酶标SpA免疫酶法检测宫颈癌患者血清中单纯疱疹病毒抗体

许多报告认为单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)感染与宫颈癌的发生有关。应用免疫酶法和免疫荧光法检测 HSV/IgG 抗体已有报道。前者需用荧光显微镜,应用受到限制。免疫酶法检测患者体液中病毒特异性抗体比其它方法简便易行,且敏感性和特异性较好,应用日广。用它检测病毒 IgG 抗体,通常以酶标抗人 IgG(简称酶标抗体)作为第二抗体。本文将辣根过氧化物酶标记葡萄球菌 A 蛋白(简称酶标 SpA)用于免疫酶法     

单纯疱疹病毒抗体检测在生殖器疱疹断中的应用

目的 探讨单纯疱疹病毒(HSV)抗体检测对生殖器疱疹的诊断意义,了解疑似生殖器疱疹患者单纯疱疹病毒感染情况.方法 用酶联免疫吸附试验(ELISA)对140例疑似生殖器疱疹患者(观察组)进行HSV抗体检测.另选100例健康体检人员血清作为对照组.结果 140例疑似生殖器疱疹患者HSV-ⅠIgM、HSV-ⅠIgG的检出率分...     

钩端螺旋体病人血清抗体的SPA-ELISA检测法

用酶标葡萄球菌A 蛋白作ELISA 检测临床确诊、显凝试验为阳性的钩端螺旋体病人血清59份,同时用40份健康人血清与酶标抗体作ELISA进行比较。两种方法都有较高的敏感性和特异性,而酶标葡萄球菌A 蛋白具有制备简单,标记步骤简便,比较稳定和易被推广等优点,可替代酶标抗体在ELISA中应用。     

酶联免疫吸附试验与中和试验检测Ⅰ型单纯疱疹病毒抗体的比较

单纯疱疹性角膜炎是影响人们健康的一种较严重的眼病,容易复发,治疗困难,采用Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV—Ⅰ)灭活疫苗进行特异性免疫治疗,经过几个单位的试用,初步取得一定效果。为配合卫生部北京生物制品研究所和我校附属一院眼科进一步研究该疫苗免疫效果时,我们比较了酶联免疫吸附试验(ELISA)与中和试验检测Ⅰ型单纯疱疹病毒特异性抗体的效果,不仅供探讨疫苗免疫效果提供实验数据,而且为扩大ELISA的应用提供一定的资料。     

微量血标本酶联免疫吸附试验检测HBV标记物

1978年文献报告按照用抗体覆盖的微量滴定板的类似方法,使用辣根过氧化物酶标记e抗体的IgG用于检测。证实此ELISA(酶联免疫吸附试验)方法的灵敏度近似RIA。近年来,用ELISA法检测血清中HBV标记物,     

酶联免疫吸附试验检测乙脑IgM,IgG抗体的研究

本文报导了间接微量酶联免疫吸附试验检测乙脑病毒抗体的实验条件和方法。抗元系用乙脑病毒感染的幼鼠脑,经鱼精蛋白和聚乙二醇处理的半提纯抗元,将抗元包被于国产聚苯乙烯微量塑料板,应用马抗人IgG辣根过氧化物酶结合物和马抗人IgM辣根过氧化物酶结合物检测人血清中乙脑病毒特异性IgM IgG抗体;与HI、CF试验比铰,三种方法结果基本一致,有一定相关性。经阻断试验,取代试验等ELISA结果是特异性的。ELISA和HI试验检测IgG抗体敏感性相近;ELISA检测IgM抗体比2ME—HI试验的敏感性稍高,是一种帮助乙脑早期诊断比较理想方法。ELISA检测病人血清较HI、CF试验快速、简便、节省材料、而且被检血清不需事先处理等优点,有可能代替HI、CF试验供检测乙脑病毒抗体,作为常规诊断之用。     

单纯疱疹病毒Ⅱ型DNA疫苗的免疫研究

目的　构建新型单纯疱疹病毒Ⅱ型DNA疫苗 ,鉴定其在哺乳细胞中的表达 ,检测其激发动物产生免疫反应的能力。方法　RT -PCR鉴定gD基因在COS - 7细胞中的表达 ,ELISA检测血清中中和抗体水平 ,用病毒攻击后检测其保护效率。结果　pVAX -gD能在COS- 7细胞中表达 ,并可激发免疫动物产生高滴度中和抗体 ,有效保护动物免受致死量病毒的攻击。结论　构建的新型单纯疱疹DNA疫苗是一株很有希望的人用生殖器疱疹疫苗     

