运用免疫受体基因进行RNA干扰对猪颗粒细胞发展的意义

在卵泡发育过程中颗粒细胞获得不同的功能，在细胞分化过程中颗粒细胞的基因是独特的。双链RNA（dsRNA）可以引起序列特异性的转录后基因沉默。此现象称为RNA干扰（RNAi）。长dsRNA经过处理产生的21～23mer的小干扰RNA（siRNA）片段是RNAi的介质。核酸复合体即RNA诱导的沉默复合体（RISC），以siRNA为向导，使同源序列的靶基因mRNA降解成片段，mRNA水平降低。RNAi也可用于对猪颗粒细胞发育过程中感兴趣的基因进行功能分析。在此研究中，用一种质粒编码的绿色荧光蛋白（GFP）作为靶基因，     

RNA干扰技术及其在胰腺癌研究中的应用

RNA干扰（RNA interference，RNAi）是指一些小的双链RNA（double stranded RNA，dsRNA）通过特异性降解与其同源的RNA而高效地阻断体内特定基因表达的现象。到目前为止，RNAi现象已经被发现广泛存在于植物、线虫、果蝇、哺乳动物等多种生物体细胞中，使这些生物能够抵御病毒的感染、阻断转座子的作用等。由于RNAi能特异性地抑制某一基因的表达，目前已经广泛应用于抗肿瘤、抗病毒等的治疗研究以及一些基础研究领域。现主要就近年来RNAi技术在胰腺癌研究中的应用进行综述。     

RNA干扰技术在肥胖研究中的应用

在多种生物细胞中，外源或内源性双链RNA（doublestranded RNA，dsRNA）可触发细胞内同源mRNA的特异性降解，从而使该基因表达沉默，这种现象称为RNA干扰（RNA interference，RNAi）。RNAi现象在生物中普遍存在。首先在线虫中发现了RNAi现象，随后证实在果蝇、涡虫、水螅、锥虫、小鼠胚胎细胞及哺乳动物成体细胞中均存在dsRNA介导的RNAi现象。由于RNAi在动植物抵抗外源病毒、生长发育调控方面起着重要作用。而且在功能基因组研究、基因治疗方面有着广泛的应用前景，所以对其研究较多。现在RNAi已用于在体研究，并在抗病毒、肿瘤、免疫、药理、遗传等方面得到广泛地应用。基因有限公司和宝生物公司等已开发出RNAi试剂盒。目前RNAi数据库与表型blast也已建立。本就RNAi干扰技术在肥胖研究中的应用作一综述。     

哺乳动物精子RNAs的研究进展

精子RNA量少，但种类多。由于生物技术的发展，多种精子RNA的功能和机制被阐明。微小RNA（miRNAs）和mRNA影响精子形成过程中的染色体固缩、鞭毛结构与动力；与Piwi蛋白相作用的RNA（piRNAs）抑制反转录转座子活性、维持基因组稳定，但作用有限。受精和早期胚胎发育过程中，mRNA调节细胞能量通路、影响配子功能（如核质运输和有丝分裂）；miRNAs和内源性小片段干扰RNA（endo-siRNAs）的缺失会使胚胎早期发育产生异常；部分miRNAs前体（pri-mir-RNAs）以前体形式运输，在受精后激活，调节胚胎干细胞多能性；长链非编码RNA（lncRNAs）可调控胚胎基因组的表达与沉默。实验证明，精子RNA[转运RNA来源的小RNA（tsRNAs）、miRNAs、piRNAs]可作为一种稳定的跨代表观遗传标记，通过修饰、改造遗传物质的高级结构，重塑获得性表型并稳定地传递给子代。     

miRNA、lncRNA和circRNA调节骨代谢治疗骨质疏松症的研究进展

骨质疏松症（Osteoporosis，OP）是临床上常见的代谢性骨病，可归因于成骨细胞骨形成和破骨细胞骨吸收之间的不平衡，但其更详细的发病机制仍有待阐明。微小RNA(microRNA，miRNA)、长非编码RNA(long non-coding RNA，lncRNA）和环状RNA（circular RNA，circRNA）是近年来备受关注的三种RNA，能够在转录后水平上控制基因表达并提供表观遗传修饰。因此本综述基于对现有文献的系统评价，提供了这三种RNA在调节骨代谢，影响OP发生发展中的分子和遗传学观点。对表观遗传修饰和分子调节作用的进一步研究将使我们更加明确OP的发病机制，并为OP的防治提供新的思路。     

