干血斑滤纸片检测Leber''s视神经萎缩线粒体突变

目的 建立干血斑滤纸片分析Leber's遗传性视神经萎缩(LHON)线粒体DNA(mtDNA)的方法，为更加广泛开展LHON的基因诊断和为进一步研究LHON积累资料。方法 收集了81例视神经炎、视神经萎缩或临床怀疑LHON患者的干血斑滤纸片，提取DNA，用突变特异性引物PCR(MSP—PCR)和异源双键—单链构象多态性(HA—SSCP)检测其mtDNA的三个常见原发致病突变位点。结果 81例受检者中，检出51例l1778位点突变阳性；1例3460位点突变阳性；14484位点突变全部阴性。结论 应用干血滤纸片检测LHON的mtDNA，具有微量、准确、有效、邮寄方便的特点，值得推广。     

外周血游离胎儿DNA检测在产前唐氏筛查中的应用价值研究

目的 探讨外周血游离胎儿DNA检测（NIPT）在产前唐氏筛查中的应用价值。方法 回顾性分析2020年8月至2022年8月于我院行DS产前筛查的1580例DS高风险孕妇的临床资料，所有孕妇均行外周血游离胎儿DNA、唐氏筛查及羊水穿刺-核型检查。结果 外周血游离胎儿DNA在DS诊断中的灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值、阴性预测值均高于唐氏筛查，差异有统计学意义（P<0.05）。Kappa检验显示：唐氏筛查与“金标准”一致性尚可（kappa值=0.600,P=0.000）；外周血游离胎儿DNA与“金标准”一致性良好（kappa值=0.887,P=0.000）;24例NIPT阳性孕妇中，15例确诊为染色体异常，胎儿染色体异常发生率为0.95%(15/1580)，确诊13-三体综合体2例，18-三体综合体4例，21-三体综合体9例，与“金标准”符合率均为100.00%。结论 NIPT在产前唐氏筛查中具有较高的应用价值，可减少产前有创性诊断数量，增加诊断的准确性，降低新生儿出生缺陷，提高出生人口质量，减少不必要的胎儿流失。     

HBsAg阳性供血者的HBV DNA与e系统的相关性和对受血者的感染性

观察业已证明,HBsAg 阳性与阴性的血液对乙肝的传染性存在着明显差异,HBeAg 与乙肝病毒复制相关,HBV DNA 与 HBeAg 相关。然而少数HBeAg 阳性的血清中 HBV DNA 阴性,抗-HBe 阳性者 HBV DNA 阳性。为探讨其内在关系和 HBVDNA 作为感染力的意义,本文对26名 HBsAg 阳性供血者和10名受血者作了血清学检查和临床观察.结果显示,26名 HBsAg 阳性供血者中,有3人(12%)HBV DNA、HBeAg、IgM 抗-HBc 均阳性,2人(8%)HBV DNA 阳性、抗-HBe 阳性,     

DNA芯片检测肝组织及血清中乙型肝炎病毒DNA的临床研究

目的：研究DNA芯片检测乙型肝炎和肝硬化患者肝组织及血清中乙型肝炎病毒（HBV）DNA的应用价值。方法：用点样仪将聚合酶链反应（PCR）扩增的HBV DNA探针制成基因芯片。对15例慢性乙型肝炎病人的血清和肝活检组织，99例乙型肝炎后肝硬化肝组织，分别用基因芯片、原位分子杂交、免疫组织化学和雅培试剂检测HBV DNA、乙型肝炎核心抗原(HBcAg)、乙型肝炎表面抗原（HBsAg)和乙型肝炎e抗原（HBeAg)。结果：用基因芯片对15份HBsAg,HBeAg阳性的乙型肝炎患者血清进行检测，HBV DNA均阳性，阳性率符合率为100％；15份肝活检组织标本，免疫组化法检测HBcAg阳性15例，原位分子杂交法和基因芯片检测HBV DNA均阳性14例，阳性率93％。99份肝炎后肝硬化患者肝组织标本，HBcAg阳性67份，HBV DNA阳性53份，基因芯片检测HBV DNA阳性46份，阳性率分别为69％、88％。32例HBcAg、HBV DNA阳性的肝组织中，基因芯片检测HBV DNA均为阴性。结论：肝炎基因诊断芯片可检测肝组织及血清中HBV DNA，诊断准确率高，假阳性率低。     

