虫草类产品中5种核苷类成分的测定及蛹虫草质量分析

目的建立HPLC法对4种常见虫草类样本[蛹虫草、发酵虫草菌粉(Cs-4)、中华被毛孢和冬虫夏草]中尿苷、鸟苷、腺苷、虫草素和N6-(2-羟乙基)-腺苷5种核苷类成分进行含量测定,比较成分差异,确定蛹虫草的特征成分,为控制蛹虫草及其提取物的质量提供科学依据。方法采用岛津ODS-3 C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水进行梯度洗脱,体积流量为0.8 mL/min,检测波长为260 nm,柱温为30℃。结果蛹虫草样品均含有尿苷、鸟苷、腺苷、虫草素和N6-(2-羟乙基)-腺苷,而CS-4、中华被毛孢和冬虫夏草中未检测到虫草素和N6-(2-羟乙基)-腺苷。供试品制备方法对核苷类成分的影响较大,蛹虫草粉采用6种方法制备供试品溶液,发现用水超声提取180 min获得的尿苷、鸟苷和腺苷的含量最高,且在24 h内稳定。虫草素性质稳定,而N6-(2-羟乙基)-腺苷对热和酸都不太稳定;其中4种制备方法测得的虫草素和N6-(2-羟乙基)-腺苷含量一致。结论为蛹虫草及其提取物的质量分析提供了依据,以特征成分虫草素和N6-(2-羟乙基)-腺苷为指标可更好地对蛹虫草及其提取物的质量进行控制。     

人工蛹虫草中核苷类化学成分的研究

目的：研究人工蛹虫草Cordyceps militaris中核苷类化学成分。方法：建立人工蛹虫草中核苷类化合物的提取方法并用色谱水法分离各个核苷类化合物。结果：分离鉴定了4个化合物，分别是尿嘧啶核苷（1）、腺嘌呤核苷（2）、鸟嘌呤核苷（3）和酪氨酸（4）。结论：从核苷类物质分析来看，该人工蛹虫草菌丝体中核苷类物质含量丰富，主要为化合物1、2、3，三者总和约占菌丝体干重的1．3％。     

蛹虫草中虫草素分离纯化工艺研究进展

本文介绍了蛹虫草和虫草素的性状功效以及检测和提取工艺,主要综述了虫草素的分离纯化工艺的研究进展。离子交换树脂法是目前分离纯化虫草素的常用方法,超临界CO2萃取在分离蛹虫草中核苷类成分方面也取得了进展,并提出大孔吸附树脂技术可能会成为虫草素分离纯化新的手段。     

蛹虫草菌丝与冬虫夏草中核苷类成分的含量测定

蛹虫草菌丝与冬虫夏草中核苷类成分的含量测定刘静明,刘岱,杨立新,钟裕容,崔淑莲(中国中医研究院中药研究所北京100700)蛹虫草CardycepsmiliLaris(L.)Link,为冬虫夏草同属真菌,近年来发现蛹草有重要的药用价值,越来越受到国内外的重视,国外报道从蛹虫草人工培养液中分离出虫草素,3′-氨基-3-去氧腺甙及肌氨酸氨基腺音。我们从蛹虫草菌丝中分离得6种成分:β-谷甾醇、麦角甾醇、D-甘露醇、腺嘌呤、腺苷和虫草素￣[1]。并对5批样品....     

RP-HPLC测定天然虫草与人工虫草中核苷类成分的含量

 目的分析不同来源的天然虫草与人工虫草中主要核苷类成分的差异。方法应用RP-HPLC检测18个样品中尿苷、腺嘌呤、腺苷、虫草素的含量。Symmetry Shield Rp18柱(3.9 mm×150 mm,5μm),以乙腈-水为流动相,梯度洗脱。流速0.2～1.2mL·min^-1,检测波长260 nm,柱温30℃。结果本法高效灵敏,重现性好。所测人工虫草核苷类成分的含量较天然虫草高,不同产地天然虫草4种主要的核苷类成分的差异较不同来源人工虫草的小。结论本法能有效鉴别虫草的核苷类成分,可用于天然虫草和人工虫草中核苷类成分的分析,评价不同来源虫草的质量。     

虫草素的药理作用研究进展

虫草素是从蛹虫草Cordyceps militari中分离的核苷类抗生素,并已成功地从人工培育的蛹虫草子实体中提取到,质量分数98％以上.虫草素不仅具有抗肿瘤、抗白血病、免疫调节等作用,还具有抗菌、消炎、抗病毒、降血糖、降血脂、抗衰老等多种生物活性和药理作用.近年来虫草素已引起国内外研究人员的极大关注,主要对虫草素的生物活性和药理作用研究概况进行综述.     

