川楝素对H22肝癌荷瘤小鼠的抑瘤作用

目的:建立荷瘤小鼠模型,探讨川楝素对肝癌的抑瘤作用及其机制.方法:建立H22肝癌移植瘤小鼠模型,随机分为0.9%氯化钠溶液对照组、环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)组(20 mg/kg)、川楝素低剂量组(0.173 mg/kg)和川楝素高剂量组(0.690 mg/kg)共4组.各组药物处理后,测量小鼠体内肿瘤大小,观察肿瘤的生长曲线;剥瘤后称重,计算小鼠的肿瘤抑制率;行肿瘤组织病理形态学及HE染色观察,透射电子显微镜观察其超微结构改变;同时,观察川楝素对荷瘤小鼠心、肝、脾、肾、胸腺及睾丸组织的影响;免疫组织化学法检测肿瘤组织内Bcl-2、Bax和Fas蛋白的表达.结果:川楝素可显著抑制小鼠体内肿瘤的生长,川楝素低剂量组(0.173 mg/kg)和高剂量组(0.690 mg/kg)的抑瘤率分别为66.23%和87.01%(P＜0.05);透射电子显微镜观察可见肿瘤组织超微结构中出现凋亡小体;HE染色显示小鼠心、肝、脾、肾及睾丸脏器形态正常,而胸腺组织中可见胸腺小叶的数量及面积减少甚至消失;免疫组织化学检测证实,小鼠肿瘤组织内Bcl-2蛋白表达下调,Bax和Fas蛋白表达上调(P＜0.05).结论:川楝素能够明显抑制小鼠移植瘤的生长,此作用可能与抑制肿瘤细胞增殖及促进肿瘤细胞凋亡有关.     

三氧化二砷对小鼠皮下移植性肺癌抑制及其机制的探讨

目的:探讨三氧化二砷(AS2O3)对小鼠肺癌移植瘤的抑制作用,进一步分析其抗血管生成的可能机制.方法:建立Lewis肺癌小鼠移植瘤模型,60只小鼠随机分成阴性对照组、阳性对照组和AS2O3治疗组3组(每组20只),应用AS2O3治疗后,观察肿瘤生长情况计算抑瘤率,免疫组化法检测肿瘤组织内血管内皮生长因子(VEGF)和表皮生长因子受体(EGFR)的表达.结果:AS2O3组、阳性对照组、阴性对照组的瘤质量分别为(1 420±60)、(1 500±80)和(2 420±190) mg;AS2O3组和阳性对照组的瘤质量较阴性对照组明显减轻,P＜0.05;AS2O3组的抑瘤率(52％)较阳性对照组(54％)差异无统计学意义,P＞0.05.AS2O3治疗后VEGF、EGFR阳性细胞比例分别为(63.10±5.32)％、(68.33±5.99)％,较阴性对照组[(76.33±10.3)％、(80.50±10.21)％]降低,且差异有统计学意义,P＜0.05.结论:AS2O3对小鼠肺癌移植瘤有显著的抑制作用;下调VEGF和EGFR的表达是AS2O3抗肿瘤血管生成的可能机制.     

蝎毒联合紫杉醇对人胃癌MKN-45裸鼠移植瘤的抑制作用

目的 研究蝎毒联合紫杉醇对裸鼠体内胃癌的抑制作用.方法 建立人胃癌细胞裸鼠皮下移植瘤模型;ELISA法检测血清中VEGF浓度;测量肿瘤的体质量及抑瘤率;流式细胞仪检测细胞凋亡比率及TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡指数(AI);对裸鼠肝、肾、肺组织进行病理学检测.结果 蝎毒和紫杉醇对裸鼠体内胃癌都有抑制作用;联合用药组肿瘤体质量、血清VEGF浓度较对照组及单一用药组明显降低(P＜0.05);联合用药组肿瘤细胞凋亡率较对照组及单一用药组明显提高(P＜0,05);联合用药组细胞凋亡指数明显高于对照组(P＜0.05)及两药单独使用组(P＜0.05);蝎毒、紫杉醇及两者联合使用对裸鼠肝、肾、肺组织病理学检测均未见明显异常.结论 蝎毒联合紫杉醇作用于胃癌的效果优于两药单独使用,本实验的蝎毒、紫杉醇药物浓度对裸鼠肝、肾、肺组织病理学检测均未见明显异常.     

