虎纹蜘蛛毒素-I对全脑缺血再灌注大鼠海马神经元Fas凋亡通路的抑制作用

目的:探讨虎纹蜘蛛毒素-I(HWTX-I)与由Fas分子启动的死亡信号转导通路之间的关系及可能的神经保护作用分子机制。方法:48只SD大鼠随机分为假手术组、生理盐水组及用药组三组,每组16只,采用改良的Pulsinelli"四血管阻断法"并结合蛛网膜下腔置管术构建全脑缺血再灌注损伤大鼠模型。免疫组织化学法检测海马组织CA1区Fas、FasL、FADD蛋白水平表达,RT-PCR法检测海马组织死亡信号转导通路相关因子Fas、FasL、FADD核酸水平表达。结果:免疫组化法检测结果显示,生理盐水组、用药组Fas、FasL和FADD蛋白表达高于假手术组,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01),用药组Fas、FasL和FADD蛋白表达低于生理盐水组,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);RT-PCR检测结果显示,假手术组Fas、FasL、FADDmRNA表达低于生理盐水组和用药组,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01),用药组Fas、FasL、FADDmRNA表达均低于生理盐水组,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:HWTX-I蛛网膜下腔用药对全脑缺血再灌注损伤大鼠海马组织具有一定的神经保护作用,其机制可能是通过抑制Fas分子启动的死亡信号转导通路激活而发挥作用。     

虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅰ对全脑缺血再灌损伤大鼠海马组织中TNF凋亡通路的影响

目的探讨注射虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅰ(HWTX-Ⅰ)对全脑缺血模型大鼠神经保护作用的可能分子机制.方法48只SD大鼠随机分为假手术组、非用药组和用药组,采用改良的Pulsinelli大鼠四血管阻断全脑缺血结合蛛网膜下腔置管模型,应用光镜、免疫组化方法观察各组大鼠海马CA1区锥体细胞Nissl染色形态学变化及海马组织中肿瘤坏死因子α(TNFα)、肿瘤坏死因子受体Ⅰ(TNFRI)、TNF相关死亡结构域(TRADD)、Fas相关死亡结构域(FADD)、Caspase8等TNF凋亡通路相关因子蛋白表达水平的变化.结果(1)用药组大鼠锥体神经元排列较整齐,略为疏散分布,而非用药组大鼠锥体神经元排列散乱,层次不完整,稀疏分布;(2)TNFα、TNFRI、TRADD、FADD、Caspase8阳性单位的表达值以非用药组最高,用药组次之,假手术组表达最低.结论HWTX-Ⅰ能明显减轻全脑缺血再灌损伤大鼠海马锥体细胞的损伤,并降低大鼠海马组织TNFα、TNFRI、TRADD、FADD、Caspase8蛋白水平表达,表明HWTX-Ⅰ对全脑缺血再灌损伤大鼠海马神经细胞凋亡具有抑制作用,在一定程度上对全脑缺血再灌损伤有神经细胞保护作用.     

经膈肌下抬挤心脏复苏法对心脏骤停兔心肌细胞Fas／FasL、Caspase3表达的影响

目的 比较两种复苏方法对心搏骤停兔心肌细胞Fas、FasL、Caspase3表达及凋亡的影响,为开腹手术中发生的心跳骤停选择更合适的复苏方法提供参考.方法 分别采用经膈肌下抬挤心脏复苏法与标准心肺复苏法(Cardiopulmonary resuscitation,CPR)对开腹手术中窒息致心搏骤停兔进行复苏,计算6 h存活率,免疫组织化学染色法检测复苏成功6 h后心肌细胞Fas、FasL、Caspase3的表达,TUNEL法检测细胞凋亡情况.结果 经膈肌下抬挤心脏复苏组6 h存活率显著高于标准心肺复苏组,差异有统计学意义(P＜0.05),心肌细胞Fas、FasL、Caspase3表达及心肌细胞凋亡率显著低于标准心肺复苏组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 开腹手术发生心搏骤停时,膈肌下抬挤心脏复苏法较标准心肺复苏法复苏成功率高,可能与前者能减少心肌细胞凋亡,减轻缺血再灌注损伤有关.     