实时荧光定量PCR在EB病毒DNA检测中的应用

目的探讨实时荧光定量PCR技术在检测患者外周血单个核细胞(PBMC)中EB病毒(EBV)DNA定量的临床应用,比较实时荧光定量PCR在检测血浆和PBMC中EBV DNA含量的差别,并研究EBV阳性患者的病种分布特点。方法应用罗氏Light Cycler荧光定量PCR仪检测375例患者PBMC中EBV DNA含量,所有阳性患者均用血浆进行复查,比较其差别,并回顾性分析患者临床特点。结果检测PBMC中EB阳性标本35例,阳性率为9.3%。阳性患者中鼻炎13例,鼻咽癌4例,鼻息肉4例,肺炎7例,急性淋巴细胞性白血病1例,传染性单核细胞增多症6例。取阳性标本检测其血浆游离EB DNA,33例阳性,其拷贝数低于相应标本中PBMC中的拷贝数。结论实时荧光定量PCR技术检测PBMC和血浆中EB DNA准确,快速,在确诊EBV感染相关性疾病中具有重要的作用,且检测PBMC中EB DNA可能更优于检测血浆中EB DNA。     

HBV DNA定量检测及其与HBV标志物的相关性探讨

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)DNA与不同类型HBV免疫标志物之间的关系,为临床诊断和治疗提供有价值的判断标准。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA法)对220例血清标本进行HBV免疫标志物检测,同时用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测HBV DNA含量。结果 96例乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎核心抗体(抗-HBc)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)阳性(+)标本中HBV DNA阳性检出率为91.7%(88/96);100例HBsAg(+)/抗-HBe(+)抗-HBc(+)标本中HBV DNA阳性检出率为20.0%(20/100)。HBsAg阳性组与HB-sAg阴性组、HBeAg阳性组与HBeAg阴性组的DNA载量比较差异有统计学意义。结论 FQ-PCR可以检测HBV感染的真实性和复制情况,其与ELISA法检测HBV血清标志物相结合,对乙型肝炎的临床诊断及治疗方案的选择、疗效观察及预后判断具有极其重要的作用。     

乙型肝炎病毒几种标志物相关性分析

目的探讨慢性乙型肝炎患者几种标志物即乙型肝炎病毒（HBV）两对半（HBV-M）、前S1抗原（PreS1）及HBV DNA检测的相关性。方法HBV-M和PreS1采用酶联免疫吸附试验法检测，HBVDNA采用实时聚合酶链反应法检测。结果131例慢性乙型肝炎患者的HBV—M检测中，“大三阳”，“小三阳”，乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）阳性、乙型肝炎病毒核心抗体（抗-HBc）阳性三种典型感染模式为126例，占96．2％；其中72例大三阳阳性病例中PreS1和HBV DNA阳性分别为60例和72例，阳性率分别为83．3％和86．1％，而42例小三阳阳性病例中PreS1和HBV DNA阳性分别为12例和28例，阳性率为28．6％和66．7％；在78例PreS1阳性患者中HBV DNA阳性占68例，其阳性率为87．2％，48例PreS1抗原阴性的患者中HBV DNA阳性为32例，其阳性率为66．7％。结论在慢性乙型肝炎患者HBV-M检测“大三阳”模式中PreS1与HBV DNA均表现高阳性率，二者具有良好的相关性（P〈0．01）；而“小三阳”模式中PreS1阳性率较低，但HBV DNA仍有较高的阳性率，表明在慢性乙型肝炎患者“小三阳”模式中HBV DNA检测比PieS1检测更有价值（P〈0．01）。值得注意的是研究中PreS1阳性和阴性患者均有较高的HBV DNA阳性率，二者没有明显差异（P〉0．05）。因而，在临床诊断、治疗和疗效观察中HBV DNA可作为检测金标准，而PreS1阴性的患者也不应忽视。     