苏拉明对肺腺癌小鼠移植瘤生长的影响及其机制

背景与目的:有研究表明,苏拉明对恶性肿瘤有明显抑制作用,但有关其对肺腺癌体内抗瘤作用的报道很少。本实验观察苏拉明对肺腺癌LA795细胞的T739小鼠移植瘤生长和转移的抑制作用,并探讨其作用机制。方法:将32只接种LA795肺腺癌细胞T739的小鼠随机分成4组:对照组、顺铂组、苏拉明组、联合组(苏拉明加顺铂组),每组8只。用药16d,观察肿瘤生长情况,于接种后24d处死各组小鼠,取出双肺并剥离皮下肿瘤,计算出肺转移发生率,计数各组小鼠肺表面转移结节数并算出肺表面结节转移抑制率;收集移植瘤标本,称重和测量体积,免疫组化和图像分析系统定量检测肿瘤组织中表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、P-选择素和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达。结果:顺铂组、苏拉明组、联合组肿瘤的生长明显受到抑制,瘤重明显低于对照组,其抑瘤率分别为34.9%、23.8%、57.3%;苏拉明组及联合组与对照组和顺铂组相比肺转移发生率、肺表面转移结节数明显下降(P<0.05),而顺铂组与对照组比较差异则无统计学意义。EGFR和P-选择素的表达对照组高于顺铂组、苏拉明组、联合组,对照组、顺铂组、苏拉明组、联合组EGFR表达的灰度值分别为157.7±6.1、130.7±5.9、110.3±5.8、89.2±5.4,P-选择素表达的灰度值分别为134.5±5.7、117.9±5.1、96.2±5.4、78.3±4.5,各用药组与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);对照组、顺铂组、苏拉明组、联合组增殖指数(S phase fraction,SPF)分别为(89.7±3.8)%、(68.8±4.0)%、(65.2±4.2)%、(51.3±4.2)%,各用药组SPF都比对照组低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:苏拉明可明显抑制肺腺癌细胞在小鼠体内的生长和转移,其作用机制可能为通过调控肿瘤细胞中的EGFR和P-选择素表达,从而抑制肿瘤细胞增殖和减少肿瘤细胞的粘附而防止转移。     

CD147和EGFR蛋白表达与胃癌转移和预后的关系

目的 探讨细胞外基质金属蛋白酶诱导因子CD147和表皮生长因子受体(EGFR)的表达与胃癌临床病理特征和患者预后的关系.方法 应用免疫组织化学法检测63例胃癌和40例癌旁正常组织中CD147和EGFR蛋白表达,并结合肿瘤的病理学行为和临床随访资料进行分析.结果 在胃癌组织中CD147和EGFR阳性表达率分别为77.8％ (49/63)和42.9％(27/63),均显著高于癌旁正常组织的25.0％和0(x2 =27.851,P =0.000;x2=23.233,P=0.000).在胃癌组织中,CD147和EGFR表达与肿瘤浸润深度(x2=5.992,P=0.014;x2=13.148,P =0.000)、TNM分期(x2=8.481,P=0.004;x2=14.589,P=0.000)、淋巴结转移(x2=5.270,P=0.022;x2 =20.261,P =0.000)和患者预后(x2=5.606,P =0.018;x2 =4.982,P=0.026)密切相关;CD147表达还与Ki-67增殖指数(x2=10.481,P=0.001)相关.CD147与EGFR的表达呈正相关(r=0.309,P=0.014).结论 CD147和EGFR表达与胃癌发生、转移和患者生存期密切相关,检测CD147和EGFR蛋白表达可作为判断胃癌预后的参考指标.     

