新城疫病毒抗肿瘤的研究进展

新城疫病毒（newcastle disease virus，NDV）是一个典型副粘病毒科病毒，该病毒是一种有囊膜的病毒，核农壳被一个来源于细胞质膜的脂质膜包被。膜内侧是M蛋白、膜外侧是HN和F两个病毒糖蛋白，核衣壳内有L、NP、P三种结构蛋白包裹着的基因组RNA，核衣壳内的病毒基因组是负单链RNA，长约15kbt，95％以上是编码区，共编码6种结构蛋白和36kD、33kD非结构碱性蛋白，     

鸡新城疫病毒抗肿瘤作用及其机制的研究进展

鸡新城疫病毒（ｎｅｗｃａｓｔｌｅ ｄｉｓｅａｓｅ ｖｉｒｕｓ,ＮＤＶ）感染机体可以诱导产生干扰素、白细胞介素、肿瘤坏死因子等细胞因子,这些细胞因子能够在患瘤机体内发挥抗肿瘤作用。ＤＮＶ的随着蛋白（ｈｅｍａｇｇｌｕｔｉｎｉｎ－ｎｅｕｒａｍｉｄａｓｅ,ＨＮ蛋白）具有增加瘤细胞对淋巴细胞的粘附力、刺激淋巴细胞的分化和改变肿瘤细胞的免疫原性等作用,同时ＮＤＶ可以激活患瘤机体的免疫细胞,使免疫细胞发挥细胞毒     

新城疫病毒修饰的自体肿瘤疫苗研究进展

新城疫病毒 (ＮＤＶ )是一种禽类的副粘液病毒 ,具有多组织亲和性的免疫刺激性特点 ,它能在肿瘤细胞质中选择性的复制而不依赖于细胞的增殖 ,属于非致癌性的病毒。能有效而安全的转染肿瘤细胞[1] 。ＡＴＶ ＮＤＶ是用ＮＤＶ感染已经灭能但存活的患者自体肿瘤细胞制成瘤苗 ,对肿瘤患者进行术后主动特异性免疫治疗 (ＡＳＩ)。ＮＤＶ感染种瘤细胞后 ,在细胞表面引入了病毒自身的神经氨酸酶分子 (ＨＮ)和融和蛋白 (Ｆ) ,诱导Ｔ细胞共刺激活性、诱导细胞因子和局部趋化因子 ,增强肿瘤特异性抗原的表达 ,产生特异性抗肿瘤作用。ＡＴＶ ＮＤＶ因具…     

新城疫病毒对人胃癌细胞的抑制杀伤作用

目的 :研究新城疫病毒 (NDV)对人胃癌细胞株的作用。方法 :利用MTT方法检测NDV对人胃癌细胞株的杀伤性。结果 :NDV作用后的人胃癌细胞株的细胞活性比对照的细胞活性有显著下降 (P <0 0 1) ,且NDV血凝效价值显著升高 ,表明NDV能杀死肿瘤细胞。结论 :NDV能够直接杀死肿瘤细胞 ,可作为治疗肿瘤的一种新生物制剂     

新城疫病毒抗癌作用及其应用的研究进展

新城疫病毒（Newcastle disease virus,NDV）为反义负链RNA病毒,能选择性的杀伤人类肿瘤细胞。应用NDV免疫肿瘤细胞进行各种体内外实验研究,均有不同程度的抗肿瘤效应。用NDV对癌症病人进行临床治疗则可延长肿瘤病人的存活期,肿瘤复发率较低。作用机制包括其直接对肿瘤细胞产生细胞毒作用;增强机体的各种细胞及体液免疫;诱导多种细胞因子的产生。其中T细胞的杀肿瘤作用增强及活化巨噬细胞数量增加是主要的抗瘤因素。     

新城疫病毒对人胃癌细胞的抑制杀伤作用

目的：研究新城疫病毒（ＮＤＶ）对人胃癌细胞株的作用。方法：利用ＭＴＴ方法检测ＮＤＶ对人胃癌细胞株的杀伤性。结果：ＮＤＶ作用后的人胃癌细胞株的细胞活性比对照的细胞活性有显著下降（Ｐ〈０．０１）,且ＮＤＶ血凝效价值显著升高,表明ＮＤＶ能杀死肿瘤细胞。结论：ＤＮＡ能够直接杀死肿瘤细胞,可作为治疗肿瘤的一种新生物制剂。     

