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胆固醇酯转运蛋白的提纯和鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
目的建立一种新的分离纯化人血清胆固醇酯转运蛋白(CETP)的方法,为制备CETP单克隆抗体和CETP浓度测定提供物质基础。方法制备无脂血清,用ButylSepharose4FF、CMSepharoseFF和SephacrylS200三步柱层析分离、纯化CETP。结果纯化CETP经SDSPAGE电泳鉴定呈单一区带,分子量65000,蛋白质含量0325mg/ml,与国外和作者研制CETP单抗的免疫斑点试验呈特异性反应,与纯化脂蛋白(a)、载脂蛋白(Apo)A1、ApoB、IgG、IgA、IgE、C3、C4抗体无免疫反应。结论经三步柱层析获得了纯化CETP,得率约25%,活性每小时30nmol/μg。 相似文献
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目的探讨胆固醇酯转运蛋白基因D442G多态性与阿尔茨海默病(AD)易感性与血清脂蛋白水平间的关系。方法用限制性片段长度多态性检测125例AD和115例对照D442G和载脂蛋白E(ApoE)的基因多态性,并测定血清脂蛋白水平。结果对照组D442G的DG基因型频率(9%)高于AD组(2%);ApoE分层后,上述关系仅存在于ApoEε4携带者;DG基因型的高密度脂蛋白(HDL)水平[(1.95±0.71mmol/L)]高于DD基因型[(1.71±0.45mmol/L)],而AD组总胆固醇[(4.86±0.96)mmol/L]和低密度脂蛋白水平[(2.26±0.71)mmol/L]低于对照组[(5.30±1.16)mmol/L、(2.93±0.97)mmol/L]。结论 D442G基因多态性通过调节HDL水平影响AD易感性。 相似文献
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心脑血管疾病患者胆固醇酯转运蛋白及某些基因缺陷 总被引:7,自引:0,他引:7
目的 分析心脑血管疾病患者和健康人血清胆固醇酯转运蛋白(CETP)水平、CETPD442G和114A突变频率和基因突变者血脂异常的特点。方法 94例心肌梗死、110例脑卒中和335名健康人,应用ELISA测定GETP浓度;合成^14C胆固醇酯标记的含载脂蛋白AI的双盘状、双层颗粒作基质测定GETP活性;并采用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性分析CETP基因突变。结果 心梗组、脑卒中组CETP水平较健康人明显增高。心梗组、脑卒 中组和健康人D442G检出率分别为3.5%、3.6%和5%;114A检出率分别为1.2%、0.9%和1%,其中1名为健康人D442G纯合子。心梗、脑卒中患者两种CETP基因突变频率与健康人无差别。 基因突变者ETP浓度和活性仅为非基因突变者1/3,并伴有血清高密度脂蛋白胆固醇升高,甘油三酯降低。结论 心脑血管疾病患者CETP水平升高;CETP基因突变者有显著的脂蛋白异常。 相似文献
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人血浆胆固醇酯转运蛋白(CETP)为476个或氨酸构成的疏水糖蛋白,人CETP基困长25kb,含16个外显子,15个内含子,位于染色体16q12-21。CETP的主要功能是促进血浆脂蛋白之间中性脂质胆固醇酯(CE)及甘油三酯(TG)的转运及交换。CETP分子C-端具有CE及TG结合位点,其促进CE及TG的转运机制可能为载体介导机制。CETP活性不仅受脂蛋白中脂质浓度和栽脂蛋白浓度的影响,还受很多其它因素的影响。单克隆抗体及转基因小鼠的应用使CETP在脂蛋白代谢中的作用得到了更深入的认识。胆固醇、他和脂酸可诱导CETP基因表达。迄今已在日本人及欧洲白种人中发现了几种CETP基因变异。 相似文献