人源抗H7N9血凝素中和抗体IgG的制备及鉴定

目的:将从全人源Fab噬菌体抗体库筛选获得的抗H7N9血凝素Fab抗体基因进行基因工程改造,以表达全分子抗H7N9血凝素中和抗体IgG,并验证其对H7N9型禽流感病毒的中和活性?方法:用H7N9型禽流感病毒血凝素筛选全人源Fab噬菌体抗体库,构建全分子IgG抗体重?轻链表达载体,共转染293 FreeStyle(293F)细胞,表达并纯化IgG抗体?应用ELISA及Western blot实验检测抗体免疫学活性,微量中和实验及鸡胚预防保护实验检测其中和活性,血凝抑制试验判断其结合血凝素亚基?结果:成功筛选出1株全人源抗H7N9血凝素Fab抗体基因并构建IgG真核表达载体?获得的全分子IgG抗体重?轻链序列正确,并可特异性结合H7N9血凝素?微量中和实验证明其对H7N9型禽流感病毒有良好中和活性,中和滴度为15.6 μg/mL?鸡胚预防保护实验显示抗体用量为200 μg时可达100%保护率?血凝抑制试验表明其结合血凝素HA2亚基?结论:制备的重组全人源全分子抗H7N9血凝素IgG抗体可特异性识别H7N9型禽流感病毒血凝素,对H7N9型禽流病毒有显著的中和作用,为进一步研发用于禽流感防治的抗体药物奠定基础?     

酶标葡萄球菌A蛋白ELISA法检测大年龄人群白喉免疫效果的研究(简报)

人群对白喉免疫力的高低与体内抗毒素抗体水平有密切关系,因此,检测人群血清中白喉抵毒素抗体水平,对评价免疫状况、观察预防接种效果等均有重要意义。本研究为配合白喉预防及流行病学调查的实际需要,探讨用酶标葡萄球菌A蛋白(简称酶标SpA)的 ELISA法检测人群血清白喉抗毒素抗体水平,并与间     

用微量ELISA法检测水痘—带状疱疹病毒IgG抗体

用微量ELISA法检测807例份不同年龄、性别的健康人血清中水痘－带状疱疹病毒疱疹病毒IgG抗体，0－1岁年龄组最低，为48．15％，25－35岁年龄达到高峰，以后逐渐下.降无性别差异。随机取95份血清与CF进行比较，两法的总符合率为90．53％，阳性符合率为94．20％，rs^1=0.7760,P<0.001,ELISA法的GMT是CF法的64倍。     

过敏性紫癜食物特异性IgG检测及禁食/轮替治疗疗效观察

目的检测单纯型过敏性紫癜患者血清14种食物特异性免疫球蛋白G(IgG),并应用禁食/轮替治疗观察复发率。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测62例单纯型过敏性紫癜及60例健康对照组血清14种食物特异性IgG抗体水平,将62例单纯型过敏性紫癜分为治疗组32例及对照组30例,治疗组行禁食/轮替治疗,对照组行未控制饮食的常规治疗,6个月后观察复发率并检测二组IgG水平。结果单纯型过敏性紫癜患者IgG水平高于健康对照组,两组差异有统计学意义(P<0.05);单纯型过敏性紫癜患者治疗6个月后IgG均下降,且治疗组较对照组下降明显,差异有统计学意义(P<0.05);于6个月后对两组做问卷调查,治疗组复发率6.67%。对照组复发率33.33%;两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论食物特异性IgG抗体水平与单纯型过敏性紫癜有相关性,禁食/轮替治疗对本病的防治有重要意义。     

生殖器溃疡患者杜克雷氏链杆菌、梅毒螺旋体及人类单纯疱疹病毒2型抗体血清学检测及其与HIV感染的关系

目的：检测女性生殖器溃疡患者血清杜克雷氏链杆菌抗体、梅毒螺旋体血清学、人类单纯疱疹病毒2型抗体，并探讨其与人类免疫缺陷病毒(HIV)感染之间的关系。方法：将102例女性生殖器溃疡患者作为研究对象。采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清HIV抗体，并以蛋白印迹试验(western blot)进行确认；采用快速血浆反应试验(RPR)筛查梅毒，对螺旋体感染患者进一步进行梅毒螺旋体红细胞凝集试验(TPHA)；采用Westem blot测定人类单纯疱疹2型特异糖蛋白抗体；采用酶免法(EIA)测定抗杜克雷氏链杆菌抗体IgA及IgG。结果：杜克雷氏链杆菌IgG或／及IgA阳性共计30例(30．61％)；梅毒RPR或／及TPHA阳性51例(52．04％)；单纯疱疹2型特异糖蛋白抗体阳性17例(17．35％)。98例患者中，HIV抗体阳性47例(47．96％)。30例软下疳患者中19例HIV抗体阳性(63．33％)，51例梅毒病例中21例(41.18％)呈HIV感染，17例单纯疱疹病毒2型特异糖蛋白抗体阳性者中7例(41．18％)HIV抗体阳性；三者之间HIV抗体阳性率无显著差异，但均有易感倾向。结论：杜克雷氏链杆菌、梅素螺旋体及单纯疱疹2型感染所致的女性生殖器溃疡与HIV感染有密切联系。     