虎纹捕鸟蜘蛛毒素对全脑缺血大鼠海马神经元细胞形态及bax、bcl-2 mRNA和蛋白表达的影响

目的:观察蛛网膜下腔注射虎纹捕鸟蜘蛛毒素(HWTX-I)对全脑缺血再灌注大鼠海马神经细胞线粒体和CA1区锥体细胞形态、凋亡相关因子bax和bcl-2 mRNA及蛋白表达的影响。方法:SD大鼠随机分为假手术组、生理盐水组及HWTX-I组,采用改良的Pulsinelli四血管阻断全脑缺血损伤结合蛛网膜下腔置管术模型,对大鼠海马神经细胞线粒体进行超微结构及Nissl染色形态学观察,免疫组织化学法检测Bax、Bcl-2蛋白表达,RT-PCR法检测baxb、cl-2 mRNA表达。结果:(1)HWTX-I能够使全脑缺血大鼠海马神经细胞线粒体基本维持正常形态。(2)HWTX-I能稳定全脑缺血大鼠海马CA1区锥体细胞分布。(3)HWTX-I能够下调全脑缺血再灌注大鼠海马组织bax mRNA及蛋白表达,上调bcl-2 mRNA及蛋白表达。结论:蛛网膜下腔注射HWTX-I对全脑缺血再灌注所致的大鼠海马神经元损伤有明显的保护作用。     

复合疲劳对大鼠学习记忆能力的影响

目的 通过观察复合疲劳大鼠的空间学习、记忆能力及其海马区磷酸化环磷腺苷相应元件结合蛋白(phosphorylated cyclic adenosine monophosphate responsive element binding protein,p-CREB)的表达水平,探讨复合疲劳对大鼠学习记忆能力影响的机制. 方法 按随机数字表法,将24只成年雄性Sprague Dawley(SD)大鼠分为对照组、食物限制组和复合疲劳组3组,每组8只.运用Morris水迷宫实验方法测定各组大鼠的平均逃避潜伏期及平台所在象限的游泳时间百分比.运用蛋白质印迹(western blot)方法检测大鼠海马区p-CREB的表达.采用SPSS 17.0统计软件对3组大鼠的负重游泳时长、平均逃避潜伏期及平台所在象限的游泳时间百分比进行单因素方差分析. 结果 5d负重游泳实验结果显示,3组大鼠间游泳时长差异有统计学意义(F=40.28～66.04,P＜0.01);与对照组和食物限制组相比,复合疲劳组大鼠的负重游泳时长明显缩短(P＜0.01).在Morris水迷宫定位航行实验中,3组大鼠之间第2、3、4天的逃避潜伏期差异有统计学意义(F=4.17～7.11,P＜0.05或0.01);与对照组和食物限制组相比,复合疲劳组大鼠的逃避潜伏期明显延长(P＜0.05或0.01).在空间探索试验中,3组大鼠在平台所在象限的时间百分比差异有统计学意义(F=3.62,P＜0.05);与对照组和食物限制组相比,复合疲劳组大鼠在平台所在象限的时间百分比明显降低(P＜0.05).3组大鼠海马区p-CREB的相对含量差异有统计学意义(F=730.07,P＜0.01);复合疲劳组大鼠低于对照组和食物限制组(P＜0.01). 结论 复合疲劳对大鼠的空间学习、记忆能力具有损害作用,其机制可能与复合疲劳组大鼠海马区p-CREB的表达水平降低有关.     

The Effect of Erythropoietin on Focal Cerebral Ischemia Reperfusion in Rats by Observing STAT1, STAT3 Protein and MRI Expression

目的 探讨促红细胞生成素(EPO)对大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑梗死面积变化及信号转导与转录激活子-1( STAT1)、磷酸化STAT1( P-STAT1)、信号转导与转录激活子-3(STAT3)、磷酸化STAT3( P-STAT3)蛋白表达的影响.方法 雄性健康SD大鼠40只,随机分为假手术组(A)、脑缺血再灌注组(B)、生理盐水治疗组(C)、EPO治疗组(D),采用线栓法阻断大鼠一侧大脑中动脉血流2h,再灌注24h,建成局灶性脑缺血再灌注损伤模型.治疗组于脑缺血刚开始时腹腔注射EPO或等量生理盐水,于24h时行MRI检查观察脑梗死面积,采用Western blotting检测STAT1、P-STAT1、STAT3、P-STAT3蛋白表达水平的变化.结果 与B、C组相比,D组脑梗死面积减小(P＜0.05),STAT3磷酸化水平增加(P＜0.05),STAT1磷酸化水平有所减少.结论 EPO可能通过影响JAK/STAT信号转导通路减小脑梗死面积.     

