GITR/GITRL信号系统在单核巨噬细胞免疫调节中的作用

糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptor,GITR)蛋白是TNFR超家族的新成员,它最初于1997年在杂交瘤细胞株上由Nocentini 等克隆出来[1],1999年又分别由两组科学家克隆得到与鼠GITR类似的人GITR以及其配体(GITR ligand,GITRL)[2].但到目前为止.人们对GITR信号在后天免疫系统的作用研究较多,但对于先天免疫的研究有限,而先天免疫是机体免疫重要组成部分,单核巨噬细胞在处理抗原,激活淋巴细胞,吞噬细菌等方面具有重要的功能[3].现对GITR/ GITRL信号在具有代表性的单核巨噬细胞中的作用予以综述.     

GITRL在内毒素诱导的Kupffer细胞凋亡中的作用研究

目的:探讨糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子相关蛋白配体(GITRL)在脂多糖(LPS)诱导的Kupffer细胞(KCs)凋亡中的作用。方法:分离BALB/c小鼠的KCs,转染对照siR-NA或者GITRL siRNA 24 h后,分四组培养,分别为对照(Control)组:仅加入培养液;地塞米松(Dex)组:加入Dex10μmol/L;LPS组:加入LPS 1 mg/L;LPS+Dex组:加入LPS 1 mg/L和Dex 10μmol/L。24 h后用免疫细胞化学法检测GITRL蛋白的表达,应用Annexin V/PI双染标记和流式细胞术检测KCs的凋亡率。结果:LPS刺激增加了KCs GITRL的表达(P<0.05),然而地塞米松处理降低了LPS诱导的GITRL表达。LPS刺激诱导了KCs的凋亡,但是沉默GITRL基因或者地塞米松处理抑制了LPS诱导的凋亡(P<0.05)。结论:LPS可以诱导小鼠KCs的凋亡,其作用可能依赖于GITRL信号的转导。     

GITR及其在免疫调节中的作用

糖皮质激素诱导的TNFR家族相关受体（GITR），也被称为TNFRSF18、AITR（人类）。静止T细胞低水平表达GITR，而CD4^＋CD25^＋调节性T细胞则呈高水平表达。GITR与其配体（GITRL）结合后会增强T细胞激活、增殖、分泌细胞因子、MAPKs和NF-κB激活效应、抑制CD4^＋CD25^＋Treg细胞的功能，从而加强效应性T细胞的活性，有利于增强抗肿瘤免疫和抗病毒免疫。随着生物学环境的变化，GITR激活Siva或者TRAF，起着促进或诱导凋亡的作用。     

甘露糖受体在免疫调节中的作用

甘露糖受体 (ＭＲ)属于多凝集素 (ｍｕｌｔｉｌｅｃｔｉｎ)受体 ,可识别细胞表面或病原体细胞壁上的多种糖分子 ,通过参与受体介导的内吞作用 (ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｍｅｄｉａｔｅｄｅｎｄｏｃｙｔｏｓｉｓ)和吞噬作用 (ｐｈａｇｏｃｙｔｏｓｉｓ) ,来维持内环境的稳定 ,并将先天性免疫与获得性免疫联系起来 ,组成机体的一种免疫防御系统。本文对近几年来甘露糖受体的结构和功能等方面的研究进行综述 ,主要介绍甘露糖受体在维持机体组织内环境稳定、参与非特异性免疫防御、诱导特异性免疫应答和调节免疫反应等方面的重要生物学作用。1　ＭＲ的…     

DR5在TRAIL诱导Jurkat细胞凋亡中的作用

目的：研究DR5在介导TRAIL凋亡信号中的作用。方法：用含人DR5细胞外全长结构域重组DR5免疫BALB／C小鼠，制备抗DR5单克隆抗体；流式细胞仪检测Jurkat细胞表面DR5表达水平；采用TRAIL凋亡检测试剂盒，检测Jurkat细胞凋亡率及抗DR5单克隆抗体对TRAIL诱导细胞凋亡的阻断率。结果：DR5在Jurkat细胞表面的表达率为94．83％，TRAIL和抗TRAIL单克隆抗体能够诱导Jurkat细胞凋亡，呈现明显的剂量相关性，TRAIL浓度在50-100ng/ml时，杀伤率达90％以上。预先用抗DR5单克隆抗体与Jurkat细胞作用后，TRAIL对Jurkat细胞的杀伤功能几乎完全被mAb所阻断，其平均阻断率达90．49％。结论：DR5在TRAIL诱导Jurkat细胞凋亡中起着十分关键的作用。     

