紫草素诱导卵巢癌细胞表达钙网织蛋白促进DC成熟的研究

目的探讨经紫草素诱导凋亡的卵巢癌细胞促进树突状细胞(DC)成熟的作用及其机制。方法分别用不同浓度紫草素以及不含紫草素的培养基处理卵巢癌HO-8910细胞系。48 h后检测各组HO-8910细胞的凋亡率和膜表面钙网织蛋白的表达(流式细胞技术);同时将各组HO-8910细胞,在加入和未加入钙网织蛋白抑制性结合肽的条件下分别与人外周血来源的树突状细胞混合培养(未经过紫草素处理的HO-8910细胞与树突状细胞的混合培养设为对照组),48 h后检测各组与树突状细胞成熟相关的膜分子CD86的表达情况(流式细胞技术)。结果与未经药物处理的HO-8910细胞相比,经紫草素处理的HO-8910细胞凋亡率和膜表面钙网织蛋白的表达显著增加,并且凋亡率和钙网织蛋白水平呈紫草素浓度依赖性。经与紫草素处理过的HO-8910细胞混合培养后,树突状细胞表达CD86较对照组显著上调,同时钙网织蛋白抑制性结合肽能显著抑制CD86的上调。结论经紫草素诱导凋亡的卵巢癌HO-8910细胞能促进树突状细胞的成熟,其机制与诱导凋亡细胞膜表面暴露钙网织蛋白有关。提示在卵巢癌的化疗中使用紫草素,能加强凋亡肿瘤细胞的免疫原性,从而刺激机体产生特异性的抗肿瘤免疫。     

基于AKT信号通路探讨紫草素对宫颈癌细胞凋亡及Cyclin-D1蛋白表达的影响

目的:研究紫草素激活AKT信号通路对宫颈癌细胞凋亡及Cyclin-D1蛋白表达的影响.方法:将宫颈癌海拉(Hela)细胞接种于DEME培养基中,根据分组,加入不同浓度的紫草素细胞培养液进行培养.分别测定培养24、48、72 h后空白组、低浓度组、中浓度组及高浓度组细胞凋亡率.另采用实时荧光定量PCR技术及Western...     

紫草素诱导白血病HL-60细胞凋亡及其机制研究

目的：研究紫草素在体外对人早幼粒白血病细胞株HL-60增殖的抑制和诱导凋亡作用。方法：MTT比色法检测紫草素对HL-60细胞增殖的抑制作用;AnnexinV／PI双标记流式细胞术检测紫草素对HL-60细胞凋亡率。结果：MTT测定显示紫草素能够对HL-60细胞起到明显的增殖抑制作用,且呈现剂量一效应依赖关系。AnnexinV／PI显示紫草素能够诱导HL-60细胞凋亡,凋亡率呈剂量依赖性。结论：紫草素能抑制人白血病HL-60细胞增殖,并诱导其凋亡。     

紫草素抑制卵巢癌作用机制的研究进展

紫草为紫草科植物新疆紫草Arnebia euchroma或内蒙紫草A.guttata的干燥根,《中国药典》记载其具有清热凉血、活血解毒、透疹消斑的功效。紫草素是从紫草中提取出来的萘醌类化合物,目前,紫草素及其衍生物在各种癌症的治疗中被广泛研究。主要从机体的免疫系统、肿瘤细胞的侵袭和转移、肿瘤细胞凋亡、肿瘤细胞的有氧糖酵解及肿瘤细胞周期5个方面综述紫草素抑制卵巢癌作用机制的研究进展,为紫草素治疗卵巢癌的临床研究提供参考依据。     