完整迷走神经刺激对肝细胞炎症反应及细胞因子信号转导抑制因子mRNA表达的影响

目的 观察完整迷走神经刺激(IVNS)对肝细胞炎症反应及细胞因子信号转导抑制因子(SOCS)mRNA的影响.方法 以内毒素血症为全身炎症反应模型.80只SD大鼠随机分为内毒素组、迷走神经刺激组、假手术组和对照组.每组在注射前、注射后2,4,6 h共4个时相点,检测肝组织TNF-α、IL-10水平变化;RT-PCR法检测肝组织SOCS1、SOCS3 mRNA表达.结果 注射LPS后,肝组织TNF-α、IL-10水平升高,其中注射后4 h TNF-α高于注射后2,6 h(P＜0.01,P＜0.05).在LPS注射后的各时相点,迷走神经刺激组TNF-α浓度显著低于内毒素组(P(0.05).注射后4,6 h迷走神经刺激组IL-10水平显著高于注射后2 h水平(P＜0.01),且高于内毒素组(P＜0.05).注射后4 h,LPS组SOCS1、SOCS3 mRNA表达显著高于对照组及假手术组(P＜0.01);迷走神经刺激组SOCS3 mRNA水平高于内毒素组(P＜0.01).结论 IVNS能抑制肝脏炎症反应,其抗炎机制涉及SOCS信号转导途径.     

异丙酚对大鼠脑缺血再灌注损伤诱导型一氧化氮合酶表达的抑制作用

目的 观察异丙酚预先给药对大鼠全脑缺血再灌注后海马CA1区诱导型一氧化氮合酶（iNOS）表达的影响,在分子水平上探讨异丙酚对迟发性脑神经元损伤保护作用机制.方法 采用Pulsinelli-Brierley四血管阻断法制备全脑缺血模型.应用免疫组织化学方法和原位杂交技术检测海马CA1区iNOS的表达.结果 同缺血再灌注对照组相比,异丙酚预处理组大鼠海马CA1区iNOS表达明显降低,存活的神经元数目明显增加,差异有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）.结论 异丙酚可能通过抑制iNOS表达而对脑缺血再灌注迟发性神经元损伤有一定的保护作用.     

Graves病介入术后甲状腺细胞凋亡因子的表达

目的 研究Graves病(GD)介入治疗前后凋亡调节蛋白Fas、FasL、Bcl-2、Bax、P53表达改变,了解GD介入治疗术前、术后凋亡因子表达情况及凋亡与疗效的关系.方法 对15例CD患者的150 μmPVA微粒及平阳霉素栓塞甲状腺动脉治疗,于术前、术后44例次成功穿刺甲状腺取标本行切片免疫组化分析,其中术前15例次、栓塞术后1年内16例次、术后1年以上13例次.采用免疫组化半定量积分法检测GD患者Fas、FasL、Bcl-2、Bax及P53表达情况.结果 ①术后15例中9例停药6个月以上无复发,为长期缓解,6例少量抗甲状腺药物(ATD)维持(用药量＜术前用药量的1/4,甲状腺功能正常)为好转.②Fas和FasL阳性细胞数及着色程度均高于术前GD甲状腺组织(P＜0.05).③术后1年内组与术前组Bax阳性细胞数及着色程度均较强(两组比较,P＞0.05),但术后1年以上Bax阳性细胞数及着色程度高于术前组(P＜0.05);Bcl-2阳性细胞数及着色程度术前术后均无明显差别.④术后P53阳性细胞数及着色程度明显高于术前(P＜0.05).结论 甲状腺动脉栓塞治疗GD后促凋亡基因Fas、FasL、Bax及P53表达增强,抗凋亡因子Bcl-2表达无增强.表明GD介入栓塞治疗是从甲状腺腺体细胞凋亡调节的水平发挥了有效的治疗作用.     

