差异显示基因EEG1在原发性肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的研究和克隆原发性肝细胞癌（HCC）相关基因,探索其在肝癌发病中的临床意义。方法采用mRNA差异显示技术,分析肝细胞癌和癌旁正常肝组织间基因的差异表达,获得差异表达基因片段,对其进行克隆,测序,并用RTPCR方法,检测所获得的基因在44对肝细胞癌及相应癌旁正常肝组织中差异表达的情况,分析该基因表达与HCC临床病理特征的关系。结果克隆了一个肝癌相关基因EEG1,其在肝癌组织中的表达水平明显低于癌旁正常肝组织,仅为正常组织表达量的0．586±0．346倍（P〈0．05）。EEG1基因在肝癌组织中的表达下调与肝癌的早期分化程度密切相关（P〈0．05）。结论差异表达基因EEG1可能在HCC的早期发病中起着重要作用,有望成为肝癌的早期诊断指标。     

Wntl／β-catenin与食管鳞状细胞癌临床病理及预后的相关性研究

目的探究Wntl／β-catenin信号通路与食管鳞状细胞癌（ESCC）的临床病理及预后凶素的相关性。方法用实时定量PCR（RT-PCR）和免疫组织化学技术分析70例ESCC（包括癌组织与癌旁非癌组织）中Wntl／β-eatenin的表达情况,统计分析其与临床病理及预后的关系。结果癌组织中Wnt1 mRNA水平（1．9934±1．9888 vs 5．0．8863±0．6658,P=0．0000）和蛋白质水平（0．3830±0．0947 vs．0．2721±0．1474,P=0．0000）均较癌旁组织中显著高表达;WntlmRNA表达与病理分期和淋巴结转移及预后相关（P〈0．05）,但蛋白质水平未显示相关。癌组织中β-cateninmRNA水平（0．2854±0．1298w．0．8863±0．6658,P=0．0000）和蛋白质水平（0．2835±0．0844135．0．2352±0．0670,P=0．003）较癌旁组织中显著高表达,B—eateninmR—NA表达与病理分期、淋巴结转移及预后相关（P〈0．05）,但蛋白质水平并未显示相关。在蛋白质水平上,Wntl和β-catenin表达水平兀相关性。结论Wntl／β-catenin在ESCC组织中显著高表达。可能成为判断ESCC分期和预后的重要分子标记物。且Wntl／β-ateninmRNA表达水平与ESCC临床病理分期、淋巴结转移呈逆相关,mRNA的异常表达者预后不佳．但可能不是独立预后因素。     

Bag-1及Bcl-2在肝癌中表达及意义

目的探讨Bag-1及Bcl-2在肝癌中的表达及意义。方法采用免疫组织化学SP法检测Bag-1及Bcl-2在60例行肝脏部分切除的肝癌组织、30例癌旁肝组织与14例正常肝组织的表达情况,并分析其与临床病理间关系。结果肝癌组织中Bag-1及Bcl-2阳性表达率明显高于癌旁组织与正常肝组织（P〈0．05）;肝癌组织中Bag-1及Bcl-2的表达在肝癌分期、有无淋巴结转移、有无癌栓形成、有无包膜形成上差异有统计学意义（P〈O．05）;Bag-1及Bcl-2阳性表达者1a和2a生存率及生存时间低于阴性表达者（P〈0．05）。结论Bag-1及Bcl-2与肝癌生物学特性密切相关,可作为评估肝癌患者预后指标。     

