黄芪-当归配伍对家兔血管内膜增生、平滑肌细胞表型转化和增殖的影响

目的 探讨黄芪-当归配伍对家兔血管内膜增生、平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMC)表型转化和增殖的影响及作用机制.方法 新西兰兔随机分为对照组、模型组、黄芪(1 g/kg)组、当归(1 g/kg)组、黄芪-当归(1∶1)组、黄芪-当归(1∶5)组、黄芪-当归(5∶1)组和阿托伐...     

柿叶黄酮对肿瘤坏死因子α诱导大鼠血管平滑肌细胞凋亡信号调节激酶1表达的影响

目的:观察柿叶黄酮对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的大鼠血管平滑肌细胞凋亡信号调节激酶1的影响。方法:体外培养SD大鼠血管平滑肌细胞,应用柿叶黄酮与TNF-α共同进行作用并设立对照进行比较,采用非放射性的MTS/PES法确定血管平滑肌细胞的增殖状态。利用Western blotting蛋白免疫印迹法测定血管平滑肌细胞凋亡信号调节激酶1蛋白的表达情况。结果:各组的细胞增殖率分别为对照组0.817±0.074;TNF-α20 ng/ml组1.865±0.093;柿叶黄酮50μg/ml组0.905±0.044;TNF-α20 ng/ml联用柿叶黄酮50μg/ml组1.247±0.061。统计分析显示TNF-α20 ng/ml能明显刺激血管平滑肌细胞的增殖。柿叶黄酮单独作用对血管平滑肌细胞细胞增殖率无影响;柿叶黄酮对TNF-α诱导血管平滑肌细胞增于有明显的抑制作用,TNF-α对血管平滑肌细胞的凋亡信号调节激酶1蛋白的表达有显著的增强作用,这种作用部分可以被柿叶黄酮所抑制。结论:柿叶黄酮能明显抑制由TNF-α诱导的大鼠血管平滑肌细胞凋亡信号调节激酶1蛋白的表达。     

中药对体外血管平滑肌细胞增殖与凋亡的影响

血管平滑肌细胞(VSMC)增殖是经皮腔内冠状动脉成形术(PTCA)后再狭窄、动脉粥样硬化(AS)、高血压病、肺动脉高压等疾病发生发展的重要病理基础.其中,PTCA后再狭窄以内膜下平滑肌增殖为其主要特征.     

中药调控血管平滑肌细胞凋亡的作用机制研究进展

目的:阐明中药调控血管平滑肌细胞凋亡的作用机制研究现状。方法:查阅国内外近年来相关资料35篇并对其进行汇总、分析、综述。结果:多种中药可对血管平滑肌细胞在基因、蛋白等不同分子水平产生调控作用,抑制或促进其凋亡,从而逆转或改变其相应病理状态。结论:中药合理调控血管平滑肌细胞凋亡作用确切,具有明显的优势,对其机制进行分子生物学的深入研究有着广阔的前景。     

平滑肌细胞凋亡相关蛋白表达与中药的作用研究进展

细胞凋亡 (ａｐｏｐｔｏｓｉｓ)是肌体生长发育、细胞分化和病理状态中细胞自主性死亡过程。19 72年病理学家Ｋｅｒｒ[1 ] 等通过对不同类型的细胞死亡进行比较 ,发现了另一种区别于坏死的死亡形式 ,即程序性死亡 (Ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄｃｅｌｌｄｅａｔｈ ,ＰＣＤ)又称细胞凋亡。它是细胞在基因调控下发生的主动死亡过程。细胞死亡 (凋亡 )与增殖过程的动态平衡调节着肌体的生长发育及进化 ,维持着细胞群体数量的自身稳定和内环境的相对恒定。同时对维持血管结构的稳定也具有重要意义。1　平滑肌细胞凋亡与动脉粥样硬化血管平滑肌细胞 (Ｖ…     

丹参素对氧化低密度脂蛋白致血管平滑肌细胞凋亡的影响

目的 探讨丹参素( DSS)对氧化低密度脂蛋白(ox - LDL)致血管平滑肌细胞(VSMCs)凋亡的影响和机制.方法 采用反复贴块法培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞原代培养成功后,采用第3～10代细胞应用于实验.收集培养的细胞种植在6孔板中的4个孔中,分为4组:①正常组;②ox - LDL(100 mg/L)干预组;③ox - LDL(1 00 mg/L)+ DSS( 50 mg/L)干预组;④ox - LDL(100mg/L)+ DSS(100 mg/L)干预组,作用12h后,收集每孔细胞,用流式细胞仪检测细胞凋亡.结果 丹参素可明显升高ox - LDL引起的凋亡指数升高.结论 丹参素可促进ox - LDL致血管平滑肌细胞凋亡.     