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慢性肾衰透析患者胆固醇酯转运蛋白及血脂变化 总被引:8,自引:0,他引:8
本文检测 77例慢性肾衰血透患者 (HD)的胆固醇酯转运蛋白 (CETP)和血脂 ,结果显示 HD患者较对照组的 CETP、TC、HDL - C、apo AI明显降低 ,TG明显升高。按 TG分组 ,高 TG组和正常 TG组 HD患者 CETP仍显著低于对照组 ,但高 TG组 HD较正常 TG组 HD患者 TC、apo B明显升高 ,apo AI、HDL - C下降。CETP和血脂异常与 HD患者高发心、脑血管疾病密切相关 ,其发病机理需进一步探讨。 相似文献
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目的探讨胆固醇酯转运蛋白(CETP)活性与心脑血管疾病的关系。方法应用体外合成14C标记的高密度脂蛋白(HDL)样颗粒,测定了45例冠心病患者、26例脑卒中患者和40例健康人CETP活性。结果冠心病患者、脑卒中患者CETP活性分别为(17.6±5.4)%、(15.2±3.8)%,而健康人为(12.7±2.0)%,两组患者与健康人比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论CETP与动脉粥样硬化的发生、发展密切相关。 相似文献
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胆固醇酯转运蛋白(CETP)介导血浆脂蛋白之间脂质的交换和转运,血浆中中性脂质胆固醇酯(CE)和TG的转运,特别是促进高密度脂蛋白(HDL)的CE向其他包含载脂蛋白B(ApoB)的脂蛋白(极低密度脂蛋白(VLDL)、中密度脂蛋白和低密度脂蛋白(LDL))转运来调节血浆HDL,CETP还参与调节血浆HDL-C的体积和含量,被认为是胆固醇逆向转运(RCT)的关键蛋白.与糖尿病所致的脂代谢紊乱有着密切的关系.本将对CETP结构和功能、代谢的调节因素及其最新研究进展进行综述如下. 相似文献
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胆固醇酯转运蛋白的研究方法与临床意义 总被引:4,自引:0,他引:4
鄢盛恺 《国外医学:临床生物化学与检验学分册》2003,24(3):137-139
胆固醇酯转运蛋白(CETP)是一种重要的脂质转运蛋白,在胆固醇逆向转运中起关键作用,与动脉粥捍硬化的发生和发展密切相关。本文简要介绍了CETP的生物化学特征、CETP活性与质量及基因多态性的研究方法以及CETP研究的临床意义。 相似文献
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胆固醇酯转运蛋白的研究方法与临床意义 总被引:1,自引:0,他引:1
鄢盛恺 《国际检验医学杂志》2003,24(3):137-139
胆固醇酯转运蛋白 (CETP)是一种重要的脂质转运蛋白 ,在胆固醇逆向转运中起关键作用 ,与动脉粥样硬化的发生和发展密切相关。本文简要介绍了CETP的生物化学特征、CETP活性与质量及基因多态性的研究方法以及CETP研究的临床意义。 相似文献
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胆固醇酯转运蛋白基因I405V多态性与辛伐他汀的调脂效应 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:探讨胆固醇酯转运蛋白基因I405V多态性对血脂水平及辛伐他汀降脂疗效的影响.方法:选择北京大学第一医院心内科住院的血脂异常患者369例.均签署知情同意书的患者.运用聚合酶链式反应-限制性片断长度多态性方法测定胆固醇酯转运蛋白基因I405V多态性位点的基因型.