DLC-1基因在原发性肝癌组织中表达的临床意义研究

目的研究DLC-1基因与肝癌发生、转移乃至复发的临床意义。方法收集南通大学附属肿瘤医院2005年3月-2006年10月间73例HCC及癌旁正常组织（其中12例含癌栓）和24例肝血管瘤手术切除标本，标本均经过病理证实。依据临床以及病理学特征分为高侵袭组币口低侵袭组，采用PCR对所有组织标本DLC-1基因表达进行分析。结果研究发现肝血管瘤、癌旁组织、部分肝癌组织中表达的DLC-1基因大约为450bp，肝癌组织、癌旁组织和肝血管瘤中DLC-1基因表达阳性率依次为69．86％，97．26％和100％，统计学分析这三种组织之间有明显差异（P〈0．05）。DLC-1基因表达在HCC高侵袭组明显低于低侵袭组，二者之间有明显的差异（P〈0．05）。短期随访发现DLC-1表达阴性者的HCC患者中住生存期低于表达阳性患者，且易复发（P〈0.05）。结论定期动态监测高危人群的DLC-1基因表达可能对肝癌患者早期转移复发有一定的临床诊断价值。     

血管生成素-2,VEGF和bFGF在人肝细胞肝癌中表达及意义

【目的】研究血管生成素-2（Ang-2）在人肝细胞癌（HCC）组织中的表达．并探讨其与HCC组织中血管内皮生长因子（VEGF）、碱性成纤维生长因子（bFGF）和微血管密度（MVD）的关系。【方法】采用免疫组化和逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）的方法,对38倒HCC的癌组织及癌旁非肿瘤组织,7例正常肝组织中的Ang-2、VEGF、bFGF和MVD的表达进行检测,同时研究了肝癌组织中Ang-2的表达与临床病理关系。【结果】Ang-2在正常肝组织无表达．癌旁组织呈弱表达（39．47％）。在大部分癌组织呈强表达（60．53％）。Ang-2表达与VEGF、bFGF和MVD表达有明显相关性（r分别为0．857、0．706和0.820,P〈0．01）。Ang-2表达与HCC的血管侵犯、肿瘤的转移及肿瘤的分级有关（P〈0．05）。【结论】Ang-2、VEGF和bFGF在HCC血管形成和进展中具有协同作用。Ang-2、VEGF、bFGF及MVD可作为HCC生物学行为恶化的一项评估指标。     

c-myc在肝细胞肝癌中的表达及其临床意义

目的检测肝细胞肝癌中c-myc蛋白表达情况，研究其与肝癌临床特征的关系，探讨c-myc在肝细胞癌（Hcc）发生、发展及转移中的作用。方法采用免疫组织化学技术检测59例肝癌组织及癌旁非癌组织中c-myc蛋白的表达。结果59例肝癌组织中35例c-myc呈阳性表达，阳性率为59，3％。肿瘤组织表达阳性率高于癌旁非癌组织（P〈0．05）。c-myc的表达与肝癌的发病年龄，性别，肿瘤大小，分化程度无关（P均〉0．05），而与肝癌的转移有关（P〈0．05）。应用Kaplan—Meier法制作累积生存曲线并经Log-Rank检验结果显示，c-myc表达阳性与阴性组患者术后累积生存率有显著性差异（P=0．0039）。结论c-myc在肝细胞肝癌中的表达能促进肝癌的发生发展，HCC患者c-myc表达阳性者预后不良，应密切随访。     

癌症高表达蛋白在原发性肝癌中的表达及意义

【目的】研究癌症高表达蛋白（Hec 1）在原发性肝细胞肝癌（HCC）中的表达和意义。【方法】采用免疫组化sABc的方法检测15例正常肝组织、20例癌旁组织及30例HCC组织中Hec1蛋白的表达水平并进行比较。【结果】在正常肝、癌旁组织及HCC组织中,Hec1蛋白的阳性表达率分别为0％、25％、66．7％,各组织中Hec1蛋白的表达相比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。Hec1蛋白的表达与HCC的Ed—mondson分级、侵袭转移显著相关。差异有统计学意义（P〈0．05）。【结论】Hec1的表达与HCC的Ed—mondson分级、侵袭转移显著相关,Hec1蛋白的过度表达可能在HCC的发生和发展中起重要作用,且对HCC的诊断及预后有重要的参考价值。     

