银染单链构象多态性技术检测结核杆菌rpoB基因突变

目的探讨分子生物学方法在临床标本结核分枝杆菌利福平（ＲＦＰ）耐药性评估中的应用价值。方法设计针对ｒｐｏＢ基因１８３ｂｐ扩增引物,运用聚合酶链反应单链构象多态性分析（ＰＣＲＳＳＣＰ）银染色方法,检测了４５株结核杆菌临床分离株,并对其中部分菌株进一步做了ＤＮＡ序列分析。结果以药敏试验结果为对照,有１６株ＲＦＰ敏感株及２６株ＲＦＰ耐药株经ＳＣＰ方法得到检测,阳性占９３．３％,特异性１００％。对部分菌株１８３ｂｐ片断测序结果显示,ＲＦＰ敏感株无ｒｐｏＢ基因突变,耐药株均发生碱基突变,分别导致编码５３１及５２６位点的氨基酸改变。结论银染ＰＣＲＳＣＰ方法具有简便,快速,准确的特点,提高敏感性,可以对临床标本结核杆菌利福平耐药突变进行鉴定。序列分析证明结核分枝杆菌利福平耐药菌株有ｒｐｏＢ基因突变。     

三种方法在检测Leber‘s视神经萎缩mt—DNA突变的比较

比较ＭＳＰ－ＰＣＲ、ＳＳＣＰ、ＲＦＬＰ在检测Ｌｅｒｂｅｒ’ｓ视神经萎缩（ＬＨＯＮ）线粒体ＤＮＡ（ｍｔ－ＤＮＡ）１１７７８突变中的优缺点。７７例受试者，分别用ＭＳＰ－ＰＣＲ、ＳＳＣＰ、ＲＦＬＰ法检测ｍｔ－ＤＮＡ１１７７８突变。被ＭＳＰ－ＰＣＲ检出的４８例阳性者同时也被ＳＳＣＰ检出，另外ＳＳＣＰ还检出６例杂合性突变；ＭＳＰ－ＰＣＲ和ＳＳＣＰ检测阳性的９例患者，再用ＲＦＬＰ（ＭａｅⅢ）检测也得出一致结果     

结核分枝杆菌链霉素耐药分离株rpsL基因突变的检测

目的 探讨结核分枝杆菌（结核菌）对链霉素（Ｓｍ）产生耐药性的分子机制,建立直接快速检测结核菌Ｓｍ药物敏感性的试验方法。方法 应用聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）银染分析技术检测３２例结核菌临床分离株的ｒｐｓＬ基因。结果 以结核菌标准株（Ｈ３７Ｒｖ）为对照,３２株结核菌临床分离株中,１０株Ｓｍ敏感株的ｒｐｓＬ基因未见ＳＳＣＰ泳动异常,２２株Ｓｍ耐药株中,１６株（７２．７％）的ｒｐｓＬ     

急性胰腺炎病人血清G—CSF和CRP的变化

目的 测定急性胰腺炎（ＡＰ）病人血清粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）和Ｃ－反应蛋白（ＣＲＰ）水平。并春临床意义。方法 对４１例ＡＰ病人和４０例正常对照组利用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法测定血清Ｇ－ＣＳＦ,快速免疫消浊比浊法测定ＣＲＰ。结果 ＡＰ病人血清Ｇ－ＣＳＦ和ＣＲＰ水平较正常对照组明显增高,其中重症急性胰腺炎（ＳＡＰ）又轻轻症急性胰腺炎（ＭＡＰ）病人血清Ｇ－ＣＳＦ和ＣＲ）Ｐ水平增高（Ｐ〈０．０５）。     

