乳清酸磷酸核糖转移酶和结直肠癌化疗毒性的相关性

目的研究结直肠癌患者乳清酸磷酸核糖转移酶（OPRT）的表达及其同化疗毒性的相关性。方法应用逆转录-聚合酶链
式反应（RT-PCR）法检测58例结直肠癌组织及癌旁正常组织OPRT的表达,同时观察患者接受FOLFOX6方案化疗的毒性,分
析二者的相关性。结果结直肠癌组织OPRT的表达高于相应正常肠粘膜组织,差异具有显著性（P=0.001）。结直肠癌组织
OPRT的表达状况和化疗反应无明显相关性（P>0.05）。正常组织OPRT水平和腹泻的发生呈正相关,并具有统计学意义（P=
0.013）。结论结直肠癌组织OPRT的表达和结直肠患者的化疗毒性无相关;而癌旁正常组织OPRT的表达可以预测5-FU相关
毒性的发生情况。
     

结直肠癌中nm23-H1异常表达与淋巴结转移的关系

目的:探讨结直肠癌nm23基因异常表达与淋巴结转移的关系.方法:收集结直肠癌患者癌组织及其同源正常(癌旁)组织标本63对,使用小鼠抗入nm23-H1蛋白单克隆抗体,经流式细胞仪检测63对结直肠癌组织及其癌旁组织nm23-H1蛋白表达.结果:nm23-H1基因蛋白表达癌组织明显低于正常(癌旁)黏膜组织(P＜0.01),大肠癌伴转移(20/63)的表达水平明显低于未发生转移的癌组织(43/63)(P＜0.01).结论:nm23-H1基因蛋白水平的表达下调与结直肠癌转移潜能相关.     

基因芯片技术筛选结直肠癌腹膜转移相关基因

摘要：目的筛选和鉴定结直肠癌腹膜种植转移相关基因。方法收集手术切除3例伴有腹膜种植转移的结直肠腺癌病人原发病灶
和正常黏膜的新鲜组织标本,提取总RNA,经逆转录合成cDNA后经体外扩增合成aRNA,Cy3荧光分子标记后和人类全基因组
表达谱芯片杂交,采用经验贝叶斯方法（P≤0.05）筛选出差异表达基因,并用RT-PCR实验对部分差异表达基因进行验证。结果
满足（P≤0.05）的基因共有105个。其中和正常组织相比,在肿瘤组织表达上调的基因有42个,表达下调的基因有63个。通过生
物信息学分析,在表达上调基因中选择3条（S100P;PRDX1;SLPI）基因进RT-PCR行验证,结果与芯片结果完全相符。结论基
因芯片技术通过筛选结直肠癌腹膜转移过程中发挥关键作用的基因,为寻找结直肠癌腹膜转移的分子标志物提供依据和参考。
     

多配体聚糖结合蛋白在大肠癌组织中的表达及其对预后的影响

目的通过对109例结肠癌患者中多配体聚糖结合蛋白（SDCBP）表达的分析,探讨其临床意义及对患者预后的影响。方
法免疫组织化学法检测109例有10年随访资料,诊断为原发性结直肠癌患者中SDCBP的表达,分析其表达与结直肠癌患者各
临床因素之间的关系,生存分析采用Kaplan-Meier和Cox回归分析法。结果SDCBP的表达对结直肠肠癌患者的淋巴结转移、
TNM分期及术后的生存期均有显著影响（P=0.001）、（P=0.033）、（P=0.004）,但与患者的年龄,性别,肿瘤浸润深度,组织分化以
及病理类型没有关系。Kaplan-Meier法检验,结果显示,109例结直肠癌患者中SDCBP高低表达组患者术后平均生存期及7年累计生
存率分别为：52.300±6.508（月）、86.184±5.358（月）;38.6±6.4（%）、61.5±6.7（%）,整体水平及各组间水平的差异经Log-rank法分
析均有统计学意义（χ2=10.585,P=0.001）;Cox回归分析法发现：SDCBP的高表达和发生淋巴结转移是患者死亡的主要影响因
素（B=0.605,P=0.034;B=0.677,P=0.013）。结论SDCBP可作为提示大肠癌淋巴结转移、TNM分期及预后的一项指标。
     

