宫颈癌中PTEN和Bcl-2的表达及意义

目的探讨Bcl-2和PTEN在宫颈癌组织、宫颈上皮内瘤样病变(CIN)和正常宫颈组织中表达情况及意义。方法采用组织芯片技术和免疫组织化学S-P法检测50例宫颈癌、31例CIN和20例正常宫颈组织中PTEN和Bcl-2的表达情况。结果 Bcl-2和PTEN表达定位于细胞浆和细胞核,其在宫颈癌中阳性表达率分别为82%(41/50)和32%(16/50),在CIN中的表达率分别为77%(24/31)和52%(16/31),在正常宫颈组织中表达率分别为0(0/20)和80%(16/20);两者在宫颈癌的表达情况均与淋巴结转移、临床分期及组织学分化程度相关(P均<0.05);在宫颈癌组织中Bcl-2和PTEN表达呈负相关(P<0.05)。结论随着癌前病变的进展及宫颈癌临床分期升高、病理组织学分化程度降低和淋巴结转移,PTEN和Bcl-2表达增强,说明两者与宫颈癌的发生、发展和转移密切相关。     

抑癌基因PTEN在宫颈癌中的表达及意义

目的探讨一种新的抑癌基因PTEN在人宫颈癌中的表达及意义。方法采用免疫组化SP法,检测48例宫颈癌及癌旁正常组织石蜡切片中PTEN蛋白表达情况。经计算机图像分析,计算阳性细胞数,比较PTEN蛋白表达与临床病理特征的关系。结果PTEN蛋白表达于细胞浆。48例宫颈癌中PTEN蛋白阳性表达率40%(19/48),而癌旁正常组织阳性表达率96%(46/48),两者有显著性差异(P<0.05)。在淋巴结转移组织中PTEN蛋白阳性表达率(24%)明显低于未转移组织(52%,P<0.01),另外,PTEN蛋白表达与临床分期呈负相关趋势,而与病理分级、浆膜浸润无相关性(P均>0.05)。结论PTEN异常表达可能与部分宫颈癌发生、发展及预后有关。     

复方苦参胶囊对宫颈癌细胞增殖和细胞周期的影响

目的观察复方苦参胶囊对体外培养宫颈癌细胞增殖和细胞周期的影响。方法宫颈癌细胞经药物处理后,采用CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡。结果不同浓度的复方苦参胶囊处理宫颈癌Hela细胞24,48,72 h后,均呈现出显著的细胞增殖抑制作用,抑制作用具有时间依赖性和剂量依赖性,差异有统计学意义(P<0.01);流式细胞术结果显示不同浓度的复方苦参胶囊处理宫颈癌Hela细胞48 h后可显著增加宫颈癌细胞凋亡率,差异有统计学意义(P<0.01),并可增加G1期比例同时降低S期细胞比例,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论复方苦参胶囊可抑制体外培养宫颈癌细胞增殖并诱导其凋亡,该作用可能是通过抑制S期细胞比例,将细胞周期阻滞在G1期实现的。     

骨肉瘤中PTEN的表达及意义

目的:探讨PTEN在人骨肉瘤、骨软骨瘤中表达的生物学意义及其互相关系.方法:选取30例人骨肉瘤标本,以骨软骨瘤为对照,采用免疫组化S-P法,探讨PTEN在人骨肉瘤、骨软骨瘤中的阳性表达及其与肿瘤分组、分级的关系.结果:①骨软骨瘤组PTEN阳性表达率为90.0%(9/10),骨肉瘤组阳性表达率为70.0%(21/30),两者染色阳性率差异无统计学意义(P＞0.05),染色强度比较差异有统计学意义.②骨肉瘤I级组阳性表达率为85.7%(6/7),Ⅱ、Ⅲ级组阳性表达率为65.2%(15/23),Ⅱ、Ⅲ级组与Ⅰ级组染色阳性率和染色强度相比,差异无统计学意义(P＞0.05).③骨肉瘤各型间染色结果比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论:骨肉瘤的发生与PTEN异常表达有关;PTEN不可作为骨肉瘤的恶性分级、增殖的指标.     

牡荆素诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡和细胞周期阻滞的作用

目的 研究牡荆素诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡和细胞周期阻滞的作用.方法 HeLa细胞培养至对数生长期,分为对照组和牡荆素低、中、高剂量组;通过MTT法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞周期,Western blot检测Bcl-2、Bax、caspase-3、p-P53、cyclin B1、cyclin E...     

