温肾生精饮对生精细胞凋亡和组蛋白H3K9二甲基化的影响

目的研究温肾生精饮对环磷酰胺致小鼠睾丸生精细胞凋亡和组蛋白H3K9二甲基化(H3K9me2)的影响。方法将8周龄的60只昆明种雄性小鼠随机分为对照组、模型组、西药组和中药组,每组15只。对照组腹腔注射0.9%Na Cl溶液,模型组、西药组和中药组连续5天腹腔注射环磷酰胺(80μg·g-1·d-1的)然后将对照组和模型组小鼠灌胃0.9%Na Cl溶液,西药组、中药组小鼠分别灌胃克罗米芬、温肾生精饮。各组均干预30天,检测小鼠的体质量、睾丸重和附性腺重;观察睾丸生精上皮的发育且进行Johnsen评分;TUNEL法检测睾丸生精细胞的凋亡;免疫荧光法检测睾丸生精小管中H3K9me2蛋白的表达。结果与模型组和西药组比较,中药组显著提高了生精障碍小鼠的体质量、附性腺指数和小鼠睾丸组织的Johnsen评分(P0.05),促进了生精上皮的发育,显著减少了小鼠睾丸组织中凋亡的生精小管数和生精小管内凋亡的阳性细胞数(P0.05),上调了精子细胞中H3K9me2的表达水平。结论温肾生精饮能显著修复环磷酰胺致小鼠睾丸生精功能损伤,其修复机制可能与减少睾丸生精细胞凋亡,稳定精子细胞中H3K9me2的表达水平有关。     

续断种子方对少精子症模型小鼠生精功能障碍的实验性研究

目的探讨续断种子方对少精子症模型小鼠生精功能障碍实验性研究。方法取45只6~8周龄C5BL/6小鼠,随机选取35只小鼠用白消安造模,建立少精子症小鼠模型,对造模成功后随机分为模型组(15只)、续断种子方组(10只)和左卡尼汀口服液组(10只)。另外10只小鼠为正常对照组,不造模。模型组和正常对照组正常喂养,左卡尼汀口服液组和续断种子方组每天给予剂量2000mg/(kg·d)灌胃给药,1次/日,给药8周后,各组实验小鼠全部处死,取出左侧附睾和睾丸,检测附睾精子质量、HE染色检测小鼠睾丸组织形态学和超微结构的改变。结果用药治疗组睾丸组织超微结构均有所改善,附睾精子质量、精曲小管直径、空泡化百分率、生精上皮细胞层数和厚度均明显高于模型组(P<0.01,P<0.05),但均仍未达到正常对照组的程度。结论续断种子方对生精功能障碍小鼠的作用机制是通过改善附睾及睾丸“微环境”,增加间质细胞和支持细胞,恢复附睾培育精子的内环境,为精子成熟提供有利条件。     

新温肾生精饮对环孢霉素致小鼠附睾组织氧化应激和精子损伤的影响

目的研究新温肾生精饮(主要由鹿茸、人参、锁阳、黄芪和淫羊藿等15味药材组成)对环孢霉素A致小鼠附睾组织氧化应激和精子损伤的保护作用及其机制。方法将8周龄的昆明种雄性小鼠随机分为对照组、溶剂组、模型组、西药组和中药组,每组15只。对照组腹腔注射0.9%Na Cl溶液,模型组、西药组和中药组连续30天腹腔注射15μg·g-1·d-1环孢霉素A,同时将对照组和模型组小鼠灌胃0.9%Na Cl溶液,西药组和中药组小鼠分别灌胃克罗米芬或新温肾生精饮30天。称量小鼠体质量和附睾重;检测附睾组织中丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPH-Px)的水平;流式细胞仪检测小鼠附睾精子中ROS水平、精子的凋亡和死亡情况。结果与对照组比较,溶剂组各指标差异无统计学意义(P0.05);模型组体质量增重和附睾指数显著降低,GSH水平和GSH-Px活性显著降低,MDA水平显著升高,附睾成熟精子中ROS水平显著升高,同时附睾成熟精子的存活率显著降低、死亡率显著升高,差异均有统计学意义(P0.05)。与模型组比较,中药组显著增加了小鼠体质量增重及附睾指数,提高了附睾组织中GSH水平和GPH-Px活性,显著降低了附睾组织中MDA的含量和附睾成熟精子中ROS水平,提高了精子的存活率,降低了精子的死亡率,差异均有统计学意义(P0.05)。与西药组比较,中药组小鼠体质量增重增加,附睾组织中MDA的含量下降,附睾成熟精子中ROS水平下降,提高了精子的存活率,差异均有统计学意义(P0.05)。结论新温肾生精饮能显著修复环孢霉素A致小鼠附睾组织的氧化应激损伤,提高附睾成熟精子的存活率。     