ADAM12基因在结直肠癌中的表达及临床意义

目的: 研究ADAM12基因在结直肠癌中的表达水平及其与临床参数和预后的关系。方法: 收集50例手术切除的结直肠癌及相应的癌旁组织标本,采用实时荧光定量PCR技术检测标本中ADAM12基因的表达水平,并分析ADAM12基因表达与结直肠癌临床病理特征及预后的关系。同时运用Western blot检测其中5对结直肠癌组织及配对的癌旁组织中ADAM12蛋白的表达情况。结果： ADAM12基因在结直肠癌中mRNA和蛋白水平的表达都显著高于相应的癌旁组织。ADAM12基因在 76.0 %（38/50）的病例中表现为高表达,且其高表达与结直肠癌的淋巴结转移（P=0.005）、TNM分期 （P=0.002）密切相关。高表达ADAM12基因与结直肠癌的3年生存率显著相关。结论：ADAM12基因的表达在结直肠癌中明显上调,且其表达上调与结直肠癌的转移潜能及进展相关,提示ADAM12是结直肠癌的一个潜在分子指标物。ADAM12的高表达与患者的3年生存率显著相关,可作为判断预后的一个重要指标。     

结直肠癌中NOB1基因的表达及意义

摘要：目的探讨NOB1在结直肠癌中的表达及其意义。方法用免疫组织化学SP法对60例结直肠癌和癌旁正常组织(距癌组
织大于3.0 cm)中NOB1的表达进行检测;并分析其与结直肠癌临床病理因素的关系。结果NOB1在结直肠癌组织中表达阳性
的有32例（53.3%）,NOB1在癌旁正常组织中表达阳性有10例（16.7%）,差异有统计学意义（P<0.05）。在结直肠癌组织中NOB1
的表达与患者性别、年龄、肿瘤组织的分级和淋巴结转移均无关(P>0.05)。结论NOB1在结直肠癌中表达升高,可能在结直肠
癌的发生发展过程中起重要作用。NOB1能否成为结直肠癌治疗的新靶点,有待进一步研究。
     

Mus81和GEN1基因在肺癌组织中的表达及其临床意义

目的研究肺癌组织中Mus81及GEN1的表达及其临床意义。方法采用反转录-聚合酶链反应（RT—PCR）和Westernblot检测30例肺癌组织及其相应癌旁组织中Mus81及GEN1 mRNA和蛋白的表达情况,分析其临床意义。结果30例肺癌组织中Mus81mRNA和蛋白表达水平低于相应癌旁组织,差异具有统计学意义（t=-3．529,P〈0．05;t=-4．273,P〈0．05）;30例肺癌组织中GEN1 mRNA和蛋白表达水平同癌旁相比无统计学差异（t=-2．006,P〉0．05;t=0．957,P〉0．05）。30例肺癌组织中Mus81表达水平和GEN1表达水平无明显相关性（P〉0．05）。结论肺癌组织中Mus81表达低于癌旁组织,提示Mus81表达下调可能和肺癌的发生相关;GEN1在肺癌组织中的表达水平同癌旁相比无统计学差异,提示GEN1在肿瘤的发生、发展过程中可能不起主要作用;肺癌组织中Mus81的表达水平和GEN1的表达水平无明显相关性。     

