ITS2和psbA-trnH序列对人参属常见药用植物的DNA分子鉴定研究

目的 评价两种DNA条形码候选区对常见人参属药用植物品种的鉴别能力.方法 选择ITS2和psbA-trnH序列扩增并测序,运用最大简约法(maximum parsimony,MP)、非加权分组平均法(unweighted group average method,UPGMA)和最大似然法(maximum likelih...     

基于DNA条形码序列分析的5种菖蒲属药用植物鉴定

目的构建菖蒲属药用植物的鉴别方法。方法采用DNA条形码序列技术,对5种菖蒲属药用植物的4条候选DNA条形码序列(ITS2、rbc L、mat K、psb A-trn H)进行PCR扩增和测序,比较各序列的扩增和测序效率,对比分析种内、种间的遗传变异、分析barcoding Gap并构建聚类分析树。结果 4条候选DNA条形码序列PCR扩增和测序效率均为100%,ITS2序列对菖蒲属药用植物的鉴定成功率最高。结论基于ITS2序列的DNA条形码技术可以鉴定菖蒲属药用植物。     

基于叶绿体psbA-trnH基因间区序列鉴定肉苁蓉属植物

肉苁蓉的干燥肉质茎是常用中药材, 药典收录基源植物有管花肉苁蓉和荒漠肉苁蓉两种, 但是市场上经常会与黄花列当、草苁蓉、盐生肉苁蓉及沙苁蓉等混用。本文对不同类群肉苁蓉及混淆品的叶绿体psbA-trnH基因间区进行PCR扩增并测序, 获得了该区间的完整序列, 用K-2P法建立了系统进化树, 聚类结果与形态分类相符。所得结果显示, psbA-trnH片段序列在肉苁蓉及混淆品种间存在丰富的变异, 肉苁蓉属各种的种间遗传距离从0.077% 到0.743%, 种内遗传距离从0% 到0.007%, 种内和种间存在明显的“barcoding gap”。肉苁蓉属各种与黄花列当的遗传距离为0.979% 至1.149%, 与草苁蓉的遗传距离为1.066% 至1.224%。研究结果表明psbA-trnH基因间区可以作为条形码来鉴定肉苁蓉及其混淆品。     

重楼属药用植物DNA条形码鉴定研究

为评价DNA条形码候选序列对重楼属药用植物的鉴定作用, 探讨重楼属药用植物鉴定新方法, 本研究对重楼属11个物种17份样品的psbA-trnH、rpoB、rpoC1、rbcL、matK和核ITS2序列进行PCR扩增和测序, 比较各序列扩增和测序效率、种内和种间变异, 进行barcoding gap分析, 采用BLAST1和Nearest Distance方法评价不同序列的鉴定能力。结果显示, ITS2序列在所研究的重楼属药用植物中的扩增和测序效率均为100%, 其种内种间变异、barcoding gap与其他DNA条形码候选序列相比具有明显的优势, ITS2序列在重楼属中的鉴定成功率达到100%, 而生物条形码协会 (CBOL) 植物工作组推荐的matK和rbcL序列的鉴定成功率分别为52.9% 和5.9%, 二者联合鉴定能力没有提高, 对于ITS2序列扩大至29个物种67份样品依然具有100%的鉴定成功率。实验结果表明, ITS2序列能够准确鉴定重楼属药用植物, 可以作为潜在的药用植物通用条形码序列。     

陕西关中野生商陆资源的ITS2和psbA-trnH条形码序列研究

为探讨DNA条形码在陕西关中野生商陆资源中的鉴定作用,本研究采用通用引物ITS2和psbA-trnH对29份商陆样品DNA进行PCR扩增和测序,用Codon CodeA-ligner V3.0进行序列拼接和校对,随后进行BLAST比对鉴定分析;同时运用MEGA 6.0分析序列特征、K2P遗传距离及种内或种间变异,并构建系统进化树,评价两对引物对该区域商陆及其混伪品的鉴别能力。研究结果表明, ITS2和psbA-trnH序列的PCR扩增和测序成功率均为100%; NJ系统进化树显示ITS2和psbA-trnH序列均可明显将所有样本分别聚为商陆、垂序商陆并与其同属近源种鄂西商陆、日本商陆及两种混伪品各自聚为不同分支; ITS2序列在种间遗传距离上较psbA-trnH有一定优势。ITS2和psbA-trnH序列均可作为DNA条形码对商陆及其混伪品进行识别和鉴定,为商陆资源品种现状与分布研究及合理开发利用提供理论依据。     