芒果苷对白血病K562细胞周期分布及细胞周期素A、细胞周期素B1表达的影响

目的：观察芒果苷对白血病K562细胞周期分布及细胞周期素A（CyclinA）、细胞周期素B（CyclinB1）表达的影响,以进一步探讨芒果苷抗白血病的分子作用机制。方法：应用流式细胞仪检测细胞周期的分布,用RT-PCR方法检测Cyclin A及Cyclin B1 mRNA表达水平。结果：芒果苷作用24 h后,K562细胞G2/M期细胞增多,出现G2/M期阻滞,并呈现剂量依赖性;Cyclin A mRNA和Cyclin B1 mRNA的表达随作用浓度的增加而逐渐增强,呈显著的剂量依赖性。结论：芒果苷阻滞白血病K562细胞周期于G2/M期,明显上调K562细胞Cyclin A和Cyclin B1 mRNA表达水平,芒果苷诱导K562细胞G2/M期阻滞可能是其抗白血病作用的分子机制之一。     

Lgr5在宫颈癌中的表达及意义

目的:探究Lgr5在宫颈癌发生发展中的表达及意义。方法:采用免疫组织化学方法检测30例正常宫颈组织、20例宫颈上皮内瘤变(CIN)及30例宫颈癌组织中Lgr5的表达。结果:Lgr5在正常宫颈组织、CIN组织及宫颈癌组织中的表达阳性率及免疫组化评分均逐渐升高。结论:Lgr5在CIN及宫颈癌的表达升高,可能对宫颈癌的发生发展起促进作用。     

大黄素对血管平滑肌细胞周期调控蛋白CyclinD1表达的影响

目的:观察大黄素对人血管平滑肌细胞周期时相和CyclinD1表达的影响.方法:取对数增长期的平滑肌细胞,采用MTT法观察大黄素对平滑肌细胞增殖抑制的有效浓度范围,求出IC50并干预细胞;然后分别用流式细胞仪和Westernblot法进行细胞周期时相和CyclinD1表达的测定.结果:与对照组比较,LC50时药物组G0/G1期细胞百分比升高,S期细胞百分比下降,CyclinD1表达高峰延迟,表达量下调,细胞周期受阻于G0/G1期.结论:大黄素在抑制平滑肌细胞增殖的过程中通过下调Cyclin D1表达,阻滞了细胞周期的进程;是一种有效的抗平滑肌细胞增殖的药物.     

microRNA-3147在宫颈癌中的表达及意义

目的分析microRNA-3147在宫颈癌患者以及正常人血液中的表达情况及其与宫颈癌患者临床病理参数之间的相关性。方法选择宫颈癌患者以及健康查体者各100例分别作为患者组和正常组,采用实时荧光定量PCR法检测2组受检者血液中microRNA-3147表达量,分析其与宫颈癌临床病理参数之间的相关性,绘制ROC曲线探讨其在宫颈癌诊断中的价值。结果患者组血液中microRNA-3147表达量明显高于正常组(P0.05),ROC曲线下面积为0.932;血液中microRNA-3147表达量与患者年龄、肿瘤类型不相关(P均0.05),但与肿瘤大小、分化程度、转移状态相关(P均0.05)。结论血清中microRNA-3147的表达量对宫颈癌的早期诊断、预后和治疗有一定的指导意义。     

Silymarin inhibits cervical cancer cell through an increase of phosphatase and tensin homolog

Silymarin is an active constituent contained in the seeds of the milk thistle plant and is widely used as a hepatic protection agent due to its antioxidant-like activity. In the present study we evaluated the potential action of silymarin against cervical cancer and investigated its mechanism of action. Treatment of cervical cancer cells (C-33A) with silymarin resulted in a significant decrease in cell viability. Silymarin induced apoptosis through the modulation of Bcl-2 family proteins and activation of caspase 3. Silymarin also inhibited the phosphorylation of Akt with an increase in expression of phosphatase and tensin homolog (PTEN). We also observed that silymarin suppressed C-33A cell invasion and wound-healing migration in a concentration-dependent manner. Western-blot analysis showed that silymarin significantly inhibited the expression of matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) in C-33A cells. Furthermore, we applied siRNA to lower the PTEN gene, which diminished the anticancer actions of silymarin. Taken together, these results show that silymarin has the potential to suppress the survival, migration and invasion of C-33A cancer cells; thus, it could be developed as a promising agent for the treatment of cervical cancer in the future.     

