．333（95％置信区间：0．138-0．527，P〈0．01），FMD的偏相关系数为-0．623（95％CI：-1．144—0．102，P〈0．051，其中常数项为5．570。高PAPP—A（〉11．094×10^-3U／L）患者hs—CRP明显增高[（5．3±4．2）mg／L与（1．3±0．6）mg／L，P〈0．01），FMD则降低（3.3％±2．4％与6．2％±3．6％，P〈0．05）。【结论】PAPP-A可作为间接评估冠心病患者血管内皮功能的指标之一。     

非程控降温,—80℃冻存自体外周血干细胞的研究

目的：观察非程控降温、－80℃冻存的方法对自体外周血十细胞（APBSC）的保存效果。方法：以6％羟乙基淀粉（HES）、5％二甲基亚砜（DMSO）及4％人血白蛋白（ALB）的混合物为冷冻防护剂，将APBSC直接置于－80℃下保存，冻存前反复苏后测定APBSC的CFU－GM、BFU－E；观察移植后造血功能重建情况。结果：13例患者白细胞在十3～＋7天下降至（0．0～0．1）×10／L，白细胞（0．0～0．2）×109／L持续时间3～6天，于＋9～＋11天恢复至1．0X109／L以上．中性粒细胞绝对值（ANC）于＋9～＋11天达到0．5X109／L。血小板在＋3～＋7天下降至（2．0～21）×109／L，于＋8～＋15天恢复至20×109／L以上。CFU－GM、BFU－E回大率分别为76．5％、78．4％。结论：非程控降温、－80℃冻存是一简便、经济、有效的自体外周血于细胞保存方法。     

卡马西平对大鼠海马脑片诱发场电位抑制作用的可能机制

抑制剂量的卡马西平（CBZ）可抑制大鼠海马脑片的场电位使其幅值显著减小。非抑制剂量的CBZ（小于等于2×10-4mol／L）与γ-氨基丁酸（GABA.10－4，2×10－4，5×10－4和10－3mol／L）合用，抑制场电位的作用比单用GABA显著增强。用β-疏基丙酸10－4mol／L预处理脑片40－60min降低内源性GABA产量后，场电位幅值稳定地增大40％左右．此后再给抑制剂量的CBZ（3×10－4mol／L）对场电位无明显抑制作用，而CBZ与GABA合用则又显示了显著的抑制作用．上述结果表明，CBZ抑制场电位的作用可能是通过内源性GABA实现的。     

一种简易的预杂交体系

一种简易的预杂交体系分子生物学研究室陈汉春，卿科云，杨友云关键词印迹法，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ；预杂交；核酸杂交；方法核酸分子杂交是一项基本的分子生物学研究技术。在进行核酸分子杂交反应之前，必须用含有某些大分子物质的预杂交液，对经核酸印迹转移（Ｓｏｕｔｈｅ...     

TAD方案治疗成年人急性非淋巴细胞性白血病40例临床观察

我们于1988年3月～1993年11月用TAD方案（6硫鸟嘌呤、阿糖胞苷、柔红霉素）诱导治疗成年人急性非淋巴细胞性白血病（ANLL）40例。完全缓解（CR）27例，其中2例持续完全缓解（CCR），现报告如下。资料与方法1．病例资料：40例按天津白血病分类分型橄准分型为M1，11例，M2a21例，M12例，M5b6例。其中男性29例，女性11例；年龄为14～46岁。中位数31岁；病程20～140天，中位数67天。化疗前血象：Hb46～95g／J，中位数66g／L；WBC9．6～320×109／L，中位数164×109／L；BPC56～196×109／L中位数67×109／L化疗方法l一诱导缓解：第l…     

RP-HPLC法测定复方三黄洗剂中盐酸小檗碱的含量

目的建立测定复方三黄洗剂中盐酸小檗碱含量的反相高效液相色谱（HPLC）法测定方法。方法色谱柱kromasil C18（4．6mm×150mm，5gm），流动相为乙腈-0．05mol／L柠檬酸-0．5mol/L三乙胺（10：85：5），检测波长为265nm。结果盐酸小檗碱的线性范围为0．048-0．64μg／ml（r=0．993），平均加样回收率为98．33％；日内、日间RSD为1．02％、2．11％。结论方法简便、准确，可用于复方三黄洗剂的质量控制。     

