HPLC 法测定贯叶金丝桃中芦丁和金丝桃苷的含量

目的：建立贯叶金丝桃中芦丁与金丝桃苷的含量测定方法。方法：采用高效液相色谱仪,使用Diamonsil C18柱（250mm×4.6 mm,5μm）,流动相为甲醇-乙腈-四氢呋喃-0.4%醋酸（1∶1∶18∶80）,流速为0.7 ml·min-1,检测波长为358 nm,柱温为30℃。结果：芦丁在0.206～1.236μg范围内有良好的线性关系,r=0.999 9。金丝桃苷在0.144～0.864μg范围内有良好的线性关系,r=0.999 8;芦丁的平均加样回收率为98.57%,RSD为0.94%,金丝桃苷的平均加样回收率为98.57%,RSD为0.94%。结论：该方法简便快捷,准确度高。     

不同产地贯叶连翘中金丝桃素和伪金丝桃素的含量分析

目的比较不同产地贯叶连翘中金丝桃素和伪金丝桃素的含量。方法样品经甲醇超声波提取,采用KromasilC18柱(200mm×4.6mm,5μm)分离测定,以甲醇-0.006mol/L磷酸氢二钠(87.5∶12.5,V/V,用磷酸调节pH值至6.5)为流动相,检测波长为590nm,流速为1.0mL/min。结果不同产地贯叶连翘中金丝桃素和伪金丝桃素的含量存在一定差异。结论该方法为制订贯叶连翘药材质量控制标准提供了重要依据。     

HPLC法测定枸骨叶中金丝桃苷的含量

目的：建立HPLC法测定枸骨叶中金丝桃苷含量。方法：色谱柱Kromasil-C18（4.6mm×250mm,5μm）;流动相为乙腈-0.1%磷酸（28：72）;流速1.0mL·min-1;检测波长356nm;柱温25℃。结果：金丝桃苷在0.20～4.00μg范围内线性关系良好（r=0.9998）,平均回收率为100.17%,RSD为1.10%;枸骨叶中金丝桃苷的平均含量为1.18mg·g-1。结论：本法操作简便,准确性高,重现性好,可用于测定枸骨叶中金丝桃苷的含量。     

HPLC法测定不同产地贯叶连翘不同部位中金丝桃素的含量

目的:建立以高效液相色谱法测定贯叶连翘中金丝桃素含量的方法,并对不同产地贯叶连翘不同部位中金丝桃素的含量进行比较。方法:色谱柱为Boston pHlex ODSC18(150mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水(85:15,氨水调pH9.5),检测波长为588nm,流速为1.0mL·min-1。结果:金丝桃素检测浓度在0.14～3.60μg·mL-1范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.9997);平均回收率为100.7%,RSD=1.98%(n=6)。不同产地贯叶连翘不同部位中金丝桃素的含量在0.005～0.562mg·g-1之间。结论:不同产地贯叶连翘药材不同部位中金丝桃素含量均不同。本方法简便、准确、重现性好,可用于贯叶连翘的质量控制。     

HPLC法测定药材贯叶金丝桃中金丝桃苷和槲皮素的含量

目的建立测定药材贯叶金丝桃中槲皮素和金丝桃苷含量的方法。方法采用高效液相色谱法(HPLC)。色谱柱:Hypersil CN(150mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇-4mL·L-1磷酸(30/70),流速1.0mL·min-1;检测波长(241,360nm);柱温30℃;进样量20μL。结果槲皮素和金丝桃苷浓度分别在0.02~10和0.03~8μg·mL-1质量范围内与峰面积积分分值呈良好线性关系。加样回收率分别为98.0%和98.1%。结论该方法专属性强,灵敏度高,重复性好,可作为该药材测定槲皮素和金丝桃苷质量控制的方法。     

HPLC测定不同产地和不同部位贯叶金丝桃中的金丝桃素

目的 测定自四川、湖北、甘肃、陕西等4省48个样地的贯叶金丝桃中金丝桃素的含量,为评价药材质量提供依据.方法 采用HPLC方法,色谱柱为Agilent zorbax extend-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-6 mmol·L-1磷酸氢二钠(87.5∶12.5,用磷酸调pH6.5),检测波长为590 nm,柱温30℃,流速1 mL· min-,进样量10 μL.结果 金丝桃素4.04～252.5 ng与峰面积之间的线性良好(r2 =0.9996);回收率为99.69％,RSD=1.28％ (n =9).不同产地贯叶金丝桃中金丝桃素的含量为0.186 ～0.382 mg·g-1,不同部位中的含量为花＞叶＞茎;光照在提取过程中对金丝桃素检测结果的影响较大.结论 不同产地贯叶金丝桃的不同部位中金丝桃素的含量均不同.     

