灵芝孢子油对小鼠T淋巴细胞功能影响浅释

[目的]观察灵芝孢子油对小鼠T淋巴细胞功能的影响。[方法]测定灵芝孢子油对小鼠T淋巴细胞亚群的含量变化、IL-2的活性和ConA诱导的脾淋巴细胞的增殖反应。[结果]灵芝孢子油可显著升高正常小鼠外周血CD4+T细胞比例,降低CD8+T细胞比例,升高CD4+/CD8+比值。可以促进正常小鼠诱生IL-2。促进ConA诱导的脾T淋巴细胞增殖反应。[结论]灵芝孢子油能促进小鼠T淋巴细胞的免疫功能。     

灵芝三萜药理学作用研究进展

主要介绍了近5年来灵芝三萜的药理学作用的研究进展,包括抗肿瘤、抗微生物、降血脂、抗炎症反应,免疫调节等作用.使灵芝三萜的药理学作用逐渐明确,但灵芝三萜类化合物的成分和药理作用的研究仍需进一步深入.     

灵芝三萜与灵芝多糖抗肿瘤作用及其机制研究进展

随着人口老龄化程度的加剧,肿瘤患者的发病率和死亡率持续上升。目前肿瘤的治疗方法包括手术、化疗、放疗、靶向治疗、免疫治疗,然而大部分化疗药物可引起严重的副作用和耐药性。因此中医药治疗作为一种替代疗法可以有效地改善肿瘤患者的临床症状,提高生活质量,抑制或稳定肿瘤的发展,延长患者生存期限。由于中药具有良好的安全性,其抗癌潜力日益受到关注。灵芝是一种药用真菌,在我国有着两千多年的历史,是我国中草药宝库中的一个珍品。迄今为止,有许多研究已经提出了灵芝的抗癌特性。灵芝具有广泛的药理作用,如抗肿瘤、调节免疫、保肝、降血糖血脂、抗动脉粥样硬化、保护心脏、抗衰老等。灵芝的化学成分较为复杂,目前已知含有多糖、三萜类、生物碱、核苷类、氨基酸及各种微量元素,灵芝多糖和三萜类化合物的抗肿瘤机制主要通过诱导细胞凋亡、免疫调节、抗血管生成、阻滞细胞周期等来实现。已广泛应用于肺癌、肝癌、宫颈癌、前列腺癌、乳腺癌、结肠癌等多种肿瘤的辅助治疗。该文通过对近年来灵芝三萜和灵芝多糖的生物活性及作用机制的相关文献进行归纳汇总,重点综述其抗肿瘤作用及作用机制,以期为灵芝抗肿瘤的进一步开发利用提供参考和借鉴。     

灵芝中性三萜胶囊一般药理学研究

目的:观察灵芝三萜胶囊对动物神经、呼吸和心血管系统的影响。方法:灌胃给药后,旷野法观察灵芝三萜胶囊对小鼠自发活动的影响;金属棒法和倾斜板法观察灵芝三萜胶囊对小鼠机能协调功能的影响;采用入睡率和睡眠时间观察灵芝三萜胶囊与戊巴比妥钠联用对小鼠的睡眠等神经系统方面的影响;使用生理机能记录仪记录给药前后对麻醉大鼠的呼吸频率、血压、心率等呼吸、心血管系统方面的影响。结果:灵芝三萜胶囊(250~1000mg/kg)对小鼠的自主活动、机能协调功能、戊巴妥钠阈下催眠剂量及戊巴比妥钠睡眠时间均无明显的影响;灵芝三萜胶囊(125~500mg/kg)对麻醉大鼠的呼吸和心血管系统无影响。结论:灵芝三萜胶囊对动物的神经、呼吸和心血管系统均无明显的影响作用,在药效学有效剂量范围内有较高的安全性。     

5种中草药水提取液对灵芝三萜含量的影响

目的研究5种中草药水提取液对灵芝液体培养的菌丝体生物量和三萜含量的影响。方法在基本培养基中分别添加了终浓度为5%的中草药水提取液,液体培养4 d后,测定各灵芝菌丝的生物量和三萜含量。结果与结论中草药水提取液对菌丝体生物量均有促进作用,其中银杏促进作用最明显,增幅达27.7%,而生地最弱,增幅为4.6%;而生地水提取液对灵芝菌丝体的三萜含量有抑制作用,其余4种有促进作用,其中银杏增幅最高为17.1%。     