1号染色体扩增区MEF2D基因在肝细胞癌组织中的表达

目的探讨1号染色体扩增区基因MEF2D mRNA在正常肝组织、肝癌细胞系及肝细胞癌（HCC）与癌旁组织中的表达并探讨其意义。方法利用逆转录聚合酶链反应方法对正常肝组织、13个肝癌细胞系及40例HCC癌组织与癌旁组织中MEF2DmRNA的表达情况进行初步分析。结果MEF2D mRNA在正常肝组织、13个肝癌细胞系及40例HCC癌组织与癌旁组织中均为高表达,其表达阳性率分别为100．0％（2／2）、92．3％（12／13）、95．O％（38／40）和97．5％（39／40）。MEF2D在各组的表达阳性率与pactin相类似,差异无统计意义,均为P〉0．05。结论染色体扩增区域常常存潜在的癌基因,由于染色体具有不稳定性,1号染色体扩增区MEF2D基因非HCC发生的癌基因,MEF2D mRNA高表达与HCC发生、发展无相关性。     

原发性肝癌组织中肝素酶表达与肝癌侵袭转移关系的研究

目的探讨乙酰肝素酶（Heparanase Hpa）在肝癌中的表达及其与肝癌临床病理特征的关系。方法分别采用RT—PCR和免疫组织化学法检测Hpa mRNA及Hpa蛋白在肝细胞肝癌、癌旁肝组织及肝癌细胞株中的表达。结果肝癌Hpa mRNA和蛋白的表达显著高于癌旁及正常肝组织（P〈0．05），肝癌组织中Hpa mRNA的表达与TNM分期、Edmondson分级和复发有关（P〈0．05）。结论Hpa mRNA及蛋白在肝癌中高表达，并与肝癌的侵袭转移、复发、预后有关.     

MiR-122在肝细胞癌中的表达及其与肿瘤表型标志物的相关性研究

目的：检测肝细胞癌（HCC）组织中 miR-122和上皮性钙粘蛋白（E-cadherin）、转化生长因子-β1（TGF-β1）的表达,并分析miR-122与E-cadherin、TGF-β1之间的相关性。方法应用实时荧光定量PCR技术检测45例HCC及其配对癌旁组织中miR-122的表达情况;免疫组织化学法检测上述HCC及其配对癌旁组织中E-cadherin、TGF-β1的表达,分析miR-122的表达量与E-cadherin、TGF-β1之间的相关性。结果 miR-122在肝癌组织低表达,肝癌组织中miR-122表达量低于其癌旁组织者有41例,表达量相仿或高于其癌旁组织者4例,差异具有统计学意义（P＜0.05）。E-cadherin在HCC组织中的表达显著低于癌旁组织（P＜0.05）,HCC组织中TGF-β1表达显著高于癌旁组织（P＜0.05）。HCC组织中miR-122表达与E-cadherin呈正相关（r＝0.827）,与TGF-β1表达呈负相关（r＝-0.356）。结论 miR-122在HCC组织中低表达,其表达量与肝癌分化程度正相关。     

整合素α6在原发性肝细胞肝癌中的表达及意义

目的:比较整合素α6mRNA在原发性肝细胞肝癌(HCC)癌组织及正常肝组织中表达的差异,分析整合素α6mRNA的表达与HCC的侵袭程度、远处转移、临床分期之间的关系。方法:取肝癌患者手术切除标本,RT-PCR扩增整合素α6mRNA后对扩增产物进行电泳及图象分析。结果:癌组织、癌旁组织与相应正常肝组织中整合素α6mRNA定性表达阳性率差异有统计学意义(P<0.001)。但癌旁组织和正常肝组织之间整合素α6mRNA表达阳性率差异无统计学意义(P=0.4862)。在表达阳性的癌组织中,其半定量分析显示无包膜者高于有包膜者,有肝内或肝外转移者高于无肝内或肝外转移者。随着Edmondson分级增高,整合素α6及β1mRNA表达量不断增高(P<0.001)。结论:整合素α6mRNA在HCC癌组织、癌旁组织和相应正常肝组织中均有阳性表达。但在HCC癌组织中表达明显高于其他组织。HCC癌组织中整合素α6mRNA表达高低与侵袭程度、有无肝内或肝外转移及临床分期密切相关。高表达的整合素α6mRNA预示着肝癌的高度恶性、高侵袭性、高转移性和预后不良。整合素α6mRNA可以作为反映HCC转移和侵袭特性的分子标记物。     