不同方法除鞣质后贯叶金丝桃提取物中金丝桃素的含量变化

目的 考察用不同方法检测除鞣质后金丝桃素的含量变化和收率,建立贯叶金丝桃良好的除鞣质方法。方法采用明胶沉淀法、改良明胶沉淀法及碱性醇沉法除鞣质后,用高效液相色谱（HPLC）法测定贯叶金丝桃提取物中金丝桃素含量变化和收率;色谱柱为Phenomenex—C18柱（250mm×4．6mm,5μm）,流动相为甲醇-0．006mol／LNa214PO4（7：1V／V,H3P04调至pH=6．5）,流速为1．0mL／min,柱温30℃,检测波长590nm,外标法计算。结果金丝桃素的进样量线性范围为0．0194～0．7760μg（r=0．9999）,平均回收率为100．25％。RSD：1．29％（n=5）;明胶沉淀法、改良明胶沉淀法和碱性醇沉法除鞣质后金丝桃素含量分别为0．092％,0．098％和0．093％,收率分别为70．15％,85．21％和89．16％。结论改良明胶沉淀法具有鞣质去除完全、金丝桃素含量较高、损失较少的优点,且方法简便易行．可应用于贯叶金丝桃提取物除鞣质处理。     

不同产地贯叶连翘中贯叶金丝桃素含量分析比较

目的：比较不同产地贯叶连翘中贯叶金丝桃素的含量。方法：采用反相高效液相法（RP－HPLC）测定贯叶金丝桃素含量。结果与结论：不同产地贯叶连翘中贯叶金丝桃素含量有差异，以陕西汉中产含量最高。     

黔产3种金丝桃属植物药中金丝桃苷的含量测定

目的:测定贵州地区3种金丝桃属植物药贯叶连翘、地耳草、贵州金丝桃中金丝桃苷的含量。方法:采用高效液相色谱法,选用岛津Shim-packVP-ODS(5μm,250mm×4.6mm)柱,流动相:甲醇-0.5％磷酸(45:55,用三乙胺调pH为3.0),流速1.1mL·min~(-1),检测波长为360 nm。结果:金丝桃苷在0.114～0.684μg范围内线性关系良好,r=0.999 9(n=6)。平均回收率为96.05％～103.3％,检测限为5 ng·mL~(-1)。结论:本方法便捷、灵敏、准确、重现性好。     

HPLC法同时测定贯叶金丝桃中芦丁、金丝桃苷和槲皮素的含量

目的建立贯叶金丝桃原药中芦丁、金丝桃苷和槲皮素的含量测定方法。方法样品经丙酮超声波辅助提取,采用Diamonsil~C_(18)柱(250mm×4.6mm,5μm)分离测定;以A相乙腈-甲醇-甲酸(89.8∶10∶0.2),B相水-甲醇-甲酸(79.8∶20∶0.2)为流动相梯度洗脱;检测波长为270nm;流速为1.0mL·min~(-1)。结果芦丁的进样量在0.454~4.540μg范围内(r=0.999 7),金丝桃苷的进样量在0.480~4.800μg范围内(r=0.999 2),槲皮素的进样量在0.794~7.940μg范围内(r=0.999 5),都与峰面积线性关系良好。加样回收率分别为99.01%,96.04%和95.97%(n=6)。结论该方法快捷、简便,结果准确、可靠,可作为贯叶金丝桃原药中有效成分的质量控制方法。     