miR-199a在肾细胞癌中的表达与临床病理特征及预后的关系

目的检测miR-199a在肾细胞癌及癌旁相对正常肾组织中的表达量,分析其相对表达量和肾细胞癌相关的临床病理特征
及其对肾细胞癌预后判断的意义。方法采用RT-qPCR检测67例肾细胞癌及癌旁正常组织miR-199a表达,分析表达的差异与
临床病理特征间的关系。结果在肾细胞癌和癌旁相对组织中均有不同程度的表达,在肾细胞癌的表达显著低于癌旁相对正常
组织,均值13.7倍（P=0.003）。miR-199a的表达在不同肿瘤浸润程度及复发程度之间存在差别（P<0.05,χ2=4.215）,
而与年龄、组织学类型、淋巴结转移、远处转移、Fuhrman分级等无统计学关联（P>0.05）。miR-199a下调组生存期明显低于对照组（Log-rank
test,P=0.017）。结论miR-199a表达下调与肾癌患者原发肿瘤浸润程度、复发及预后不良有关,可作为评估肾癌预后有价值的
一种指标。
     

结直肠癌转移相关基因PCR芯片的建立及初步应用

摘要：目的建立同时检测表达多个结直肠癌转移相关基因的PCR芯片,用于诊断结直肠癌转移和预测转移。方法通过
严格设计基因引物,探索各基因同时达到特异性扩增的PCR反应条件;应用基因芯片筛选获得的29个结直肠癌转移相关
基因,结合3个看家基因,建立同时检测32个基因的PCR芯片;应用该芯片检测不同转移潜能的结直肠癌细胞和临床直肠
癌组织、癌旁正常粘膜。结果成功构建同时检测32个基因的PCR芯片,各基因均获得特异性扩增;29个转移相关基因
PCR芯片检测结果与基因芯片检测结果的吻合率为86%;PCR芯片检测伴有转移的结直肠原发癌与不伴有转移的结直肠
癌组织,结果显示14个基因表达一致,15个基因表达有差异。结论结肠癌转移PCR芯片结果可靠,可用于预测结直肠癌
转移的研究。     

脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶1 在结直肠癌 组织中的表达及临床意义

目的 探讨脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶1（APE1）在结直肠癌组织中的表达及其与临床病理特征 和预后的关系。方法 选取2015 年10 月—2017 年9 月浙江省台州医院收治的100 例结直肠癌患者的结直 肠癌组织及其癌旁组织（距离肿瘤切缘≥ 5 cm）标本,组织标本采集后立即放入液氮中保存。免疫组织化学 （HE）染色测定结直肠癌和癌旁组织中APE1 蛋白表达。结果 APE1 在结直肠癌组织中表达率高于癌旁组织 （P <0.05）。APE1 在不同肿瘤大小、肿瘤分期、是否淋巴结转移及是否远处转移的表达比较,差异有统计学 意义（P <0.05）。肿瘤直径≥ 5 cm、肿瘤分期Ⅲ和Ⅳ期、有淋巴结转移及有远处转移结直肠癌组织中APE1 阳性表达率高于肿瘤直径<5 cm、肿瘤分期Ⅰ和Ⅱ期、无淋巴结转移及无远处转移者（P <0.05）。APE1 在 不同年龄、性别、肿瘤位置及分化程度表达比较,差异无统计学意义（P >0.05）。APE1 高表达组总生存率低 于APE1 低表达组（P <0.05）。Cox 比例风险模型分析显示,APE1 表达[Hl ^ R=1.198（95% CI ：1.102,1.276）, P =0.000]、肿瘤分期[Hl ^ R=1.426（95% CI ：1.358,1.492）,P =0.000]、淋巴结转移[Hl ^ R=1.384（95% CI ： 1.306,1.457）,P =0.000]、远处转移[Hl ^ R=1.735（95% CI ：1.164,2.237）,P =0.000] 为结直肠癌总生存期的独 立影响因素。结论 结直肠癌组织中APE1 表达升高,APE1 与结直肠癌的肿瘤大小、肿瘤分期、淋巴结转移、 远处转移及预后关系密切。     