EGFR、Cyclin A在胃癌中的表达及临床意义

目的:探讨表皮生长因子受体(EGFR)及细胞周期素A(Cyclin A)在胃癌组织中的表达及意义.方法:应用免疫组化法检测10例正常胃上皮组织和58例初治胃癌组织中EGFR、Cyclin A的表达情况.结果:10例正常胃组织未见EGFR及Cyclin A的阳性染色,EGFR与Cyclin A在胃癌组织中的阳性表达率分别为46.6％、48.3％.正常组织EGFR和Cyclin A表达与胃癌组织比较有显著性差异(P均＜0.05).EGFR、Cyc-lin A均与血管累犯正相关,此外,EGFR还与性别、肿瘤浸润深度、淋巴结转移相关,Cyclin A还与肿瘤细胞分化程度相关;EGFR与Cyclin A的表达呈正相关(P=0.001).结论:EGFR和Cyclin A在胃癌中的高表达可能与其发生发展过程有重要作用,并有可能成为靶向治疗的靶点.     

靶向RECK基因的miR-374b-5p对裸鼠人胃癌移植瘤生长的影响

目的 :探讨微RNA-374b-5p(micro RNA-374b-5p,miR-374b-5p)及其靶基因反转录富含半胱氨酸蛋白(reversion-inducing-cysteine-rich protein with Kazal motifs,RECK)在胃癌发生和发展中的作用。方法 :采用人胃癌MGC-803细胞建立BABL/c裸鼠移植瘤模型,当移植瘤体积达到60 mm3左右时,将小鼠随机分为3组(每组5只),即空白对照组、阴性对照组[体内转染无意义微RNA序列(miR-374b-5p negative control inhibitor)]和miR-374b-5p抑制组(体内转染miR-374b-5p inhibitor),并观察各组移植瘤的生长情况。在接种MGC-803细胞后第35天时(最后一次治疗3 d后)处死各组小鼠,苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察移植瘤标本的病理学特征;实时荧光定量-PCR(real-time fluorogenic quantitative-PCR,RFQ-PCR)检测移植瘤组织中miR-374b-5p的表达水平;荧光素酶活性检测验证miR-374b-5p是否靶向作用于RECK基因;分别采用RFQPCR和免疫组织化学法检测移植瘤中RECK mRNA和蛋白的表达情况。结果 :miR-374b-5p抑制组移植瘤体积在转染miR-374b-5p inhibitor 9 d后(即接种细胞的第23天后),开始明显小于空白对照组和阴性对照组(P<0.05),而空白对照组和阴性对照组小鼠的移植瘤体积差异无统计学意义。病理学检测结果提示,miR-374b-5p抑制组移植瘤的恶性程度较空白对照组和阴性对照组明显下降。miR-374b-5p抑制组移植瘤中miR-374b-5p的表达水平均较空白对照组和阴性对照组明显下调(P<0.05)。荧光素酶报告载体系统证实,RECK是miR-374b-5p直接调控的靶基因;miR-374b-5p抑制组移植瘤中RECK m RNA及蛋白的表达水平均显著高于空白对照组和阴性对照组(P均<0.05)。结论 :miR-374b-5p可能通过RECK通路在胃癌的发生和发展中扮演着癌基因的角色。     