黄芪当归主要活性成分抗血管平滑肌细胞增殖和迁移的作用

目的：研究黄芪和当归6种主要活性成分芒柄花素、黄芪皂苷Ⅰ、黄芪甲苷、毛蕊异黄酮、阿魏酸、毛蕊异黄酮苷单用及其配伍对大鼠血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖与迁移的影响。方法：以血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)诱导VSMCs增殖,随机分为对照组、模型组、各成分单用组、各成分剔除组、六药配伍组。CCK-8检测VSMCs增殖,流式细胞术检测细胞周期,划痕实验检测细胞迁移能力,免疫荧光法检测增殖细胞核抗原（PCNA）、平滑肌α肌动蛋白（α-SMA）、骨桥蛋白（OPN）的表达。结果：各成分单用组（除芒柄花素单用组外）、各成分剔除组、六药配伍组均可显著抑制VSMCs增殖、细胞周期转化、PCNA的表达（P<0.05,P<0.01）。与六药配伍组比较,黄芪皂苷Ⅰ剔除组、黄芪甲苷剔除组、毛蕊异黄酮剔除组细胞增殖抑制率显著降低,增殖指数（PI）、PCNA蛋白表达显著升高（P<0.05,P<0.01）;单用黄芪皂苷Ⅰ组、单用毛蕊异黄酮组、单用阿魏酸组、各成分剔除组、六药配伍组均可使细胞迁移降低,α-SMA表达上调,OPN蛋白表达下调（P<0.01）,单用毛蕊异黄酮苷组可上调...     

益气健脾中药对血管平滑肌细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响

目的：探讨益气健脾中药血清体外诱导血管平滑肌细胞凋亡的作用及其分子机制。方法：采用缺口末端标记（terminal deoxynucleotidyl transferase mediated dUTP nicked labeling,TUNEL)分析、透射电镜、流式细胞仪分析、DNA电泳分析检测细胞凋亡；应用Northern印迹检测bcl-2、c-myc和p53基因表达活性。结果：经中药血清处理的血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cell,VSMC)，可出现典型的凋亡特征，DNA电泳呈梯状图谱；流式细胞仪分析显示G0／G1期细胞阻滞现象，亚二倍体凋亡细胞增多，出现典型的凋亡峰，细胞凋亡率与中药血清浓度具有量效关系。杂交结果提示，30％中药血清可抑制抗凋亡基因bcl-2的表达，上调促凋亡基因c-myc和p3 mRNA水平。结论：益气健脾中药通过影响凋亡相关基因bcl-2、c-myc和p53的表达活性而诱导VSMC凋亡。     

当归芍药散对实验性动脉粥样硬化家兔血脂及主动脉平滑肌细胞凋亡的影响

目的：观察当归芍药散(以下简称“归芍散”)对实验性动脉粥样硬化(AS)的作用，并初步探讨其机制。方法：采用高脂饲料喂饲法复制实验性AS家兔模型，观察归芍散对其血脂、脂蛋白含量水平，主动脉病理形态学改变及细胞凋亡率、增殖率、Bax和Bel-2蛋白表达量的影响。结果：归芍散能明显降低血清总胆固醇(TC)，甘油三脂(TG)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-c)含量水平，升高高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)含量；抑制主动脉内膜脂质沉着、泡沫细胞的产生和堆积；能有效促进早期实验性AS家兔主动脉平滑肌细胞(SMC)的凋亡，抑制其增殖。结论：归芍散能有效防治AS，其机理可能与有效调整血脂、调控平滑肌细胞凋亡密切相关。     

三七总皂甙对平滑肌细胞凋亡及凋亡调控基因的影响

目的:探讨血管紧张素Ⅱ在不同浓度和不同作用时间下对血管平滑肌细胞凋亡及凋亡调控基因表达的作用及三七总皂甙对其影响.方法:采用流式细胞技术测定了在血管紧张素Ⅱ不同浓度和不同作用时间下血管平滑肌细胞凋亡率及凋亡调控基因Fas、Bcl-2表达的变化和三七总皂甙对其影响.结果:血管紧张素Ⅱ对血管平滑肌细胞凋亡和凋亡调控基因表达有较明显的诱导作用;三七总皂甙可抑制AngⅡ作用,对细胞凋亡有一定的影响,同时可影响凋亡调控基因的表达.结论:血管紧张素Ⅱ具有一定促进血管平滑肌细胞凋亡作用和调节凋亡调控基因表达的作用,尤其在大剂量作用较明显;三七总皂甙可明显抑制AngⅡ对血管平滑肌细胞的作用.     