运动、巯甲丙脯酸与巯甲丙脯酸运动肾显像检测原发性高血压的肾功能

目的：观察和分析运动（ＥＸ）、巯甲丙脯酸（ＣＡＰ）及巯甲丙脯酸运动（ＣＡＰ－ＥＸ）介入对轻中度原发性高血压（ＥＨ）患者肾功能的影响。方法：１０例正常志愿者和１５例轻中度原发性高血压患者,在１个月内完成基础双核素肾显像（ＢＳ－ＲＳ）、运动双核素肾显像（ＥＸ－ＲＳ）、巯甲丙脯酸双核素肾显像（ＣＡＰ－ＲＳ）及巯甲丙脯酸运动双核素肾显像（ＣＡＰ－ＥＸ－ＲＳ）４次检查。图像均按ＡＤＡＣ公司提供的计算机软件进行处理。结果：ＥＸ和ＣＡＰ－ＥＸ介入,ＧＦＲ,ＥＲＰＦ均明显降低（Ｐ＜００１）;而ＣＡＰ介入未见明显变化。ＥＨ组与对照组相应方法间ＧＦＲ,ＥＲＰＦ不存在显著差异（Ｐ＞００５）。１５例ＥＨ患者中,基础肾显像及巯甲丙脯酸肾显像结果均正常,而４０％（６／１５）的患者出现异常运动肾图,３０％（５／１５）出现异常巯甲丙脯酸运动肾图,二者同时异常的有５例,其中１例于ＣＡＰ－ＥＸ－ＲＳ介入时,异常更加明显,均表现为对称性的１３１Ｉ－ＯＩＨ和９９ｍＴｃ－ＤＴＰＡ排泄延迟,１３１Ｉ－ＯＩＨ肾图和９９ｍＴｃ－ＤＴＰＡ肾图曲线宽大,排泄段抬高。上述异常变化在１３１Ｉ－ＯＩＨ和９９ｍＴｃ－ＤＴＰＡ肾图曲线中,以９９ｍＴｃ－ＤＴＰＡ肾图     

类风湿因子对临床常用免疫学试验干扰的探讨

目的 探讨类风湿因子（ＲＦ）在临床常规免疫学试验中的干扰。方法 采用ＥＬＩＳ莘接法和夹心法检测ＣｏｘＢＡｇ、抗ＣｏｘＢＩｇＭ抗体ＡＦＰ,采用胶体金渗透沉析法检测ＡＦＰ;采用胶乳涨集法检测ＣＲＰ、ＦＤＰ、Ｄ－二聚体,采用免疫速率法定量检测ＲＦ,血清中ＲＦ去除采用０．１Ｍ、２－ＭＦ Ｔｒｉｓ－Ｈｃｌ溶液。结果数据统计分析采用Ｘ＾２二聚体。结果 ５６例ＲＦ阳性血清去除ＲＦ后各试验阳性均减少,较去除前有显     

HLA—II类抗原的基因分析进展

近年来对ＨＬＡ－Ⅱ抗原的分析已从血清学方法转向分子生物学方法。本文介绍ＲＦＬＰ，ＰＣＲ－ＲＦＬＰ，ＳＳＣＰ，ＰＣＲ－ＳＳＰ＋ＲＦＬＰ及Ｈｅｔｅｒｏｕｄｕｐｌｅｘ技术对ＨＬＡ－Ⅱ类基因检测的研究进展。     

扩张型心肌病TNF,IL—1和SIL—2R的检测及其意义

应用双抗体夹心法及小鼠胸腺细胞增殖法等分别检测了３０例原发性扩张型心肌病（ＤＣＭ）的血清肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）、白细胞介素（ＩＬ－１）及可溶性白细胞介素２受体（ＳＩＬ－２Ｒ）的水平，结果发现ＤＣＭ病人ＴＮＦ、ＩＬ－１及ＳＩＬ－２Ｒ均明显高于正常对照组（ＮＣ，Ｐ〈０．００１，Ｐ〈０．０１，Ｐ〈０．００１），提示ＴＮＦ，ＩＬ－１及ＳＩＬ－２Ｒ可能在ＤＣＭ的发病机理中有意义。     

电化学治疗对人肝癌细胞SMMC7721化疗耐药性的影响

目的 观察电化学治疗对人肝癌细胞ＳＭＭＣ７７２１化疗耐药性的影响,为其临床应用提供实验依据。方法 细胞计数法观察ＥＣＴ、化疗药阿霉素（ＡＤＲ）结合的抑癌效应,应用“多药效应分析软件”分析两之间的相互作用。流式细胞仪（ＦＣＭ）分析ＥＣＴ细胞内ＡＤＰ累积的影响,免疫组化法检测ＥＣＴ对ＳＭＭＣ７７２１细胞Ｐ－ｇｐ的影响,ＲＴ－ＰＣＲ法观察ＥＣＴ对细胞ＭＤＲ１ ｍＲＮＡ水平的影响。结果 ＥＣＴ与ＡＤＲ结     