细胞凋亡在燃煤型砷中毒肝损伤中的作用

目的 通过观察肝细胞表面分子介导细胞凋亡的Fas、FasL及相关基因Bax、Bcl-2、Bcl-X／L的变化来探索燃煤型砷中毒肝损伤的分子机制。方法 对25例砷中毒肝损伤患者按职业性中毒性肝病诊断标准分为A组4例（无明显肝病患者）、B组11例（轻度砷中毒肝损伤患者）、C组10例（中、重度砷中毒肝损伤患者）。采用免疫组化ABC法进行Fas、FasL、Bax、Bcl-2、Bcl-X／L检测。结果 采用PEMS统计软件进行Radit分析。结果Fas、FasL表达在肝损伤较重的C组比肝损伤较轻的B组显著增强，两组间分级构成上差异均有统计学意义（P〈0．05）；Bax表达在B、C两组间分级构成上差异均有统计学意义（P〈0．05），而Bcl-2和Bcl-X／L表达在B、C两组间分级构成上差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论 Fas、FasL的表达程度在肝损伤较重的C组比肝损伤较轻的B组显著增强，其阳性表达多分配在Ⅱ、Ⅲ级。Bax在肝损伤程度不同的B、C组间的表达强度及分布随肝损伤加重而增强。而抗凋亡蛋白bcl-2和bcl-X／L在两组间的表达强度及分布则基本一致。推测砷可能通过上调凋亡基因蛋白Fas／FasL和bcl-2家族中促凋亡蛋白Bax的表达而启动肝细胞的胞内凋亡信号传递过程，导致肝细胞凋亡增加。     

丙泊酚对新生大鼠海马BDNF mRNA、proBDNF/mBDNF表达的影响及其与学习记忆功能的关系

目的 探讨丙泊酚麻醉对新生大鼠海马脑源性神经营养因子(BDNF)mRNA、BDNF前体(proBDNF)/成熟型BDNF(mBDNF)表达的影响及其与学习记忆功能的关系.方法 108只新生7d SD大鼠随机分为对照组(C组)、丙泊酚单次麻醉组(P1组)和丙泊酚多次麻醉组(P2组),每组36只.C组腹腔注射生理盐水7.5ml/(kg.d),连续7d;P1组腹腔注射生理盐水7.5ml/(kg.d),连续6d,第7天腹腔注射丙泊酚75mg/kg;P2组腹腔注射丙泊酚75mg/(kg.d),连续7d.各组于第7天注射完毕后15min随机选取6只大鼠,心室穿刺采血,测定血糖及血气分析;于注射完毕后6h、24h、48h、72h及30d,每组随机抽取6只大鼠,分离海马组织,采用RT-PCR检测BDNF mRNA的表达,Western blotting检测mBDNF、proBDNF蛋白的表达;各组取6只大鼠喂养至出生25d进行Morris水迷宫实验,测试空间学习记忆能力.结果 C组大鼠海马BDNF mRNA及mBDNF蛋白表达水平逐渐升高,proBDNF蛋白表达水平及proBDNF/mBDNF比值逐渐降低.与C组比较,P1组各时间点海马BDNF mRNA及mBDNF蛋白表达水平下降(P＜0.05),proBDNF/mBDNF比值升高(P＜0.05),大鼠幼年期逃逸潜伏期延长,空间探索时间缩短(P＜0.05);与C组及P1组比较,P2组各时间点海马BDNF mRNA及mBDNF蛋白表达水平下降,proBDNF蛋白表达及proBDNF/mBDNF比值升高(p＜0.05),大鼠幼年期逃逸潜伏期延长,空间探索时间缩短(P＜0.05).结论 丙泊酚麻醉可导致大鼠幼年期学习记忆功能减退,且多次麻醉的效果强于单次麻醉,其机制可能与BDNF mRNA、proBDNF)/mBDNF表达改变有关.     