新城疫病毒抑制鼻咽癌细胞的体外实验研究

目的:研究新城疫病毒(NDV)对鼻咽癌细胞的抑制作用及其作用机制.方法:采用化学发光法、流式细胞术及电子显微镜研究NDV分别作用于两株鼻咽癌细胞后其对细胞生长的抑制情况,以及NDV诱导鼻咽癌细胞发生凋亡的情况.结果:化学发光法的结果显示,在一定的浓度范围和时间范围内,NDV对鼻咽癌细胞的抑制作用有剂量效应比和时间效应比关系.流式细胞术结果显示,NDV使鼻咽癌细胞生长阻滞在G1期,并促进细胞凋亡.电子显微镜观察细胞凋亡超微结构的结果显示,NDV可诱导鼻咽癌细胞产生凋亡小体,发生凋亡.结论:NDV可以抑制鼻咽癌细胞增殖,其作用机制主要是影响细胞生长周期和诱导细胞发生凋亡.     

联合应用新城疫病毒及其 HN基因对小鼠黑色素瘤抑制效应的研究

背景与目的:尽管新城疫病毒( Newcastle disease virus, NDV)对多种肿瘤具有抑制作用 ,但其抑瘤机制尚不完全清楚.以前的研究结果表明,该病毒的血凝素神经氨酸酶( hemagglutinin-neuraminidase,HN)基因在该病毒的抗肿瘤作用上发挥重要作用且 HN蛋白表达后能够定位于肿瘤细胞膜上,以 HN蛋白作为肿瘤细胞的外源抗原来研究其抑瘤作用尚未见报道.本研究拟探讨 HN蛋白作为外源抗原在新城疫病毒抗肿瘤的作用以及二者联合应用对小鼠黑色素瘤的抑制效应.方法:在 C57BL/6小鼠右后肢皮下接种 B16黑色素瘤细胞 2× 105个.荷瘤第 2天,左后肢肌肉注射含新城疫病毒 HN基因的重组质粒,荷瘤第 7天,瘤内注射新城疫病毒 2× 109pfu;同时设单独 HN基因或 NDV治疗组及注射 PBS的对照组.通过抑瘤率观察动物体内的抑瘤效果;通过特异性细胞毒 T淋巴细胞( cytotoxic T lymphocyte,CTL)实验, ICAM Ⅰ、 CD48及新城疫病毒 HN蛋白在肿瘤细胞表面表达检测,探讨 HN蛋白所介导的抑瘤作用.结果:联合应用新城疫病毒及该病毒 HN基因对肿瘤的抑制效果明显好于单独 HN基因及新城疫病毒,抑瘤率达 82.8%,特异性 CTL反应增强,对靶细胞的杀伤率为 18.4%;单独 HN基因及新城疫病毒治疗组的抑瘤率分别为 56.6%、 41.0%,特异性 CTL活性分别为 4.4%、 10.1%;瘤内注射 NDV的肿瘤细胞表面检测到 HN分子的表达, ICAM Ⅰ、 CD48分子表达上调.结论:定位于肿瘤细胞表面的 HN蛋白介导机体对肿瘤细胞的特异性杀伤,联合应用新城疫病毒及该病毒 HN基因显著增强了机体对肿瘤细胞的杀伤效应.     

新城疫病毒对癌细胞的杀伤作用

 目的　探讨新城疫病毒NDV对癌细胞的直接杀伤作用。方法　将NDV与各组细胞的混悬液一起加入细胞培养板中三孔法,同时设不加NDV的对照孔,经8、16、24、36和48小时五个时相观测细胞生长情况和病毒复制情况。结果　成纤维细胞和对照组细胞生长良好,而实验孔的各组癌细胞逐渐减少,出现融合、裂解。48小时癌细胞组的上清液病毒效价较高而成纤维细胞的上清液病毒效价为0。结论　NDV对癌细胞有较强的亲和力,可在癌细胞内大量复制,具有直接杀伤癌细胞的作用,而对正常细胞无明显的杀伤作用。     

新城疫病毒处理瘤细胞的免疫实验研究

目的：观察新城疫病毒（简称ＮＤＶ）对体外培养的肿瘤细胞免疫原性的影响。方法：将经新城疫病毒处理的小鼠肝癌细胞Ｈ２２为活瘤进行免疫接种。结果：ＮＤＶ处理瘤细胞制备的瘤苗可完全排斥再次接种未经病毒处理瘤细胞的生长,瘤苗能增强小鼠体内细胞免疫。结论：ＮＤＶ处理后的瘤细胞能使肿瘤生长减慢、荷瘤生存期明显延长。     