黄芪与当归在肾脏微血管病变中的治疗应用前景

肾脏组织局部微血管病变促进了肾小球硬化和间质纤维化的进展。现代药理学研究表明中药黄芪与当归能够通过多种途径改善微血管病变,包括增加局部组织的血流灌注以减轻组织的缺氧性损伤、促进缺血再灌注后肾血流量和肾小球滤过率的恢复、纠正一氧化氮/血管紧张素等血管活性物质的失衡、抑制细胞内钙的释放和促进血管表皮生长因子表达及血管内皮细胞DNA合成以改善内皮细胞功能。提示黄芪、当归可能通过上述机制起到延缓肾脏疾病进展作用。     

黄芪、当归及其组方促血管内皮细胞增殖作用的研究

目的：探讨黄芪、当归及其组方对人脐静脉内皮细胞增殖和细胞周期的影响。方法：以离体培养的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,,HUVEC)为模型,采用MTT法测定细胞增殖、流式细胞仪分析其细胞周期、SABC法检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达,对黄芪、当归及其组方的促HUVEC增殖作用进行了观察研究。结果：黄芪、当归单用或合用均可促进内皮细胞生长,增加细胞周期中S期细胞的数目,尤以复方作用明显(P<0．05或P<0．001)。同时,各给药组均能上调VEGF的表达,而对照组VEGF仅有微弱表达(P<0．05或P<0．01)。结论：黄芪、当归有促进血管内皮细胞增殖及DNA合成的作用,两药配伍应用时具有协同效应,提示在缺血心肌新生血管的发生和发展中可能具有一定作用。     

昆明山海棠提取物对血管平滑肌细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨昆明山海棠提取物(THW-4)对离体血管平滑肌细胞(VSMC)增殖及凋亡的影响。方法培养家兔主动脉平滑肌细胞,加入不同浓度的THW-4进行处理,用MTT法测定细胞生长曲线,以Annexin V-FITC／PI双标记、透射电镜、原位末端标记法检测细胞凋亡。结果THW-4可以明显抑制VSMC增殖,呈剂量和时间依赖性,作用48h的半有效抑制浓度(IC50)为15．6μg／L;VSMC在含10～100μg／L THW-4的培养液中孵育56h,可检测到细胞早期凋亡,且凋亡率随THW-4浓度增加而升高;延长孵育时间至72h,透射电镜下可观察到典型的凋亡细胞形态学改变,原位末端标记法显示DNA片段化增多,有核碎裂、固缩等改变;细胞周期时相分布显示THW-4主要阻滞VSMC于G2/M期。结论THW-4能有效抑制体外培养的VSMC增殖及诱导其凋亡,提示THW-4可能会作为防治血管成形术后再狭窄的候选药物。     

当归注射液、黄芪注射液不同配比促鸡胚绒毛尿囊膜模型血管生成的实验研究

目的:探讨当归、黄芪注射液不同配比对鸡胚绒毛尿囊膜(chorioallantoic membrane,CAM)血管生成的影响。方法:种蛋在37.8℃孵育7 d后制备CAM模型,当归、黄芪注射液不同配比滴加于CAM表面的载体上,继续孵育3 d,观察鸡胚存活状况,然后制备鸡胚CAM标本,解剖显微镜下计数新生毛细血管数目。结果:当归、黄芪注射液不同配比均具有促进鸡胚CAM血管生成作用,与生理盐水对照组相比有显著性差异(P&lt;0.05),除当归黄芪1∶5,其他各组药效低于表皮生长因子(EGF)(P&lt;0.05)。结论:当归、黄芪注射液不同配比具有显著促进鸡胚CAM血管生成作用,其可能的机制是血管内皮细胞的增殖与迁移。     

淫羊藿苷对大鼠颈动脉损伤后新生内膜增生和平滑肌细胞凋亡的影响

目的:研究淫羊藿苷对大鼠颈动脉损伤后新生内膜增生和平滑肌细胞凋亡的影响。方法:大鼠44只随机分为正常对照组8只,淫羊藿苷60 mg.kg-1组、淫羊藿苷120 mg.kg-1组和模型组各12只。后3组建立鼠颈动脉球囊损伤术后狭窄模型,淫羊藿苷组术前6 d开始ig至实验结束;模型组以等体积生理盐水ig。术后14 d和28 d分批处死动物。取各组动物颈动脉损伤段,常规制片,HE染色,采用计算机图像分析系统测量内膜面积和中膜面积,并计算新生内膜/中膜面积比(I/M);采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的三磷酸脱氧尿嘧啶缺口末端标记法(TUNEL)检测平滑肌细胞凋亡。结果:给药两组术后14,28 d,损伤部位血管内膜、中膜面积明显小于模型组,差异非常显著(P0.01);球囊损伤后14,28 d,各手术组新生内膜区均出现明显的凋亡细胞,其中淫羊藿苷组较模型组细胞凋亡率显著增高(P0.01),结论:淫羊藿苷可能通过促进平滑肌细胞的凋亡而减轻球囊损伤后新生内膜的增生。     