DiaSysR／S尿沉渣定量分析工作站检测健康人尿沉渣参考值范围 …

确定ＤｉａＳｙｓＲ／Ｓｎ尿沉渣定量分析工作站检测健康人尿沉渣参考值范围。方法：按ＮＣＣＬＳ Ｌｉｔｅｒａ－ｔｕｒｅＧＰ－１６－Ａ（ＩＳＢＮ １－５６２３８－２８２－９）对尿液分析要求,用ＤｉａＳｙｓＲ／Ｓ２００３尿沉渣定量分析工作对４０５名健康人进行尿沉渣分析。结果：（１）尿红细胞：各个年龄组和男女性别的检查值经Ｆ检验均有显著性差异（Ｐ〈０．０５）;参考值范围;浓缩尿男性０－７个μ／Ｌ,女性０－１     

肝癌,肝硬化患者AFP,SF,β2—MG,HA联合检测结果分析

采用放射免疫法（ＲＩＡ）对４２例原发性肝癌（ＰＨＣ）、３１例肝硬化（ＬＣ）及２８例正常人的血清甲胎蛋白（ＡＦＰ）、铁蛋白（ＳＦ）、β２－微球蛋白（β２－ＭＧ）和透明质酸（ＨＡ）进行联合检测。结果，ＰＨＣ和ＬＣ组ＳＦ、β２－ＭＧ、ＨＡ单项检测的阳性率分别为７１．４％和２５．８％（Ｐ〈０．０１）、５０．０％和３８．７％（Ｐ〈０．０５）、８３．３％和８３．８％（Ｐ〉０．０５）；ＳＦ、β２－ＭＧ、ＨＡ含量     

快速检测乙型肝炎病毒C基因启动子联合点突变

目的　研究聚合酶链反应限制性片段长度多态性分析（ Ｐ Ｃ Ｒ Ｒ Ｆ Ｌ Ｐ） 法检测乙型肝炎病毒（ Ｈ Ｂ Ｖ） Ｃ 基因启动子区 Ｔ１７６２／ Ａ１７６４ 联合点突变的有效性。方法　将４４ 份慢性乙型肝炎患者的血清 Ｐ Ｃ Ｒ Ｒ Ｆ Ｌ Ｐ结果同测序结果进行综合分析。结果　在４４ 份慢性乙型肝炎患者的血清中,有１２ 份血清 Ｐ Ｃ Ｒ Ｒ Ｆ Ｌ Ｐ的结果为单纯突变株感染;１０ 份为突变株与野生株混合感染;２２ 份为单纯野生株感染,与测序结果相吻合。结论　 Ｐ Ｃ Ｒ Ｒ Ｆ Ｌ Ｐ检测 Ｈ Ｂ Ｖ／ Ｃ 基因启动子区 Ｔ１７６２／ Ａ１７６４ 联合点突变具有快速、简便以及敏感性高、特异性强等优点,且可用于观察 Ｔ１７６２／ Ａ１７６４ 变异株的动态变化。但是此法也有一定的局限性。     

脑膜炎患者血清和脑脊液C-反应蛋白水平的变化

为观察各型脑膜炎患者血清和脑脊液（ Ｃ Ｓ Ｆ）中 Ｃ 反应蛋白（ Ｃ Ｒ Ｐ）浓度变化情况，应用速率散射比浊法对 ８３ 例各型脑膜炎患者和１６ 例正常对照进行检测。结果化脓性脑膜炎（化脑）、结核性脑膜炎（结脑）患者血清和 Ｃ Ｓ Ｆ中 Ｃ Ｒ Ｐ与正常对照组比较均显著增高（ Ｐ＜ ０００１），化脑显著高于结脑（ Ｐ＜ ０００１），病毒性脑炎（病脑）与正常对照比较无显著差异（ Ｐ＞ ００５）。血清 Ｃ Ｒ Ｐ升高幅度较 Ｃ Ｓ Ｆ大。结果表明血清和 Ｃ Ｓ Ｆ中 Ｃ Ｒ Ｐ检测对于颅内感染的诊断、鉴别诊断以及疗效观察有一定的参考价值。     