TIPE 家族生物活性及作用研究进展

TIPE (Tumor necrosis factor-alpha-induced protein 8 like )家族是新近报道的免疫和肿瘤调节因子。该家族拥有四个高度同源的成员:TNFAIP8 (Tumor necrosis factor-induced protein 8), TIPE1 (TNFAIP8L1), TIPE2 (TNFAIP8L2)和TIPE3 (TNFAIP8L3)。它们虽然结构相似,但在组织、器官上的表达不同,在生物学功能及疾病中的作用存在较大的差别。TNFAIP8 具有抑制细菌感染与促肿瘤迁移的作用;TIPE2 是一种免疫和炎症负调控因子,可抑制某些肿瘤的生长;TIPE1 可诱导细胞凋亡具有抑瘤效应;TIPE3 可特异性结合磷脂第二信使,促进肿瘤生成。随着研究的深入,TIPE 家族在多种疾病的发生发展过程中表现出重要的调控作用,然而其具体生物活性与分子机制有待进一步的研究。     

THANK—一种新的免疫调节因子

THANK是1999年发现的肿瘤坏死因子超家族成员，最早发现其可诱导肿瘤细胞凋亡；之后则发现THANK和TNF家族的另一成员APRIL与它们的两个受体TACI和BCMA形成了双配体-双受体系统，共同调节B细胞的活化，增生与成熟；而TACI表达于活化的T细胞及可诱导NFAT的表达，表明THANK不仅与B细胞的功能有关，且参与了T细胞介导的免疫调节，THANK对B细胞的作用大大地加深了人们对B细胞生长，发育调控的理解，本文对THANK基因的研究进展进行了综述。     

ILT4的免疫调节功能及其在肿瘤和免疫性疾病中的作用

免疫球样蛋白转录子4(ILT4)是ILT超家族中的抑制性受体,主要表达于髓系细胞,包括单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞和粒细胞,通过免疫受体酪氨酸抑制基序(ITIM)传导抑制信号,发挥免疫抑制作用.近年的研究发现,ILT4在免疫调节、肿瘤免疫、移植免疫以及自身免疫性疾病中均扮演重要角色,进一步了解ILT4的免疫调节功能及...     

肿瘤坏死因子受体超家族成员死亡受体在病毒感染中的作用

死亡受体是一组具有死亡结构域的膜受体，属于肿瘤坏死因子受体超家族成员。表达死亡受体的细胞与其相应的配体结合后可引发细胞凋亡，因此死亡受体参与机体的多种生理和病理过程，特别是在多种病毒感染中发挥着双重作用。本就最新发现的死亡受体在肝炎病毒、HIV以及巨细胞病毒等多种病毒感染中的作用作一综述。     

小鼠糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体相关蛋白生物信息学分析

目的获取小鼠糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体相关蛋白(GITR)氨基酸序列,并预测其结构和功能。方法利用网络平台及相关生物学软件对小鼠GITR氨基酸序列进行生物信息学分析。结果小鼠GITR氨基酸序列与人等其他物种具有56%的同源性,具有信号肽、胞外区、跨膜区及胞内区等结构;小鼠GITR蛋白胞外区位于第22~153号氨基酸序列区间;可能含有4个N-糖基化位点、4个丝氨酸磷酸化位点、1个苏氨酸磷酸化位点以及1个酪氨酸磷酸化位点。结论小鼠GITR氨基酸序列的生物信息学分析为进一步表达该蛋白及其相关功能研究奠定了基础。     