放疗联合周剂量重组人血管内皮抑素对A549肺腺癌裸鼠移植瘤生长抑制作用的研究

目的:研究放疗联合周剂量重组人血管内皮抑素(recombinant human endostatin, rh-Endostatin)对肺腺癌A549裸鼠移植瘤生长的抑制作用.方法: 40 只裸鼠A549细胞移植瘤模型随机分成4组:空白对照组、rh-Endostatin治疗组、放射治疗组和放疗联合rh-Endostatin治疗组,观察并绘制肿瘤生长曲线图,计算肿瘤体积抑制率;肿瘤组织行常规HE病理学检查,免疫组织化学法检测肿瘤组织中微血管内皮CD31的表达及肿瘤微血管密度(microvessel density, MVD)的变化;采用免疫组织化学及Western印迹法检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)的表达;TUNEL法检测肿瘤细胞的凋亡. 结果:治疗第8天起,放疗联合rh-Endostatin治疗组的肿瘤体积与对照组相比,差异有统计学意义(P＜0.05).15 d后,rh-Endostatin治疗组、放射治疗组和放疗联合rh-Endostatin治疗组小鼠的肿瘤体积的抑制率依次为68.35%、90.78%和106.56%; rh-Endostatin治疗组小鼠的MVD较放射治疗组下降明显(P＜0.05);但rh-Endostatin治疗组与对照组、放疗联合rh-Endostati治疗组及放射治疗组相比,VEGF的改变差异均无统计学意义;放疗联合rh-Endostatin治疗组细胞凋亡明显.结论:放疗联合周剂量rh-Endostatin能抑制肿瘤的生长,较早诱导肿瘤退缩,可能与减少放射治疗后肿瘤血管再生及增加肿瘤细胞和内皮细胞的凋亡相关;各治疗组小鼠均未出现急性不良反应,因此该方法具有短疗程的优势,可用于临床推广.     

低分子肝素对人胃癌裸鼠原位移植模型肿瘤生长、转移及趋化因子受体4表达的影响

目的:探讨低分子肝素(low molecular weight heparin ,LMWH)对人胃癌裸鼠原位移植模型中肿瘤生长、转移及趋化因子受体4(chemokine receptor 4,CXCR4)表达的影响.方法:应用原位移植方法建立人胃癌裸鼠原位移植模型,模型建立后7 d时将裸鼠随机分为对照组(0.9%氯化钠溶液)、化疗组(5-氟尿嘧啶)和LMWH组(低分子肝素钙),分别每周给药2次,共5周.第6周牺牲动物,观察裸鼠胃癌原位模型的肿瘤生长及转移情况.应用RT-PCR和免疫组织化学法检测胃癌组织中CXCR4 mRNA和蛋白的表达水平.结果:化疗组和LMWH组的肿瘤体积比对照组明显缩小,差异有统计学意义(P＜0.05);LMWH组胃癌原位模型的肿瘤转移率(20%)低于对照组(70%),差异有统计学意义(P＜0.05),而与化疗组(11%)之间无明显差异(P＞0.05);LMWH组CXCR4 mRNA和蛋白的表达均较对照组和化疗组下降,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:LMWH具有抑制人胃癌裸鼠原位移植模型中肿瘤生长和转移的作用,可能与肿瘤组织中CXCR4表达下降有关.     

益气解毒复方中药对人胃癌移植瘤裸鼠肿瘤生长及胃癌组织Ki-67表达影响的实验研究

目的:探讨益气解毒复方中药对SGC-7901荷瘤裸鼠的抑瘤作用及对肿瘤组织Ki-67表达的影响,为其临床应用提供实验依据.方法:胃癌细胞株SGC-7901接种于裸鼠右后肢皮下.对照组灌胃生理盐水10 mL/kg,5-FU组肌肉注射30 mg/kg,益气解毒复方中药大、中、小剂量组分别灌胃1 500、750和375 mg/mL的药液,各组连续给药14 d,各鼠脱臼处死,计算瘤质量系数,肿瘤组织用于免疫组织化学染色检测肿瘤组织Ki-67表达.结果:对照组的瘤质量系数为3.060±2.426,显著高于5-FU组和益气解毒复方中药大、中剂量组(0.273±0.146,P<0.01;0.696±0.585, P<0.01;1.197±1.271,P<0.05),与益气解毒复方中药小剂量组(1.727±1.721)相比差异无统计学意义,P>0.05.免疫组织化学结果显示,5-FU组、中剂量的益气解毒复方中药组的肿瘤组织Ki-67过度表达率(36.8±10.3)%,(32.5±20.4)%显著低于对照组(59.5±13.9)%,P<0.05.结论:益气解毒复方中药对胃癌细胞增殖和Ki-67表达具有较好的抑制作用.     

