三子养亲汤对支气管哮喘模型大鼠的作用机制研究

目的:探讨三子养亲汤对支气管哮喘模型大鼠Th1/Th2平衡失调的作用机制。方法:将60只SD大鼠随机分成6组,每组各10只,分别为正常对照组、哮喘模型组、地塞米松0.75mg组、三子养亲汤1.5、3、6g/kg组。采用卵清白蛋白(OVA)与氢氧化铝致敏,并OVA雾化吸入激发制备大鼠支气管哮喘模型。各组大鼠经末次激发24h后,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)及肺组织标本。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠BALF中的IFN-γ、IL-2和IL-5的含量;免疫组化法检测肺组织中T-bet、GATA-3蛋白的表达。结果:三子养亲汤6 g/kg组和地塞米松组可显著降低哮喘大鼠BALF中IL-5含量;地塞米松组和三子养亲汤3 g/kg、6g/kg组显著升高IL-2含量;三子养亲汤1.5g/kg、3 g/kg、6 g/kg组和地塞米松组显著升高IFN-γ含量。与哮喘模型组比较,三子养亲汤1.5g/kg、3 g/kg、6 g/kg组和地塞米松组可显著降低哮喘大鼠BALF中GATA-3含量;三子养亲汤3 g/kg、6 g/kg组显著升高Tbet含量。结论:三子养亲汤能够发挥抗支气管哮喘的作用,其机制可能与调控Th1/Th2平衡失调有关。     

三子养亲汤对支气管哮喘模型大鼠Th17/Treg比例失衡的影响

目的:探讨三子养亲汤对支气管哮喘模型大鼠Th17/Treg比例失衡的影响。方法:大鼠分为正常对照组、模型组、地塞米松0.075 mg/kg组、三子养亲汤1.5 g/kg、3 g/kg和6 g/kg剂量组,采用卵清白蛋白(OVA)致敏,并雾化吸入卵清白蛋白激发复制大鼠支气管哮喘模型,给予不同剂量三子养亲汤进行干预,各组大鼠经末次激发24 h后,取肺组织进行HE染色观察病理变化,酶联免疫吸附法(ELISA)测定大鼠BALF中的IL-10、TGF-β和IL-17、IL-6的含量;采用免疫组化法检测肺组织中IL-10和IL-17蛋白的表达。结果:与模型组相比,三子养亲汤各组和地塞米松组明显减少大鼠BALF中IL-17含量、下调肺组织中IL-17蛋白表达,三子养亲汤3 g/kg、6 g/kg组和地塞米松组可降低哮喘大鼠BALF中IL-6含量,升高IL-10、TGF-β含量,上调肝组织IL-10蛋白的表达。结论:三子养亲汤能够抑制哮喘大鼠的气道炎症,其作用机制可能与调节Th17/Treg平衡失调有关。     

“平喘汤”对哮喘大鼠肺组织EOS凋亡及Bax蛋白表达的影响研究

目的:观察平喘汤对哮喘大鼠肺组织嗜酸性粒细胞(EOS)凋亡及Bax蛋白表达的影响,探讨平喘汤治疗哮喘的相关机制。方法:SD大鼠随机分为模型组、地塞米松组、正常组和平喘汤低、中、高剂量组。除正常组,其余各组大鼠以卵清蛋白(OVA)致敏、激发制备哮喘大鼠模型。于第1次哮喘激发(造模第21天)开始各组连续灌胃给予相应药物或生理盐水14d。观察各组大鼠一般状况、肺组织病理形态,DNA断裂的原位末端标记法(TUNEL)测定肺组织EOS原位表达;免疫组化法(Western blot)检测Bax蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠肺组织有明显的病理变化,肺组织EOS呈强阳性表达(P0.01),Bax蛋白表达量明显减少(P0.01)。经药物干预后,各治疗组哮喘症状有所减轻,肺组织病理变化呈不同程度的改善。各治疗组大鼠肺组织EOS表达明显低于模型组(P0.01或P0.05),Bax蛋白表达明显高于模型组(P0.01或P0.05),其中平喘汤高剂量与地塞米松改善效果更为明显,且其改善效果相当。结论:平喘汤能够通过促进Bax蛋白表达,诱导EOS凋亡以减少肺组织炎性细胞浸润,进而缓解哮喘气道炎症。     

