日本血吸虫肝门型童虫蛋白质SDS—聚丙烯酰胺凝电泳的分析

本文采用十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）对日本血吸虫肝门型童虫蛋白组分进行了分析，结果显示，１４ｄ肝门型雌雄童虫出现３３条蛋白区带，主带８条，２１ｄ肝门型雌雄童虫出现３４例蛋白区带，主带８条，２１ｄ雄性童虫出现３１条蛋白区带，主带７条，各组童虫与成虫比较，有２７～２８条共同蛋白区带，提示日本血吸虫不同时期的肝门型童虫与成虫的蛋白组分在质与量方面虽然存在着某些差异，但总体上两者     

SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳技术的改良及其应用

ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳技术的改良及其应用ＡｎｉｍｐｒｏｖｅｄｍｅｔｈｏｄｆｏｒＳＤＳ－ＰＡＧＥａｎｄｉｔｓａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ胡承香，张玉纯，李磊，顾长国（第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所第一研究室）重庆，６３００４２生物样品分子量的测定...     

聚丙烯酰胺凝胶电泳中一种快速敏感的蛋白质双染色法

本文报道了我们在聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)中改良了一种考马斯亮兰(Coomassic Brillant Blue,CBB)与铬银染色法相结合的新的蛋白质双染色法。这种方法比单一的CBB染色或单一的银染色敏感,比CBB与氨银双染法简便,一般实验室也能采用本法。     

日本血吸虫肝门型童虫在体外培养中的生长、发育和产卵

本文报导在不同培养基中日本血吸虫肝门型童虫的生理活动、生长、生殖器官的发育和产卵。结果表明:在培养35d 内,不同培养基中童虫雌雄合抱率均有随培养时间延长而升高的趋势;M-841培养基、M-841+影细胞培养基中童虫生长速度快于841培养基,但三种培养基中睾丸、卵巢的生长速度差异无显著性(P>0.05)。培养35 d 时,在以上三种培养基中童虫卵黄腺均可发育成熟。最早于培养10d 时,在 M-841+影细胞培养基中查见体外产出的虫卵。提示 M-841影细胞培养基比较适合于肝门型童虫的体外培养。     

介绍一种聚丙烯酰胺平板凝胶电泳凝胶的原态快速干燥成膜新方法

此聚丙烯酰胺凝胶电泳凝胶成膜方法,采用生化实验常备仪器,工序工艺简便,易于掌握。其应用价值:①可提供理想的能使聚丙烯酰胺凝胶样本保持原态,并可长期保存的制膜方法。②由于凝胶样本膜化,带内物质相对密集,若应用于放射自显影技术中,可提高精度,敏感性.     

日本血吸虫童虫培养细胞形态的初步观察

首次报道日本血吸虫童虫培养细胞的光镜及扫描电镜观察结果。光镜下日本血吸虫童虫培养细胞可分为圆颗粒形，鞭毛形、多角形、三角扇形及不规则形，其中以圆颗粒形细胞占多数。童虫培养细胞虽较成虫培养细胞小，但在光镜和扫描电镜下两者的结构相似。ＳＥＭＩＰＳ图像分析结果表明，圆颗粒形细胞和鞭毛形细胞在面积、周长、最大、最小直径及圆球率等方面差异存在显著性（Ｐ＜０．０１）。     

培养基及血清因素对体外培养日本血吸虫童虫的影响

在本室创立的８４１培养基的基础上，以不同种类和不同浓度的血清，对体外培养４６ｄ、９５ｄ的日本血吸虫进行了实验观察，并比较了８４１和８５１培养基虫体的吞食红细胞率、肠管汇合率及虫体存活率。结果表明：３项指标８４１培养基均优于８５１培养基（Ｐ＜０．０１）．童虫用８４１培养基培养２周后，提高血清浓度至２５％继续培养至９５ｄ，吞食红细胞率和肠管汇合率均明显高于１０％血清浓度（Ｐ＜０．０１），而虫体存活率两组无明显差异（Ｐ＞０．０５）。提示在后期童虫的培养中，适当提高血清浓度有利于虫体的发育。     

无电极缓冲液的水平薄层SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳

无电极缓冲液的水平薄层ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳邵军，陈镔复，刘智广（中心实验室）关键词蛋白质，ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳，缓冲液，凝胶条中图法分类号Ｑ５１电泳已成为当代测定生物大分子特性和纯度的主要工具之一。它的高分辨率既能用于分析又能用于制备，设...     

在体外培养中吡喹酮对日本血吸虫肝门型童虫活动及存活影响的观察

用体外培养技术观察了吡喹酮对日本血吸虫肝门型童虫活动及存活情况的影响。童虫接触较低浓度(1μg/ml以下)吡喹酮后表现为短时间兴奋,继而出现轻度挛缩,虫体活动减弱,换正常培养基后活动很快恢复并能正常存活;而接触较高浓度(1μg/ml以上)吡喹酮后,童虫立即出现强直性挛缩,活动几乎停止,短时间(6h内)换正常培养基童虫活力尚可恢复并能正常存活,延长与药物接触时间童虫活力不能恢复,继续培养时也不能存活。     