人工虫草与冬虫夏草成分的比较研究

目的比较人工北虫草、发酵虫草菌粉和冬虫夏草中,核苷及碱基类成分、甘露醇及麦角甾醇的含量,为开发利用虫草的药用价值提供理论依据。方法采用RP-HPLC法测定虫草中核苷及碱基类成分,采用HPLC-ELSD法分析虫草中甘露醇的含量,采用RP-HPLC法分析虫草中麦角甾醇的含量。结果 11批冬虫夏草中核苷及碱基类成分(尿嘧啶、尿苷、肌苷、鸟苷、腺嘌呤、腺苷和虫草素)的平均含量分别为0.008 0、0.738 8、0.251 1、0.200 6、0.003 7、0.229 4、0.005 0 mg/g。10批人工北虫草中核苷及碱基类成分的平均含量分别为0.012 3、0.110 0、0.081 2、0.648 0、0.001 6、0.071 5、0.699 9 mg/g,12批发酵虫草菌粉中核苷及碱基类成分的平均含量分别为0.017 0、1.057 1、0.127 9、0.944 8、0.009 7、1.232 8、0.029 0 mg/g;冬虫夏草、人工北虫草、发酵虫草菌粉中甘露醇的平均含量分别为88.66、44.23、17.40 mg/g;冬虫夏草、人工北虫草、发酵虫草菌粉中麦角甾醇的平均含量分别为1.723 8、5.123 3、5.321 9 mg/g。结论人工北虫草、发酵虫草菌粉含有与冬虫夏草相似的主要活性成分,但人工虫草与冬虫夏草中各种活性成分的含量存在差异。     

人工蛹虫草总核苷提取工艺优化考察

目的:优化考察利用大孔吸附树脂纯化提取分离人工蛹虫草总核苷的工艺方法。方法:通过正交设计优化总核苷的提取分离条件,用高效液相色谱分析和检测各组分。结果:最佳提取条件为样品在10倍量水中80℃水浴提取3次,每次2 h,滤液合并,减压浓缩后上AB-8弱极性大孔树脂柱,蒸馏水洗脱除去多糖类大分子物质。以30%乙醇洗脱得总核苷提取液,减压浓缩,真空干燥后得到人工蛹虫草总核苷。结论:利用色谱法对提取过程中与提取液前体及中间体进行了比较分析,结果显示该工艺具有简单、快速、高效等优点。     

虫草保健品中13种核苷类成分的UHPLC-ESI-MS/MS定量分析及评价

目的:对香港和大陆市场上销售的8种常见虫草保健品进行核苷类成分的定量分析及评价。方法:采用冰浴超声提取法与UHPLC-ESI-MS/MS分析法,快速检测虫草保健品中的13种核苷类成分。结果:虫草保健品中被测核苷类成分的含量明显高于天然冬虫夏草药材。这些保健品绝大部分组成为冬虫夏草菌丝体粉,而并非是由天然冬虫夏草经直接粉碎加工而成。结论:通过对13种核苷类成分的含量测定,比较市场上以虫草药材或虫草菌丝体为原料制备的保健品质量,可以反映部分已经上市销售的虫草类保健品在核苷类成分种类及含量之间的差异性。     

高效液相色谱定量分析比较4种虫草药材的核苷类成分

为比较4种常见虫草类药材(冬虫夏草、蛹虫草、虫草菌丝体和蝉花)中核苷类成分的差异,该研究以0.5%磷酸溶液提取样本,色谱柱为Zorbax SB-Aq(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为0.04 mol·L-1磷酸二氢钾溶液(A)和乙腈(B),梯度洗脱,流速为0.8 m L·min-1,检测波长260 nm,柱温30℃,对4类药材产品进行分析。已知核苷以外标一点法进行计算,未知成分以腺苷为对照进行计算,并对测定结果进行聚类分析,同时利用指纹图谱相似度软件对不同样本进行了比较。结果显示,冬虫夏草、蛹虫草、虫草菌丝体、蝉花4种药材中的核苷类成分差异较大,聚类分析和指纹图谱分析均可有效区分冬虫夏草和其他3种虫草药材。该研究建立的核苷测定方法准确可靠,可用于虫草类产品的品质评价。     