灵芝三萜的提取分离及总三萜的含量测定

目的研究灵芝三萜的最佳提取方法,并测定其总三萜的含量。方法采用正交实验方法,用硅胶柱进行总三萜分离,通过紫外-可见分光光度法测定总三萜含量。结果最佳提取方法为用5倍量95%乙醇回流提取3次,每次1.5 h;用30倍量硅胶装柱,以石油醚-乙酸乙酯(9:1和7:3)进行洗脱;经分离得到针状晶体Ⅰ和Ⅱ,测定该品种中灵芝总三萜含量为9.07%。结论本提取方法稳定可行,可作为灵芝三萜工业化生产的参考。     

灵芝三萜对小鼠脾脏树突状细胞增殖的影响

目的:观察灵芝三萜(Ganoderma Triterpene,GT)对小鼠脾脏树突状细胞(Dendritic cells,DC)增殖的影响.方法:采用MTT法,以细胞因子(GM-CSF IL-4)作比较,观察不同浓度GT以及细胞因子 不同浓度的GT对小鼠脾脏DC的增殖作用.结果:GT在实验浓度范围内(40～200μg/ml)均可显著刺激小鼠脾脏DC增殖,但其刺激强度均明显低于细胞因子组;GT 细胞因子,与对照组相比均有显著的促增殖作用,且明显高于细胞因子组.结论:GT不仅能直接促进小鼠脾脏DC的增殖,而且与细胞因子有显著的协同作用.     

灵芝总三萜酸含量测定方法的研究

我国灵芝科灵芝属药用真菌有80余种,常用的有赤芝、紫芝、松杉灵芝、树舌等。2005年版《中国药典》收载赤芝和紫芝为灵芝入药品种。灵芝作为传统中药已有几千年的历史,灵芝含有多种化学成分,近年来,随着人们对灵芝的广泛深入研究,已分离、纯化并阐明结构的三萜化合物112种[1],药理研究表明其具有护肝排毒、抗氧化、抗菌降糖、抗HIV病毒和疱疹病毒、抑制肿瘤细胞等[2]作用。关于灵芝三萜酸的含量测定仅有马林等[3]用HPLC法分离测....     

灵芝三萜对小鼠肝损伤的预防和保护作用研究

目的研究灵芝三萜对四氯化碳(CCl4)所致的小鼠肝损伤的预防和保护作用。方法将小鼠随机分为正常组,模型组,灵芝三萜高、中、低剂量组5组。小鼠皮下注射CCl4油溶液造模。以高、中、低剂量灵芝三萜进行灌胃,剂量分别为180,90,45 mg/kg。收集血清检测丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、谷氨酰转移酶(GGT)。结果与模型组相比灵芝三萜治疗组能够显著降低小鼠血清中AST、ALT、GGT。病理切片清楚地显示灵芝三萜能够显著减轻小鼠肝损伤的程度。结论灵芝三萜对CCl4所致的小鼠肝损伤有明显的保护作用。     

黄芩苷对T淋巴细胞增殖与活化的影响

目的:研究黄芩苷对小鼠T细胞体外活化和增殖的影响,并探讨其免疫调节机制。方法:以刀豆蛋白A(ConA)或佛波醇酯(PMA) 离子霉素(ionomycin,Ion)诱导小鼠淋巴细胞中T细胞增殖,用MTT法测定细胞增殖;利用ConA或PMA诱导T细胞激活,流式细胞术检测T细胞早期活化标志CD69分子与CD25分子表达情况。结果:在ConA或PMA Ion刺激48h后,小鼠淋巴细胞MTT吸光度显著高于对照组(P<0.01)。黄芩苷(10~40uM)显著降低了ConA或PMA Ion引起的MTT吸光度增加(P<0.01)。在ConA或PMA刺激18h后,小鼠T细胞CD69表达率显著提高(P<0.01),ConA或PMA刺激36小时后,T细胞CD25表达率显著提高(P<0.01),黄芩苷(10~40uM)能显著降低活化(P<0.01)。结论:黄芩苷可以显著抑制多克隆刺激剂ConA或佛波醇酯(PMA)介导的小鼠T细胞的活化和增殖。     