喉鳞癌组织中SMG-1、ATM和P53的表达及临床意义

目的检测SMG-1、ATM和P53在喉鳞癌组织中的表达,探讨它们在肿瘤发生发展过程中的相互作用。方法收集2006年
1月1日~2009年8月31日在耳鼻咽喉科住院手术的喉鳞癌患者标本,采用免疫组化法检测63例喉鳞癌、30例癌旁正常组织中
SMG-1、ATM和P53 蛋白的表达情况,并对它们的表达与喉癌临床病理特征之间的关系以及三者的相关性进行分析。结果
SMG-1、ATM和P53在喉鳞癌组中的表达率分别为36.5%（23/63）、41.3%（26/63）、和57.1%（36/63）,与癌旁正常组织比较（分别
为73.3%、83.3%、和20.0%）,差异有统计学意义（P<0.05）;SMG-1表达与T分期和原发部位呈显著相关（P<0.05）,与患者年龄、
N分期、病理分级无关（P>0.05）。ATM和P53表达均与患者年龄、T分期、N分期、原发部位、病理分级无关（P>0.05）。SMG-1阴
性表达患者的五年生存率明显高于阳性患者,差异有统计学意义（P<0.05）。SMG-1 和P53 的表达之间存在负相关关系
（r=-0.476, P<0.01）。结论SMG-1 、ATM和P53与喉癌的发生关系密切,SMG-1表达是反映喉癌临床病理特征和预后的重要生
物学指标,其可能通过调控P53表达,共同在喉癌的发生发展中起重要作用。
     

Hsa-miR-186在结肠癌细胞中的表达及作用

目的检测hsa-miR-186在结肠癌组织及细胞中的表达,探讨hsa-mir-186对结肠癌细胞生物学特性的影响及作用。方法
应用实时荧光定量PCR 检测了miR-186 在12 对配对的结肠癌组织、癌旁组织和5 株结肠癌细胞中的表达情况;扩增包含
miR-186前体序列在内的基因片段,并将其克隆至PLVTHM载体,将PLVTHM- miR186质粒转染SW620细胞,流式分选慢病
毒感染的SW620细胞;CCK-8法、划痕实验和Transwell检测细胞检测细胞的增殖、迁移和侵袭能力。Western Blot检测靶基因
YY1 蛋白水平的表达。结果与癌组织相比,12 例癌组织中miR-186 的平均表达量为0.0024±0.0027,显著低于癌旁组织的
0.066±0.068,P=0.008;miR-186 在高转移潜能的人结肠癌细胞SW620 和LOVO相对表达量分别为0.118±0.138 和0.157±
0.001,与在低转移潜能HT-29 细胞中表达量1.000 ± 0.00,差异具有统计学意义P<0.05;质粒双酶切及测序鉴定
PLVTHM-hsa-miR186重组质粒构建成功;荧光定量PCR表明稳定过表达miR-186的结肠癌细胞株SW620构建成功,且过表达
miR-186后降低了细胞的增殖、迁移及侵袭能力,差异均具有统计学意义P<0.05。稳定过表达miR-186的细胞中,miR-186的表
达明显高于对照组和未处理组,YY1蛋白质水平有所下降。结论hsa-miR-186在结肠癌组织以及在高转移潜能的人结肠癌细
胞SW620、LOVO中低表达,具有类似抑癌基因的作用;成功构建PLVTHM-miR186慢病毒重组质粒,并稳定转染结肠癌细胞
SW620,抑制了细胞的增殖、迁移和侵袭能力。miR-186调控YY1表达可能是抑制结直肠癌生物特性的重要机制之一。
     