儿童外周血EB病毒DNA检测的临床意义

目的探讨Epstein-Barr病毒(EB病毒)DNA检测的临床应用价值。方法应用荧光定量聚合酶链反应病毒核酸扩增方法,定量检测儿科以发热为主诉的患儿外周血EB病毒DNA载量。阳性病例进行临床分析和抗病毒治疗观察。结果检测522例间断和/或持续发热患儿,阳性(病毒载量≥50拷贝/ml)102例,阳性率19.5%。病毒载量最高4.44×106拷贝/ml,最低4.3×102拷贝/ml。阳性病例疾病病种较多。部分阳性病例抗病毒治疗显效。结论静脉血EB病毒DNA检测是可行的实验室诊断方法;儿科以发热为主诉的患儿可能有19.5%左右存在EB病毒感染或隐性感染。EB病毒DNA检测阳性患儿应适当抗病毒治疗并随访。     

乙肝病毒前S1抗原为HBV复制新标志物的临床价值探讨

[目的]探讨乙肝病毒前S1抗原作为HBV复制的新标志物与HBeAg和HBV—DNA比较，在临床应用时的价值所在。[方法]前S1抗原和HBeAg检测均采用ELISA法，HBV—DNA检测采用荧光PCR检测法。对280例常见模式的HBV血清标记物标本进行检测。[结果]280例常规模式的HBV血清标记物标本中，检出HBV—DNA阳性158例；前S1抗原阳性134例；HBeAg阳性100例。[结论]前S1抗原与HBV—DNA有较高的符合率（P〉0．05）；前S1抗原作为乙肝感染和复制的血清学指标敏感性高于HBeAg。前S1抗原可以作为一项新的乙肝病毒感染、复制、传染的敏感指标，有较高的临床应用价值。     

HBV-LP在乙型肝炎诊断及判断预后中的作用

目的探讨乙肝病毒大蛋白(HBV-LP)与乙型肝炎病毒复制的关系和在诊断和预后中的作用。方法采用ELISA和荧光定量PCR(FQ-PCR)法,检测200例HBsAg阳性患者血清中HBV-LP、HBVM、HBV DNA和60例经拉米夫定治疗半年的乙型肝炎患者血清HBVM、HBV DNA,并与HBV DNA作对比分析。结果 200例HBsAg阳性患者中,HBeAg与HBV-LP和HBV DNA的阳性检出率差异有统计学意义(P0.05),HBV-LP与HBV DNA的阳性检出率差异无统计学意义(P0.05);60例抗病毒治疗患者血清HBV-LP和HBV DNA阳性检出率差异无统计学意义(P0.05)。结论 HBV-LP能准确反映乙肝病毒在人体内感染和复制情况,动态检测HBV-LP的变化有助于临床评估乙型肝炎的治疗效果。     

拉米夫定治疗慢性重型肝炎临床观察

目的观察拉米夫定治疗HBV—DNA阳性慢性乙型重型肝炎的临床疗效。方法选择HBV—DNA阳性慢性乙型重型肝炎(早、中期)患者，随机分为治疗组和对照组，在综合治疗相同基础上，治疗组联合应用拉米夫定，观察两组患者主要症状、并发症与病死率情况，以及对肝肾功能、凝血酶原活动度、HBV—DNA、HBV—M的影响，并进行统计学分析。结果治疗组在改善临床症状、恢复肝脏功能、减少并发症、降低病死率、HBV—DNA阴转率、HBeAg阴转率及HBeAg／HBeAb血清转换率等方面明显优于对照组。结论应用拉米夫定治疗HBV—DNA阳性慢性乙型重型肝炎，能有效抑制HBV复制，控制病情发展，提高存活率，是一种有效、合理的治疗方案。     

埃及慢性肝炎患者和无偿供血者TT病毒的临床意义

本文应用截面分析方法对埃及慢性肝炎患者和无偿供血者TT病毒(TTV)的临床意义进行了调查。使用半巢式PCR方法检测TTV DNA。慢性乙肝、慢性丙肝和血吸虫肝病患者中的TTV DNA流行率无差异(11/24,46％;22/72,31％;14/39,36％)。供血者的流行率(32/109,29％)与各组肝炎患者无差异。在任何一研究组中,TTV DNA阳性和阴性两者间的临床背景资料包括:平均年龄、性别、输血史、ALT值均无差异。表明在每个慢性肝炎组中,超声波扫描TTV DNA阳性和阴性患者两者间的肝化程度相似。在供血者中,TTV感染与HBV、HCV感     