对其中211例伴高胆固醇血症的冠心病患者给予辛伐他汀20 mg/d治疗,4周后测定血脂变化值,分析胆固醇酯转运蛋白基因I405V多态性与基线血脂及服用辛伐他汀后血脂变化值的相关性.结果:血脂异常患者369例均进入结果分析.[1]中国北方血脂异常患者中的胆固醇酯转运蛋白基因I405V多态性位点的基因型频率分别为Ⅱ基因型22.5%,Ⅳ基因型50.0%,ⅤⅤ基因型22.5%.[2]不同基因型的患者服用辛伐他汀4周后,Ⅱ基因型患者三酰甘油下降最多,Ⅳ基因型次之,ⅤⅤ基因型下降最少.Ⅳ基因型比Ⅱ基因型的总胆固醇降低值减少了0.27 mmol/L(P=0.01),ⅤⅤ基因型比Ⅱ基因型的三酰甘油降低值减少了0.40 mmol/L(P<0.01).Ⅳ+ⅤⅤ基因型比Ⅱ基因型的总胆固醇降低值减少了0.31 mmol/L(P<0.01).[3]调整了年龄,性别,体质量指数混杂因素的影响作用后,Ⅱ基因型患者服药4周后低密度脂蛋白胆固醇下降较多,Ⅳ+ⅤⅤ基因型下降较少.Ⅳ+ⅤⅤ基因型比Ⅱ基因型的低密度脂蛋白胆固醇降低值减少了0.27 mmol/L(P=0.03).而三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇的变化值在不同基因型患者中差异不明显.[4]基因型频率是否符合Hardy-Weinberg平衡定律的检验采用卡方检验;不同基因型间基线血脂和服药后血脂变化值的比较采用方差分析;比较不同基因型和基线血脂以及服药后血脂变化的标准回归系数(β)大小用多元线性回归分析.结论:胆固醇酯转运蛋白基因的Ⅱ基因型携带者对他汀类药物调脂疗效的反应最强.胆固醇酯转运蛋白基因I405V多态性可能是预测北京地区高胆固醇血症患者中他汀类药物调脂效应个体化差异的标记物之一. 相似文献
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目的探讨载脂蛋白E(ApoE)基因多态性和胆固醇酯转运蛋白(CETP)基因多态性与冠心病发生风险的关系以及二者有无交互作用。方法筛选冠心病患者121例及非冠心病者107例为研究对象,应用聚合酶链反应限制片长多态性分析方法检测ApoE基因多态性和CETP基因多态性。结果冠心病组ApoE4等位基因频率(10.7%)显著高于对照组(4.7%,P〈0.05);CETP基因型频率在两组间差异无统计学意义(P〉0.05)。ApoE4是冠心病的独立危险因素(OR=2.502,95%CI1.017-6.156,P=0.046)。CETP基因型及其与ApoE的交互作用与冠心病发生风险无显著性关系(P〉0.05)。结论ApoE4基因型与高TC、LDL-C水平有密切关系。冠心病患者ApoE4等位基因频率显著高于对照组。等位基因E4是冠心病的独立危险因素。CETP基因型频率在冠心病组和对照组无显著性差异。CETP基因型及其与ApoE基因型的交互作用对冠心病的发生无显著性影响。 相似文献
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目的:以往的心脏型脂肪酸结合蛋白多来自牛、鼠等动物心肌组织,本实验构建了人左心室心肌组织纯化心脏型脂肪酸结合蛋白的新方法。方法:实验于2005-01/03在南京医科大学第一附属医院心血管病研究所完成。①实验材料:人心室肌由南京医科大学第一附属医院心血管病研究所提供。②实验过程:取20g人左心室肌在缓冲液中匀浆,多步骤离心后以(NH4)2SO4进行盐析→再次离心→沉淀缓冲液重悬透析得蛋白粗提液→Sephadex G-75凝胶过滤→电泳确定主要蛋白条带的收集管号合并收集→QSepharose Fast Flow阴离子交换层析→聚乙二醇浓缩→缓冲液透析得人心脏型脂肪酸结合蛋白。③实验评估:以SIGMA公司人心脏型脂肪酸结合蛋白为对照标准品;以Tricine-SDS-PAGE电泳鉴定相对分子质量;以鼠抗人脂肪酸结合蛋白单克隆抗体及羊抗鼠IgG对其进行Western印迹检测鉴定其特异性。