龙威口服液对大鼠生精障碍的促生精作用

本研究观察了龙威口服液对大鼠生精障碍的促生精作用。结果表明,经温水浴造模,使大鼠睾丸生精细胞受破坏,灌服龙威口服液每日1次,4ml/140～150g体重,14天后龙威口服液组较对照组有显著促生精作用,能恢复睾丸生精细胞,促进精子成熟,增加睾丸组织中cAMP含量等。     

淫羊藿总黄酮对环磷酰胺致小鼠生精障碍保护作用的研究

目的:研究淫羊藿总黄酮对环磷酰胺所致小鼠生精障碍的治疗作用。方法:腹腔注射环磷酰胺建立小鼠生精障碍模型,检测小鼠的睾丸及附睾重量、精子密度、活率,流式细胞术分析睾丸生精细胞周期,光、电镜观察睾丸组织学和超微结构的变化。结果:淫羊藿总黄酮能够显著增加模型小鼠的睾丸、附睾重量,提高精子密度、精子活率,恢复各级生精细胞百分比;并能改善环磷酰胺所致模型小鼠睾丸组织的病理性损害。结论:淫羊藿总黄酮可以显著改善环磷酰胺致生精障碍小鼠生殖功能。     

补肾生精汤对房劳小鼠模型生精细胞的影响

目的:观察补肾生精汤对生精细胞的影响,以探讨其治疗男性不育症的作用机制。方法:采用诱导雄性小鼠性交过度的方法,复制房劳小鼠模型,实验分为治疗组和自复组,造模8周、治疗30天。检测内容包括小鼠一般情况、睾丸和附睾外观及重量、睾丸精子密度及畸形率、血清睾酮水平、睾丸组织亚单倍体DNA含量等。结果:治疗组较自复组各项指标均有明显差异。结论:补肾生精汤能使房劳小鼠生精功能得到改善,提高生殖能力。     

精杞胶囊对大鼠生精功能损伤的保护作用

目的探讨精杞胶囊(蛹虫草、熟地、枸杞子,等)对环磷酰胺诱导大鼠生精功能损伤的保护作用。方法精杞组和丙酸睾酮组先期给药2周后,除正常组外,均腹腔注射环磷酰胺25 mg/(kg·d)连续造模5 d,与此同时精杞组和丙酸睾酮组延续给药,造模结束后次日处死全部动物。放射性免疫法检测血清睾酮含有量;称取大鼠体质量、睾丸、附睾、前列腺质量,计算脏器指数;HE染色观察大鼠睾丸组织形态;CASA仪检测精子密度与精子活率;TUNEL检测细胞凋亡。结果精杞组与模型组比较,血清睾酮含有量升高;睾丸、附睾、前列腺脏器指数增加;生精上皮损伤减轻,各级生精细胞数量增多;精子密度与精子活率增高;TUNEL显示细胞凋亡率降低。结论精杞胶囊对环磷酰胺所致大鼠生精功能损伤有保护作用。     

五味子多糖对微波辐射生精障碍小鼠的治疗作用研究

  目的：探讨五味子多糖对微波辐射致生精障碍小鼠的治疗作用及其对生殖激素的影响  方法：50只雄性BALB/C小鼠随机分为正常组、模型组及五味子多糖低、中、高剂量组。除正常组外,每组小鼠每天给予1 450 MHz、50 mW/cm²的微波照射1 h,连续12天,制备微波致生精障碍小鼠模型。模型制备后,五味子多糖低、中、高剂量组分别给予五味子多糖100、200、400 mg/kg灌胃,正常组和模型组给予等体积0.9%NaCl溶液灌胃,均每天1次,连续30天。末次灌胃后24 h,取小鼠血清、睾丸和附睾。检测各组小鼠精子密度、活率及畸形率;酶联免疫法测定小鼠血清卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)和睾丸组织匀浆睾酮(T)水平;HE染色观察睾丸形态学变化  结果：与正常组比较,模型组精子密度和精子活率降低、精子畸形率升高(P<0. 01),血清FSH和LH水平升高、睾丸组织匀浆中T含量降低 (P<0.01)。与模型组比较,五味子多糖各剂量组精子密度、精子活率升高,精子畸形率降低,血清FSH 和LH水平降低,睾丸组织匀浆中T含量升高,差异均有统计学意义(P<0.01),且作用效果呈剂量依赖性。组织学观察显示,五味子多糖各剂量组小鼠睾丸组织病理性损害均得到改善  结论：五味子多糖对微波致生精障碍小鼠生精功能有明显的改善作用,其作用机制可能与调节生殖激素水平,恢复下丘脑垂体性腺轴的调控功能有关。     