和美新临床应用副作用的护理

近年来，和美新(盐酸托泊替康)的临床应用为卵巢癌、乳腺癌、肺癌的治疗开辟了新的路径。它主要是通过形成稳定共价DNA-酶复合物，以阻止DNA的修复，当DNA在稳定复合物存在下复制时，出现DNA双链断链，其DNA破碎导致细胞死亡。和美新在临床应用以来，对治疗肿瘤显示了良好效果。但在治疗过程中出现毒副作用应引起我们的特别注意。     

前S1抗原与HBV DNA及HBV血清标志物检测的相关性及临床意义

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)DNA含量、前S1抗原(Pre-S1-Ag)及HBV e抗原(HBeAg)与不同模式HBV血清标志物(HBV-M)的关系及临床意义。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和微粒子化学发光法(CMIA)分别检测515例乙型肝炎患者的Pre-S1-Ag和HBV-M;采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)测定HBV DNA和酶动力学法测定丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST),并对检测结果进行比较分析。结果在乙型肝炎患者中,HBV DNA和Pre-S1-Ag的阳性检出率差异无统计学意义;其中HBV表面抗原(HBsAg)、HBeAg和HBV核心抗体(抗-HBc)同时阳性组的HBV DNA和Pre-S1-Ag的阳性检出率分别为91.2%和88.1%,说明此组患者存在病毒的高复制和传染性;部分HBeAg阴性患者仍存在病毒的复制;若以HBV DNA定量≥103拷贝/mL为病毒复制的诊断标准,HBV DNA阳性患者HBeAg阳性率为61.5%,Pre-S1-Ag的阳性率为95.2%,两者差异有统计学意义;HBV Pre-S1-Ag阳性患者血清中ALT及AST均高于阴性患者。结...     

心肌病患者心肌中相关病毒的测定

目的：探讨炎症性心肌病、扩张型心肌病(idiopathic dilated cardiomyopathy，IDCM)、肥厚型心肌病(hypertrophic cardiomyopathy，HCM)与心肌中细小病毒B19(parvovirus B19，PBl9)、腺病毒和肠病毒的关系。方法：利用多聚酶链反应(PCR)，比较30例炎症性心肌病、36例IDCM、13例HCM及36例对照组患者心内膜活检标本中PB19、腺病毒及肠病毒的检出率，并用荧光素探针实时定量PCR检测PB19拷贝数。结果：30例炎症性心肌病患者中有4例PB19阳性(13．3％)、1例腺病毒阳性(3．3％)、10例肠病毒阳性(33．3％)；36例IDCM中有3例PB19阳性(8．3％)、1例腺病毒阳性(2．8％)、7例肠病毒阳性(19．4％)；13例HCM中有2例PB19阳性(15，4％)、1例肠病毒阳性(7．69％)、腺病毒阴性。而对照组未检出病毒序列。PBl9量从70拷贝／μg至3900拷贝／ug，炎症性心肌病PB19DNA拷贝数高于IDCM组和HCM组。结论：PB19和肠病毒一样是炎症性心肌病、IDCM病因之一，可能与HCM发生也有一定关系，而腺病毒为非主要致病病毒；炎症性心肌病的高拷贝PB19DNA提示病毒感染是诱发心肌炎症反应的机制之一。     

HBV DNA与HBV五项指标检测的临床应用研究

目的研究乙型肝炎病毒(HBV)DNA与HBV五项指标乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)、乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)、乙型肝炎病毒e抗体(HBeAb)、乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)检测在临床应用中的价值。方法通过513例甲乙型肝炎血清标志检测结果分析,对HBeAg阳性的含义有了近一步的认识。结果发现它与HBeAg相关密切,在判断乙肝病毒复制时不能单凭HBeAg阳性,而应结合HBV DNA是否阳性;在判断乙肝病毒停止复制的康复期时也不能单凭HBeAg转阴、抗-HBe转阳,还应结合HBV DNA是否也转阴。结论把HBV DNA列入乙型肝炎常规检查具有较大的临床意义。     