新城疫病毒体外抗白血病作用的实验研究

 目的　通过体外实验研究探讨新城疫病毒（NDV）对人类急性单核细胞白血病的作用。方法　应用倒置显微镜观察NDV感染后白血病细胞形态和密度的变化,AO／PI染色后观察病毒对白血病细胞的生长抑制情况;甲基偶氮唑蓝（MTT）法测定不同浓度NDV作用于白血病细胞不同时间后对细胞增殖的影响。结果　倒置显微镜下,对照组细胞形态规则、分布密集;NDV感染组细胞形态不规则,聚集、融合现象明显,分布稀疏;AO／PI染色后对照组呈均匀明亮的绿色荧光,NDV原液组呈红、绿两色荧光,以红色为主,MTT检测结果显示不同浓度NDV对SHI-1细胞的增殖均有明显抑制作用（P＜0.01）,不同时间的抑制作用也有明显差异（P＜0.01）;增殖抑制作用呈现时间-浓度依赖关系。结论　NDV是一种有效的抗人类急性单核细胞白血病的病毒。     

新城疫病毒对人NK细胞表达TRAIL的促进作用

目的:研究新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)刺激自然杀伤(natural killer,NK)细胞产生肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)的作用机制。方法:采用免疫磁珠分选(magnetic activated cell sorting,MACS)法,分离得到高纯度的NK细胞;乳酸脱氢酶释放法检测NDV激活的NK细胞对人肝癌HepG2细胞的杀伤作用;实时荧光定量-PCR(real-time fluorogenic quantitative-PCR,RFQ-PCR)检测NDV刺激NK细胞4h后对TRAILmRNA表达水平的影响;FCM检测NDV刺激NK细胞16h时TRAIL蛋白的表达情况;ELISA法检测NDV刺激NK细胞后对其分泌干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)的影响;最后采用抗IFN-γ抗体中和IFN-γ后,再采用FCM检测NDV刺激的NK细胞中TRAIL蛋白的表达情况。结果:FCM检测结果显示,分离得到的NK细胞的纯度达(90.60±1.15)%;NDV刺激NK细胞16h后,明显增强NK细胞的杀伤肿瘤作用,NDV效价为204.8HU刺激组的杀伤率达到(22.28±0.84)%;RFQ-PCR及FCM检测结果显示,不同效价的NDV刺激NK细胞后,NK细胞中TRAILmRNA及蛋白表达水平均明显升高;ELISA检测结果显示,NDV刺激NK细胞后IFN-γ的分泌水平明显增加,在NDV效价为25.6HU刺激16h时达到峰值(796.47±37.87)pg/mL;采用抗IFN-γ抗体中和IFN-γ后,NK细胞中TRAIL蛋白表达水平明显下降。结论:NDV刺激NK细胞后可增强IFN-γ的分泌水平,进而通过IFN-γ上调TRAIL的表达,此途径为NDV刺激NK细胞表达TRAIL的机制之一。此外,NDV直接刺激NK细胞表达TRAIL是另一条重要的途径。     

新城疫病毒对小细胞肺癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的:探讨新城疫病毒(Newcastle disease virus, NDV)7793株在体内对肿瘤生长的抑制作用及机制.方法:体外培养人小细胞肺癌NCI-H446细胞,通过皮下接种NCI-H446细胞建立人小细胞肺癌裸鼠移植瘤模型.NDV组裸鼠瘤内注射新城疫病毒,阳性对照组注射顺铂(cisplatin,DDP),阴性对照组注射PBS.观察移植瘤生长情况和裸鼠体质量变化,绘制肿瘤生长曲线.6周后处死裸鼠剥取肿瘤组织,HE染色观察细胞学变化,免疫组织化学法检测移植瘤细胞Bax和Bcl-2蛋白表达情况.结果:NDV注射对肿瘤生长有显著抑制作用,抑瘤率达34.1%;NDV对荷瘤鼠无不良反应;光学显微镜下观察发现,NDV治疗组肿瘤组织有许多散在分布的凋亡/坏死区域.NDV能明显上调Bax蛋白的表达量(P＜0.01),对Bcl-2蛋白表达则无影响.结论:新城疫病毒7793株在体内能够有效抑制移植瘤生长,其抗肿瘤机制可能与上调Bax蛋白的表达有关.     