α2b干扰素治疗慢性丙肝患者的临床研究

目的：探讨α2b干扰素对慢性丙肝患外周血单个核细胞（PBMC）内HCV的治疗效果。方法：采用国产α2b干扰素（300MU／d）治疗，3个月为一疗程，共2个疗程，并设常规治疗组（VitC、门冬氨酸）为对照。于疗程结束后分别检测患PBMC内HCV－RNA和血清内HCV－RNA、抗－HCV。结果：α2b干扰素治疗组2个疗程后慢性丙肝患PBMC、血清内HCV－RNA和抗－HCV转阴率分别为42．31％（11／26）、57．69％（15／26）、65．38％（17／26），常规治疗组慢性丙肝患PBMC、血清内HCV－RNA和抗－HCV转阴率分别为13．64％（3／22）、22．73％（5／22）、27．27％（6／22），两组相比，差异有显性（P＜0．05）。结论：α2b干扰对PBMC内HCV－RNA具有肯定的治疗作用，其疗效优于常规治疗组。     

RNA干扰,一种征服人类疾病的新武器

RNA干扰(RNA interference，RNAi)是Fire和Mello创建的名词，指将双链RNA(dsRNA)导入细胞，其序列与靶基因同源，它在细胞内可与靶基因mRNA结合，并迅速将其降解，从而抑制该基因表达的过程。由于近几年RNAi研究取得的进展，RNAi名列2002年Science杂志评出的十大科技成就之首，并被描述为：“小RNA溅起大浪花(Small RNAs make big splash)。”     

lncRNA作为ceRNA在卵巢癌中的研究进展

人类基因组中大部分为非编码区，转录产生非编码RNA（non-coding RNA，ncRNA）。ncRNA 虽然不能翻译成蛋白，但可通过对mRNA直接或间接地调控影响人体生理、病理过程。长链非编码RNA（long non-coding RNA，lncRNA）是ncRNA的重要分类，越来越多的研究表明lncRNA参与癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡和耐药等，影响肿瘤的发生和发展，lncRNA可作为肿瘤早期诊断、治疗和判断预后的潜在靶向标记物。竞争性内源RNA（competitive endogenous RNA，ceRNA）假说的提出使人们对肿瘤发生机制有了进一步的了解。在ceRNA的形成中，lncRNA有着重要作用。近年lncRNA作为ceRNA在卵巢癌中的研究日益增多。本文就lncRNA形成的ceRNA网络在卵巢癌的发生发展过程中的研究进展进行综述。     

适用于海藻酸钠-壳聚糖微囊化肝细胞RNA提取的破囊方法

目的验证不同破囊液裂解载肝细胞海藻酸钠一壳聚糖（AC）微囊获取高纯度RNA的可行性。方法破囊液A基本成分为0．1mol／L二水合柠檬酸三钠；破囊液B的基本成分为0．2mol／L碳酸氢钠和0．06mol／L二水合柠檬酸三钠。将载可逆性永生化人肝细胞（Hepli4）的AC微囊分别用破囊液A（A组，n=5）和破囊液B（B组，n=5）处理。破囊后，Trizol法提取总RNA，RT-PCR法检测肝脏特异性功能基因。结果A组细胞中可见微囊碎片残留．而B组细胞中基本观察不到微囊碎片。A组和B组RNA样品的A—A。差异无统计学意义（P〉0．05），A260/A230差异有统计学意义（P〈0．05）。B组RNA获得率为（8．69±0．59）μg／10。细胞，A组为（2．39＋0．32）μg／10。，两组比较差异有统计学意义（t=21．09，P〈0．05）。以B组的RNA为模板，可检测到谷氨酰胺合成酶（GS）、尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶（UGTIAl）、白蛋白（ALB）等肝脏特异性功能基因。结论以碳酸氢钠-二水合柠檬酸三钠破囊液处理载肝细胞AC微囊，能避免微囊成分污染，获得高纯度RNA。该破囊液可应用于AC微囊化肝细胞的基因表达研究。     

RNA干扰的基础研究和临床应用前景

RNA干扰（RNA interference，RNAi）是在mRNA水平关闭相应序列基因表达或使其沉默的过程。在哺乳动物中发现的21—23核苷酸的双链RNA（小干扰RNA）开肩了siRNA的治疗应用可能。目前RNA干扰对于病毒感染、癌症和基因病等表现出广阔的应用前景。就RNA干扰的作用机制、临床应用及应用中存在的障碍等方面综述该领域的研究进展。     

慢性丙型肝炎患者重叠庚型肝炎病毒感染的研究分析

目的探讨慢性丙型肝炎（CHC）患者重叠庚型肝炎病毒感染的临床特征和治疗效果情况。方法对45例CHC患者血清HGV—RNA采用逆转录套式聚台酶链反应进行检测，对HGV—RNA阳性和阴性患者的相关临床资料及用药效果进行观察分析。结果HGV—RNA阳性率为17．8％（8／45）。HGV—RNA阳性和阴性患者在临床个人资料、HGV—RNA水平、丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平及干扰素进行治疗的效果等因素上差异不明显（P〉0．05）。3例HGV—RNA阳性CHC患者在干扰素进行治疗后，HGV—RNA都转为阴性，长期随访后发现2例患者治疗停止后1年内HGV—RNA恢复至治疗前一般情况。结论慢性丙型肝炎重叠庚型肝炎病毒感染在临床上、病毒复制和干扰素进行治疗上效果差异不明显。虽干扰素对HGV作用明显，但停止治疗后会出现复发。     