五子衍宗方对生精障碍模型大鼠附睾精子参数及血清抑制素B的影响

目的:观察五子衍宗方对生精障碍模型大鼠附睾精子参数及血清抑制素B水平的影响。方法:采用随机数字表法将50只雄性SD大鼠分为正常对照组、模型组、甲基睾酮组和五子衍宗方低、高剂量组,每组10只。除正常对照组外,其余各组大鼠按醋酸棉酚50mg/kg体质量灌胃给药,制备生精障碍模型。正常组和模型组大鼠灌服蒸馏水,甲基睾酮组大鼠灌服甲基睾酮混悬液,五子衍宗方低、高剂量组大鼠分别给予低、高浓度(含1.75g、3.5g生药/mL)五子衍宗方混悬液灌胃,每天1次,连续1个月。观察各组大鼠睾丸湿重、睾丸指数及间质细胞数,按WHO标准,采用WLJY-9000荧光染色精子动(静)态图像分析系统检测附睾精子参数,ELISA法检测大鼠血清抑制素B水平。结果:棉酚可造成大鼠睾丸减轻、睾丸指数减小、间质细胞数减少(P0.01);附睾精子密度降低,活动率和前向运动率(a+b%)下降(P0.05,P0.01),血清抑制素B水平降低(P0.01);五子衍宗方能显著改善大鼠睾丸重量及睾丸指数,增加间质细胞数,改善附睾精子参数(P0.05,P0.01),上调血清抑制素B水平(P0.01),拮抗棉酚造成的大鼠睾丸生精功能损伤。结论:通过上调抑制素B水平,改善睾丸生精功能,可能五子衍宗方治疗不育症的作用机制之一。     

强精煎对模型小鼠睾丸生精细胞凋亡影响的实验研究

目的：探讨强精煎对模型小鼠睾丸生精细胞凋亡的影响。方法：用环磷酰胺所致的睾丸生精障碍小鼠模型,光学显微镜观察小鼠睾丸的病理形态,流式细胞仪检测生精细胞凋亡率。结果：与模型组比较,强精煎组睾丸生精细胞凋亡率显著降低。结论：强精煎具有修复睾丸病理损伤,降低睾丸生精细胞凋亡率的作用。     

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??OBJECTIVE To study the effect of myricetin and its mechanism for spermatogenesis obstruction caused by lead acetate in male mice. METHODS The spermatogenesis obstruction of male mice model was built by intraperitoneal injection with lead acetate(20 mgkg^-1) for 7 d. From the 2 d model made mice in low, medium and high doses myricetin were treated by myricetin, respectively(100, 200, 400 mgkg^-1) by intraperitoneal injection for 42 d. The mice were sacrificed on day 43 for the measurement of the sperm density and sperm aberration rate. The levels of lactate dehydrogenase(LDH), nitric oxide(NO), tumor necrosis factor ??(TNF-??) in testicular tissue homogenate, the content of malondialdehyde(MDA) in blood serum were assayed respectively. The pathological changes of testicular tissues were observed. RESULTS Compared with the model group, sperm density was increased, the sperm aberration rate mice were decreased, the activities of LDH in testicular tissue homogenate were improved and the contents of NO in testicular tissue homogenate were decreased in different doses myricetin groups. The activities of TNF-?? in testicular tissue homogenate and the content of MDA in blood serum were increased. Pathological change of testis showed there were decline of spermatogenic cells in levels and numbers and few spermiogenesis in most of seminiferous tubule in model group. Those change above could be reversed by myricetin. CONCLUSION Myricetin has certain improvement on spermatogenesis obstruction of mice caused by lead acetateits, its mechanism may be related to decreasing NO, anti-oxidation and inhibiting inflammatory mediator.     