新城疫病毒诱导的抗体反应与肿瘤生长的相关分析

目的：了解新城疫病毒（NDV）接种机体产生的血凝抑制（HI）抗体反应水平与NDV在体内的抑瘤效果是事存在一定关系,从而探讨测定HI抗体能否成为一种简便可行的、既能判断NDV接种成功与否,又有估计疗效预后的监测手段。方法：以小鼠肉瘤180为实验模型,于实验开始后第4周及终止实验时,收集小鼠的眼底血标本测定NDVHI抗体,同时解剖和称量每只小鼠的移植瘤,以HI抗体为横座标,瘤重为纵座标描绘相关散点图,并计算和检验直线相关系数。结果：小鼠的HI抗体阳性率试验组第一批为90％,第二批为100％,第二批为100％;对照组两批小鼠均为阴性;试验组小鼠HI抗体与瘤重的相关散点图呈直线趋势,相关系数为－0．6495,P＜0．002,负相关呈高度显著性。结论：NDVHI抗体,除能判断接种成功与否外,可能对疗效的预后估计也有一定的间接性的参考价值。     

新城疫病毒诱导的抗体反应与肿瘤生长的相关分析

目的:了解新城疫病毒(NDV)接种机体产生的血凝抑制(HI)抗体反应水平与NDV在体内的抑瘤效果是否存在一定关系,从而探讨测定HI抗体能否成为一种简便可行的、既能判断NDV接种成功与否,又能估计疗效预后的监测手段.方法:以小鼠肉瘤180为实验模型,于实验开始后第4周及终止实验时,收集小鼠的眼底血标本测定NDV HI抗体,同时解剖和称量每只小鼠的移植瘤,以HI抗体为横座标,瘤重为纵座标描绘相关散点图,并计算和检验直线相关系数.结果:小鼠的HI抗体阳性率试验组第一批为90%,第二批为100%;对照组两批小鼠均为阴性;试验组小鼠HI抗体与瘤重的相关散点图呈直线趋势,相关系数为-0.6495,p＜0.002,负相关呈高度显著性.结论:测定NDV HI抗体,除能判断接种成功与否外,可能对疗效的预后估计也有一定的间接性的参考价值.     

荷IL-12新城疫病毒治疗结肠癌的实验及其机制探讨

目的:探讨荷IL-12新城疫病毒rClone30-IL-12瘤内注射治疗结肠癌的作用效果及可能机制.方法:RT-PCR法鉴定病毒中IL-12;构建荷CT26细胞的结肠癌模型,将荷瘤小鼠随机分为rClone30-IL-12组、奥沙利铂(OXA)组、磷酸盐缓冲液(PBS)组;给药后隔天记录瘤体直径(mm)、小鼠质量(g)和...     

新城疫病毒联合化疗对晚期非小细胞肺癌的疗效和安全性评价

  目的  探讨新城疫病毒在ⅢB、Ⅳ期非小细胞肺癌(NSCLC)化疗中的作用。  方法  2005年7月~2008年5月, 在辽宁省肿瘤医院收治的146例非小细胞肺癌患者, 随机分为实验组与对照组。实验组73例, 采用新城疫病毒联合长春瑞滨+卡铂方案化疗; 对照组73例, 单纯采用长春瑞滨+卡铂方案化疗。每28天为1个周期, 化疗4个周期。每2个周期评价疗效, 并监测治疗前后患者白细胞、血小板、T细胞亚群CD4/CD8变化。  结果  实验组和对照组的有效率分别为50.68%和41.10%(P < 0.05)。实验组不良反应较对照组轻, 差异有统计学意义(P < 0.05)。实验组治疗前后CD4/CD8分别为1.22+0.94和1.59±1.17, 差异有统计学意义(P < 0.05)。  结论  新城疫病毒联合长春瑞滨+卡铂方案治疗ⅢB、Ⅳ期非小细胞肺癌(NSCLC)疗效好, 不良反应轻, 具有提高机体的免疫功能和改善患者生活质量的作用。      

新城鸡瘟病毒用于肿瘤特异性免疫治疗的研究进展

在肿瘤免疫治疗基础上发展起来的肿瘤生物治疗(Biotherapy),着眼于调动机体的自身的抗癌能力,随着现代分子生物学、免疫学等科学技术的发展,已经成为继手术、化疗、放疗后的肿瘤第四种治疗模式.