基于DNA条形码ITS2序列对阿魏属药用植物的鉴别研究

目的:建立一种快速、准确和标准化的中药材阿魏属植物DNA条形码鉴别方法。方法:提取新疆阿魏(Ferula sinkiangensis K.M.Shen)和阜康阿魏(Ferula fukanensis K.M.Shen)基因组DNA,扩增ITS2序列并测序;运用分析相似性搜索法,下载Gen Bank数据库中阿魏属植物13个物种26个样本基因ITS2序列并进行比对分析,计算种间种内遗传距离并构建系统进化树进行聚类分析。结果:通过计算,15个物种遗传距离分布范围为0.009~0.230,平均遗传距离为0.018;聚类分析结果显示DNA条形码ITS2序列能够将阿魏属32种植物聚为不同的类。结论:建立的阿魏药材DNA条形码ITS2序列鉴别方法可准确、快速地鉴别出阿魏属药材的正品和混淆品。     

含岩白菜素药用植物DNA条形码的鉴定研究

目的 评价以ITS2和psbA-trnH序列作为DNA条形码对含有岩白菜素药用植物的鉴定.方法 采集了 9份含有岩白菜素和13份不含岩白菜素的药用植物样本,扩增所有样品的ITS2与psbA-trnH序列,并从GenBank下载含岩白菜素和不含岩白菜素药用植物的ITS2与psbA-trnH序列,计算种间和种内遗传距离,并...     

鼠尾草属药用植物及其近缘种的ITS序列分析

采用分子系统学方法分析鼠尾草属药用植物及其近缘种的遗传多样性，为准确进行基源鉴定、阐明本属内的种间关系及发现新的药用资源提供分子证据。本文从野外采集的27个鼠尾草属植物叶片样品中分离提取DNA，PCR扩增ITS区及5.8S rDNA完整序列并测序，采用Mega 3.1软件进行系统学分析。27个鼠尾草样品的ITS及5.8S rDNA区序列全长为612～617 bp，邻接法(neighbor-Joining)构建的系统发生树部分支持了形态学的属下划分，但对部分种的系统位置特别是三叶鼠尾草和黄花鼠尾草两个亚种的处理上与形态学划分存在明显的分歧。序列分析显示5.8S rDNA序列相当保守，而ITS区段则在亚属间差异明显，且原产我国的该属植物与欧美引进种明显具有不同起源。ITS系统树对于亚属和组的处理较为合理，但对组下的划分则表现出了信息量不足，需要其他相关证据的支持。ITS分析支持了丹参组内其他近缘种作为丹参类药材替代资源的合理性，同时也揭示了甘西鼠尾类高山丹参在遗传上与丹参类药材的显著不同。     

ITS2+psbA-trnH复合序列鉴定徐长卿、白薇和白前

目的：建立以ITS2+psbA-trnH复合序列鉴定徐长卿、白薇和白前及其同属近缘混伪品的DNA条形码鉴定方法。方法：搜集徐长卿、白薇、白前及其近源混伪品,采用改良的CTAB法提取DNA,通过实验分别获得ITS2和psbA-trnH序列,将同一样本的ITS2序列与psbA-trnH序列整合得到43条ITS2+psbA-trnH复合序列,从GenBank数据库中下载来源于同一样本的ITS2序列与psbA-trnH序列整合得到14条ITS2+psbA-trnH 网上复合序列,用MEGA 6.05软件分析徐长卿、白薇、白前及其近源混伪品的复合序列变异位点,计算种内、种间的K2P距离,并构建NJ系统聚类树。结果：徐长卿、白薇和白前药材ITS2+psbA-trnH复合序列比对后产生17个变异位点;徐长卿、白薇和白前基源物种种内最大K2P距离均小于其与混伪品的种间最小K2P距离;系统NJ树能准确将徐长卿白薇和白前及其近缘混伪品。结论：该研究建立了应用ITS2+psbA-trnH复合序列鉴定徐长卿、白薇、白前及其近缘混伪品的DNA条形码鉴定方法。     