三氧化二砷对宫颈癌Hela细胞免疫抑制作用的影响

目的探讨三氧化二砷(As2O3)预处理对宫颈癌Hela细胞免疫抑制作用的影响。方法以经As2O3预处理的宫颈癌Hela细胞再培养上清(As-S)为研究对象,MTT法检测其对PHA诱导的外周血单核细胞增殖及CTL细胞毒作用的影响,FCM分析外周血T淋巴细胞亚群表型的影响,ELISA法检测5种免疫抑制因子的含量;并对As-S中免疫抑制因子含量及其免疫抑制功能进行相关分析。结果 As-S对PHA诱导的PBMC增殖抑制和CD25+细胞亚群增殖抑制与TGF-β1正相关,而As-S对CD4+CD25+细胞亚群增殖抑制与TGF-β1负相关,IL-4与CD4+CD25+表达亦存在正相关。结论 As2O3通过调节多种免疫抑制分子的分泌,促进CD4+CD25+Treg细胞生成减少,恢复CD4+T细胞的抗瘤功效及CTL细胞的杀瘤活性。     

Survivin、P53突变基因、PTEN基因在非小细胞肺癌中的表达及相关性研究

目的探讨凋亡抑制基因Survivin、P53突变基因和抑癌基因PTEN在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及相关性。方法：应用免疫组织化学法（SP），检测60例NSCLC组织标本和20例正常肺组织标本中的Survivin、P53突变基因、PTEN基因表迭情况。结果①在60例NSCLC组织标本中，Survivin、P53，PTEN表迭结果分别为47例（78．33%）、42例（70．00%）、27例（45．00％）。在20例正常肺组织标本中，Survivin、P53基因无表达，PTEN阳性表达18例（90%）。②Survivin、P53在NSCLC组织中的阳性表达明显高于正常肺组织（P〈0．01）。Survivin的阳性表达与NSCLC的组织学类型、分化程度、是否淋巴结转移及TNM分期无相关性（P〉0．05），P53的阳性表达与NSCLC的组织学类型、分化程度、TNM分期无相关性（P〉0．05），与NSCLC的有无淋巴结转移有相关性（P〈0．05）。PTEN在正常肺组织中的阳性表达明显高于NSCLC组织（P〈0．01）。PTEN的阳性表达与NSCLC的组织学类型及TNM分期无相关性（P〉0．05），与NSCLC的分化程度、有无淋巴结转移有相关性（P〈0．05）。③Survivin与P53在NSCLC的表达无相关性（P〉0．05），PTEN与Survivin、P53在NSCLC的表达均有显著差异（P〈0．05）。结论Survivin、P53突变基因、PTEN基因的异常表达与非小细胞肺癌的发生发展有关；三者在NSCLC的发生发展中起协同作用；P53突变基因和PTEN基因可作为诊断肺癌和评价肺癌预后的参考标志及基因治疗的新靶点。     

PTEN与P53在卵巢癌中的表达及其相关性研究

目的:通过检测PTEN与P53基因蛋白在卵巢上皮性癌及正常卵巢组织中的表达,探讨抑癌基因PTEN与P53基因蛋白在卵巢癌发生发展过程中的作用,分析PTEN与P53基因蛋白在卵巢癌中表达的相关性。方法:采用链霉素抗生物素蛋白一过氧化物酶联结免疫组织化学方法检测卵巢癌与正常卵巢中PTEN及P53蛋白的表达。结果:(1)PTEN表达:在68例卵巢癌组织中,有20例呈现PTEN的阳性表达,阳性率为33.82%;而在11例正常卵巢组织中,10例阳性表达,阳性率为90.91%。PTEN在卵巢癌组织中的染色阳性率显著高于正常组(P0.05,差异有统计学意义)。相关结果表明PTEN表达与临床分期、病理分级呈负相关,与肿瘤的原发、复发无关。(2)P53表达:在68例卵巢癌组织中,有45例呈现P53的阳性表达,阳性率为66.18%;而在11例正常卵巢组织中,仅见2例阳性表达,阳性率为18.18%。两组进行比较,P53在卵巢癌组织中的染色阳性率显著高于正常卵巢组织18.18%(P0.05,差异有统计学意义);相关结果表明P53表达与临床分期、病理分级呈正相关,与肿瘤的原发、复发无关。(3)在卵巢癌组织中PTEN与P53的表达无明显相关(P0.05)。结论:PTEN基因蛋白在卵巢肿瘤中表达降低,P53基因蛋白在卵巢肿瘤中表达升高,但二者表达未见明显相关,可能与病例数目及统计方法选择有关;二者的改变与卵巢肿瘤的分级、分期密切相关,有望成为卵巢癌早期诊断的重要指标之一。     