石杉碱甲对急性低压低氧模型大鼠海马神经元凋亡的影响

目的 探讨石杉碱甲对急性低压、低氧模型大鼠空间学习与记忆能力的改善作用及其海马神经元细胞凋亡的缓解作用.方法 48只SD大鼠随机分为4组(n=12):平原组(对照组)、平原给药组、高海拔组(模拟6000m海拔)、高海拔给药组.各给药组在模拟低压、低氧实验前1d,按0.1mg/kg剂量给予石杉碱甲(配制成10mg/ml混悬液)灌胃给药.比较各组大鼠Morris水迷宫学习与记忆测试成绩.采用TUNEL法检测海马神经元细胞凋亡情况,Western blotting检测海马神经元细胞凋亡因子Bax及抗凋亡因子Bcl-2的表达.结果 与高海拔组比较,高海拔给药组大鼠逃避潜伏期明显缩短(P＜0.05),60s内穿越平台次数增多(P＜0.05),目标象限滞留时间延长(P＜0.05),海马CA1区神经元凋亡数量减少(P＜0.05),海马组织中促凋亡因子Bax表达降低(P＜0.05),抗凋亡因子Bcl-2表达增加(P＜0.05).高海拔给药组与平原对照组各指标比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 石杉碱甲对急性低压、低氧导致的大鼠大脑海马神经元凋亡具有缓解作用,可改善模型大鼠的空间学习与记忆能力.     

大鼠慢性酒精诱导肝损伤中肝细胞凋亡与Fas表达

目的:在实验性大鼠酒精诱导肝损伤中研究肝细胞凋亡与Fas、Fas配体(FasL)表达的关系。方法:改进的酒精灌胃法建立大鼠肝损伤模型,应用末端转移酶标记技术(TUNEL)检测肝细胞原位凋亡的情况,免疫组化法分别检测肝组织中Fas、FasL。结果:肝损伤模型组及正常对照组肝细胞凋亡指数分别为(2.03±1.61)%及(0.10±0.21)%(P<0.05)、Fas阳性细胞数分别为7.23±1.10及0.58±0.17(P<0.05)、FasL阳性细胞数分别为5.14±0.76及0.31±0.25(P<0.05)。结论:酒精可以诱发大鼠肝细胞凋亡,肝细胞凋亡的发生与Fas的表达增加有关。     

高压氧对脑缺血大鼠学习、记忆能力的影响

目的 探讨高压氧治疗对脑缺血后大鼠学习、记忆能力的影响.方法 将38只雄性健康Sprague-Dawley大鼠,采用随机数字表法分为4组,正常对照组10只,假手术组10只,缺血组9只,高压氧组9只.参照Pulsinelli等报道的四血管阻断方法并加以改良,建立脑缺血模型.高压氧组于术后当天行高压氧治疗,连续7 d,1次/d.各组于术后第7天开始行Morris水迷宫实验,连续6 d,比较各组前5 d每天的逃逸潜伏期及第6天穿越平台的次数.结果 (1)前5 d的逃逸潜伏期比较:高压氧组在第3～5天时均小于缺血组(P＜0.01或P＜0.05);高压氧组在第1～5天时与假手术组差异无统计学意义;缺血组在第3～5天时大于假手术组(P＜0.01或P＜0.05);正常对照组在第2～5天时均小于假手术组(P＜0.01或P＜0.05).(2)第6天穿越平台的次数比较:高压氧组大于缺血组(P＜0.05),与假手术组差异无统计学意义;缺血组小于假手术组(P＜0.01);正常对照组大于假手术组(P＜0.01).结论 高压氧治疗对脑缺血后大鼠学习、记忆能力的恢复有改善作用.     

促红细胞生成素对海马CA1区缺血神经元凋亡和bcl-xl表达的影响

目的 :探讨促红细胞生成素 (Erythropoietin ,EPO)预处理的神经保护机制。方法 :采用 4-VO法制作大鼠全脑缺血模型。将SD大鼠随机分为假手术组、生理盐水组、EPO组。全脑缺血前 3h ,EPO组大鼠脑室立体定向注射重组人促红细胞生成素(rHu -EPO) 5μl,生理盐水组则给予等体积生理盐水 ,假手术组只进行假手术处理。观察缺血后 2 4h海马CA1区bcl -xl蛋白表达和缺血后 72h细胞凋亡。结果 :缺血后 2 4h ,EPO组海马CA1区bcl -xl蛋白表达与假手术组比较有显著差异 (P <0 .0 1) ,较生理盐水组表达增强 (P <0 .0 1)。缺血后 72h ,EPO组海马CA1区较生理盐水组有较少的凋亡细胞 (P <0 .0 1)。结论 :EPO预处理减少缺血海马细胞凋亡 ,促进bcl -xl蛋白表达可能参与了这种保护机制     