根据SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳结果测定蛋白质分子量软件的研制及应用

0引言通常根据十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS－PAGE）结果推算未知蛋白质分于量步骤繁琐，用肉眼与标准品（Marker）比较来估计也不准确．我们编写的计算机软件-ProCac，可自动列出回归直线方程，计算未知蛋白质的分子量。1设计思想在SDS-PAGE中，当蛋日质的分子量在11．7－165．0kD之间时，蛋白质-SDS复合物的电泳迁移率与蛋白质分子量以10为底的对数符合直线方程：lgMW=a+b·mR（MW为蛋白质的分子量，mR为蛋白质-SDS复合物电泳相对迁移率，a和b为常数）首先，分别测出Marker各条带、未知蛋白质和它们各自的指示剂…     

日本血吸虫（大陆株）融合蛋白保护性免疫力的研究

采用日本血吸虫(大陆株)融合蛋白加福氏佐剂免疫小鼠,攻击感染后,不但可减少虫负荷(减虫率为29.2—51.0%),还可降低血吸虫雌虫的产卵量(减卵率为52.1—74.3%),血清抗体在初次免疫后3周即明显升高,并持续维持较高的水平。结果表明,经大肠杆菌表达的日本血吸虫重组融合蛋白能诱导抗攻击感染的保护性免疫力,可望作为混合多价疫苗的候选组份而大规模的生产。     

血清酸溶性蛋白定量在日本血吸虫病研究中的应用

本文研究动物感染日本血吸虫及毗喹酮治疗过程中血清酸溶性蛋白(ASP)浓度的动态变化。结果显示:家兔感染早期,血清ASP浓度明显升高,中期降至正常水平,末期再次明显升高,感染小鼠经吡喹酮治疗,血清ASP降低程腰与疗效、减虫率、病变消退等相符合。本文提示:血清ASP浓度测定可作为监护病情、判定药物疗效的指标,有一定的临床实用价值。     

地龙药材蛋白质电泳鉴定的初步研究

目的 探讨聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对地龙药材进行鉴别的可行性,为地龙的品种鉴定以及药材品质评价提供参考依据.方法 采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对不同来源、不同品种、不同加工方法的地龙药材进行可溶性蛋白质电泳研究.结果 电泳图谱中广地龙在分子质量66.2～14.4 ku之间存在5条清晰、稳定的条带,可初步认定其为广地龙的特...     

穿心莲种子蛋白质电泳鉴定的初步研究

目的探讨SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对穿心莲种子进行鉴别的可行性,为穿心莲种子鉴别及育种研究提供科学依据。方法采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对广东省几种不同来源和不同采收期的穿心莲种子进行可溶性蛋白质电泳研究。结果不同产地的穿心莲种子蛋白质电泳图谱之间在谱型和谱带的强弱、蛋白质相对含量上均有一定的差异,不同采收期穿心莲种子蛋白质电泳在蛋白质谱带的强弱上有一定差异。结论聚丙烯酰胺凝胶电泳技术可用于穿心莲种子鉴定。     

日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原的分析

采用免疫沉淀技术和ＥＩＴＢ技术分析了日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原（ＳＩＥＡ）。结果：能被ＳＩＥＡ免疫血清识别的ＳＩＥＡ带主要集中于３０８ＫＵ到４９６ＫＵ之间，其主要反应带为４９６ＫＵ、３９７ＫＵ和３３７ＫＵ。推测４９６ＫＵ和３３７ＫＵ这两抗原分子在诱导宿主产生抗卵成熟过程中可能起着重要作用。     

日本血吸虫表达序列标签的获取和分析

目的 运用表达序列标签(expressed sequence tag，EST)技术，从日本血吸虫成虫cDNA文库中分离、鉴定和分析表达基因序列，为日本血吸虫病的防治提供候选疫苗和药物靶点。方法 构建日本血吸虫成虫cDNA文库，随机挑取重组阳性克隆进行测序，将获取的EST登录GenBank，并进行生物信息学分析。结果 随机挑取382个阳性克隆进行测序，获得149个EST(登录号分别为：CA747382～CA747391，BU917055～BU917058，CA305307～CA305309，BU581980，BU582400～BU582403，BU666906和(A946548～CA946666)，同源性比较发现，部分序列与血吸虫的生活史的不同阶段和不同性别序列有一定的同源性。结论 EST技术有助于快速、经济地获取和研究日本血吸虫表达基因。     

用日本血吸虫成虫抗原ELISA检测血吸虫病抗体的现场应用

用日本血吸虫成虫抗原(AAg)和虫卵抗原(EAg)ELISA检测血吸虫病疫区粪检阳性病人134例,其阳性率分别为99.25％和98.51％。134例中45例儿童和89例成人用AAg检测,其阳性率分别为100％和98.88％,而用EAg检测的阳性率分别为97.78％和98.88％。AAg和EAg检测26例正常人均为阴性。结果表明:AAg与EAg的检出率以及儿童与成人的检出率均相似。     

PCR扩增日本血吸虫大陆株黏蛋白样蛋白(SjMLP)部分基因

目的 体外扩增日本血吸虫中国大陆株黏蛋白样蛋白(SjMLP)的部分基因序列。方法 利用PCGENE软件查找SjMLP的抗原决定簇；特定寡核苷酸引物的设计与合成；TROZOL抽提日本血吸虫成虫总RNA，RT—PCR扩增目的基因并进行DNA度列分析。结果 RT—PCR特异性扩增出SjMLP编码区部分基因序列，大小为756bp，测序结果显示与曼氏血吸虫MLP高度同源。结论 扩增到了SjMLP抗原编码区基因的部分序列，与Sm MLP高度同源。