紫草素诱导人前列腺癌PC-3细胞凋亡机制的探讨

目的:研究紫草素诱导人前列腺癌细胞(PC-3)凋亡及其作用机制。方法:以PC-3细胞为研究对象,以不同浓度的紫草素处理PC-3细胞,另设空白组,处理不同时间后,分别采用噻唑蓝(MTT)法检测紫草素对PC-3细胞增殖抑制情况;显微镜观察细胞形态变化;流式细胞仪检测细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生;蛋白质免疫印迹(Western blot)检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和磷酸化-细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)蛋白的表达。结果:不同浓度的紫草素对PC-3细胞的生长抑制呈时间和剂量依赖性;形态学观察结果显示紫草素作用PC-3细胞后可使细胞变圆,脱落,皱缩,细胞内出现空泡,周围出现凋亡小体;与空白组比较,不同浓度的紫草素明显升高Caspase-3和Bax蛋白的表达,明显降低Bcl-2蛋白的表达,不同浓度的紫草素作用细胞48 h后可诱导细胞产生ROS,ROS清除剂二硫苏糖醇(DTT)可以明显逆转紫草素诱导的PC-3细胞的生长抑制率,且0.2 mmol·L-1DTT可以抑制由紫草素诱导的Caspase-3和ERK1/2的活化。结论:紫草素通过ROS/ERK1/2信号通路诱导人前列腺癌PC-3细胞发生凋亡。     

二级细胞悬浮培养法生产紫草素实验研究

运用二级细胞悬浮培养法进行了新疆紫草的细胞培养生产紫草素的实验,通过测定,紫草宁的平均产率为0．053g／g干重细胞。     

紫草素在Caco-2细胞的摄取特性

目的:研究紫草素(SKN)在Caco-2细胞的摄取特性.方法:以Caco-2细胞单层模型研究紫草素的细胞摄取规律.采用高效液相色谱法测定细胞中SKN浓度,考察时间、pH、药物浓度及抑制剂对Caco-2细胞摄取SKN的影响.结果:SKN在Caco-2细胞中的摄取呈时间依赖性;SKN在0.2 ～3.2 mg·L-1内的摄取呈线性增加,符合被动扩散过程;pH 8.0条件下药物的细胞摄取量(0.350±0.004) mg·g-1显著低于pH 5.0[(0.450±0.008) mg·g-1,P＜0.01];加入维拉帕米,叠氮化钠及2,4-二硝基酚后,与对照组相比,SKN的细胞摄取量显著低,分别为(0.320±0.007),(0.340±0.003),(0.260±0.007) mg·g-1(P ＜0.01).结论:SKN的细胞摄取机制主要是被动转运;P-糖蛋白未参与SKN的转运过程.     

紫草素对人卵巢癌细胞SKOV3细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究紫草素对人卵巢癌SKOV3细胞的影响,并对其机制进行初步研究。方法:以不同浓度的紫草素干预人卵巢癌SKOV3细胞,采用MTT法观察紫草素对肿瘤细胞增殖的影响;流式细胞术检测经紫草素干预48 h后SKOV3细胞的凋亡情况和细胞周期,并以Western blot法测定Bax及Bcl-2蛋白表达。结果:紫草素(0.5,1.0,2.0,4.0,8.0,16.0μg/ml)经过24 h,48 h及72 h对肿瘤细胞增殖的抑制率分别为6.90%,12.11%,20.82%,30.20%,41.69%,56.81%;7.28%,12.16%,20.18%,40.81%,51.23%,70.51%;10.50%,15.90%,28.16%,46.86%,59.01%,78.58%,呈剂量依赖性和时间依赖性的关系。流式细胞术检测结果显示,人卵巢癌SKOV细胞经紫草素(3.0,6.0,12.0μg/ml)处理48 h后,其凋亡率分别为20.58%,35.10%及51.26%,G0/G1期细胞的比例分别62.10%,63.91%及83.86%。Western blotting检测结果显示,人卵巢癌SKOV细胞经紫草素(3.0,6.0,12.0μg/ml)处理48 h后,Bcl-2蛋白水平表达随紫草素浓度递增减少,而Bax蛋白水平随紫草素浓度递增而递增。结论:紫草素可抑制人卵巢癌细胞SKOV-3的体外增殖并诱导其凋亡,其机制可能为上调Bax表达和下调Bcl-2表达有关。     

雷公藤甲素抗卵巢癌的研究进展

雷公藤甲素是从雷公藤中提取的环氧化二萜内酯化合物,对卵巢癌体外培养细胞及体内实体瘤均有显著的抑制作用,并可有效抑制耐顺铂卵巢癌细胞的生长。综合近年来国内外对雷公藤甲素抗卵巢癌的最新研究结果,对雷公藤甲素抗卵巢癌的作用及其诱导卵巢癌细胞凋亡、干预细胞周期、抑制癌细胞转移等方面的机制进行综述。     