BTLA信号通路在免疫调节中的作用

BTLA(CD272)属于免疫球蛋白超家族成员,广泛表达于免疫细胞,其配体为HVEM。BTLA基因敲除小鼠淋巴器官发育基本正常,但TCR诱导的免疫应答反应显著增强,CD8记忆T细胞数量显著增多;抗原特异性IgG反应增强,并逐步出现自身抗体、高丙球蛋白血症以及自身免疫性肝炎样疾病。这些结果证明,BTLA具有抑制细胞及体液免疫反应的功能。BTLA信号通路与部分自身免疫性疾病、艾滋病等感染性疾病、肿瘤和移植物抗宿主病等的发生和发展密切相关,调控BTLA信号通路有望用于相关疾病的免疫治疗。     

牙龈卟啉菌外膜蛋白ragB-GITRL真核共表达载体的构建及免疫原性研究

目的:构建牙龈卟啉菌外膜蛋白ragB和小鼠糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体的配体(mGITRL)真核共表达载体,在体内研究其免疫原性。方法:应用PCR扩增技术,从pMD18-T-ragB中获得ragB基因编码序列片段,克隆至真核共表达载体pIRES及pIRES-mGITRL。对重组质粒进行双酶切与测序鉴定后,以脂质体介导法转染至COS7细胞,通过Western blot检测其在COS7细胞中的表达。将成功构建的重组质粒免疫小鼠,应用ELISA法检测免疫后小鼠血清中抗RagB的水平。结果:PCR扩增目的基因,酶切和测序证实重组质粒pIRES-ragB及pIRES-ragB-mGITRL成功构建,Westernblot结果显示目的基因在COS7细胞及骨骼肌细胞中均过表达。小鼠血清中检测出高滴度的抗RagB的抗体。结论:pIRES-ragB-mGITRL表达载体的构建,为牙龈卟啉菌疫苗研究、预防和牙周炎治疗提供了实验依据。     

抗hGITRaa27-165多克隆抗体生物学活性的初步鉴定

目的:明确兔源性抗人糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体胞外段的多克隆抗体(anti-hGITRaa27-165 PcAb)与人类天然GITR分子的结合能力及其对CD4+T细胞的生物学作用。方法:分离、刺激培养人外周血单个核细胞后,利用流式细胞术(FCM)检测anti-hGITRaa27-165 PcAb与细胞膜表面GITR分子的结合能力;免疫磁珠分离人外周血收集CD4+T细胞,以3H-TdR掺入试验分别检测在细胞刺激生长剂存在或不存在的情况下,anti-hGITRaa27-165PcAb对CD4+T细胞增殖的影响。结果:兔源性anti-hGITRaa27-165 PcAb可以与天然构象的GITR分子结合,且此种结合具有浓度依赖性;在细胞生长刺激因子存在或不存在情况下,该多抗均能促进CD4+T细胞增殖。结论:本室制备的兔源性anti-hGITRaa27-165 PcAb具有与天然分子结合的能力以及一定的生物学活性,进一步的研究可考虑将其应用于临床相关疾病的检测和治疗。     

人γ干扰素＼β肿瘤坏死因子重组杂合蛋白的免疫调节功能

报道了人γ干扰素／β肿瘤坏死因子杂合蛋白对正常动物免疫反庆的影响，结果如下：经ＬＰＳ激活的豚鼠腹腔巨噬细胞，当与适宜剂量的杂合蛋白温育后，其无细胞上清液中的Ｈ２Ｏ２浓度高于对照组。ＤＮＣＢ致敏的大鼠在半抗原攻击性，如在一侧耳翼内注入适宜剂量的ｒｈＩＦＮ／γ／ｒｈＴＮ－Ｆβ，则由ＤＮＣＢ诱导的迟发超敏反应大于在另一侧耳翼内注入ＰＢＳ作为对照的反应强度。     

生长抑素的免疫调节作用

生长抑素是一种抑制性神经肽 ,同时又具有免疫调节功能 ,是神经内分泌免疫网络中重要的信号传导分子。它降低淋巴细胞活性 ,影响细胞因子分泌 ,调节T细胞分化和功能及具有抗炎、抗增殖作用。     

肿瘤坏死因子受体超家族成员死亡受体在病毒感染中的作用

死亡受体是一组具有死亡结构域的膜受体,属于肿瘤坏死因子受体超家族成员.表达死亡受体的细胞与其相应的配体结合后可引发细胞凋亡,因此死亡受体参与机体的多种生理和病理过程,特别是在多种病毒感染中发挥着双重作用,本文就最新发现的死亡受体在肝炎病毒、HIV以及巨细胞病毒等多种病毒感染中的作用作一综述.     