芪薏益肝煎对小鼠H22移植瘤PTEN表达的影响

目的:探讨芪薏益肝煎对小鼠H22移植瘤的抑瘤作用及作用机制。方法:小鼠右腋下皮下种瘤造成实体瘤模型,将30只小鼠分为三组,即对照组、芪薏益肝煎组和5-Fu组,每组各10只,连续用药15 d。第16天处死小鼠,计算胸腺指数、脾指数;剥离瘤块秤重并计算抑瘤率;采用免疫组化技术检测抑癌基因(PTEN)的表达。结果:芪薏益肝煎组小鼠皮下肿瘤重量低于生理盐水组,PTEN表达高于生理盐水组,有非常显著性差异(P<0.01),并且其抑瘤率为37.00%。结论:芪薏益肝煎对小鼠肝癌细胞具有明显抑制作用,其作用机制与PTEN表达有关。     

PTEN在白藜芦醇对体外直肠癌细胞生长和凋亡的影响

分析第10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因(phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten,PTEN)在直肠癌细胞系中的相对表达水平,以及白藜芦醇对直肠癌细胞增殖和凋亡的作用,并分析其可能作用机制。利用Western blot检测PTEN在人直肠癌细胞株Caco-2和SW480及人正常结肠上皮细胞株NCM460中的表达;不同浓度的白藜芦醇作用体外SW480细胞后,CCK-8法检测白藜芦醇对细胞增殖的影响;流式细胞术检测白藜芦醇对细胞凋亡的影响;Western blot检测Caspase-3,PTEN,p53以及AKT蛋白在SW480细胞中的表达水平;构建慢病毒介导特异性短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)下调SW480细胞中PTEN的表达,检测下调PTEN的表达后是否影响白藜芦醇对体外直肠癌细胞的生长抑制和凋亡诱导作用。结果表明,与NCM460细胞相比较,PTEN在Caco-2和SW480中的表达量均显著下调,差异有统计学显著性(P0.001);白藜芦醇对体外直肠癌SW480细胞增殖有明显抑制作用,并诱导细胞凋亡;白藜芦醇对SW480细胞中Caspase-3,PTEN和p53蛋白的表达均有明显上调作用,而抑制磷酸化AKT的表达;shRNA PTEN可明显下调PTEN在SW480细胞中的表达,同时降低白藜芦醇对SW480细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用。提示白藜芦醇可通过上调PTEN的表达从而调控体外直肠癌细胞增殖和凋亡。     

宫颈癌新辅助化疗miRNA的差异表达

目的观察宫颈癌新辅助化疗相关的差异miRNA表达谱,明确与宫颈癌新辅助化疗相关的miRNA表达分子机制。方法从宫颈癌患者新辅助化疗前后的肿瘤组织标本中筛选出3对标本（均为宫颈癌Ⅱb期高分化鳞状上皮细胞癌）,利用Agilent microRNA芯片检测法,初步筛选与新辅助化疗相关的miRNA表达谱。结果初步筛选出56个差异表达的miRNA,其中29个miRNA在新辅助化疗后表达上调,占总数的52％;27个miRNA表达下调,占总数的48％。结合文献筛选出5个宫颈癌相关的miRNA。结论宫颈癌新辅助化疗与5个miRNA的差异性表达具有相关性。     

抑癌基因PTEN在三阴性乳腺癌及非三阴性乳腺癌中的表达及临床意义

目的探讨抑癌基因PTEN在三阴性乳腺癌及非三阴性乳腺癌中的表达及临床意义。方法收集130例三阴性乳腺癌及112例非三阴性乳腺癌的组织标本,用免疫组化S-P法检测2组乳腺癌组织中PTEN的表达情况及与乳腺癌临床病理特征的相关性。结果 PTEN蛋白在三阴性乳腺癌组织中的高表达率为37.7%(49/130),在非三阴性乳腺癌组织中的高表达率为50.9%(57/112),两者之间比较差异有统计学意义(P0.05)。在三阴性乳腺癌中,PTEN的表达与临床分期及腋下淋巴结转移均相关(P均0.05),而与年龄、肿瘤大小、乳腺癌家族史及组织学分级无关(P均0.05)。在非三阴性乳腺癌中,PTEN的表达与腋下淋巴结转移相关(P0.05),而与年龄、肿瘤大小、乳腺癌家族史、临床分期及组织学分级无关(P均0.05)。结论与非三阴性乳腺癌相比,PTEN在三阴性乳腺癌中的低表达更为显著,提示PTEN的表达可能成为判断三阴性乳腺癌浸润及预后的重要指标。