鸦胆子油静脉乳剂对卵巢癌细胞株CAOV3作用的实验研究

目的探讨并阐明鸦胆子油静脉乳剂对卵巢癌细胞株CAOV3作用机制,为该中药治疗卵巢癌提供可靠的实验依据。方法采用电镜技术,观察应用鸦胆子油静脉乳剂后卵巢癌细胞株CAOV3的形态学改变。结果CAOV3细胞超微结构变化明显,出现中晚期细胞凋亡现象,微绒毛及突起明显减少,伪足消失,线粒体空泡化,核染色质凝集,可见凋亡小体。结论鸦胆子油静脉乳剂可促进卵巢细胞形态学改变、诱导癌细胞凋亡,能降低CAOV3细胞侵袭和转移能力。     

冬凌草甲素对卵巢癌细胞紫杉醇耐药性的拮抗作用及其机制研究

目的探讨冬凌草甲素体内外对卵巢癌细胞紫杉醇耐药性的拮抗作用及其机制。方法通过大剂量冲击法,诱导制备耐紫杉醇的人卵巢癌HO-8910PM细胞株(HO-8910PM/PIX),用不同浓度冬凌草甲素处理HO-8910PM/PIX细胞;或在冬凌草甲素作用HO-8910PM/PIX细胞前以NF-κB激活剂TPA进行预处理。给药后,细胞经DAPI染色,荧光显微镜下观察细胞形态变化;CCK-8法检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;Western blotting检测卵巢癌细胞中NF-κB蛋白的表达。建立裸鼠卵巢癌皮下移植瘤模型。接种后8周,观察冬凌草甲素对裸鼠皮下移植瘤生长的影响;免疫组织化学法检测肿瘤组织中NF-κB的阳性表达。结果与对照组相比,冬凌草甲素呈浓度相关性抑制卵巢癌HO-8910PM/PIX细胞增殖,显著诱导细胞凋亡,而TPA可显著削弱冬凌草甲素诱导细胞凋亡的作用。与HO-8910PM细胞相比,NF-κB在HO-8910PM/PIX细胞中表达显著上调,冬凌草甲素可抑制HO-8910PM/PIX细胞中NF-κB的表达。冬凌草甲素可显著抑制裸鼠卵巢癌皮下移植瘤生长,明显减弱移植瘤组织中NF-κB的阳性表达。结论冬凌草甲素体内外对卵巢癌细胞紫杉醇耐药性具有拮抗作用,该作用可能通过抑制NF-κB的表达而实现。     

光敏剂m-THPC加红光照射对人卵巢癌上皮细胞A2780的体外杀伤作用

 目的：研究光敏剂m-THPC加红光照射对人卵巢癌上皮细胞A2780的体外杀伤作用。方法：在人体卵巢癌上皮细胞A2780的培养液内，分别加入浓度为0.1,0.2, 0.3, 0.4 μg·ml^-1的光敏剂m-THPC，加红光照射。观察细胞形态变化并用细胞计数的方法测定细胞的存活率。结果：在0.1～0.4 μg·ml^-1浓度范围内，m-THPC对A2780细胞的光敏杀伤作用随浓度的增加而增强。单纯的光照对其无明显影响。结论：m-THPC加红光照射对人卵巢癌上皮细胞A2780具有较强的体外杀伤作用，其作用强度与m-THPC的浓度有关。     

Capilliposide from Lysimachia capillipes promotes terminal differentiations and reverses paclitaxel resistance in A2780T cells of human ovarian cancer by regulating Fos/Jun pathway