蝉花与有关虫草活性成分检测比较

目的:测定蝉花的虫草活性成分,并与冬虫夏草和蛹虫草作比较。方法:分别采用高效液相色谱法、3,5-二硝基水杨酸比色法和高碘酸钠比色法测定3种虫草样品的腺苷和虫草素、虫草多糖以及虫草酸含量。结果:经测定,蝉花中含虫草素0.02mg·g-1,腺苷1.90mg·g-1,虫草多糖94.88mg·g-1,虫草酸78.57mg·g-1,其中虫草酸和腺苷含量高于冬虫夏草,多糖和虫草酸含量高于蛹虫草。结论:蝉花中的虫草活性成分不亚于冬虫夏草和蛹虫草,属于优质虫草,值得进一步研究和推广。     

正交设计优选蛹草拟青霉中虫草素和虫草多糖的提取工艺

目的:采用正交设计优化蛹草拟青霉菌丝体中虫草素和虫草多糖的提取工艺。方法:建立高效液相色谱测定指标成分虫草素含量的方法,采用正交试验法考察醇浓度、加醇量、提取次数与时间的组合3个因素对虫草素乙醇提取率的影响。醇提后残渣以水提取多糖,采用苯酚-浓硫酸比色法在490 nm处测定虫草多糖的含量,以单因素法筛选多糖提取工艺。结果:HPLC色谱条件下精密度的RSD为0.30%,稳定性的RSD为1.27%,重复性的RSD为2.93%。以乙醇浓度为90%,加醇量为10倍量,提取3次,每次1 h虫草素的提取率最高;而以乙醇浓度为95%,加醇量为6倍量,提取3次,每次1 h提取虫草素后的残渣再以水提取,虫草多糖得率最高。结论:所优化的提取工艺虫草素和虫草多糖提取率均较高,采用的含量测定方法稳定可靠。     

北虫草中核苷类成分的含量测定与质量评价

目的 建立北虫草中尿苷、腺嘌呤、腺苷、虫草素4种核苷类成分的含量测定方法,确定其含量测定指标成分及其限量标准.方法 Agilent TC-C 18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),甲醇-水为流动相梯度洗脱,柱温30℃,流速1.0 mL/min;检测波长260 nm,进样量20 μL.结果 线性关系良好,精密度高,重现性好,回收率均在95.39％～103.3％;不同产地的北虫草中各核苷类成分含量变异较大.结论 该方法简便、灵敏、准确、重现性好,适用于北虫草中核苷类成分的含量测定;建议以腺苷和虫草素作为北虫草中核苷类成分的含量测定指标成分,其含量限量分别为不低于0.07％、0.27％.     

不同基原虫草的成分比较及其对人胚胎成纤维细胞抗纤维化作用的初步研究

该研究以尿苷、腺苷、虫草素为主要评价指标,采用高效液相、液质联用等色谱方法,对6种不同基原的10个虫草样品的虫体/草体/全体进行高效液相/液质联用的测定和比对;并利用TGF-β1诱导人胚胎成纤维细胞CCC-ESF-1建立体外细胞外基质聚集模型,观察不同基原虫草提取物的抗纤维化活性。实验结果显示,不同基原子实体和菌丝成分数量上基本相同,但是各成分的含量分布具有明显的差异;不同基原的虫草提取物中,体外抗纤维化活性结果为:虫草花蝉虫草(金蝉花)桑蚕蛹虫草柞蚕蛹虫草天然冬虫夏草。该研究结果为找寻天然冬虫夏草的人工替代品提供了科学的参考和依据。     

冬虫夏草及人工虫草核苷类成分的TLCS研究

目的：以腺苷、尿苷、鸟苷为指标测定天然虫草与人工虫草菌丝体中核苷类有效成分的含量，并对不同虫草样品进行薄层色谱指纹图谱对比研究，探求虫草中核苷类化合物鉴别的专属性。方法：采用高效薄层色谱扫描法进行含量测定，同时建立了不同虫草样品的荧光淬灭薄层色谱指纹图谱。结果：虫草菌丝体中测得腺苷、尿苛鸟苷成分高于天然虫草。结论：该法快速简便，重现性好，能有效鉴别出虫草中核苷类成分以及评价不同电菌样品的质量。     