Shh与MMP2在人食管鳞癌组织中的表达及意义

目的探讨音猬因子（Shh）与基质金属蛋白酶2（MMP2）在人食管鳞癌组织中的表达以及与临床病理参数之间的关系。方
法采用免疫组化SP法检测Shh与MMP2在48例人食管鳞癌组织以及44例癌旁组织中的表达情况。结果Shh的阳性表达主
要定位在细胞质和胞核,在食管鳞癌组织中的阳性表达率为75%明显高于癌旁组织（20.45%）,且与患者的TNM分期有关;而
MMP2的阳性表达主要分布在胞质,其在食管鳞癌组织中的阳性表达率为68.75%,明显高于癌旁组织中的22.72%,与淋巴结转
移与否,TNM分期有关,且均具有统计学意义（P<0.01）。48例人食管鳞癌组织中Shh蛋白与MMP2蛋白的表达呈正相关（R=
0.037,P=0.019）。结论Shh蛋白的表达可能参与到食管鳞癌的侵袭与转移。
     

上皮性卵巢癌中CD133与EMT相关因子表达的关系

目的探讨上皮性卵巢癌（Epithelial ovarian cancer, EOC）中CD133 蛋白及上皮-间质转化（Epithelial mesenchymal
transition, EMT）相关因子Snail、E-cadherin 蛋白表达的关系及其功能意义。方法采用免疫组织化学ElivisionTM plus 法检测
150 例EOC和50 例良性上皮性卵巢肿瘤中CD133、Snail 和E-cadherin 蛋白的表达情况。结果良性上皮性卵巢肿瘤组织中
CD133、Snail和E-cadherin蛋白的表达阳性率分别为10%、8.0%和70%,在EOC组织中3者表达分别为58.7%、60.7%和32.7%,
差异有统计学意义（P<0.05）。CD133、Snail 和E-cadherin 的表达与EOC的腹腔脏器和淋巴结转移以及FIGO 分期有关（P<
0.01）;E-cadherin蛋白的表达与Snail及CD133 蛋白的表达均呈负相关关系（r分别为-0.545和-0.570,P均<0.01）,CD133蛋白的
表达与Snail蛋白的表达呈正相关关系（r=0.599,P<0.01）。Kaplan-Meier生存分析表明,CD133和Snail的过表达均与患者的生
存率有关,阳性表达的患者生存率明显低于阴性者（P<0.05）;而随着E-cadherin蛋白表达水平的降低EOC患者生存率明显下
降（P<0.05）。多因素分析表明FIGO分期、CD133、Snail 和E-cadherin 的表达是影响EOC根治术后患者预后的独立因素（P<
0.05）。结论CD133和Snail表达的升高以及E-cadherin表达的降低与EOC的侵袭、转移和预后等因素相关,这些指标的联合
检测有可能作为评估EOC患者临床预后的重要指标。
     

MicroRNA-155在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义

目的探讨microRNA-155（miR-155）在甲状腺乳头状癌（papillary thyroid cancer, PTC）患者中的表达情况及与临床病理 特征的相关性,miR-155指导PTC预后的可行性。方法收集86例PTC患者的癌及癌旁新鲜组织,用荧光定量PCR的方法检测 miR-155在上述组织中的表达,并结合其临床病理特点进行回顾性分析。结果69.8%（60/86）的PTC患者癌组织的miR-155表 达较癌旁正常组织上调,相对上调倍数为2.63±2.73倍;而在表达上调组中,PTC原发灶更大［（1.66±0.96）cm vs（1.19±0.52）cm, P=0.021］;更容易出现甲状腺包膜外侵犯（56.7% vs 23.1%,P=0.004）;淋巴结转移率更高（70% vs 46.2%,P=0.036）;具有更晚的 TNM分期,Ⅲ~Ⅳ期的比例更高（20% vs 0%,P=0.014）。PTC癌组织中miR-155相对表达量（ΔCT）高低与淋巴结转移个数具备 一定的相关性（r=0.531,P=0.001）。结论PTC中miR-155的高表达具有更大肿瘤病灶,更易甲状腺包膜外侵犯,更高颈部淋巴 结转移率及更晚的TNM分期等临床病理特点,可能作为不良临床预后的判断指标之一。     

磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3在肺鳞癌和腺癌中的不同表达及其与预后的关系

目的探讨磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3（GPC3）在两种最常见肺癌病理类型鳞癌和腺癌中的不同表达及其与预后的关系。方
法肺鳞癌和腺癌病人共48名,肝癌对照病人10名,采用免疫组织化学方法检测肺癌组织及其癌旁组织中GPC3蛋白的表达。
应用Kaplan-Meier 法进行生存分析。结果肺癌中的GPC3 蛋白总表达率29.2%（14/48）。GPC3 在肺癌旁组织中不表达。
GPC3蛋白在肺鳞癌中的阳性率为54.5%（12/22）,在肺腺癌中的阳性率为7.7%（2/26）,肺鳞癌中的GPC3蛋白表达明显高于肺
腺癌（P<0.01）。在阳性表达的肺癌样本中,肺鳞癌与肺腺癌有淋巴结转移者和低分化组GPC-3均表达更显著。肺癌与肝癌的
GPC3蛋白表达特点不同。Kaplan-Meier生存分析显示GPC3蛋白与预后无关。结论GPC3蛋白肺鳞癌患者表达更高,提示其
可作为潜在候选标记物检测肺鳞癌。
     

大肠癌患者血浆miR-106a的表达及意义

目的研究血浆miR-106a在大肠癌患者中的表达及其与临床病理特征的关系,分析其诊断价值。方法选取3例大肠癌组
织及配对正常粘膜组织进行miRNA芯片检测,筛选出大肠癌组织中异常表达的miRNA;收集50例首治的大肠癌患者的血浆标
本和47例健康志愿者的血浆作为对照,提取血浆中总RNA,运用荧光定量PCR方法检测miR-106a在大肠癌和正常人血浆中的
表达情况。同时收集患者术后7 d血浆标本40例,分析术前、术后miR-106a的表达变化。分析术前血浆miR-106a表达与临床
病理特征间的关系,并对受试者行ROC分析。结果miRNA芯片检测大肠癌组织中miR-106a的表达较正常粘膜明显增加;与
健康对照组相比,miR-106a在大肠癌患者血浆中表达量显著上调（P=0.012）,术后患者血浆miR-106a的表达较术前明显降低
（P<0.01）。术前血浆miR-106a的表达与大肠癌患者淋巴结转移、TNM分期及分化程度均无关（P>0.05)。miR-106a 所得ROC
曲线下面积为0.661(95% CI∶0.55~0.772),区别大肠癌和正常人的敏感性为62.3%,特异性为68.2%。结论血浆miR-106a在大
肠癌患者中表达上调,可能对大肠癌的诊断具有一定临床价值。
     

miR-223在肾透明细胞癌中的表达与功能

目的探讨miR-223在肾透明细胞癌中的表达与功能。方法用real-time RT-PCR法检测miR-223在肾透明细胞癌组织和
瘤旁组织中的表达以及细胞系中miR-223的表达量。用transwell迁移实验和划痕实验测转染miR-223模拟物的786-O细胞的
迁徙能力,MTS法测其增殖情况,流失细胞仪分析其细胞周期。并用SPSS统计软件分析其临床数据与miR-223 表达量的关
系。结果miR-223在肾透明细胞癌组织和细胞系中的表达量高于瘤旁组织和正常肾小管上皮细胞（P=0.0003）,其miR-223的
表达量与肿瘤的大小有关,肿瘤直径大于4 cm的肿瘤miR-223 表达量升高（P=0,0028）。转染miR-223 模拟物的786-O 细胞
transwell细胞迁移数比对照组多（P<0.0001）,划痕实验显示实验组愈合能力比对照组快,增殖实验表明实验组增殖速度快于对
照组（P=0.006）,细胞周期显示实验组细胞G1期减少,S期细胞增加,提示处于增殖的细胞数多（P<0.05）。结论miR-223可能
起着促进肾透明细胞癌发生发展的作用,可能是抗肾透明细胞癌治疗的新的抗癌靶标。