骨髓间质干细胞输注对庆大霉素致急性肾小管损伤细胞增殖和凋亡的影响

目的 观察骨髓间质干细胞(MSCs)对庆大霉素导致的急性肾功能衰竭(ARF)的疗效,并探讨其可能的机制.方法 建立庆大霉素皮下注射致大鼠ARF模型.雄性SD大鼠NtSCs用4,6-二乙酰基-2-苯基吲哚(DAPI)标记.雌性SD大鼠随机分为对照组(C组)、MSCs组(M组)和DMEM-F12组(D组).C组未给予任何处理;M组在每次给予庆大霉素的同时经尾静脉静注DAPI标记的MScs;D组在每次给予庆大霉素的同时注入无血清DMEM-F12.7d后观察血尿素氮(BUN)和血肌酐(Scr)以及肾脏病理改变(HSK评分),采用原位末端标记法检测细胞凋亡指数(AI),免疫组化法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2、Fas/FasL的表达,并观察DAPI标记的MSCs在受体大鼠肾脏的分布情况.结果 M组的HSK评分、BUN、Scr(分别为5.5±0.8、11.6±2.2mmol/L、93.5±13.1μmol/L)均低于D组(分别为10.2±0.8、22.2±6.3mmol/L、204.4±53.1μmol/L,P＜0.05);M组肾小管上皮细胞PCNA 细胞数、AI(分别为20.8%±3.7%、15.73%±2.43%)低于D组(分别为42.1%±5.2%、23.76%±4.30%,P＜0.05).M组Bcl-2表达(35.27%±2.93%)高于D组(25.28%±3.10%,P＜0.05);M组Fas、FasL(分别为21.53%±3.72%、20.50%±3.71%)均低于D组(37.28%±11.14%、37.66%±10.59%,P＜0.05).整个实验期间未发现MSCs定位于肾组织中.结论 外源性MSCs可以促进ARF损伤后肾小管上皮细胞的增殖并减少细胞凋亡,促进Bcl-2和抑制Fas/FasL表达,从而有利于肾小管损伤的早期恢复.     

辛伐他汀对老年大鼠心肌胶原含量及MMP-9表达水平的影响

目的 观察老年大鼠心肌胶原含量和MMP-9 mRNA表达水平的变化及辛伐他汀干预的效果.方法 20月龄的Wistar鼠45只,随机分为老年对照组、大剂量辛伐他汀组[20 mg/(kg·d)]和小剂量辛伐他汀组[2 mg/(kg·d)],每组15只;另有15只3月龄的Wistar鼠作为青年对照组.辛伐他汀组给予相应剂量的药物灌胃4个月;对照组给予相同体积的生理盐水灌胃.灌胃4个月后,留取心脏标本,采用苦味酸 - 天狼腥红染色方法,观察各组大鼠心肌胶原含量,在偏振光显微镜下观察各组大鼠心肌Ⅰ/Ⅲ型胶原比例;同时,应用RT-PCR方法检测各组大鼠心肌MMP-9 mRNA含量的变化.结果 与青年对照组相比,老年对照组大鼠的心肌胶原含量、Ⅰ/Ⅲ型胶原比例及MMP-9 mRNA表达水平均显著增高(P＜0.01),辛伐他汀可显著抑制这一变化(P＜0.01);不同剂量辛伐他汀组之间的比较显示,大剂量组的心肌胶原含量和MMP-9 mRNA表达水平低于小剂量组(P＜0.05或P＜0.01),而Ⅰ/Ⅲ型胶原比例两组之间无显著差别(P＞0.05).结论 辛伐他汀可显著降低老年大鼠心肌胶原含量和Ⅰ/Ⅲ型胶原比例,抑制MMP-9 mRNA表达水平的增高.     