贯叶金丝桃药材中萘骈二蒽酮类成分的分光光度法和HPLC法定量分析

目的:建立测定贯叶金丝桃药材中萘骈二蒽酮类成分的紫外-可见分光光度法和HPLC法,比较两者测定结果的差异与定量可靠性。方法:紫外-可见分光光度法以金丝桃素为指标性成分,在590nm处测定。HPLC法以DiamonsilC18柱(150mm×4.6mm,5μm为色谱柱,甲醇-10mmol/L CH3COONH4水溶液(pH值为6.2)(90∶10)为流动相,流速1.0ml/min,检测波长590nm,柱温30℃。经紫外光谱与质谱确认其中主要色谱峰成分为伪金丝桃素和金丝桃素,并以伪金丝桃素、金丝桃素为对照品进行定量,萘骈二蒽酮大类成分含量以伪金丝桃素、金丝桃素含量之和来表征。结果:紫外-可见分光光度法定量金丝桃素在2.44～19.52μg/ml范围内线性关系良好(r=0.999 6,n=3),测得贯叶金丝桃药材中萘骈二蒽酮类成分以金丝桃素计为(0.990 2±0.006 0)μg/mg。HPLC法定量伪金丝桃素在0.402～8.032μg/ml范围内线性关系良好(r=0.999 5,n=3)),定量金丝桃素在0.488～9.760μg/ml范围内线性关系良好(r=0.999 7,n=3)),测得贯叶金丝桃药材中伪金丝桃素和金丝桃素含量分别为(0.387 2±0.001 4)、(0.220 2±0.000 7)μg/mg,两者的总量为(0.605 5±0.001 2)μg/mg。结论:对贯叶金丝桃药材中萘骈二蒽酮类成分的定量分析,紫外-可见分光光度法和HPLC法测定结果差异明显;即使化学结构与光谱特性相似的大类成分,其紫外-可见分光光度法的定量准确性仍需要验证与评价。     

HPLC法测定奥沙利铂脂质体中奥沙利铂的含量

目的:建立以高效液相色谱法测定奥沙利铂脂质体中奥沙利铂含量的方法。方法:色谱柱为Hypersil C18(250 mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇:水=5∶95(V/V),流速为1.0 mL·min-1,检测波长为250 nm,柱温为30℃。结果:奥沙利铂的检测浓度在12.2～122.0μg·mL-1范围内线性关系良好;以峰面积(Y)为对浓度(C)进行回归分析,得回归方程为Y=78 575 C-4 811.8(n=5,r=0.999 9),奥沙利铂的检测浓度在12.2～122.0μg·mL-1范围内线性关系良好;检测限为97.6 ng·mL-1;平均回收率为98.58%,RSD=1.83%。结论:该方法操作简便、灵敏、准确,可用于奥沙利铂脂质体中奥沙利铂的含量测定。     

桂枝汤中桂枝不同配伍对桂皮酸含量的影响

目的:研究桂枝汤中桂枝不同配伍对制剂中桂皮酸含量的影响。方法:采用高效液相色谱(HPLC)法测定桂皮酸含量:色谱柱为NVCLEOSILC18(250mm×4.6mm,10μm),流动相为乙腈-0.1%醋酸水溶液(33∶67),检测波长为285nm,柱温为35℃,流速为1.0mL·min-1,进样量为10μL。结果:桂皮酸进样浓度在88.5～531μg·mL-1范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.9999);平均回收率为95.9%,RSD=2.1%(n=6)。结论:桂枝汤中桂枝不同配伍对桂皮酸含量有影响。     

RP-HPLC法测定不同清开灵剂型中绿原酸的含量

目的:建立以反相高效液相色谱法测定清开灵3种不同药物剂型中绿原酸含量的方法。方法:色谱柱为Sino Chrom ODS-AP C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水-冰醋酸(25∶75∶0.5),流速为1.0mL·min-1,检测波长为327nm,柱温为30℃。结果:绿原酸的检测浓度在3.81～152.50μg·mL-1范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.9998);清开灵胶囊、颗粒、滴丸的平均回收率分别为99.03%(RSD=2.02%)、99.35%(RSD=1.16%)、98.11%(RSD=1.51%)。结论:本法灵敏、简便、准确,可用于清开灵3种不同剂型的绿原酸含量测定和质量控制。     

HPLC法同时测定七叶灵颗粒中特女贞苷与柚皮苷的含量

目的：建立同时测定七叶灵颗粒中特女贞苷与柚皮苷含量的方法。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱为Kromasil C18（250mm×4.6mm,5μm）,流动相为乙腈-4%冰醋酸（17∶83,V/V）,检测波长为224nm,流速为1mL·min-1,柱温为30℃。结果：特女贞苷与柚皮苷的进样量分别在0.04～1.00、0.08～2.00μg范围内与各自峰面积积分值呈良好的线性关系（r均为0.9999）;平均加样回收率分别为101.17%和100.32%,RSD分别为2.10%和2.17%（n均为6）。结论：本方法简便、准确、重复性好,可用于七叶灵颗粒中特女贞苷与柚皮苷的含量测定。     