地塞米松通过抑制GITR/GITRL信号减轻脂多糖诱导的血管内皮细胞凋亡

目的本研究通过观察地塞米松对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)小鼠模型肺部炎症反应及GITR/GITRL信号通路的影响,同时初步探讨地塞米松对LPS诱导人血管内皮细胞GITRL表达以及细胞凋亡的作用。方法制作ARDS动物模型后,取小鼠肺组织行常规HE染色,同时行免疫组化染色检测GITR/GITRL信号蛋白,另外行肺泡灌洗并收集灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)分类计数炎症细胞,ELISA检测BALF中的炎症因子。利用免疫荧光检测人血管内皮细胞GITRL的表达,另外用流式细胞学分析检测凋亡细胞比例。结果地塞米松明显减少模型小鼠BALF中的炎症细胞以及炎症因子,利用免疫组织化学方法检测实验小鼠肺组织中的GITR/GTIRL信号蛋白发现:对照组小鼠肺组织中有少许的炎性细胞表达GITR;ARDS模型模型组小鼠肺组织中可见明显GITR蛋白表达,主要表达于浸润的炎性细胞;地塞米松干预ARDS模型小鼠后肺组织中GITR表达明显减少;对照组小鼠肺组织中GITRL主要表达于血管内皮细胞,其他组织细胞有少量表达;ARDS模型组小鼠肺组织中可见明显GITRL蛋白表达;地...     

TRAF2在B淋巴细胞AP-1信号传导系统中的作用

目的利用人B细胞株模型探讨TRAF2在调控AP-1信号系统中的作用。方法将融合有黄色荧光素(YFP)的野生型(WT-TRAF2)或功能缺失型(DN-TRAF2)TRAF2质粒,以及小干扰RNA-TRAF2质粒转染至人类B淋巴细胞株,过夜培养后经流式细胞仪或抗生素G418筛选阳性转染细胞,通过Western blot、ELISA等方法研究TRAF2对AP-1通路中ERK、JNK、P38磷酸化和AP-1亚单位的细胞核内转移等的影响。结果B细胞过度表达WT-TRAF2可增加ERK和P38的磷酸化水平以及C-FOS的核内转录,而过度表达DN-TRAF2或转染小干扰RNA-TRAF2则减少ERK和P38的磷酸化水平以及C-FOS的核内转录。结论TRAF2可选择性地作用于人B淋巴细胞AP-1信号传导系统中的部分激酶,对B细胞AP-1信号系统的活化有重要作用。     

GITRL对Kupffer细胞内脂多糖诱导的吲哚胺2,3双加氧酶的作用研究

目的:研究糖皮质激素诱导的TNF受体配体(GITRL)对Kupffer细胞(KCs)内脂多糖(LPS)诱导的吲哚胺2,3双加氧酶(IDO)的影响。方法:分离小鼠KCs后分为5组:Control组,只加培养基;LPS组,加入LPS(10μg/ml);LPS+Control siRNA组,转染Control siRNA后同LPS组;LPS+GITRLsiRNA组,转染GITRLsiRNA后同LPS组;LPS+Dex组,地塞米松(100μmol/L)处理后同LPS组。处理24小时后,分别采用免疫细胞化学染色、蛋白免疫印记和ELISA法检测KCs的GITRL、IDO表达及肿瘤坏死因子(TNF)-α分泌。结果:和Control组比较,LPS刺激后KCs上GITRL的表达明显上调(P<0.05),而沉默GITRL基因或者使用地塞米松能减弱其升高(P<0.05)。LPS可以诱导IDO和TNF-α在KCs上的高表达,然而GITRL基因沉默可以抑制其诱导的IDO和TNF-α的表达(P<0.05),同样地塞米松预处理也能够减弱其诱导的IDO和TNF-α的表达(P<0.05)。结论:GITRL介导了KCs内LPS诱导的IDO,地塞米松可通过下调GITRL的表达以降低LPS诱导的IDO。