CD4^＋CD25^＋、CD4^＋CD69^＋和CD4^＋HLA-DR^＋T淋巴细胞的昼夜节律性变化

目的：探讨CD4＋CD25＋、CD4＋CD69＋和CD4＋HLA-DR＋T淋巴细胞的昼夜节律性变化情况。方法：10名健康男性志愿者,年龄24～30岁,平均25岁。预先在昼夜节律模式条件（16h-light：8h-dark cycle,LD）下生活1周：室温25±1oC,起床时间：7：00,睡眠时间（无光照期）：23：00～7：00,早餐时间：7：30～8：00,午餐时间：11：30～12：00,晚餐时间：5：00～6：00;睡眠时光照强度〈0.1 Lux;受试者自由饮水,无烟酒嗜好,日常活动和饮食成分基本一致。随后在一昼夜内每隔4h抽取各受试者外周血3ml,用流式细胞仪测定CD4＋CD25＋、CD4＋CD69＋和CD4＋HLA-DR＋T淋巴细胞占CD4＋T细胞的百分比,通过余弦法和Clock Lab软件获取节律参数,并经振幅检验分析是否存在昼夜节律。结果：在自然光制下,CD4＋CD25＋、CD4＋CD69＋和CD4＋HLA-DR＋T淋巴细胞的相对数量均呈现昼高夜低的节律性振荡（P〈0.05）,但各细胞相对数量变化的峰谷时点略有不同。结论：人外周血CD4＋CD25＋、CD4＋CD69＋和CD4＋HLA-DR＋T淋巴细胞的变化均存在着昼夜节律性特征。     

云芝糖肽对健康人外周血淋巴细胞的体外免疫调节作用

目的探讨云芝糖肽在体外对细胞免疫和体液免疫功能调节的可能机制。方法分离健康人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),分为PBMCs空白组、云芝糖肽20μL与PBMCs共培养组和云芝糖肽40μL与PBMCs共培养组,3组分别于培养24 h、48 h、72 h采用流式细胞仪检测淋巴细胞亚群的比例变化及T淋巴细胞表面CD3+/HLA-DR+、B淋巴细胞表面CD19+/CD69+表达情况,ELISA方法检测上清液中Ig G水平。结果云芝糖肽与PBMCs共培养组CD4+T细胞比例明显上升(P0.05),CD4+/CD8+细胞比值明显增高(P0.05);云芝糖肽20μL与PBMCs共培养组T细胞表面CD3+/HLA-DR+,72 h时表达水平高于24 h(P0.05);B细胞表面CD19+/CD69+的表达显示从培养24 h到48 h表达升高而在72 h表达减少的趋势;PBMCs与云芝糖肽共培养2组上清Ig G水平均明显高于PBMCs空白组(P均0.05)。结论云芝糖肽在体外能促进CD4+T细胞比例上升及CD8+T细胞比例下降,提高CD4+/CD8+比值,并增加Ig G分泌,具有一定的免疫调节作用。     

再生障碍性贫血CD3+CD25+和CD3+HLA-DR+T细胞亚群的表达与中医辨证分型的相关性研究

目的:应用统计学判别分析方法,筛选53项免疫学指标,建立再生障碍性贫血(Aplastic Anemia, AA)的中医证型判别方程,对AA中医证型客观量化. 方法:采用流式细胞技术,对AA患者34例,健康对照人群34名外周血的免疫学指标进行检测,同时对AA患者进行辨证分型,以判别分析方法建立AA辨证分型的判别方程,对中医证型进行客观量化.结果:(1)筛选出CD45RA 绝对值、CD3 CD25 绝对值、CD3 CD25 (%)、CD3 HLA-DR 绝对值和CD4 γδT(%)等5个最有意义的免疫指标,其判别总正确率为76.5%;(2)与健康对照相比,CD3 CD25 (%)在AA中医证型各组均具有显著性差异(P＜0.01,P＜0.05,P＜0.05),CD3 HLA-DR (%)在肾阳虚组有显著性差异(P＜0.01);(3)CD3 CD25 /CD3 HLA-DR 在预后不良的肾阴虚组偏高(＞1),在预后较好的肾阳虚组偏低(＜1),而在肾阴阳两虚组居中. 结论:(1)AA中医证型判别方程中有3个值与T细胞的活化指标CD25和HLA-DR相关,说明中医辨证分型确有其客观物质基础,同时反映出辨证分型与AA免疫学发病机制的内在联系;(2)CD3 CD25 /CD3 HLA-DR 在AA辨证分型各组中变化具有一定规律,对辨证分型及预后判断有一定意义.     