NF-κB 在肝细胞肝癌组织中的表达及其意义

目的：探讨核转录因子-κB（NF-xB）在肝细胞肝癌（HCC）组织的表达意义及NF-κB与HCC病人临床病理特征的关系。方法：采用免疫组织化学S—P法检测30例HCC组织NF-κB的表达，以30例相应癌旁肝组织作为对照，所得结果行卡方检验及相关分析进行比较。结果：NF—κB蛋白在HCC组织、癌旁肝组织阳性表达率分别为63．3％（19／30）、16．7％（5／30），有显著差异（P〈0．05）；NF-κB表达与性别、年龄、HBsAg、Child分级、肝硬化背景、肿块大小无相关（P〉0．05），与HCC分化程度、AFP水平相关（P〈0．05）。结论：NF-κB对肿瘤的发生起重要作用。     

肝细胞性肝癌膜联蛋白A2异常表达的临床病理学特征及意义

目的 分析膜联蛋白A2（ANXA2）在肝细胞性肝癌（HCC）患者中表达的临床病理学特征及对HCC的诊断价值.方法 以自身配对法收集术后肝癌的癌灶、癌旁组织和远癌组织,以Western blot法检测组织中ANXA2的表达,以定量PCR分析ANXA2 mRNA转录水平,以免疫组化法分析ANXA2在细胞中定位;分组收集肝癌、良性肝病患者和健康人群外周血,以ELISA法定量外周血中ANXA2表达水平.结果 无论是ANXA2还是ANXA2 mRNA,HCC癌灶组织中ANXA2表达显著高于癌旁和远癌组织（P〈0.001）;ANXA2在HCC癌灶组织中定位于胞质和胞膜,癌旁组织中定位于胞质,而远癌组织中未见明显表达;HCC患者血ANXA2表达水平,显著高于良性肝病或健康人群（P〈0.01）,但与转移性肝癌组间未见明显差异.临床病理学特征：血ANXA2表达与HBV感染（t=6.820,P〈0.001）、伴肝外转移（t=3.191,P=0.002）、门静脉癌栓（t=2.859,P=0.005）、中低程度分化（P〈0.001）和TNM分期相关（t=5.594,P〈0.001）,但与患者性别、年龄、肿瘤大小和AFP水平间未见明显相关;血ANXA2与AFP联合检测,可提高肝癌诊断阳性率（96.52%）.结论 ANXA2过表达有助于肝癌的诊断与鉴别.     

肝细胞肝癌组织ICAM-1及血清sICAM-1水平变化的临床意义

目的：研究细胞间黏附分子-1（ICAM-1）在肝细胞肝癌（HCC）中表达的临床意义。方法：应用免疫组化方法结合全自动图像检测40例HCC组织及其癌旁组织和28例肝硬化组织中ICAM-1的表达，以酶联免疫吸附实验（ELISA）法测定42例HCC、26例肝硬化患者和22例正常健康者血清中可溶性细胞间黏附分子-1（sICAM-1）的水平，并与甲胎蛋白（AFP）进行同步分析。结果：40例HCC组织ICAM-1表达阳性率为80．0％，高于癌旁和肝硬化组织（P〈0．05），阳性率与组织学分类相关。HCC组织中ICAM-1含量高于癌旁及肝硬化组织（P〈0．05），转移组HCC中ICAM-1的含量也高于非转移组（P〈0．05），而癌旁及肝硬化组织中含量差异无显著性（P〉0．05）。HCC患者血清sICAM-1水平高于肝硬化及正常健康组（P〈0.05），HCC伴转移组患者血清中sICAM-1无转移组（P〈0.05），AFP阴性组与阳性组sICAM-1水平差异无显著性（P〉0.05）。结论：HCC组织中高度表达ICAM-1和血清中高水平的sICAM-1，在一定程度上可以反映HCC发展程度及转移状态，ICAM-1有可能作为HCC的一个新的诊断指标。     