应用4种方法检测肠道病毒的结果分析

目的 对105例心肌梗塞患者和40例对照组应用4种方法检测肠道病毒（EV）。方法 用逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）检测肠道病毒核糖核酸（EV－RNA），ELISA法检测柯萨奇B组病毒（Cox B V)IgM抗体，常规方法分离病毒及微量中和抗体（NT）。结果 病例组EV－RNA阳性23例（21．9％）。对照组1例（2．5％）；CoxB V IgM阳性29例（27．6％），对照组1例（2．5％）；病毒分离得到病毒6株（5．7％），对照组未分离出病毒；CoxB V NT阳性25例（23．8％），对照组3例（7．5％）。结论 用RT－PCR检测EV－RNA优于病毒培养，RT－PCR方法敏感，特异，简单，易于推广。采用RT－PCR，病毒培养，ELISA，NT4种方法同步进行检测EV则可以提高病毒的阳性检出率。     

新发病毒病诊断的研究进展

人类在近些年中不断地发现一些新的病毒传染病，其中发现新的病毒致病原近40余种。目前，将已知病毒分为233个属，其中204个属归类于64个科，另29个尚未归类，此外，还增加了亚病毒（subvirus）与未分类的病毒。64科的病毒分为DNA病毒（包括DNA逆转录病毒）和RNA病毒（包括RNA逆转录病毒）两大类。亚病毒根据其生物学特性和致病性又可分为类病毒（viriod）、卫星病毒（sate]lite virus，SV）和朊病毒（priori）。     

紫外交联实验筛选HCV RNA结合蛋白的应用

目的 选择一种用于筛选与丙型肝炎病毒（HCV）RNA核心区结合的细胞蛋白质分子较佳方法。方法 用体外转录的方法制备地高辛标记（DIG）-HCV RNA；从HepG2细胞中提取细胞蛋白质分子。分别用紫外交联实验（UV）和凝胶迁移实验（EMSA）筛选HepG2细胞中可与HCV RNA结合的蛋白质分子。结果 2种实验方法均可检测到细胞蛋白质分子与HCV RNA结合。但凝胶迁移实验结果所见DIG—RNA信号比较弥散，而紫外交联实验的结果可见比较清晰的RNA-结合蛋白条带。结论 紫外交联实验是用于筛选HCV—RNA结合蛋白的首选方案。     

丙型肝炎病毒窗口期感染核酸阳性血清检测和基因型别分析

目的分析丙型肝炎病毒（HCV）早期感染血液样品核酸（RNA）检测的意义，并对检出的核酸阳性血清进行基因分型。方法对8649份自然供血员及566份HCV可疑感染者血清进行核酸（TMA RNA试剂）检测，检测出的HCV RNA阳性样品利用基因分型芯片进行分型。同时利用HCV核心总抗原（HCVc Ag）和游离抗原（HCV free Ag）试剂以及抗体（Anti—HCV）试剂进行检测。并对检测数据进行比较分析。结果在所有血液样品中发现1份HCV抗体、HCVc Ag、HCV free Ag全部阴性但RNA阳性的样品，基因型别为1b型。在8649份自然供血员血清中筛出1份HCVc Ag、HCV free Ag以及HCVRNA阳性但抗体阴性血清，基因型别为1b型。在566份HCV可疑感染者血清中，筛出1份HCV free Ag和核心抗体同时阳性血清，基因型别为1b型。TMA试剂筛出5份RNA阳性血清但微粒子抗体试剂检测阴性，TMA试剂筛出6份RNA阳性的血清而酶标抗体试剂检测阴性。这6份血清，利用傲拓HCV总抗原试剂检测，其中5份HCV总抗原阳性。在澳大利亚国家血液中心进行复核，其中5份RNA阳性。在566份血清中，TMA试剂检出RNA阳性495份，阳性率87．4％。对RNA阳性血清进行型别分析，以1b、2a型为主，分别为46．5％和27％。结论由于检出了HCV RNA单独阳性的窗口期样品，认为利用HCV抗体试剂对血液进行筛查的同时，使用HCV RNA试剂做必要的补充实验，可以减少因窗口期造成的漏检。型别分析认为，窗口期感染样品基因型别也以1b，2a型为主。     