蚕虫草不同部位营养与活性成分分析

目的:明确蚕虫草不同部位的营养与活性成分,以便开发利用。方法:对蚕虫草、子座、菌核和蚕粉进行分析研究。虫草素和腺苷测定采用高效液相色谱法,虫草多糖测定采用3,5二硝基水杨酸比色法,虫草酸测定采用高碘酸钠比色法,蛋白质测定采用考马氏亮蓝比色法,粗脂肪测定采用索氏提取法。结果:蚕虫草的多糖含量达86.49mg·g^-1;子座的腺苷含量达6.82mg·g^-1;菌核的虫草素和虫草酸含量分别达到13.28mg·g^-1和44.07mg·g^-1。结论:不同活性成分在蚕虫草及其不同部位的含量不同,其中蚕虫草活性成分总量最高,菌核虫草素和虫草酸含量最高;研究还表明蛹虫草菌对蚕体脂肪和蛋白质的分解利用能力很强。     

氧化铝脱色纯化虫草素工艺研究

目的 探索氧化铝柱层析脱色纯化蛹虫草培养基中虫草素的工艺.方法 以蛹虫草小麦培养基原料,水加热提取,采用酸性氧化铝干柱层析、醇沉去杂、重结晶来纯化得到高纯度虫草素.结果 氧化铝柱层析参数:层析剂为酸性氧化铝,30％乙醇为洗脱溶剂,洗脱用量为2倍柱体积,酸性氧化铝用量为蛹虫草小麦培养基重量:酸性氧化铝重量为1g∶3g.氧化铝脱色液浓缩,浸膏乙醇超声溶解,沉淀过滤,滤液冷置结晶,晶体重结晶即得白色针状虫草素晶体.结论 该工艺可简捷有效地将蛹虫草小麦培养基中0.2％虫草素纯化至97％虫草素,同时也适合于虫草发酵液、虫草菌丝体虫草素的分离纯化.     

高效液相色谱法测定人工虫草菌丝中腺苷和虫草素的含量

为定量测定蛹虫草菌丝体中腺苷和虫草素的含量，用ＹＷＧＣ_１８不锈钢柱，磷酸二氢钠氢氧化钠缓冲液（ｐＨ６.８，加１％四氢呋喃）为流动相，高效液相色谱法同时分离和测定了人工蛹虫草菌丝中腺苷和虫草素，并考察了提取方法。二组分的线性关系良好，回收率满意。     

虫草素对小鼠S_(180)瘤抑制作用研究

环磷酰胺是一种新型的免疫调节剂 ,它广泛应用于临床 ,虫草素是从人工蛹虫草子实体中分离的核苷成分 [1 ] ,国内几乎没有虫草素生物活性研究的报道 ,werner等认为虫草素能抑制小鼠肿瘤细胞系 ( L 5 178Y细胞 )的核酸合成 ,起抑制肿瘤细胞 m RN A的作用 [2 ]。本文就虫草素对昆明种小鼠 S1 80 瘤的抗瘤作用进行了初步研究。1　实验材料1.1　药物 :虫草素由山东省中医院研究所提供 ,经光谱学分析确为虫草素 ;环磷酰胺由上海第十二制药厂生产 ,批号 940 5 11;生理盐水购于临朐县人民医院。1.2　实验动物 :昆明种小鼠由潍坊医学院动物室提供 …     

储存时间对腺苷和虫草素在柞蚕蛹虫草中分布和含量的影响

目的:研究储存时间对腺苷和虫草素在柞蚕蛹虫草中分布和含量的影响。方法:采用RP-HPLC法分别测定柞蚕蛹虫草子实体、菌核及整草中腺苷和虫草素含量,并与相同储存时间的米饭虫草进行比较。结果:储存1年的柞蚕蛹虫草腺苷和虫草素的含量顺序为子实体菌核;总量顺序为菌核子实体。储存2年的柞蚕蛹虫草腺苷和虫草素含量有所降低,其分布规律以及总量顺序没有明显变化。储存1年的柞蚕蛹虫草中腺苷总含量高于2年的,差异有统计学意义(P0.05),但其虫草素的含量差异无统计学意义(P0.05)。米饭虫草中腺苷含量是柞蚕蛹虫草的1.6倍,虫草素的含量是柞蚕蛹虫草5倍。结论:储存时间对腺苷和虫草素分布规律以及总量顺序无明显影响,但对其腺苷总含量有明显影响。