D2-40标记阳性淋巴管密度、上皮型钙黏蛋白、β-连环蛋白异常表达与胃癌转移的关系——附84例检测报告

目的：探讨D2-40标记阳性淋巴管密度（1ymphaticvesseldensity,LVD）、上皮型钙黏蛋白（E．cadherin,E．cad）、β-连环蛋白（β-catenin,β-cat）异常表达与胃癌转移的关系。方法：用SP免疫组化染色法,检测D2-40标记阳性LVD、E-cad及β-cat在84例胃癌组织、相应癌旁组织、20例正常胃组织中的表达水平并进行比较,同时分析3者的相关关系。结果：D2—40标记阳性LVD在癌旁组织中明显高于胃癌组织及正常胃组织（P〈0．05～0．01）,胃癌组织及癌旁组织存在E-cad及B．cat的异常表达。相关分析结果显示,胃癌癌旁组织D2．40标记阳性LVD增高与E．cad的异常表达相关（r=0．27,P〈0．05）,但与β-cat异常表达无明显的相关性（r=0．16,P〉0．05）。结论：胃癌组织中高密度的淋巴管主要集中于癌旁区,且与E—cad的异常表达有关,可能参与了胃癌淋巴结转移的发生。     

原发性肝细胞癌、肝硬化组织中颗粒酶B的研究

目的：探讨颗粒酶B（granzyme B，GrB）在原发性肝细胞癌（HCC）、癌旁、肝硬化及正常肝组织中的表达，及GrB^＋淋巴细胞与HCC、肝硬化的关系。方法：HCC60例，单纯性肝硬化62例，正常肝组织23例，以免疫组化二步法进行GrB染色，对阳性细胞数进行定量分析。结果：①各组GrB^＋细胞平均数从高到低为：癌旁，HCC，正常肝，肝硬化组织；②HCC中GrB^＋细胞与组织学分级无明显关系：（P〉0．05）；③HCC中15月内有转移组的GrB^＋细胞数明显少于无转移组：（P〈0．01）；④HCC中GrB^＋细胞随着临床分期的发展有下降的趋势：（P〈0．05）；⑤以术前甲胎蛋白（AFP）阴、阳性分组（20μg／L为标准），AFP阴性组和AFP阳性组两组数据无明显差异：（P〉0．05）；⑥肝硬化和癌旁组中乙型肝炎表面抗原（HBsAg）阳性组GrB^＋细胞均多于阴性组：（P〈0．05）；HCC组GrB^＋细胞与HBsAg无密切相关：（P〉0．05）；⑦癌旁GrB^＋细胞与是否伴肝硬化无明显关系：（P〉0．05）。结论：临床上，随着HCC患者的病情恶化，GrB^＋细胞逐渐减少。GrB^＋细胞数量与HBsAg密切相关，与组织学分级、AFP和是否伴有肝硬化无关。GrB^＋细胞也可成为反映机体抗肿瘤特异性细胞免疫状态及判断患者预后的重要指标之一。     

肝细胞癌中Livin mRNA与SMAC蛋白的表达

目的通过检测凋亡抑制因子（Livin mRNA）和凋亡促进因子（SMAC蛋白）在人肝细胞癌组织中的表达及相关性,分析其与肝细胞癌转移、复发的关系。方法通过反转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测50例肝细胞癌和癌旁组织中Livin mRNA的表达;用免疫组化方法检测50例肝细胞癌和癌旁组织中SMAC蛋白表达水平。结果50例肝细胞癌组织中SMAC阳性率明显低于癌旁组织（P〈0．05）。Livin mRNA和SMAC的表达与门脉癌栓、术后复发、肝外转移及肿瘤细胞分化密切相关（P〈0．05）;SMAC的表达还与临床分期密切相关（P〈0．05）。Livin mRNA表达与SMAC蛋白表达呈显著负相关（P〈0．05）。结论Livin mRNA的高表达及SMAC的失活可能在肝细胞癌的发生及进展中起着重要作用。     

