蝎毒和蛇毒对小鼠骨髓细胞增殖的作用研究

目的对比观察蝎毒、蛇毒对小鼠骨髓细胞增殖的影响.方法健康昆明种小鼠70只,随机分为5组:①空白对照组;②蝎毒低剂量组;③蝎毒高剂量组;④蛇毒低剂量组;⑤蛇毒高剂量组.小鼠腹腔注射,每天1次,连续给药5d.每组分别在24h、8d、15d取4只小鼠股骨骨髓进行骨髓象检查分析及骨髓有核细胞计数.结果高剂量蛇毒后,骨髓有核细胞数明显增多(p<0.01),蝎毒高剂量组比蛇毒高剂量组增多更显著(p<0.01);两低剂量组有核细胞数明显增多(p<0.05).注射蝎毒和蛇毒后均可使小鼠骨髓有核细胞中单个核细胞比例先增高后下降,而分叶核细胞比例随之升高,但蝎毒的作用更明显.结论蝎毒、蛇毒均具有促进骨髓细胞增殖、分化和成熟的作用,蝎毒的促进作用更明显.     

蝎毒及蝎毒多肽对小鼠免疫功能和外周血细胞计数的作用

目的　观察蝎毒 (SV)及蝎毒多肽 (PSV)对正常小鼠免疫功能和外周血细胞计数的作用 .方法　取正常小鼠 4 5只 ,随机分为 3组 :SV组、PSV组、对照组 ,分别腹腔注射 ,1次 /d ,连续 5d .于首次给药 6h、2 4h、8d后 ,每组取小鼠 5只 ,称体重 ,眼球取血 ,计数外周血细胞、处死后脾脏、胸腺 ,计算脾重指数、胸腺指数 .8d取外周血后测试体能 .结果　SV组 6h、2 4h、8d白细胞计数增加 (p <0 .0 5 ) ;PSV组略高于对照组 .SV组 6h中性粒比例明显增多 ,2 4h淋巴细胞比例明显增加 (p<0 .0 5 ) ,8d二者比例恢复正常 ;PSV组 6h、2 4h中性粒略有增加 ,8d恢复正常 .两组单核细胞均有增高 .血小板计数SV组维持正常 ,PSV组升高 .SV、PSV组脾重指数、胸腺指数和红细胞计数与对照组相比均不减少或略有增加 (p >0 .0 5 ) ,两组体能增强明显 .结论　SV及PSV均可提高正常小鼠的免疫功能 ,维持或增加外周血各类细胞数目 ,改善机体整体功能状态     

巨噬细胞对小鼠骨髓肥大细胞增殖的调节作用

本文应用体外细胞共培养和免疫细胞化学技术观察小鼠腹腔巨噬细胞对小鼠骨髓来源的肥大细胞生长增殖的影响。结果表明小鼠腹腔巨噬细胞对肥大细胞的生长增殖具有一定的促进作用，不仅表现在肥大细胞数量的增加，而且也能促使肥大细胞进入Ｓ期的比例增加（二者数值均为对照值的２－３倍）；还发现上述促增殖作用与巨噬细胞和肥大细胞的浓度有关。文中提出了巨噬细胞促使肥大细胞增殖的最适浓度范围以及两种细胞浓度比值的最佳范围，并     

黄芪多糖对小鼠骨髓及外周血造血干细胞的增殖及动员作用

探讨APS-P对正常或化疗后小鼠的骨髓、脾及外周血造血干细胞的促增殖及外周动员作用。给正常或经环磷酰胺化疗后的C57BL／6小鼠注射APS-P，然后取骨髓细胞、外周血细胞及脾细胞，并用荧光抗体PerCP-Sca-1，APE-c-kit及PE-Lineage(CD3，CD4，CD8，Trll9，B220 CDllb，Gr-1)进行染色标记，用流式细胞仪检测小鼠造血干细胞(Lin c-kit^ Sca-1^ )数量变化。注射APS-P能使正常及化疗小鼠骨髓、脾及外周血中的造血干细胞有不同程度的增加。这一作用可能是由于APS-P促进骨髓造血干细胞的增殖，而在外周血及脾中的增加则可能是由于APS-P对骨髓造血干细胞的外周动员作用。     

蝎毒和蝎毒多肽对家兔血小板聚集的影响

目的　检测蝎毒 (SV)和蝎毒多肽 (PSV)对家兔凝血系统的影响 .方法　麻醉家兔 ,颈动脉取血制备富含血小板血浆 (PRP) ,分别加入SV和PSV ,测定二磷酸腺苷 (ADP)诱导的血小板聚集作用 .结果　较低浓度的SV即可使血小板聚集曲线明显下降 ;PSV对血小板聚集影响不大 ,即使用较高的浓度 ,血小板聚集曲线亦仅轻微下降 .结论　SV对血小板聚集起抑制作用 (抗凝血作用 ) ;PSV对凝血系统的影响远远小于蝎毒     