荧光定量PCR技术在血液筛查中的应用及可行性分析

目的　了解 ELISA法筛查血液乙型肝炎病毒 ( hepatitis B virus,HBV)的漏检率 ,探讨荧光定量聚合酶链反应 ( Flurescence quantitative PCR,FQ-PCR)技术用于混合血浆标本病毒核酸检测的可行性。　方法　应用 FQ-PCR技术对常规 ELISA初复检正常献血者 (包括无偿献血者和个体献血者 )的微量血浆汇集池标本 ( 1 0人份× 2 0 μ1 )进行 HBV DNA检测 ,再对阳性汇集池中的标本进行单份检测。用双蒸水和 HBV DNA阴性汇集池中的血浆标本分别对 HBV DNA标准品(浓度为 1 0 3拷贝 /ml)作 1 0～ 5 0倍稀释后行 FQ-PCR测定 ,观察不同的血浆标本混合后是否存在 Taq酶抑制物的叠加作用及对 PCR结果有无影响。对浓度为 1 0拷贝 /ml～ 1 0 4拷贝 /ml的 HBV DNA标准品分别进行 FQ-PCR检测 ,确定试剂盒的敏感度。　结果　 1 2 0 0份无偿献血者标本中有 1 1例 HBV DNA阳性 ( 0 .92 % ) ;4 70份个体献血者标本中有 1 0例 HBVDNA阳性 ( 2 .1 3% )。双蒸水与混合血浆稀释的 HBV DNA标准品的 FQ-PCR检测结果 (定性 )完全一致。试剂盒的检出下限为 1 0 2拷贝 /ml。　结论　 ELISA法筛查血液存在较高的 HBV漏检率 ,FQ-PCR用于混合血浆标本的病毒核酸检测是可行的     

应用多种技术鉴别诊断弓形虫性、囊虫性及结核性脑炎

目的：应用多种检验技术鉴别诊断弓形虫性、囊虫性及结核性脑炎。方法：使用PCR、结核杆菌培养、ELISA检验等方法。对1200例脑炎患者的脑脊液标本中的弓形虫、结核杆菌、囊虫抗原及抗体进行了检测。结果：在1200分脑脊液标本中，共检测出弓形虫DNA阳性87例，结核杆菌DNA阳性105例，总阳性率为15．7％。其中结核杆菌DNA阳性而培养阴性的标本有22例，弓形虫DNA阳性而弓形虫抗体IgM阴性3例。检测出囊虫抗原阳性156例，抗体阳性271例，两项均阳性的134例。结合脑部CT检查发现．抗原阳性的156例病人均有脑部炎性病灶，而单纯抗体阳性的病人则只有16例存在脑部炎性病杜。结论：PCR的方法比较灵敏，但是可能出现假阳性，PCR阳性结果报告应慎重，应结合临床和常规检测结果综合判断。同时也有部分常规检测结果阳性而PCR检测阴性，这说明PCR在理论上有很大的优点，但在实际应用上仍需要完善。为明确囊虫病的诊断，需要把囊虫抗原作为诊断囊虫病的常规化验项目。     

多重聚合酶链反应在生殖器溃疡性疾病病因诊断中的应用

目的：建立同时检测梅毒螺旋体(TP)、单纯疱疹病毒(HSV)和杜克雷嗜血杆菌(HD)的多重聚合酶链反应(M-PCR)方法，以评价其在诊断生殖器溃疡性疾病(GUD)病因中的临床价值。方法：用M—PCR检测244例生殖器溃疡标本中TP、HSV和HD，并进行暗视野显微镜(D—F)、梅毒血清学试验(STS)、HD培养和酶免疫法(EIA)检查HSV抗原。结果：用M-PCR检测TP、HSV和HD标准菌株，均出现阳性扩增带(TP、HSV和HD扩增产物片段大小分别为260、432和170bp)，并进行序列分析，证实为特异性扩增片段，而阴性对照组均没有扩增带；其敏感性为10^2pg DNA。将M—PCR与D—F、TPHA、EIA法比较，有较好的一致性(Kappa分别为0．774、0．704、0．756)。结论：本研究结果表明：M—PCR是一种简单、准确、可靠的检测生殖器溃疡标本中TP、HSV、HD的方法；可用于临床GUD的病因诊断。     

高通量测序技术在无创产前筛查中的临床应用及研究进展

介绍了母体外周血中胎儿游离DNA(cff DNA)及其发现后聚合酶链反应(PCR)技术在产前诊断中的应用。重点从测序技术、数据分析和解读、临床应用现状及质量控制几个方面介绍了新一代高通量测序技术在产前筛查中的研究进展和临床应用,并对高通量测序技术在产前筛查母体癌症检测中的应用作了简单介绍。