CircRNA在女性生殖系统疾病中的研究进展

环状RNA（circRNA）作为新发现的RNA家族中的一员，随着RNA测序水平的发展已经成为最新的研究热点。CircRNA是一种具有特殊闭合环状结构的RNA，由于形态的特殊性，决定了其与线性RNA的特性不同。CircRNA具有稳定性、物种保守性及组织细胞特异性，在circRNA-微小RNA（miRNA）-mRNA轴中充当miRNA海绵作用，可调控基因转录及蛋白质翻译。研究发现，女性生殖系统疾病的发生、发展可能与circRNA的异常密切相关。通过研究各种circRNA的特性及其发挥作用的机制，可以发现circRNA作为生物标志物及疾病预后指标具有一定的发展前景。现对circRNA与女性生殖系统疾病之间的潜在作用机制进行综述。     

RNA干扰技术的研究进展

RNA干扰已经成为敲除特定基因表达的重要工具。将一段双链RNA序列导入机体或细胞中，使具有同源序列的基因表达受到抑制。由于这是一种在RNA水平上的基因表达抑制，也称之为RNA干扰，简称RNAi。该项技术的优点在于不仅可用于研究基因的功能，还可以研究药物干预的候选染色体或者筛选疫苗的靶基因。在哺乳动物细胞，RNAi技术已经成为研究基因功能的有利工具，并有望在今后对疾病的治疗中发挥重要作用。本文对RNAi技术的研究进展综述如下。     

1949—2019年上海市职业性尘肺病回顾性调查分析

目的　探讨AIDS患者行高效抗反转录病毒治疗（highly active antiretroviral therapy, HAART）后25-羟基维生素D水平与T细胞亚群含量、病毒载量的关系。方法　选取2017年6月—2019年12月在本院诊治的128例AIDS患者，测定外周血中25-羟基维生素D、CD3+ T细胞、CD4+ T细胞、CD8+ T细胞以及HIV RNA水平，并分析相关性。结果　128例AIDS患者治疗后25-羟基维生素D、CD3+ T细胞、CD4+ T细胞水平及CD4/CD8比值均升高，CD8+ T细胞、HIV RNA水平降低，与治疗前相比差异均有统计学意义（P均＜0.05）。不同25-羟基维生素D水平的AIDS患者中，25-羟基维生素D≥30 ng/ml组CD3+ T细胞、CD4+ T细胞水平以及CD4/CD8比值升高，CD8+ T细胞、HIV RNA水平降低，与＜30 ng/ml组相比差异均有统计学意义（P均＜0.05）。不同 CD4+ T细胞水平的AIDS患者中，CD4+ T细胞≥500个/μl组25-羟基维生素D、CD3+ T细胞水平以及CD4/CD8比值升高，CD8+ T细胞、HIV RNA水平降低，与＜500个/μl组相比，差异均有统计学意义（P均＜0.05）。不同HIV RNA水平的AIDS患者中，HIV RNA＜400拷贝/ml组25-羟基维生素D、CD3+ T细胞、CD4+ T细胞水平以及CD4/CD8比值升高，CD8+ T细胞水平降低，与≥400拷贝/ml组相比差异均有统计学意义（P均＜0.05）。治疗后25-羟基维生素D水平与CD3+ T细胞（r=0.547，P=0.008）、CD4+ T细胞水平（r=0.821，P=0.000）及CD4/CD8比值（r=0.630，P=0.005）呈正相关，与CD8+ T细胞（r=-0.295，P=0.009）、HIV RNA水平（r=-0.460，P=0.001）呈负相关。治疗后HIV RNA水平与CD3+ T细胞（r=-0.702，P=0.004）、CD4+ T细胞水平（r=-0.681，P=0.006）及CD4/CD8比值（r=-0.729，P=0.007）呈负相关，与CD8+ T细胞水平呈正相关（r=0.392，P=0.008）。结论　AIDS患者行HAART后，25-羟基维生素D水平与CD3+ T细胞、CD4+ T细胞水平及CD4/CD8呈正相关，与CD8+ T细胞、HIV RNA水平呈负相关。     

乙型肝炎病毒前基因组启动子的调节机制

乙型肝炎病毒（HBV）是一种DNA病毒，但其基因组的复制是通过DNA－RNA－DNA的途径来实现的。作为从RNA逆转录为前基因组DNA的模板，3．5千的RNA的转录非常重要。目前的研究证实，前基因组启动子和核心启动子（CP）是2段位置相近，但结构与调节机制又不相同的启动子、虽然均指导3．5千核苷核的RNA转录，但作为前基因组和翻译模板的RNA，其5′末端序列不同。前基因组启动子序列活性受到一系列不同的蛋白质因子的调节，增强子对于HBV前基因组启动子的活动活性也有重要的调节作用。