论大黄属和酸模属在化学成分上的内在联系和差异

酸模属的多种植物在民间习称“土大黄”,与大黄形态相似,因此常被当作其伪品或混淆品处理。大黄为临床常用中药,国内外对其研究颇多,关注度较高。而土大黄为民间常用草药,目前对其研究相对较少。虽然在化学成分上两者有一定重叠,但是仍存在许多特异性成分。本文对大黄属和酸模属植物近年的化学成分研究进行综述和比较,以期为酸模属植物进一步的开发利用提供科学依据。     

柴胡属药用植物的鉴别研究

目前柴胡市场使用情况较为混乱,地方标准收载的柴胡药材也比较复杂,文章拟从传统的鉴别方法中对常用的柴胡药材进行比较分析,为柴胡的初步鉴定提供参考依据。     

不同品种丁香叶中芦丁及丁香苦苷的含量测定

目的:建立多波长高效液相色谱法(HPLC)同时测定不同品种丁香叶中芦丁及丁香苦苷的含量。方法:采用AgilentZORBAXEclipseXDB-C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水(20∶80),流速为1.0mL/min,定性检测波长200～400nm,定量检测波长255nm和225nm,柱温为室温;利用化学计量学中的光谱相关色谱法分析确认定量色谱峰。结果:芦丁和丁香苦苷在20min内被很好地分离,经对照品比较及光谱分析得到确认。芦丁、丁香苦苷分别在0.125～2.0μg和0.625～10.0μg范围内与色谱峰面积的线性关系良好(r=0.9999)。平均回收率分别为99.9%、99.4%,RSD分别为1.4%、1.1%。结论:不同品种丁香叶中芦丁和丁香苦苷的含量有较大的差别,建立的含量测定方法可用于丁香叶中芦丁及丁香苦苷的同时定量分析。     

葛属植物中3种异黄酮成分分析

目的 :测定 7种葛属植物根中异黄酮成分的含量。方法 :采用高效液相色谱法。色谱柱为HypersilODS2(15 0mm× 4 6mm ,5 μm) ;检测波长 2 5 0nm ;葛根素、大豆苷、大豆苷元的加样回收率±RSD分别为 (10 5 7± 4 6 ) % ,(10 5 4± 6 9) % ,(10 4 5± 9 2 ) %。结果 :葛属植物中 3种异黄酮成分含量差异较大 ,野葛、粉葛和峨嵋葛中含有的葛根素和大豆苷比其它几种葛属植物高 ,野葛中葛根素的含量最高 ;从液相色谱图中观察到不同产地野葛的图谱与其它种的葛属植物有明显区别。结论 :异黄酮成分可作为评价葛属植物质量的参考依据     

安泰巴布剂中当归、独活、羌活等药味的鉴别研究

目的 建立安泰巴布剂中主要药味的鉴别方法.方法 采用薄层色谱法(TLC)鉴别制剂中当归、独活、羌活等主要药味,并进行方法耐用性考察.结果 薄层色谱中当归、独活、羌活、丁香的特征斑点清晰,分离度好,阴性对照无干扰.结论 上述鉴别方法准确可靠,耐用性良好,可有效控制安泰巴布剂质量.     

RP—HPLC测定几种闽产杜鹃中槲皮素的含量

目的:建立反相高效液相色谱法测定毛果杜鹃、岭南杜鹃、乳源杜鹃中槲皮素的含量。方法:用Hypersil C_(18)(250mm×4.6 mm,10μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.1％磷酸(36:64),流速为1.0 mL·min~(-1),检测波长为360 nm。结果:槲皮素在0.148 8～0.744 0 μg范围内呈良好的线性关系,回归方程为Y=2 870.5X -4.181(r=1.000 0),平均回收率为98.62％。结论:本法简便,快速,灵敏,准确,重现性好,可作为含量测定方法。     

DNA分子标记技术在中药鉴定学中的应用

DNA分子标记技术是近年来发展起来的一种新的分子生物学技术.本文介绍了几种DNA分子标记技术的基本原理和特点,概述了近年来该技术在药用植物鉴别中的应用进展,并展望了其应用前景.