用免疫胶体金层析法检测血液标本中2型单纯疱疹病毒抗体

目的 建立了一种特异性的用于免疫胶体金层析技术(GICA)检测单纯疱疹病毒2型(HSV-2)的免疫球蛋白IgG.方法 共有239份血清和100份全血标本用免疫胶体金层析法进行检测,同时,血清的标本用ELISA方法作对照检测,全血标本分别用ELISA 和免疫印迹法(IB)确定.结果 与ELISA 方法对比,GICA测定特异性的HSV-2抗体的敏感性为 100%(69/69,特异性为97.1%(171/176);与HSV-1.轮状病毒和EB病毒抗体的交叉反应分别为2.7%(3/112),2.9%(1/34)和6.2%(1/16);与带状疱疹病毒和人类巨细胞病毒无交叉反应;一定量胆红素、甘油三酯或血红蛋白对该试验无影响;不同的采血方法如毛细管法,EDTA或肝素抗凝的静脉采血法,及血清对实验结果无影响.结论 用免疫胶体金层析技术(GICA)检测单纯疱疹病毒2型(HSV-2)的免疫球蛋白IgG是一种方便、简捷、快速和准确的试验方法.     

SPA-ELISA检测棕果蝠血清冠状病毒抗体的研究

目的 建立一种敏感、简便的检测蝙蝠血清冠状病毒抗体的方法.方法 利用葡萄球菌A蛋白(SPA)能够与某些哺乳动物IgG抗体Fc段非特异性结合的特点,对市售人冠状病毒抗体ELISA试剂盒进行改造,建立SPA-ELISA法,使其适用于蝙蝠血清冠状病毒抗体的检测,并对采集到的55份棕果蝠血清冠状病毒抗体进行检测.结果 用SPA-ELISA方法对人冠状病毒试剂盒中阳性与阴性对照、SARS病人恢复期血清、空白对照的检测都得到理想的结果,并从55份棕果蝠血清中检测出2例阳性,阳性率为3.64％(2/55),中和试验进一步证实了结果的真实性.结论 所建立的方式适用于检测棕果蝠血清冠状病毒抗体.     

严重急性呼吸综合征冠状病毒2 DNA疫苗与重组亚单位疫苗在小鼠中诱导中和抗体的效力分析

目的 探讨以严重急性呼吸综合征冠状病毒2（SARS-CoV-2）受体结合区（RBD）和表面刺突蛋白（S蛋白）S1亚基为疫苗靶抗原诱导中和抗体的效果。方法 构建SARS-CoV-2 RBD与小鼠IgG1 Fc段（mFc）融合蛋白表达质粒pVRC-RBD-mFc,转染人胚肾细胞293T并进行培养。用蛋白质印迹法检测细胞培养上清中的RBD-mFc融合蛋白,用微量中和实验检测细胞培养上清中的RBD-mFc及CHO细胞重组表达的SARS-CoV-2 S1与人IgG1 Fc段（S1-hFc）融合蛋白对SARS-CoV-2感染的抑制作用。分别用质粒pVRC-RBD-mFc及S1-hFc融合蛋白通过肌内注射接种BALB/c小鼠,用ELISA检测小鼠血清中的抗-S1 IgG,用微量中和实验检测小鼠血清的病毒中和活性。结果 pVRC-RBD-mFc质粒转染293T细胞的培养上清中可检测到RBD-mFc融合蛋白,超滤浓缩的细胞培养上清及S1-hFc融合蛋白均呈浓度依赖性抑制SARS-CoV-2对Vero E6细胞的感染;经pVRC-RBD-mFc质粒及S1-hFc融合蛋白免疫的小鼠血清中均可检测出抗-S1 IgG,且能中和SARS-CoV-2的感染;S1-hFc融合蛋白免疫小鼠血清的抗体滴度及病毒中和活性均高于质粒pVRC-RBD-mFc免疫小鼠血清（P均<0.01）。结论 SARS-CoV-2 RBD和S1蛋白均可能作为有效的疫苗抗原,重组亚单位疫苗较DNA疫苗能更有效地诱导中和抗体。     

酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清单纯疱疹病毒抗体的研究

本文对ELISA间接法检测HSV抗体作了下列研究:以两种较简易的方法,即病毒感染细胞连同维持培养基一起(方法一)或经洗涤后在PBS中(方法二)反复冻融,分别从原代兔肾、原代鸡胚、传代Vero和FL细胞制备HSV抗原,结果以方法二制取的Vero细胞病毒抗原滴度最高;原代兔肾者次之。选取16份ELISA呈不同滴度的血清作中和试验,两法结果呈正相关关系(r=0.79,P<0.005)。初步得出△A492≥0.2可作为血清抗体阳性。以ELISA检测3组年龄人群血清抗体,婴儿组抗体阳性率6.6％,儿童组80％,成人组100％。最后,比较了酶联抗人IgG及酶联SPA ELISA检测的29份血清抗体含量,两种结合物测得的结果呈正相关关系(r=0.986,P<0.0005),并提出酶联SPA在鉴别两型HSV血清中具有重要意义。     

酶标抗体与酶标葡萄球菌A蛋白在ELISA中检测病毒抗体的比较

用酶标抗体(HRP-抗人IgG)与酶标葡萄球菌A蛋白(HRP-SPA)作ELISA检测临床疑似乙脑病人单份血清91份,及临床诊断疑似腺病毒感染病人单份血清63份,7例双份血清14份的结果,两种方法都有较高敏感性与特异性。HRP-SPA敏感性较HRP-抗人IgG低,而HRP-SPA非特异性反应较少,且制备简单,比较稳定,一种HRP-SPA可以检测多种动物血清,有可能替代HRP-抗人IgG在FLISA中应用。     

中枢神经系统感染性疾病的病原学研究

目的 :探讨中枢神经系统感染性疾病的病原学特点。方法 :分别用双抗体夹心ELISA法和传统的细菌及真菌培养等方法检测患者血清IgM ,IgG抗体和脑脊髓液中病原体。结果 :82 3例中枢神经系统急症患者中有 12 6例 (15 .3%)单纯疱疹病毒IgM和 /或IgG阳性 ,其中 10岁以下年龄为高峰。 10 (1.2 %)例巨细胞病毒特异性IgM和 /或IgG阳性 ;8(0 .97%)例水痘 带状疱疹病毒特异性IgM和 /或IgG阳性 ;7(0 .85 %)例为结核性脑膜炎 ;6 (0 .72 %)例为新生隐球菌性脑膜炎 ;1(0 .12 %)例为脑膜炎球菌性脑膜炎。结论 :病毒 ,特别是单纯疱疹病毒 ,是中枢神经系统感染性疾病的常见病原 ;结核杆菌和新生隐球菌感染也占一定比例。     

深圳市583例儿童血清CoxA16抗体检测分析

目的了解深圳市福田区0~5岁儿童血清柯萨奇病毒A16型（CoxA16）中和抗体水平及感染状况。方法应用微量细胞病变法,对2011年和2012年儿童乙肝抗体、麻疹抗体水平调查所采集的血清标本583份样本进行CoxA16中和抗体检测,并对检测结果进行统计学分析。结果 583份儿童血清中CoxA16中和抗体阳性率为23.8%（139/583）,男性阳性率为24.5%,女性阳性率为23.0%;CoxA16抗体阳性率由0~岁组的7.2%上升至5~岁组的57.7%,上升约8.0倍,≥3岁儿童阳性率迅猛增长。3岁以上儿童中和抗体滴度主要分布在1：256~1：1024,其中5岁~儿童占52.8%。结论儿童血清CoxA16中和抗体阳性率与年龄的关系密切,儿童年龄越小,抗体阳性率越低,随着年龄的增长,儿童感染CoxA16的抗体阳性率不断增加。3岁以下婴幼儿CoxA16抗体阳性率低于20%,应加强对低龄儿童手足口病监测,及早发现手足口病患者的重症表现并进行对症治疗。     

儿童病毒性脑炎、脑膜炎92例临床及病毒病原学分析

目的:探讨儿童病毒性脑炎、脑膜炎脑脊液病毒病原学特点及临床表现差异。方法:应用酶联免疫吸附(ELISA)方法对92例临床诊断为病毒性脑炎、脑膜炎患儿的脑脊液进行肠道病毒(EV)、单纯疱疹病毒(HSV)I型和II型、EB病毒(EBV)、腺病毒(ADV)及流感病毒(FLuV)特异性IgM抗体检测。结果:脑脊液特异性IgM抗体检测阳性者56例,阳性率为60.8%(56/92)。其中,第一位病原是肠道病毒27例,其次是单纯疱疹病毒I型和II型共14例,单纯疱疹病毒感染致残率及病死率较高。结论:(1)肠道病毒是本地区儿童中枢神经系统病毒感染的主要病原,单纯疱疹病毒感染致残率及病死率较其它病毒高。早期应用阿昔洛韦治疗可明显改善愈后。(2)脑脊液中病毒特异性的IgM抗体检测可作为早期病原诊断的指标之一。