趋化因子受体 CXCR7在原发性肝细胞肝癌中的表达及意义

【目的】探讨趋化因子受体 CXCR7在原发性肝细胞肝癌（PHC）中的表达情况及其临床意义。【方法】应用组织芯片和免疫组化法检测35对肝癌、癌旁组织和6例正常肝组织中 CXCR7的表达,并分析其表达与肝癌临床病理特征及预后的相关性。【结果】CXCR7在 35例 PHC 患者组织中的阳性表达率为88．6％（31／35）,显著高于配对癌旁肝组织37．14％（13／35）以及正常肝组织0（0／6）;CXCR7的高表达与 PHC 组织学分型、临床分期、淋巴结转移和血清 AFP 含量呈正相关（ P ＜0．05）,与其他临床指标无相关性（ P ＞0．05）;CXCR7阳性表达患者的中位生存时间相对于阴性表达患者均较短,且差异具有统计学意义（ P ＝0．001）。【结论】CXCR7在 PHC 患者中的阳性表达情况与临床预后密切相关,并且可分别作为独立的预测 PHC 患者预后的指标。     

赖氨酰氧化酶在肝细胞癌中的表达及其与血管内皮生长因子的关系

目的探讨赖氨酰氧化酶（lysyl oxidase,LOX）在肝细胞癌（HCC）的表达及其与侵袭转移的关系。方法采用免疫组织化学法检测LOX在HCC组织、癌旁肝组织和正常肝组织中的表达,分析其与HCC临床病理特征和血管内皮生长因子（VEGF）蛋白之间的关系。结果 LOX在HCC、癌旁组织和正常肝组织中的阳性表达率分别为59.0%、88.9%和94.7%,LOX在HCC中的表达显著低于癌旁和正常肝组织（P〈0.01）;LOX蛋白阳性表达率随肿瘤分化程度的降低、数目增多、周围组织器官受侵、远处器官转移而显著降低（P〈0.05）;在HCC中,LOX的表达与VEGF表达呈显著负相关（rs=-0.313,P〈0.05）。结论 LOX蛋白表达下调或缺失与HCC发生、发展密切相关,LOX蛋白表达下调或缺失伴随VEGF表达升高可以联合促进HCC的生长、转移。     

PTEN基因与肝细胞癌发生、发展、侵袭转移关系的研究

目的：探讨PTEN基因与肝细胞癌发生、发展、侵袭转移的关系，及其临床意义。材料与方法：肝细胞癌手术切除标本46例，2例外伤性肝破裂3例肝血管瘤周围正常肝组织手术切取标本作为正常对照。采用免疫组化SABC法染色检测。结果：5例正常肝组织，4例阳性表达，阳性率为80％。HCC患者PTEN表达总阳性率为65．2％（30／46），癌旁组织中阳性率为90．9％（30／33）（P〈0．05），PTEN表达与患者年龄，性别，AFP是否阳性．HBsAg是否阳性，肿瘤的大小无关（P〉0．05）。PTEN阳性表达与肝细胞癌病理分级，包膜的有无及癌栓的有无关系密切。其中高分化组（Ⅰ＋Ⅱ级）阳性率为88％（22／25），低分化组（Ⅲ＋Ⅳ级）阳性率为47．6％（10／21）。（P〈0．05），包膜完整者阳性率为88．2％（15／17）。无或包膜不完整者，阳性率为68．7％（17／29），有癌栓者38．4％（5／13），无癌栓者80．1％（27／33）（P〈0．05）。