肾综合征出血热患者尿液中融合细胞的检测

病毒可以诱导细胞融合，是其细胞病变效应之一。检测尿融合细胞（ＦＣ）对肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）的早期快速诊断具有一定意义（中华传染病杂志，１９９６，１４（２）：８９）。本文介绍尿ＦＣ检测方法，井用ＥＬＩＳＡ法测定患者血清中ＨＦＲＳ－ＩｇＭ抗体对ＦＣ结果进行对比评价。一、材料和方法１．材料（１）对象本院门诊ＨＦＲＳ患者１４２例，各取尿液５０～１００ｍｌ检测ＦＣ，同时取血２ｍｌ测定血清ＨＦＲＳ－ＩｇＭ抗体。２．方法（１）ＦＣ涂片染色法　取新鲜混匀尿液１０ｍｌ于离心管中，离心２０００ｒ／ｍｉｎ、１０ｍ…     

严重型再生障碍性贫血患者骨髓和外周血 HLA-DR~ T 细胞的变化及其淋巴细胞造血抑制活性的研究

目的：进一步阐明免疫紊乱在严重型再生障碍性贫血（ＳＡＡ）发病中的作用。方法：对１３例初诊ＳＡＡ、７例抗淋巴细胞球蛋白（ＡＬＧ）治疗后恢复期ＳＡＡ（ｒＳＡＡ）患者骨髓和外周血及对照组（包括９名骨髓对照和１１名外周血对照）的ＨＬＡ－ＤＲ＋Ｔ细胞进行检测，并对部分患者和对照组刺激的外周血去单核细胞的单个核细胞培养上清液（ＰＨＡ－ＬＹＣＭｓ）的造血活性进行检测。结果：初诊ＳＡＡ患者骨髓及外周血ＨＬＡ－ＤＲ＋Ｔ细胞显著高于对照组（Ｐ＜０．００１）；ＡＬＧ治疗后ｒＳＡＡ患者骨髓和外周血ＨＬＡ－ＤＲ＋Ｔ细胞较初诊ＳＡＡ下降，但仍高于对照组（Ｐ＜０．００１）；ＳＡＡ患者骨髓内ＨＬＡ－ＤＲ＋Ｔ细胞显著高于外周血（Ｐ＜０．００１）；与对照组比较，初诊的ＳＡＡ患者外周血ＰＨＡ－ＬＹＣＭｓ对正常骨髓ＢＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－ＧＭ具有显著的抑制作用（Ｐ＜０．００１），而ＡＬＧ治疗后ｒＳＡＡ患者ＰＨＡ－ＬＹＣＭｓ对正常骨髓ＢＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－ＧＭ的抑制作用明显减弱。结论：ＨＬＡ－ＤＲ＋Ｔ细胞在ＳＡＡ的发病中可能发挥重要的作用。     

血液透析对慢性肾功能衰竭患者血清SIL2R、IL6和TNFα的影响

目的：探讨慢性肾功能不全（ＣＲＦ）患者细胞免疫功能状况,以及血液透析（血透）的影响。方法：应用酶联免疫吸附（ＥＬＩＳＡ）双抗体夹心法检测３０例ＣＲＦ未透析患者和６２例血透患者血透前后及对照组血清可溶性白介素－α受体（ＳＩＬ－２Ｒ）、白介素－６（ＩＬ－６）和肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）水平。结果：与对照组相比,ＣＲＦ未透析患者和血透患者血清ＳＩＬ－２Ｒ、ＩＬ－６和ＴＮＦ－α水平无显著差异。血清ＳＩＬ－２Ｒ较透前显著增高。结论：ＣＲＦ患者均存在显著的细胞免疫功能紊乱,单次透析对细胞免疫功能无显著影响。     