FOLFOX4联合1-MT对胃癌小鼠皮下移植瘤的抑制作用

目的： 观察FOLFOX4联合1-甲基-色氨酸 (1-methyl tryptophan,1-MT)对荷胃癌小鼠皮下移植瘤生长的抑制作用,以及对胃癌组织吲哚胺-2,3-双加氧酶 (indoleamine-2,3-dioxygenase,IDO)表达的影响。方法：将IDO真核表达质粒 (pcDNA3.1-IDO)转染小鼠胃癌细胞MFC,建立稳定表达IDO的细胞株,RT-PCR与Western blot法检测细胞中IDO的表达。小鼠皮下接种转染pcDNA3.1-IDO的MFC细胞悬液,建立高表达IDO的小鼠胃癌皮下移植瘤模型 (32只),同时设空白对照 (8只,接种未转染的MFC细胞)和阴性对照 (8只,接种转染pcDNA3.1质粒的MFC细胞),观察各组小鼠成瘤情况。将32只模型小鼠随机分为1-MT治疗组、FOLFOX4治疗组、FOLFOX4+1-MT联合治疗组和未治疗组 (阳性对照组),每组8只。治疗组分别注射给予1-MT、 FOLFOX4或FOLFOX4+1-MT,阳性对照组给予生理盐水。观察各组小鼠一般情况及肿瘤质量差异。注射细胞悬液后第12天处死所有小鼠,剥离瘤体并称重,计算各组小鼠平均瘤质量及抑瘤率,另取肿瘤标本采用免疫组织化学染色法检测胃癌组织中IDO的表达。结果：RT-PCR与Western blot均检测到pcDNA3.1-IDO转染细胞中IDO的表达。高表达IDO的胃癌皮下移植瘤模型小鼠肿瘤质量大于空白对照组和阴性对照组小鼠 (P<0.05),且其胃癌组织IDO的表达亦较空白对照组和阴性对照组明显增加 (P<0.05)。给予1-MT、FOLFOX4 和FOLFOX4+1-MT治疗后,模型小鼠进食量均不同程度增加,行动较之前灵活,嗜睡也有不同程度好转,FOLFOX4+1-MT联合治疗组小鼠症状基本缓解。1-MT治疗组、 FOLFOX4治疗组和FOLFOX4+1-MT联合治疗组小鼠肿瘤质量均小于未治疗组 (P<0.05),其抑瘤率分别为 8.91%、80.20%、86.13%,FOLFOX4+1-MT联合治疗组小鼠肿瘤质量小于1-MT治疗组和FOLFOX4治疗组 (P<0.05)。1-MT治疗组、FOLFOX4治疗组和FOLFOX+1-MT联合治疗组小鼠胃癌组织中IDO的表达均低于未治疗组 (P<0.05);FOLFOX4+1-MT联合治疗组胃癌组织中IDO的表达低于1-MT治疗组和FOLFOX4治疗组 (P<0.05)。结论：1-MT对胃癌小鼠皮下移植瘤的生长和胃癌组织IDO的表达具有抑制作用,并能与FOLFOX4发挥协同抗肿瘤作用。     

消化腺提取物对肿瘤细胞的抑制作用

背景与目的:研究消化腺提取物对小鼠移植瘤模型的抑制作用.材料与方法:将肝癌H22、肉瘤S180和人胃癌MGC-803细胞株移植到小鼠或裸鼠体内,建立荷瘤动物模型,连续灌胃给予消化腺提取物(EDG)后,分期测量肿瘤体积和瘤重.结果:给予EDG后,荷瘤鼠的瘤体生长速度明显减慢,相对肿瘤体积明显缩小(P＜0.01);肿瘤增殖率均未超出60%;肿瘤体积抑制率达到43.7%以上;EDG各剂量组的瘤体重量明显减轻.结论:消化腺提取物对荷瘤小鼠具有明显的抑制肿瘤生长作用.     