肝气郁结对雄性大鼠精子质量的影晌

目的：观察肝气郁结对雄性大鼠精子质量的影响,为临床从肝论治男性不育奠定一定的实验基础。方法：Wistar雄性大鼠40只,随机分正常组、模型组、五子衍宗丸组、逍遥丸组,每组10只。采用夹尾激怒法复制大鼠肝气郁结模型,造模完成后各组给予相应的处理,14天后观察各组大鼠睾丸和附睾脏器系数、精液参数、睾丸组织形态学等各项指标的变化。结果：与正常组比较,模型组大鼠精子数量、精子活率明显降低,精子畸形率明显升高;与模型组比较,逍遥丸组大鼠精子数量及精子活率显著升高（P〈0．05,P〈0．01）,精子畸形率无显著性差异（P〉0．05）。光镜观察,模型组大鼠较正常组大鼠呈现生精细胞排列疏松,生精细胞脱离基底部,支持细胞和生精细胞核染色质凝聚成絮状,管腔内精子减少;逍遥丸组大鼠睾丸曲细精管形状规整,生精上皮细胞排列紧密,管腔内有生精细胞,与模型组比较有显著改善;五子衍宗丸组改善不明显。结论：肝气郁结对大鼠精液参数、睾丸组织形态有一定影响,逍遥丸对其有明显的干预作用。     

强精煎对模型小鼠睾丸病理损伤的影响

目的探讨强精煎对模型小鼠睾丸病理损伤的影响。方法应用环磷酰胺所致的睾丸生精障碍小鼠模型,观察强精煎对小鼠睾丸病理形态学的影响。结果模型组小鼠睾丸组织可见明显的病理损伤;强精煎治疗组小鼠睾丸生精小管管壁较厚,细胞层次较宽,各级生精细胞排列较规则,基底面至腔面可见精原细胞、初级精母细胞、精子细胞等各个发育阶段的细胞,细胞增殖旺盛,可见到较多分裂期细胞,腔内可见成熟精子,间质稀少,血管丰富,间质细胞发育良好。结论强精煎具有修复睾丸病理损伤的作用。     

六味地黄汤及其加味组方对生精障碍模型大鼠的促生精作用研究

目的:考察六味地黄汤及其加味组方对生精障碍模型大鼠的促生精作用。方法:用醋酸棉酚造成大鼠生精障碍模型后,以分煎和合煎的六味地黄汤及其加味方灌胃治疗,以市售六味地黄丸和甲基睾酮分别为对照和阳性对照,考察实验各组精子的数量和质量。结果:六味地黄汤分煎组、合煎组、市售组、加味组方各组及阳性对照组的精子数与模型组有显著性差异(P<0.05),各治疗组的精子质量(活力)也显著优于模型组。结论:六味地黄汤及其加味组方对生精障碍大鼠均有显著的促进生精作用,并可显著提高大鼠精子的质量。     

Aspects of the male reproductive toxicity/male antifertility property of andrographolide in albino rats: effect on the testis and the cauda epididymidal spermatozoa

Previous work has shown that Andrographis paniculata leaf, when fed to male albino rats, causes the arrest of spermatogenesis. The present study was undertaken to investigate whether andrographolide, one of the major constituents of this plant, is responsible for such an effect. The compound was administered to 3-month-old male Wistar albino rats at two dose levels, for 48 days. Fertility tests, analysis of the counts, motility and abnormalities of the cauda epididymidal spermatozoa, and histopathological-evaluation of the testis were carried out. The results showed that sperm counts decreased, the spermatozoa were not motile, and several of them possessed abnormalities. The seminiferous epithelium was-thoroughly disrupted and in the seminiferous tubules, fully differentiated spermatozoa were far too limited; cells in the divisional stages were prevalent; multinucleate giant cells were abundant and Leydig cells appeared intact. It is inferred that andrographolide could affect spermatogenesis by preventing cytokinesis of the dividing spermatogenic cell lines. The multinucleate giant cells are comparable to the symplasts generated by cytochalasin-D and ursolic acid due to action at stages V-VII of the spermatogenic cycle. Sertoli cell damage and spermatotoxic effects are also apparent. Thus, the study points to a male reproductive toxic effect of this compound when used as a therapeutic; the study also confirms the possible prospective use of andrographolide in male contraception.     