声学定量硝酸异山梨醇酯试验预测冠心病患者择期经皮冠脉腔内成形术后左心功能

目的　检验声学定量－ 硝酸异山梨醇酯试验（ ＡＱＩＳＤＮ） 能否在术前预测择期经皮冠脉腔内成形术（ＰＴＣＡ） 后心功能。方法　随机对择期ＰＴＣＡ ３０ 例患者在介入前应用声学定量技术（ ＡＱ） 测定经口吸入硝酸异山梨醇酯（ＩＳＤＮ）２ ．５ ｍ ｇ 之前及吸入后５ ｍｉｎ 的左心功能参数的改变。并与介入后ＡＱ 左心功能测值相对照。结果　介入前吸入ＩＳＤＮ 后５ ｍｉｎ 峰值射血率（ＰＥＲ） 的改变与介入后ＰＥＲ 的改变相关,相关系数ｒ ＝ ０ ．７２（Ｐ ＝ ０ ．００１） ;也与介入后峰值充盈率（ＰＦＲ） 的改变相关,相关系数ｒ ＝ ０ ．５６（ Ｐ ＝ ０ ．００１） 。回归分析介入后ＰＦＲ值,能由介入前ＡＱＩＳＤＮ 的ＰＥＲ、ＰＦＲ 值代入公式推算：ＰＦＲ ＝ ＰＦＲ１ － ０ ．０８ ＋ ０ ．９０ ×（ ＰＥＲ２ － ＰＥＲ１） 。其中ＰＦＲ 为介入后预测值,ＰＥＲ１ 、ＰＦＲ１ 为静息时测值,ＰＥＲ２ 为吸入ＩＳＤＮ 后５ ｍｉｎ 时的测值（ 单位：ＥＤＶ／Ｓ,Ｓｉｇ ＝０ ．００１４） 。把ＡＱＩＳＤＮ 吸入后５ ｍｉｎ 的ＰＥＲ 大于等于吸入前和小于吸入前作为预测介入后心功能改善和恶化的标准,预测结果与实测值对比,本标准对介入后ＥＦ、ＰＦＲ、ＰＥＲ 的     

应用PCR－SSCP技术检测B淋巴细胞恶性肿瘤患者骨髓中微量肿瘤细胞

应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术检测Ｂ淋巴细胞恶性肿瘤患者骨髓中微量肿瘤细胞于力，刘敬忠，孙燕，刘春蕙，汪月增我们把多聚酶链反应（ＰＣＲ）与ＤＮＡ单链构象多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）相结合，建立了一种检测方法，对骨髓中微量肿瘤细胞进行了检测。材料和方法１标...     

广东人抗活化蛋白C及FV Leiden突变的检测

为了解活化蛋白Ｃ抵抗（ＡＰＣＲ）以及凝血因子Ｖ Ｌｅｉｎｄｅｎ（ＦＶ Ｌｅｉｄｅｎ）突变在广东人群及血栓性疾病患者中发生的情况,用序列特异性引物ＰＣＲ（ＰＣＲ－ＳＳＰ）方法检测１３０名广东籍正常人ＦＶ Ｌｅｉｄｅｎ突变,其中５７名正常人用ＡＰＣ－ＡＰＴＴ方法检测了ＡＰＣＲ。结果有３名正常人ＡＰＣＲ阳性。但所有的样本均未发现ＦＶ Ｌｅｉｄｅｎ突变,ＡＰＣＲ阳性是否与其他未知的基因缺陷有关,有待进一步     

重型颅脑伤患者红细胞免疫功能与脂质过氧化物、超氧化物歧化酶的相关性研究

探讨颅脑伤患者红细胞免疫功能改变与超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、过氧化脂质（ＬＰＯ）的关系。检测３０例重型颅脑伤患者红细胞免疫功能及ＳＯＤ、血清ＬＰＯ变化。结果：红细胞Ｃ３ｂ受体花环率（ＲＣ３ｂＲＲ）及红细胞免疫粘附促进率（ＲＦＥＲ）均明显降低（Ｐ均＜０．０１），红细胞免疫复合物花环率（ＲＩ－ＣＲ）及红细胞免疫抑制率（ＲＦＩＲ）则明显升高（Ｐ＜０．０１）；红细胞ＳＯＤ活性明显降低（Ｐ＜０．０１），血清中ＬＰＯ则明显升高（Ｐ＜０．０１）。ＲＣ３ｂＲＲ与ＲＦＥＲ及ＳＯＤ呈显著正相关（Ｐ＜０．０１）；与ＲＦＩＲ及ＬＰＯ则呈显著负相关（Ｐ＜０．０１）。作者认为：重型颅脑伤患者红细胞免疫功能降低，机体防御能力下降，易发生感染等并发症；应用ＳＯＤ等药对提高治愈率、促进康复有意义。