蝎毒及蝎毒多肽对小鼠免疫功能和外周血细胞计数的作用

目的观察蝎毒(SV)及蝎毒多肽(PSV)对正常小鼠免疫功能和外周血细胞计数的作用.方法取正常小鼠45只,随机分为3组:SV组、PSV组、对照组,分别腹腔注射,1次/d,连续5d.于首次给药6h、24h、8d后,每组取小鼠5只,称体重,眼球取血,计数外周血细胞、处死后脾脏、胸腺,计算脾重指数、胸腺指数.8d取外周血后测试体能.结果 SV组6h、24h、8d白细胞计数增加(p<0.05);PSV组略高于对照组.SV组6h中性粒比例明显增多,24h淋巴细胞比例明显增加(p<0.05),8d二者比例恢复正常;PSV组6h、24h中性粒略有增加,8d恢复正常.两组单核细胞均有增高.血小板计数SV组维持正常,PSV组升高.SV、PSV组脾重指数、胸腺指数和红细胞计数与对照组相比均不减少或略有增加(p>0.05),两组体能增强明显.结论 SV及PSV均可提高正常小鼠的免疫功能,维持或增加外周血各类细胞数目,改善机体整体功能状态.     

蝎毒和蝎毒多肽对家兔血小板聚集的影响

目的检测蝎毒(SV)和蝎毒多肽(PSV)对家兔凝血系统的影响.方法麻醉家兔,颈动脉取血制备富含血小板血浆(PRP),分别加入SV和PSV,测定二磷酸腺苷(ADP)诱导的血小板聚集作用.结果较低浓度的SV即可使血小板聚集曲线明显下降;PSV对血小板聚集影响不大,即使用较高的浓度,血小板聚集曲线亦仅轻微下降.结论 SV对血小板聚集起抑制作用(抗凝血作用);PSV对凝血系统的影响远远小于蝎毒.     

小鼠白血病骨髓基质细胞对白血病细胞体外生长的作用

用Dexter培养体系作L615小鼠白血病骨髓长期培养,观察基质细胞对白血病细胞体外生长的影响。结果显示:大量白血病细胞在1周内死亡。少数粘附于骨髓基质的细胞能在此体系繁殖,经过8周以上传代后获得独立生长能力,成为不死的细胞系,命名为L615-1。这种细胞能在BALB/C裸鼠皮下形成淋巴肉瘤,但不能诱发同系小鼠发生白血病。本文结果提示骨髓基质细胞能支持恶性造血细胞体外生长。     

当归多糖对小鼠骨髓基质细胞增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响

目的研究当归多糖（APS）对小鼠骨髓基质细胞（BMSC）增殖及细胞周期和细胞凋亡的影响。方法原代培养BMSC,随机分为对照组和药物组,作用不同时间后观察APS浓度为50mg／L、100mg／L时对小鼠BMSC80％贴壁时间的影响,MTT法检测APS浓度分别为25mg／L、50mg／L、100mg／L、200mg／L、300mg／L时对小鼠BMSC增殖的影响;流式细胞仪检测APS浓度分别为25mg／L、50mg／L、100mg／L、200mg／L、300mg／L时对小鼠BMSC细胞周期和细胞凋亡的影响。结果APS作用后的BMSC达80％贴壁所需时间比对照组明显缩短（P〈0．05）;在同一作用时间下,各APS浓度组BMSC的增殖能力较对照组增强（P〈0．05）,其中50mg／L组和100mg／L组中BMSC增殖能力较其他各组明显增强（P〈0．05）;各药物组小鼠BMSC3．5d后各组S期和S＋G2／M期均较对照组明显增多（P〈0．05）;而G0／G1期细胞均较对照组减少（P〈0．05）;50mg／L组和100mg／L组BMSCS期细胞较其它药物组S期细胞数明显增多（P〈0．05）;除50mg／L组外,其余各药物组G2／M期细胞较对照组增多（P〈0．05）。各药物组BMSC的凋亡较对照组降低（P〈0．05）,并且浓度为100mg／L时其凋亡较其它各组明显减少（P〈0．05）。结论APS可改变BMSC细胞周期,减少凋亡细胞数目进而促进BMSC的增殖。     

蛇毒F_(6.3.2)激活蛋白C的可能机制初探

本实验研究蛇毒蛋白C激活组份F6.3.2对蛋白C的激活作用。以BaCl2吸附血浆和纯化蛋白C为作用底物,采用发色底物法测定蛇毒组份F6.3.2对蛋白C的特异性激活作用,同时采用SDS-PAGE.测定该组份对蛋白C的激活机制。结果发现F6.3.2没有直接作用发色底物使之生色的能力。它对BaCl2吸附血浆不表现生色反应能力(与对照组相比P>0.05),而对纯化蛋白C则表现出很强的生色反应能力(与对照组Ⅰ、对照组Ⅱ相比P<0.01).SDS-PAGE结果表明,F6.3.2与纯化蛋白C作用后的混合物,由两条链组成,一条链分子量为19KDa,与纯化蛋白C的轻链相同,另一条链分子量为59.5 KDa。为纯化蛋白C重链与F6.3.2的分子量之和,表明F6.3.2已结合到纯化蛋白C的重链上。因此.我们认为蛇毒蛋白C激活组份F6.3.2对蛋白C有特异性激活作用,它激活蛋白C的可能机制是通过结合于蛋白C的重链,形成F6.3.2-蛋白C复合物,引起蛋白C变构,从而将蛋白C激活为活化蛋白C。     