甘草干姜汤抗小鼠乳腺癌实验研究

目的：探讨甘草干姜汤(LDGD)对荷乳腺癌小鼠肿瘤生长、免疫器官及肝肾功能的影响。方法：雌性BALB/c小鼠随机分为5组：正常对照组,模型对照组,LDGD低、中、高剂量组(分别为0.1、0.3、0.9 g/kg)。正常对照组小鼠灌胃给予蒸馏水,其他各组小鼠接种乳腺癌4T1细胞后,次日开始LDGD低、中、高剂量组小鼠连续灌胃给药20 d,模型对照组小鼠给予相应体积的蒸馏水。测定各组小鼠的体质量、胸腺系数、脾脏系数、肝脏系数、肾脏系数、血清肝功能、肾功能生化指标及肿瘤体积、质量,HE染色后观察荷瘤小鼠的肿瘤组织病理变化。结果：与模型对照组相比,LDGD高剂量组小鼠肿瘤生长受到明显抑制,抑瘤率为(44.76±0.06)%(P<0.01),中剂量组抑瘤率为(15.68±0.21)%(P<0.05),低剂量组无明显抑瘤作用;肿瘤组织病理切片HE染色结果表明,LDGD高剂量组中肿瘤坏死灶区域显著增多;各剂量组LDGD对小鼠体质量均无明显影响,不同剂量LDGD组的胸腺系数、肝脏系数、肾脏系数均无明显变化,脾脏系数下降;LDGD高剂量组ALP和CRE与正常对照组小鼠的差异有统计学意义(P&...     

人源异种移植结直肠癌小鼠不同剂量卡培他滨的疗效和心脏毒性观察

目的探讨卡培他滨剂量与人源异种移植(PDX)的结直肠癌小鼠模型的疗效、心脏毒性之间的关系。方法将1例结直肠癌患者新鲜癌组织移植至免疫缺陷NOG小鼠双腋皮下, 建立PDX模型并稳定传代。对原代和第二代肿瘤组织, 采用HE染色观察肿瘤组织细胞形态, 采用免疫组织化学法检测肿瘤标志物表达情况, 以对模型进行评价。小鼠胃灌注200、300、400 mg/kg卡培他滨, 1次/d, 分别为低、中、高剂量组, 每组5只, 对照组胃灌注0.9% NaCl溶液;给药14 d, 停药7 d, 按此方式连续用药。每天测量小鼠体质量, 每3 d测量肿瘤体积。观察100 d后, 处死小鼠, 剖取瘤块, 测量肿瘤质量, 计算肿瘤体积、肿瘤体积抑制率和抑瘤率, HE染色观察肿瘤组织细胞形态, 采用酶联免疫吸附试验检测小鼠血清中抑瘤效应指标rasP21、环氧合酶2(COX2)、前列腺素E2(PGE2)及心脏毒性指标心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)、脑钠尿肽(BNP)蛋白水平。结果成功构建PDX结直肠癌移植小鼠模型, 模型较好地保留了原发肿瘤的组织学特性。给药期间, 卡培他滨高剂量组1只小鼠死亡, 卡培他滨剂量越高, 肿...     

内皮抑素联合异环磷酰胺对小鼠肉瘤血管生成及肿瘤生长的抑制作用

目的:观察内皮抑素(endostatin,ES)联合异环磷酰胺(ifosfamide,IFO)对小鼠肉瘤皮下移植模型中肿瘤血管生成和肿瘤生长的抑制作用.方法:建立小鼠肉瘤模型,随机将60只荷瘤小鼠分为对照组、ES组、IFO组和ES+IFO联合用药组,分别给予相应药物,观察肿瘤生长情况,计算抑瘤率,并且采用免疫组织化学法检测肿瘤微血管密度(microvessel density,MVD).动物处死前1 min于尾静脉注射DiOC7(3),荧光显微镜下观察肿瘤组织灌注血管标记,计算灌注血管平均距离.结果:各治疗组药物均能明显抑制肿瘤的增长,ES组、IFO组和ES+IFO组的抑瘤率分别为43.13%、76.57%和84.66%,联合用药组的抑瘤作用最为显著(P<0.05).对照组、ES组、IFO组与ES+IFO联合用药组的移植瘤组织MVD分别为(43.13±9.86)、(17.87±7.69)、(29.20±9.28)及(7.60±3.18)个/400 Hp,灌注血管平均距离分别为(43.33±8.21)、(84.94±6.99)、(68.96±10.90)及(121.08±22.75)μm,联合用药组的MVD和灌注血管平均距离与单一用药组及对照组相比的差异有统计学意义(P<0.05).结论:ES联合IFO治疗肉瘤时,可通过显著抑制结构血管和灌注血管生成来抑制肿瘤生长,联合用药效果优于单一用药,二者具有协同抗肿瘤作用.     