败丹黄液鼻腔灌洗对鼻窦炎术后鼻黏膜CD3、CD69的影响

目的观察败丹黄配方颗粒鼻腔灌洗对慢性鼻窦炎鼻内镜手术(FESS)术后的临床疗效及粘膜CD3、CD69的影响。方法对20例Ⅱ型慢性鼻窦炎伴鼻息肉患者,在鼻内镜手术后,采用鼻腔灌注抽吸装置进行鼻腔灌洗,患者随机分成两组,治疗组用败丹黄灌洗液,对照组用生理盐水,对病变组织进行流式细胞术检测,分别在术中及术后3月进行检测,观察鼻黏膜CD3、CD69水平变化。结果①治疗组有效率90.0%,对照组80.0%;治疗组治愈率60.0%,对照组50.0%。治疗组有效率及治愈率高于对照组,但无统计学差异。②鼻腔灌洗3个月后,治疗组CD3+细胞比例低于对照组;CD3+/CD69+细胞比例差异无统计学意义。③手术前后CD3+细胞、CD3+/CD69+细胞比例与患者症状、体征进行相关性分析,相关系数r绝对值均偏小,无统计学意义。结论①鼻腔灌洗对鼻窦炎围手术期治疗有积极意义,败丹黄灌洗液能提高鼻窦炎手术愈后疗效。②CD3、CD69能够反映患者鼻腔黏膜的炎症状态,患者术后术腔黏膜炎症长期存在,控制黏膜炎症需要一个长期的治疗过程。③手术后3月治疗组CD3+细胞比例下降,可能和败丹黄灌洗液抗炎作用有关。     

黄芪注射液和有氧运动对一次力竭运动大鼠外周血T淋巴细胞亚群的影响

目的:探讨黄芪注射液和有氧运动对一次力竭运动大鼠外周血T淋巴细胞亚群的影响,为改善力竭运动引起的免疫功能低下寻找有效的干预措施。方法:将50只大鼠随机均分为5组:对照组、一次性力竭运动组(取材前做一次力竭运动)、有氧运动+一次性力竭运动组(有氧运动4周后做一次力竭运动)、服药+一次性力竭运动组(灌服黄芪注射液4周后做一次力竭运动)、服药+有氧运动+一次性力竭运动组(灌服黄芪注射液并做有氧运动4周后做一次力竭运动),每组10只。经过4周的实验后,记录力竭运动时间,用流式细胞术测大鼠外周血CD4+和CD8+百分率,并测定实验前后大鼠体重。结果:一次力竭后大鼠CD4+T百分率和CD4+/CD8+比例显著降低(P0.01),CD8+T百分率显著升高(P0.01),黄芪注射液和有氧运动均预防T淋巴细胞亚群的这种变化;有氧+力竭组、服药+力竭组和服药+有氧+力竭组大鼠的力竭时间较一次力竭组大鼠长(P0.01),并且服药+有氧+力竭组大鼠的力竭时间较有氧+力竭组、服药+力竭组大鼠长(P0.01)。结论:黄芪注射液和有氧运动均可提高大鼠运动能力,可预防力竭运动大鼠免疫功能降低,两者配合在提高运动能力方面具有协同作用。     

黄芩苷对不同刺激剂诱导的小鼠T淋巴细胞体外活化的影响

目的分析黄芩苷对小鼠T淋巴细胞体外活化的影响,探讨其对免疫系统的作用,阐明其免疫抑制作用机制。方法无菌分离小鼠淋巴结,制备淋巴细胞悬液,以不同终质量浓度的黄芩苷预孵育淋巴细胞4 h,再以刀豆蛋白A(Con A)或佛波醇酯类多克隆刺激剂(PDB)诱导小鼠淋巴细胞活化,利用流式细胞术分别结合双色免疫荧光单克隆抗体染色技术检测CD3 T细胞早期活化标志CD69和中期活化标志CD25分子的表达。结果黄芩苷(10、20、30 mg/L)能明显抑制Con A或PDB诱导T细胞活化分子CD69和CD25的表达,且呈浓度依赖性。结论黄芩苷能够明显抑制多克隆刺激剂Con A或PDB诱导的T细胞早期和中期活化,且呈明显的量效关系。提示黄芩苷在T细胞活化过程的信号转导中有抑制作用,从而可以通过抑制T淋巴细胞的活化,发挥免疫抑制作用,是一种潜在的免疫抑制剂。     

云芝糖肽对人外周血淋巴细胞增殖和T细胞亚群变化的调节作用

用流式细胞仪技术和ＭＴＴ法观察了云芝糖肽对由植物血凝素诱导的人外周血淋巴细胞增殖和Ｔ细胞亚群变化的调节作用。结果表明,５０－１００μｇ／ｍＬＰＳＰ对经ＰＨＡ诱导的人ＰＢＬ增殖有显著的促进作用,该浓度的ＰＳＰ也能促进细胞从Ｇ１期进入Ｓ期,并可使ＣＯ＾４＋细胞明显升高,使ＣＤ＾＋４／ＣＤ＾＋细胞比例增加,提示ＰＳＰ具有免疫促进作用。