结果:①Sephadex G-75凝胶过滤柱层析结果:各组分经Tricine-SDS-PAGE电泳检测证实,部分收集管中存在相对分子质量约14400的人心脏型脂肪酸结合蛋白。②阴离子交换柱层析结果:在洗脱液NaCl浓度达6mmol/L时,出现蛋白峰,人心脏型脂肪酸结合蛋白被洗脱;NaCl浓度达20mmol/L时,蛋白峰降至基线,蛋白洗脱结束。③纯化的人心脏型脂肪酸结合蛋白鉴定结果:经电泳显示其相对分子质量约为14000,纯度约为90%;Western印迹证实其可被抗人脂肪酸结合蛋白单克隆抗体特异识别,与对照标准品SIGMA公司人心脏型脂肪酸结合蛋白结果一致。实验从20g湿重心室肌中共纯化得到15.4mg心脏型脂肪酸结合蛋白,得率为0.77mg/g。结论:Sephadex G-75凝胶过滤柱层析及阴离子交换柱层析相结合,可用于人心脏型脂肪酸结合蛋白的纯化。 相似文献
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抗胆固醇酯转运蛋白单克隆抗体的制备及其应用 总被引:3,自引:2,他引:3
目的 自行制备胆固醇酯转运蛋白 (CETP)单克隆抗体 (McAb) ,建立人血清CETP的酶联免疫吸附测定法 (ELISA) ,并调查中国人群CETP参考值。方法 应用杂交瘤技术制备CETPMcAb。用棋盘试验确定ELISA法的反应条件 ;进行灵敏度、精密度、回收率、特异性试验。结果 制备出一株特异性好、反应性强的CETPMcAb。筛选出ELISA法最佳反应条件 ,样品稀释2 0 0 0倍 ,可检测 0 2 8~ 4 5 2mg/L的血清CETP水平 ;平均批内CV 4 9% ,平均批间CV 10 2 % ;平均回收率为 92 5 %~ 97 2 % ;特异性高。检测结果同国外试验室ELISA法高度相关。 112 8例参考人群血清CETP浓度为 1 84± 1 5 5mg/L ,女性高于男性 ,随着年龄增高 ,CETP浓度降低。冠心病患者CETP浓度为 2 66± 2 0 8mg/L ,较相应对照组显著升高 (P <0 0 1)。结论 该法具有方便、快速、准确、特异等优点 ,对了解CETP在动脉粥样硬化发生中的作用有着十分重要的意义。 相似文献
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目的:探讨胆固醇酯转运蛋白基因I405V多态性对血脂水平及辛伐他汀降脂疗效的影响。方法:选择北京大学第一医院心内科住院的血脂异常患者369例。均签署知情同意书的患者。运用聚合酶链式反应-限制性片断长度多态性方法测定胆固醇酯转运蛋白基因I405V多态性位点的基因型。对其中211例伴高胆固醇血症的冠心病患者给予辛伐他汀20mg/d治疗,4周后测定血脂变化值,分析胆固醇酯转运蛋白基因I405V多态性与基线血脂及服用辛伐他汀后血脂变化值的相关性。结果:血脂异常患者369例均进入结果分析。①中国北方血脂异常患者中的胆固醇酯转运蛋白基因I405V多态性位点的基因型频率分别为II基因型22.5%,IV基因型50.0%,VV基因型22.5%。②不同基因型的患者服用辛伐他汀4周后,II基因型患者三酰甘油下降最多,IV基因型次之,VV基因型下降最少。IV基因型比II基因型的总胆固醇降低值减少了0.27mmol/L(P=0.01),VV基因型比II基因型的三酰甘油降低值减少了0.40mmol/L(P<0.01)。IV+VV基因型比II基因型的总胆固醇降低值减少了0.31mmol/L(P<0.01)。③调整了年龄,性别,体质量指数混杂因素的影响作用后,II基因型患者服药4周后低密度脂蛋白胆固醇下降较多,IV+VV基因型下降较少。IV+VV基因型比II基因型的低密度脂蛋白胆固醇降低值减少了0.27mmol/L(P=0.03)。而三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇的变化值在不同基因型患者中差异不明显。④基因型频率是否符合Hardy-Weinberg平衡定律的检验采用卡方检验;不同基因型间基线血脂和服药后血脂变化值的比较采用方差分析;比较不同基因型和基线血脂以及服药后血脂变化的标准回归系数(β)大小用多元线性回归分析。结论:胆固醇酯转运蛋白基因的II基因型携带者对他汀类药物调脂疗效的反应最强。胆固醇酯转运蛋白基因I405V多态性可能是预测北京地区高胆固醇血症患者中他汀类药物调脂效应个体化差异的标记物之一。 相似文献