全蝎药理作用研究进展

全蝎是一味应用广泛的传统中药,具有多种药理作用,有丰富的临床应用价值。近年来国内外有关全蝎药理作用的研究较多,本文对此进行总结,希望能为其应用与开发提供理论依据。     

Inhibition Effects of Scorpion Venom Extracts (Buthus Matensii Karsch) on the Growth of Human Breast Cancer MCF-7 Cells

Background

To observe the inhibition effects of the Buthus matensii Karsch (BmK) scorpion venom extracts on the growth of human breast cancer MCF-7 cells, and to explore its mechanisms.

Methods

Two common tumor cells (SMMC7721, MCF-7) were examined for the one which wasmore sensitivity to scorpion venom by MTT method. Cell cycle was determined by flow cytometry. Immunocytochemistry was applied to detect apoptosis-related protein Caspase-3 and Bcl-2 levels, while the expression of cell cycle-related protein Cyclin D1 was shown by Western blotting.

Results

Our data indicated that MCF-7 was the more sensitive cell line to scorpion venom. The extracts of scorpion venom could inhibit the growth and proliferation of MCF-7 cells. Furthermore, the extract of scorpion venom induced apoptosis through Caspase-3 up-regulation while Bcl-2 down-regulation in MCF-7 cells. In addition, the extracts of scorpion venom blocked the cells from G₀/G₁ phase to S phase and decreased cell cycle-related protein Cyclin D1 level after drug intervention compared with the negative control group.

Conclusions

These results showed that the BmK scorpion venom extracts could inhibit the growth of MCF-7 cells by inducing apoptosis and blocking cell cycle in G₀/G₁ phase. The BmK scorpion venom extracts will be very valuable for the treatment of breast cancer.     

蝮蛇毒抗栓酶的促纤溶和抗凝血作用的实验研究

本工作利用大鼠衄管灌流及异丙肾上腺素(ISP)性AMI模型,以体外纤维蛋白溶解活性、纤溶酶原激活剂(PA)活性,血浆纤溶酶(PL)活性、凝血酶原时间(PT)、白陶土部分凝血活酶时间(KPTT)等变化,观察蛇毒抗栓酶(SVATE)的促纤溶、抗凝血和心肌保护作用。结果表明,SVATE有缴活纤溶怍用,它能逆转ISP性AMI大鼠PL活性的降低,这种作用是由于激活PA导致PL生成增加。同时对内源凝血系统有一定抑制作用。此外保护心肌、降低死亡率。     

蝎蜂毒肽对大鼠纤溶系统作用初探

本研究采用大鼠肢体血管灌流和整体给药两种模型，观察蝎蜂毒（ＳＢＰ）对血管理灌流液内纤溶酶原激活物（ＰＡ）活性、血浆优球蛋白纤溶性（ＥＦＡ）和纤溶酶（ＰＬ）活性的影响。结果说明，ＳＢＰ有明显激活纤溶系统作用；其机制可能涉及血管内皮细胞释放ＰＡ活性增加，进一步促使纤溶酶原活化为ＰＬ增多的途径。     

不同蛋白涂层在脱细胞牛心包片上对骨髓间充质细胞黏附生长的影响

为观察和评价不同蛋白涂层对骨髓间充质细胞在脱细胞牛心包片上黏附生长的影响,采用酶消化结合去污剂洗涤法制作脱细胞牛心包片,在其表面用不同蛋白(纤维连接蛋白、明胶蛋白、型胶原蛋白)均匀涂层。提取并培养大鼠骨髓间充质细胞,将其接种到预涂层的牛心包片上,未涂层组作为对照。在不同时间点采用Hochest染色观察细胞贴附生长情况,48h采用MTT法定量分析。纤维连接蛋白涂层及明胶蛋白涂层与型胶原蛋白涂层和不涂层组相比,对骨髓间充质细胞贴附增殖能力均有显著提高(P<0.001);纤维连接蛋白涂层和明胶蛋白涂层之间(P>0.05)以及型胶原蛋白涂层和不涂层对照组之间(P>0.05)对细胞的贴附生长没有显著差异。结果表明:脱细胞牛心包片上纤维连接蛋白涂层及明胶蛋白涂层能明显提高骨髓间充质细胞的贴附增殖能力,而型胶原蛋白涂层对骨髓间充质细胞的贴附增殖没有明显的改善。