Objective: To investigate the potential effect of Lysimachia capillipes capilliposide (LCC) on the chemo sensitivity and the stemness of human ovarian cancer cells. Methods: Cell Counting Kit-8 (CCK8) was used to measure the IC50 values. The apoptosis of cells was measured through flow cytometry. Evaluation of the stemness and differentiation markers was performed by the immunoblotting and the immunostaining assays. RNA-seq was performed through the Illumina HiSeq PE150 platform and differentially expressed genes (DEGs) were screened out through the bioinformation analysis. Overexpression or knockdown of Fos gene was achieved by shRNA transfection. Results: Pre-exposure of A2780T cells with 10 μg/mL LCC sensitized them to paclitaxel, of which the IC50 value reduced from 8.644 μmol/L (95%CI: 7.315?10.082 μmol/L) to 2.5 μmol/L (95%CI: 2.233?2.7882 μmol/L). Exposure with LCC enhanced the paclitaxel-induced apoptosis and inhibited the colony formation of A2780T cells. LCC exposure reduced the expression of cancer stemness markers, ALDH1, Myd88 and CD44, while promoting that of terminal differentiation markers, NFATc1, Cathepsin K and MMP9. RNA-seq analysis revealed that the expressions of FOS and JUN were upregulated in LCC-treated A2780T cells. A2780T cells overexpressing Fos gene displayed increased paclitaxel-sensitivity and reduced cell stemness, and shared common phenotypes with LCC-treated A2780T cells. Conclusion: These findings suggested that LCC promoted terminal differentiations of ovarian cancer cells and sensitized them to paclitaxel through activating the Fos/Jun pathway. LCC might become a novel therapy that targets at cancer stem cells and enhances the chemotherapeutic effect of ovarian cancer treatments.     

淫羊藿素对人卵巢癌SKOV3细胞增殖抑制及促凋亡作用

基于PI3K/Akt信号通路,观察人卵巢癌SKOV3细胞在不同浓度淫羊藿素(icaritin)干预下的增殖与凋亡变化过程,探讨可能存在的分子机制.研究对象为人卵巢癌细胞SKOV3,设置空白对照组和淫羊藿素不同浓度组(5,10,20μmol· L-1),药物干预48 h,采用cell counting kit-8 (CC...     

苦参素诱导卵巢癌HO8910细胞凋亡的初步研究

目的:观察苦参素对卵巢癌细胞株HO8910的抑制增殖效应及凋亡诱导作用.方法:用苦参素处理H08910细胞,采用MTT法检测药物对细胞的抑制作用,倒置显微镜观察细胞形态学改变;琼脂糖凝胶电泳观察DNA降解,以及应用流式细胞仪观察细胞凋亡过程中细胞周期的变化.结果:在苦参素作用下,HO8910细胞呈凋亡改变,DNA琼脂糖凝胶电泳呈典型的凋亡特征.细胞凋亡的同时,细胞周期发生特定的改变.结论:苦参素能抑制卵巢癌细胞增殖,诱导卵巢癌细胞凋亡.     

熊果酸对卵巢癌干细胞荷瘤裸鼠耐药的逆转作用

目的探讨熊果酸对于卵巢癌干细胞荷瘤裸鼠耐药的逆转作用。方法选用人卵巢癌Skov3细胞通过无血清悬浮培养法富集干细胞,接种于裸鼠皮下,建立裸鼠人卵巢癌干细胞皮下移植瘤耐药模型。随机分为Skov3贴壁细胞组、干细胞组,熊果酸高、中、低剂量组,顺铂组,顺铂联合熊果酸组。连续给药14天,空白组给予0.9%Na Cl溶液。每天测量瘤体积,绘制肿瘤生长曲线,计算抑瘤率。给药结束后,取肿瘤组织,HE染色观察肿瘤细胞形态、结构,免疫组化检测ABCG2的表达,TUNEL法检测凋亡细胞。结果熊果酸可以抑制肿瘤组织生长,并且抑瘤率随剂量增加而上升,熊果酸与顺铂联用明显优于顺铂(P0.01)。不同剂量的熊果酸干预后,ABCG2的表达下调,肿瘤干细胞凋亡增多,均具有剂量依赖性。并且熊果酸联合顺铂组较单用顺铂组,ABCG2的表达明显被抑制,细胞凋亡数明显升高。结论熊果酸可以抑制卵巢癌干细胞荷瘤裸鼠的瘤体生长,通过下调耐药指标ABCG2,促进细胞凋亡,提高顺铂诱导的细胞凋亡来达到逆转耐药的作用。