甲氨蝶呤与重组人肿瘤坏死因子对软骨肉瘤的作用机制

目的 探讨甲氨蝶呤(MTX)、重组人肿瘤坏死因子(rhTNF)对软骨肉瘤的抑制作用及机制.方法 采用裸鼠软骨肉瘤细胞株皮下接种模型,将实验动物随机分为四组:rhTNF组(n=8),rhTNF+MTX组(n=8),MTX组(n=8),空白对照组(n=6),分别注射rhTNF和(或)MTX.观察肿瘤的形成,记录肿瘤体积、瘤重,计算抑瘤率,通过HE染色观察肿瘤的组织学变化,应用免疫组织化学法检测瘤组织中bcl-2、bax、血管内皮生长因子(VEGF)等的表达及细胞凋亡情况.结果 rhTNF、rhTNF+MTX组肿瘤重量和体积小于MTX组、空白对照组(P＜0.05),MTX组肿瘤重量与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05);rhTNF、rhTNF+MTX、MTX三组肿瘤中bcl-2表达低于空白对照组、bax表达高于空白对照组(P＜0.05);rhTNF、rhTNF+MTX组中VEGF的表达低于MTX、空白对照组(P＜0.05),上述指标在rhTNF、rhTNF+MTX组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 rhTNF能显著抑制荷瘤小鼠体内软骨肉瘤的生长,MTX对体内软骨肉瘤的抑制作用不明显,联合应用可增强rhTNF的抑瘤效应,其机制可能与下调bcl-2及VEGF、上调bax的表达水半有关.     

舒林酸对胃癌种植瘤的抑制作用及血管形成的影响

背景与目的:观察舒林酸的体内抗胃癌生长作用,并探讨舒林酸与胃癌血管生成的关系及其作用机制.材料与方法:建立人胃癌细胞BGC-823裸鼠种植瘤模型,随机分成舒林酸治疗组(12 mg kg)、舒林酸预防组(8 mg kg)、维生素C对照组(Vit C 20 mg k)和空白对照组(生理盐水),共4组,给予舒林酸干预;用免疫组化检测胃癌移植瘤中COX-2、VEGF的表达和微血管密度(MVD值);用TUNEL法检测凋亡.结果:舒林酸抑制胃癌种植瘤生长,舒林酸治疗组和舒林酸预防组的肿瘤体积从第2周开始明显小于对照组(P<0.05),直到第35 d实验结束时舒林酸组与2个对照组相比,种植瘤体积均保持被明显抑制,差异均具有统计学意义(P<0.05).肿瘤组织的凋亡指数:舒林酸治疗组为11.6,舒林酸预防组为10.4,维生素c对照组为3.5,空白对照组为3.1,舒林酸组高于对照组(P<0.05);MVD值:舒林酸治疗组为5.4,舒林酸预防组为9.0,维生素C对照组为19.6,空白对照组为20.7,舒林酸组显著低于对照组(P<0.01).免疫组化结果:舒林酸组肿瘤组织COX-2蛋白和VEGF蛋白的阳性表达率均低于对照组(P<0.05).结论:舒林酸在体内的抗胃癌效应显著,其机制可能涉及抑制胃癌细胞增殖,促进细胞凋亡及减少肿瘤新生血管的生成.     