淫羊藿甙对家兔血管平滑肌细胞凋亡相关基因表达水平的影响

目的：观察葡萄糖调节蛋白基因78（GRP78）在动脉粥样硬化组织中的表达,探讨淫羊藿甙防治动脉粥样硬化的可能机制。方法：淫羊藿甙诱导培养的兔血管平滑肌细胞凋亡,组织原位杂交观察凋亡基因GRP78在兔斑块组织中的表达水平。结果：兔斑块组织原位杂交显示该基因片段在动脉粥样硬化斑块组织中表达水平增高。结论：葡萄糖调节蛋白78基因在AS细胞质中表达增高,可能是淫羊藿甙作用靶点之一,如上调该基因促进则可促进平滑肌细胞凋亡,将对动脉粥样硬化治疗产生一定作用。     

川芎嗪对原代培养血管平滑肌细胞胶原基因表达的影响

为了观察川芎嗪对冠状动脉成形术（ＰＴＣＡ）后再狭窄的治疗作用及其活血化瘀的可能机制，我们用４０μｇ川芎嗪来处理培养血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣｓ），应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交的方法观察了川芎嗪对培养ＶＳＭＣｓ前胶原α１（Ｉ）、α１（Ⅲ）基因转录的影响，发现川芎嗪能明显抑制α１（Ｉ）、α１（Ⅲ）基因的转录。     

藿酮胶囊诱导人体血管平滑肌细胞凋亡的实验研究

目的：从细胞凋亡水平研究藿酮胶囊抗动脉样硬化的作用机理。方法：实验培养人胚胎胸主动脉平滑肌细胞,用白细胞介素－１（ＩＬ－１）刺激平滑肌细胞建立血管平滑肌细胞（ｖａｓｃｕｌａｒ ｓｍｏｏｔｈ ｍｕｓｃｌｅ ｃｅｌｌ,ＶＳＭＣ）增生模型,从细胞形态学,ＤＮＡ凝胶电泳,流式细胞术３个方面观察用藿酮胶囊诱导增生的ＶＳＭＣ凋亡现象。结果：透射电镜观察发现：藿酮胶囊处理的ＶＳＭＣ出现细胞皱缩,染色质凝集后细胞     

冠通方及其拆方含药血清对大鼠血管平滑肌细胞凋亡的影响

目的:通过冠通方及其拆方含药血清对血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖及凋亡的影响研究,探讨冠通方防治再狭窄的部分作用机制.方法:每组SD大鼠每天给药剂量分别为冠通方组23.75 g·kg-1,活血祛瘀组8.75 g·kg-1,益气养阴组5 g·kg-1,清热化痰组10 g'kg-1,连续给药7d,制备冠通方及其各拆方含药血清,将大鼠VSMC分为6组(每组6个复孔),空白组加5％正常大鼠血清,模型组加5％正常大鼠血清及10-6mol· L-1的AngⅡ,冠通方及各拆方组在每组分别加入5％含药血清及10-6mol·L-1的AngⅡ,孵育48 h后,采用流式细胞仪检测细胞凋亡率;结果:血管平滑肌细胞模型组早期细胞凋亡率(0.36 ±0.14)％,晚期细胞凋亡率(1.02±0.86)％与空白对照组早期细胞凋亡率(2.22±0.43)％,晚期细胞凋亡率(1.29±0.57)％相比,细胞凋亡率均明显降低(P＜0.01).与模型组相比早期、晚期细胞凋亡率冠通方组为(23.4±0.95)％,(9.1±0.69)％、活血祛瘀组为(8.08±0.54)％,(18.6±1.48)％、益气养阴组(16.9±0.79)％,(4.38±0.90)％、清热化痰组(5.9±0.99)％,(11.5±0.71)％,早期及晚期凋亡率均明显升高(P＜0.05);结论:冠通方抑制VSMC的增殖与影响其周期、诱导其凋亡有关;且冠通方组作用优于其拆方组.