含尿嘧啶DNA糖基化酶的聚合酶链反应检测血清HBV DNA

为探讨含ｄＵＴＰ／尿嘧啶ＤＮＡ糖基化酶（ｄＵＴＰ／ＵＤＧ）ＰＣＲ试剂（抗污染ＰＣＲ试剂，ＰＣＲ－ｄＵＴＰ／ＵＤＧ）抗ＰＣＲ产物污染的能力及其在临床检测中的应用，采用该试剂检测２０４份病毒性肝炎患者血清中ＨＢＶＤＮＡ，并与普通ＰＣＲ试剂比较。结果显示：抗污染ＰＣＲ试剂有较强的抗污染能力，至少可阻止１００ｎｇ的ＰＣＲ产物的污染。该试剂与地戈辛素探针分子杂交所测结果的符合率（８９．３２％）高于普通ＰＣＲ与分子杂交所测的符合率（８１．４５％）。表明抗污染ＰＣＲ试剂的应用有利于防止ＰＣＲ产物的污染，提高ＰＣＲ的准确性和特异性。     

原位杂交法检测喉癌组织中人乳头状瘤病毒的研究

采用原位核酸杂交技术，地高辛标记人乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）６Ｂ／１１，１６／１８型ＤＮＡ作探针，对４４例喉癌石蜡包埋标本中ＨＰＶ－ＤＮＡ同源序列进行了检测，同时用１６例喉息肉石蜡包埋标本作为对照。结果显示：ＨＰＶ６Ｂ／１１杂交阳性者在喉癌组为８／４４（１８．２％），喉息肉组为２／１６，（１２．５％）（Ｐ〉０．０５），ＨＰＶ１６／１８杂交阳性者在喉癌组为１９／４４（４３．２％），喉息肉组为２／１６（１     

三种方法诊断尖锐湿疣的对比研究

目的探讨原位分子杂交法诊断尖锐湿疣的敏感性与特异性，并与组织病理及醋白试验相比较。方法应用原位分子杂交法[所用探针为地高辛标记的DNA探针（HPV6／11，HPVl6／18，HPV31／33）]、组织病理及醋白试验分别检测实验组和对照组标本。结果37例标本中，醋白试验34例阳性；组织病理检查37例均阳性；原位分子杂交法的总阳性率为94．6％，HPV6／11阳性31例（阳性率83．7％），HPV16／18阳性2例（阳性率5．4％），1例标本HPV6／11及HPVl6／18均阳性（2．7％），HPV31／33阳性1例（阳性率2．7％），阳性标本可见细胞核着蓝色，阳性反应物主要分布在棘层空泡化细胞的细胞核内。结论原位分子杂交法检测HPV敏感性高，特异性强，能对感染有明确的组织学定位，而且还能进一步鉴定感染的型别，因此是诊断和研究尖锐湿疣的较好和先进方法。     

两种不同H2R拮抗剂抗疟作用的比较

本实验观察了两种不同组胺H2R拮抗剂西米替丁（Cimetidine，CMD）与法莫替丁（Famotidine．FAM）对体外培养恶性疟原虫的影响。在体外培养条件下．当CMD的浓度为5×10－6～4×10－2mol／L时，具有明显的杀灭或抑制其生长的作用；而FAM各浓度组（5×10－7～4×10－2mol／L）对体外培养恶性疟原虫的生长抑制作用不明显。由此推断西米替丁的抗疟效应可能不是通过组织胺H2R的拮抗作用。     

一种新的双向电泳蛋白样品制备方法

目的探讨双向凝胶电泳（2-DE）样品裂解液对蛋白质分离和双向凝胶电泳结果的影响。方法以MOLT-4细胞为例，采用3种溶解性能不同的裂解液提取细胞中的蛋白质组，并分别进行双向聚丙烯酰胺凝胶电泳。结果通过对2-DPAGE图谱的比较分析，发现采用8mol／L Urea，2mol／L Thiourea，4％CHAPS，1％NP-40.4％Triton X-100，65mmol／LDTT，0．5mmol／LPMSF，0．5％pharmalyte3-10，能获得质量较高的2-DE图谱。结论采用高浓度脲、三去污裂解液有利于获得优质的蛋白质样品，从而提高蛋白质提取率和双向电泳分辨率等。     

钨酸比浊法与双缩脲法测定尿蛋白定量的比较

我院采用钨酸比浊法与双缩脲法测定尿蛋白定量的比较，现报告如下：一、取材：分析留取34例病人24小时尿液。二、方法：1．双缩脲法：原理以钨酸沉淀尿中蛋白质，用双缩豚法进行定量测定。试剂：（1）0，075rnmol／L硫酸；（2）159／L钨酸钠溶液。（3）双缩脲试剂，硫酸铜1．5g．滴石酸钾纳6.0g，100m／L氢氧化钠溶液300ml，蒸留水加至1000ml。（4）蛋白标准液．用双缩服法较准的混合人血历，其总蛋白509／L，应用时再稀释20倍。操作：（l）量24小时尿液总量，混匀，取尿液1011，以200O转／分离心3分钟，（2）取上清尿液作蛋白定性（磺基…