HPLC法测定人肝细胞L02内外液中金丝桃苷的含量

目的:建立测定人肝细胞L02内、外液中金丝桃苷(Hyp)含量的方法。方法:以80μg·mL-1的Hyp与L02共孵育0、3、6、12、24h后,采用高效液相色谱(HPLC)法测定细胞内、外液中金丝桃苷的含量。色谱柱为KROMASIL C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.4%磷酸(45∶55),柱温为30℃,流速为1.0mL·min-1,紫外检测波长为360nm。结果:细胞外液中Hyp的标准曲线为Y=35.412X-8.586(r=0.9999),表明Hyp检测浓度在2～200μg·mL-1范围内与峰面积积分值呈良好线性关系;细胞内液中Hyp的标准曲线为Y=35.759X-7.422(r=0.9999),表明Hyp检测浓度在0.1～10μg·mL-1范围内与峰面积积分值呈良好线性关系。细胞外、内液中Hyp的平均回收率分别为(96.00±2.43)%、(97.18±4.62)%,平均日内RSD分别为1.98%、4.36%,平均日间RSD分别为1.75%、2.86%。样品溶液处理后室温放置22h,未处理样品溶液于-20℃放置6d,平均RSD均<5%。结论:本方法简单、准确、线性范围宽、灵敏度高、精密度和回收率良好,可为进一步研究Hyp的抗氧化作用与机制奠定方法学基础。     

HPLC法测定不同来源甘草中甘草酸的含量

目的:建立以高效液相色谱法测定甘草中有效成分甘草酸含量的方法,并测定不同产地和基原甘草药材中甘草酸的含量。方法:色谱柱为Hypersil-C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.2mo·lL-1醋酸铵溶液-冰醋酸-三乙胺(64:36:1.5:0.02),流速为1.0mL·min-1,检测波长为252nm,柱温为30℃。结果:甘草酸检测浓度在0.0416～0.2080mg·mL-1范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.9999);平均回收率为101.3%,RSD=1.22%(n=9)。结论:不同来源甘草药材中甘草酸的含量差异较大,野生甘草中甘草酸的含量高于家种。     

HPLC法同时测定复方儿茶酊中儿茶素与原儿茶素的含量

目的：建立同时测定复方儿茶酊中儿茶素与原儿茶素含量的方法。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱为YMC ODS（250mm×4.6mm,5μm）,流动相为0.04mol·L-1枸橼酸溶液-N,N-二甲基甲酰胺-四氢呋喃（45∶8∶2,V/V/V）,流速为1.0mL·min-1,检测波长为280nm,柱温为35℃。结果：儿茶素与原儿茶素的检测浓度分别在0.0518～0.2590、0.0101～0.2030mg·mL-1（r均为0.9999）范围内与各自峰面积积分值呈良好的线性关系;平均加样回收率分别为101.63%和100.49%,RSD分别为1.27%和1.12%（n均为9）。结论：本方法简便、准确、稳定,能有效控制复方儿茶酊的质量。     

微乳液相色谱法同时测定大黄中5种蒽醌类衍生物的含量

目的:建立同时测定大黄中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚含量的方法。方法:采用微乳液相色谱法。以微乳为流动相,通过对影响分离度和保留时间的因素进行考察,优化最佳微乳体系组成为2.5%(W/V)十二烷基硫酸钠-0.1%(V/V)正辛烷-8.0%(V/V)正丁醇-0.5%(V/V)三乙胺(磷酸调pH值至3.0);色谱柱为HypersilODS2(250mm×4.6mm,5μm),柱温为28℃,流速为1mL·min-1,检测波长为254nm。结果:芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的进样浓度线性范围分别为4.7～47.0μg·mL-1(r=0.9999)、5.1～51.0μg·mL-1(r=0.9996)、5.5～55.0μg·mL-1(r=0.9996)、6.3～63.0μg·mL-1(r=0.9999)和0.4～40.0μg·mL-1(r=0.9987);五者平均加样回收率分别为98.67%、97.53%、101.37%、99.34%和99.52%,RSD(n=6)分别为0.31%、0.38%、0.49%、0.53%和0.87%。结论:本方法简便、准确,可用于大黄中5种蒽醌类衍生物的含量测定。