吡咯二硫氨基甲酸对移植肾细胞毒作用的影响

目的探讨核因子-κB(NF-кB)抑制剂-吡咯二硫氨基甲酸(PDTC),对大鼠移植肾急性排斥反应(AR)中细胞毒作用的影响。方法以SD大鼠和Wistar大鼠作为供鼠,Wistar大鼠作为受鼠,建立同系和同种大鼠原位肾移植模型。实验共分三组,对照组取同系移植受鼠,AR组和PDTC组取同种移植受鼠,其中PDTC组受鼠于术后腹腔注射PDTC 100 mg.kg-1.d-1,其余两组注射等量生理盐水。术后1、3、5和7 d,取各组血清和移植肾组织,检测血清肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)水平;观察肾脏组织学改变;real time PCR检测移植肾穿孔素(PFP)、颗粒酶B(GzmB)及FasL mRNA的表达;Western blot检测移植肾NF-кB p65、PFP、GzmB及FasL蛋白的表达。结果 PDTC组大鼠肾功能及肾组织病理损伤均较AR组显著减轻。术后各时间点,AR组和PDTC组PFP、GzmB和FasL mRNA表达均明显高于对照组(P<0.01),PDTC组各mRNA表达较AR组显著降低(P<0.01)。AR组和PDTC组NF-кB P65、PFP、GzmB及FasL蛋白的表达均较对照组显著增高(P<0.01),PDTC组各蛋白表达较AR组明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论 PDTC通过抑制NF-кB活化,进而减少PFP、GzmB和FasL的表达,减轻移植肾AR中的细胞毒损伤作用。     

海湾战争综合征模型大鼠海马VGF、BDNF及MAPK表达研究

目的探讨神经营养因子BDNF、神经肽VGF及MAPK/Erk信号传导通路表达情况与海湾战争综合征(GWS)发病机制的关系。方法将36只SD大鼠随机分为对照组、限制应激组及GWS模型组,采用Abdel-Rahman的方法建立GWS大鼠模型。分别在0、7、14、21、28 d测定大鼠体质量。实验28 d结束后,处死实验大鼠、取脑、分离海马。采用免疫组化染色、VGF/MAPK免疫荧光双标染色及蛋白质印迹法(Western blot)检测VGF、BDNF、MAPK的表达情况。结果单因素方差分析3组大鼠体质量,组间比较差异有统计学意义(P<0.01)。GWS模型组大鼠体质量增长率明显低于对照组与限制应激组,差异有统计学意义(P<0.05)。海马CA1区VGF、BDNF、MAPK免疫组化染色的平均光密度值,限制应激组、GWS模型组较对照组均降低,差异有统计学意义(P<0.05);GWS模型组较限制应激组均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫荧光检测结果显示,海马CA3区细胞内MAPK与VGF的表达部位相同、变化趋势一致,MAPK、VGF荧光的表达与CA1区免疫组化结果一致。Western blot结果显示,限制应激组、GWS模型组与对照组比较,海马VGF、BDNF和MAPK的积分光密度值降低,差异有统计学意义(P<0.05);GWS模型组与限制应激组比较,海马VGF、BDNF和MAPK的积分光密度值降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 GWS的发病机制与MAPK/ERK信号传导通路的抑制及VGF的表达减少相关。     

补充葛根素对力竭游泳训练大鼠海马细胞凋亡及Bcl-2、P53蛋白表达的影响

目的:观察补充葛根素对力竭性游泳训练造成的大鼠海马细胞凋亡以及Bcl-2和P53表达的影响。方法:2月龄SD大鼠30只随机分为安静对照组、力竭训练组和力竭训练+葛根素补充组,每组10只。对照组不运动,其它两组进行4周的力竭性游泳训练。葛根素补充组每天给予葛根素注射液灌胃(100mg/kg),对照组及单纯力竭运动组给予等量生理盐水。各组大鼠分别于实验结束后麻醉处死,取大鼠海马组织,采用流式细胞仪检测大鼠海马组织细胞凋亡、Bcl-2及P53蛋白表达。结果:与安静对照组相比,力竭训练组海马细胞凋亡率显著升高(P<0.01),细胞增殖指数显著升高(P<0.05),海马神经细胞Bcl-2表达显著下降(P<0.05),P53表达显著升高(P<0.01)。与力竭训练组相比,葛根素补充组海马神经细胞凋亡率显著下降(P<0.01),海马神经细胞Bcl-2表达显著升高(P<0.05),P53表达显著性下降(P<0.05)。结论:补充葛根素对力竭性游泳大鼠海马细胞有保护作用及促进疲劳恢复的作用,可能与葛根素上调凋亡基因Bcl-2及下调P53蛋白表达有关。