调肝中药对精索静脉曲张大鼠睾丸形态结构及附睾精子密度和活率的影响

目的观察调肝中药对精索静脉曲张(VC)大鼠睾丸组织形态结构及附睾精子密度和活率的影响。方法随机选取清洁级雄性SD大鼠50只,造模后分为模型组、调肝中药组、活血化瘀组、滋补肝肾组、补肾活血组,另取10只为假手术组,共6组,每组10只。各治疗组均于造模后48 d开始。连续用药60 d。处死大鼠,剪取睾丸、附睾,睾丸组织用HE染色,光镜下观察其病理改变,检测附睾精子的密度和活率。结果假手术组睾丸生精小管内各级生精细胞排列整齐、致密,层次清楚,结构正常,生精小管管腔内可见大量精子;模型组生精小管的各级生精细胞损伤最重,精子极其少见;治疗组各级生精细胞排列介于假手术组和模型组之间,其中调肝中药组生精细胞排列最致密,管腔内可见精子。与模型组比较,假手术组、调肝中药组VC大鼠附睾精子密度明显升高(P0.05),附睾精子活率各组差异无统计学意义(P0.05)。结论 VC导致睾丸生精细胞损伤,中药治疗后睾丸组织各级生精细胞都有不同程度的恢复,附睾液精子数量明显增加,调肝中药疗效最好。     

不同剂量淫羊藿苷对冒公藤多苷模型小鼠睾丸病理损伤的影响

目的 探讨淫羊藿苷拮抗雷公藤多苷小鼠睾丸病理损伤的量效关系.方法 应用雷公藤多苷所致的睾丸生精障碍小鼠模型,观察不同剂量淫羊藿苷对小鼠睾丸病理形态学的影响.结果 模型组小鼠睾丸组织可见明显的病理损伤;3份淫羊藿苷/1份雷公藤多苷治疗组小鼠睾丸生精小管管壁较厚,细胞层次较宽,各级生精细胞排列较规则,基底面至腔面可见精原细胞、初级精母细胞、精子细胞等各个发育阶段的细胞,细胞增殖旺盛,可见较多分裂期细胞,腔内可见成熟精子,间质稀少,血管丰富,间质细胞发育良好.1份淫羊藿苷/1份雷公藤多苷治疗组和9份淫羊藿苷/1份雷公藤多苷治疗组小鼠睾丸病理表现相似,好于模型组,但差于3份淫羊藿苷/1份雷公藤多苷治疗组.结论 在淫羊藿苷/雷公藤多苷的1∶1、3∶1、9∶1三种剂量配比中,3∶1配比具有最好的拮抗雷公藤多苷睾丸病理损伤的作用.     

三才连梅颗粒通过Nrf2/HO-1信号通路对糖尿病小鼠生精功能的影响

目的:探讨三才连梅颗粒通过核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)信号通路影响糖尿病小鼠生精功能的作用机制。方法:将2型糖尿病小鼠分为正常对照组、糖尿病模型组、三才连梅组、二甲双胍组。给药4周后,取小鼠附睾检测精子参数;透射电镜及HE染色观察睾丸病理改变,TUNEL染色检测睾丸生精细胞凋亡情况;qPCR及Western blot检测睾丸组织Nrf2、HO-1 mRNA及蛋白表达水平;Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1、P62的表达水平;ELISA检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的表达水平。结果:与糖尿病模型组比较,三才连梅组能显著提高大鼠精子密度、活力及存活率,上调糖尿病小鼠睾丸组织Nrf2、HO-1 mRNA及蛋白表达水平,增加SOD生成,减少MDA的生成,下调自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1、P62、Bax蛋白表达,上调Bcl-2蛋白表达(均P<0.05)。与糖尿病模型组比较,三才连梅组可显著抑制生精细胞过度自噬,减轻生精细胞凋亡。结论:三才连梅颗粒能有效提高...     

补肺益肾汤对精子参数的干预作用

目的:观察补肺益肾汤对精子运动参数的影响机制。方法:选取中医门诊男性不育症患者90例,随机分为治疗组、对照组,治疗组服用补肺益肾汤,每次150mL,每日2次,对照组口服VE胶囊50mg3次/日,1个月1个疗程,治疗前后均做精液分析。结果:补肺益肾汤能明显提高精液a级精子百分率、精子直线速度、精子前向性、精子直线性(P<0.01)。结论:补肺益肾汤能明显改善精子运动参数。