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人工合成高密度脂蛋白样颗粒测定血清胆固醇酯转运蛋白活性 总被引:5,自引:0,他引:5
目的建立血清胆固醇酯转运蛋白活性测定方法。方法用14C标记的胆固醇酯合成高密度脂蛋白(HDL)样颗粒作为胆固醇酯的供体,以低密度脂蛋白为受体测定血清中胆固醇酯转运蛋白(CETP)活性,并对40例健康人、45例冠心病(CHD)、26例脑卒中患者血清CETP活性进行分析。结果 该方法线性范围为0~30%;高(26%)、低(6.8%)活性批内变异系数(CV)分别为6.0%、7.5%,批间CV分别为11.5%和12.3%;45例CHD患者血清CETP活性(x±s)为17.6%±5.4%,26例脑卒中患者为15.2%±3.8%,均明显高于健康对照(12.7%±3.9%)(P<0.01)。结论该法简便快速、精密度较高,为临床及科研工作中测定CETP活性提供了一种有效的方法。 相似文献
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目的:探讨运动对葡萄糖转运载体蛋白4基因表达的调控作用。资源来源:应用Medline检索1990-01/2004-01中国医学、生物化学核心期刊关于葡萄糖转运载体蛋白4与运动之间关系研究方面的相关献,检索词:葡萄糖转运载体蛋白4(GLUT4)、运动(exercise)、肌肉增强因子(MEF 2,myoevte enhancer factor2)、葡萄糖转运载体蛋白4增强因子(GEF,GLUT4 enhancer factor)。资料选择:选择葡萄糖转运载体蛋白4与运动关系的相关献56篇。资料提炼:在56篇献中,内容呈不同程度重复的有14篇,给予删除;对42篇献进行分类整理分析,其中15篇选用为参考献。资料综合:运动可以增加葡萄糖转运载体蛋白4mRNA的表达,这一机制正在研究中。一次急性运动后葡萄糖转运载体蛋白4的基因转录会短暂激活;经过几天的重复训练后发现葡萄糖转运载体蛋白4蛋白增加两三倍。对葡萄糖转运载体蛋白4启动子的研究结果显示,有两条DNA序列与代谢调节关系密切并使运动应答中基因转录增加。这些DNA元件可与肌肉增强因子和葡萄糖转运载体蛋白4增强因子结合。运动训练时肌肉收缩可激活转录因子(肌肉增强因子,葡萄糖转运载体蛋白4增强因子)进而增加葡萄糖转运载体蛋白4表达。钙调蛋白激酶和AMP激酶活性的升高可使葡萄糖转运载体蛋白4基因转录提高。结论:与肌肉收缩有关的转录因子(肌肉增强因子,葡萄糖转运载体蛋白4增强因子)的激活与运动过程中葡萄糖转运载体蛋白4表达的增加有关,而如何激活这些蛋白的机制仍是研究重点。 相似文献
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目的 分析类风湿关节炎(RA)患者血清胆固醇酯转运蛋白(CETP)水平及对脂质紊乱的影响.方法 ELISA法测定RA患者(41例)血清CETP浓度,并与52例年龄、性别匹配的健康人作对照.结果 RA组CETP浓度较对照组显著增加(3.15±2.04 mg/L vs. 2.26±1.86 mg/L,P<0.05).总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG) 、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)等致动脉粥样硬化的血脂和脂蛋白水平也明显升高.结论 RA患者血清CETP水平显著升高,高水平CETP可能是致RA高血脂的原因之一. 相似文献