异种EGFR胞外区重组DNA疫苗与蛋白质疫苗抗小鼠Lewis肺癌的作用研究

目的:构建异种表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)胞外区重组DNA和蛋白质疫苗,观察其对小鼠Lewis肺癌的抗肿瘤作用.方法:克隆鸡源性EGFR胞外Ⅱ-Ⅲ区与IgG-Fc融合基因,构建重组DNA疫苗质粒pVAX1-cEGFR-Fc和原核表达质粒pET28a(+)-S-cEGFR-Fc,后者转化大肠杆菌,将诱导表达的重组蛋白作为蛋白质疫苗.免疫小鼠4次后接种Lewis肺癌细胞,19 d后处死小鼠,剥离肿瘤称重并计算抑瘤率,检测小鼠血清中抗EGFR抗体效价,并检测特异性细胞毒性T淋巴细胞( cytotoxicity T lymphocyte,CTL)活性.结果:成功构建异种EGFR胞外区重组DNA和蛋白质疫苗.DNA疫苗组、蛋白质疫苗组和联合免疫组的抑瘤率分别为37%、49%和63%.3组小鼠均检测出抗EGFR抗体和CTL反应.结论:重组疫苗能打破机体对自身EGFR分子的免疫耐受,诱导特异性免疫反应,对小鼠Lewis肺癌有明显的抑制作用.2种疫苗的联合应用可进一步加强抑瘤作用.     

塞来昔布联合氟尿嘧啶对MFC细胞615小鼠原位移植瘤COX-2、Fas表达的影响及意义

[目的]通过测定在塞来昔布及氟尿嘧啶干预下的小鼠前胃癌细胞(MFC)615小鼠原位移植瘤中环氧合酶(COX-2)、Fas的表达,对COX-2抑制剂联合氟尿嘧啶对胃癌的影响及意义进行探讨.[方法]制备MFC细胞615小鼠原位移植胃癌模型.造模成功后分为塞来昔布组、联合用药组及对照组,其中塞来昔布25mg/kg灌胃,氟尿嘧啶50mg/kg腹腔注射.观察各组小鼠一般情况.干预3周后处死小鼠,计算抑瘤率.SP免疫组织化学法检测各组肿瘤COX-2、Fas表达.[结果]造模成功率100.00％(30/30).联合用药组、塞来昔布组的小鼠一般情况优于对照组.实验结束后3组比较,塞来昔布组、联合用药组比对照组肿瘤体积和瘤重的抑制率均明显升高(P＜0.05).与塞来昔布组相比,联合用药组肿瘤体积更小、瘤重减轻(P＜0.05).COX-2蛋白在塞来昔布组、联合用药组表达阳性率明显低于对照组,而Fas蛋白的表达则明显高于对照组(P＜0.05).[结论]塞来昔布及氟尿嘧啶对胃癌有抑制作用,其机制与调节COX-2、Fas蛋白表达有关.     

人参皂苷Rg3对小鼠B16黑素瘤细胞侵袭、转移及MMP-9表达的影响

目的:观察人参皂苷Rg3(简称Rg3)对小鼠黑素瘤细胞B16的肺转移、侵袭能力及基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)表达的影响,探讨其抗肿瘤转移的作用机制。方法:体内建立小鼠自发肺转移和实体瘤模型,观察腹腔注射不同剂量的Rg3(对照组给予0.9%氯化钠溶液)后,肺部肿瘤转移灶的数目,并检测实体瘤中MMP-9蛋白的表达情况。采用Boyden小室侵袭实验及免疫细胞化学染色法检测Rg3对肿瘤细胞体处侵袭能力及MMP-9表达的影响。结果:采用不同剂量的Rg3(0.3、1.0和3.0mg/kg)治疗后,小鼠肺部转移灶的数目均较少,肿瘤组织中MMP-9的表达水平降低,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。在体外,2.5和5.0μg/mLRg3治疗组中侵袭穿过人工基膜的B16细胞数目明显少于对照组(P<0.01),且5.0μg/mLRg3可抑制肿瘤细胞中MMP-9的表达。结论:Rg3能够抑制小鼠黑素瘤细胞的肺转移,其抗肿瘤转移作用可能是通过降低肿瘤细胞中MMP-9的表达水平及细胞侵袭能力来实现的。