补脾益气方对支气管哮喘大鼠肺组织Toll样受体4表达的影响

目的观察补脾益气方对支气管哮喘大鼠肺组织Toll样受体4(TLR4)的影响。方法将36只Wistar大鼠随机分为对照组、哮喘组、治疗组,每组12只。哮喘组使用卵蛋白致敏和激发制备支气管哮喘模型,对照组使用等量生理盐水代替卵蛋白,治疗组在第1次致敏时以补脾益气方10g/kg灌胃治疗,每天1次,共21天。观察各组大鼠嗜酸性粒细胞(EOS)等炎性细胞的计数,并采用RT-PCR检测各组大鼠肺组织TLR4的mRNA表达水平,采用免疫组化检测肺组织TLR4的蛋白表达水平。结果哮喘组大鼠肺组织TLR4的mRNA及蛋白的表达均显著高于对照组和治疗组(P<0.01);哮喘组大鼠血液中EOS计数及其他炎性细胞百分比均显著高于对照组和治疗组(P<0.01)。结论支气管哮喘大鼠肺组织TLR4mRNA和蛋白的表达显著增强,补脾益气方能有效抑制其表达,并同时降低血液中EOS等炎性细胞的数量。     

止哮平喘方对哮喘大鼠肺组织EOS凋亡及Fas,Bcl-2基因表达的影响

目的:观察止哮平喘方对哮喘大鼠肺组织嗜酸性粒细胞(EOS)凋亡及Fas,B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bc1-2)mRNA表达的影响,探讨止哮平喘方影响哮喘大鼠肺组织EOS凋亡的机制.方法:SD大鼠60只,随机分为正常对照组、哮喘模型组、地塞米松治疗组(1 mg·kg-1·d-1)、止哮平喘方低、中、高剂量组(11,22,44 g·kg-1·d-1),每组10只.采用卵蛋白(OVA)致敏和激发复制哮喘大鼠模型,共治疗14 d.取右中肺组织4％多聚甲醛固定,石蜡切片,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测肺组织EOS凋亡,原位杂交检测Fas,Bcl-2 mRNA的表达.结果:与正常组比较,哮喘模型组大鼠肺组织中EOS的数量较多,EOS凋亡减少,同时FasmRNA表达明显降低、Bcl-2 mRNA的表达明显增加(P＜0.01).药物干预后,各治疗组EOS凋亡增加,Fas mRNA表达增加、Bcl-2 mRNA表达降低(P＜0.01或P＜0.05).Fas mRNA表达与EOS凋亡呈正相关(P＜0.01),Bcl-2 mRNA表达与EOS凋亡呈负相关(P＜0.01).结论:止哮平喘方可促进肺组织Fas mRNA表达、抑制Bcl-2 mRNA的表达,促进肺组织EOS凋亡,减轻气道炎症,从而发挥平喘作用.     

三子养亲汤对哮喘小鼠EOT-1、EOT-3影响的实验研究

目的:观察三子养亲汤对哮喘模型小鼠嗜酸性粒细胞活化趋化因子-1(Eotaxin-1,EOT-1)、嗜酸性粒细胞活化趋化因子-3(Eotaxin-3,EOT-3)的影响,探索三子养亲汤作用的分子机制。方法:按随机数字表法将小鼠分为三子养亲汤高、中、低剂量组及孟鲁司特组,模型组和空白对照组建立哮喘小鼠模型,测定其肺组织中EOT-1、EOT-3蛋白与基因表达。结果:与模型组比较,孟鲁司特组、三子养亲汤高剂量组肺组织中EOT-1、EOT-3浓度明显降低,差异有统计学意义;三子养亲汤中剂量组肺组织中EOT-1、EOT-3浓度降低,差异有统计学意义。结论:三子养亲汤能改善哮喘小鼠症状,其机制可能与下调EOT-1和EOT-3的表达有关。     

咳喘宁对支气管哮喘大鼠肺组织MMP-9mRNA表达的影响

目的观察咳喘宁对支气管哮喘大鼠肺组织MMP-9 mRNA表达的影响。方法取SD大鼠40只,随机分为正常对照组、模型对照组、咳喘宁高、低剂量组(27,13.5 g/kg)和桂龙咳喘宁组(0.41 g/kg),每组8只。除正常对照组外,其余各组以卵蛋白致敏并吸入激发法制备大鼠支气管哮喘模型,各给药组均从第1次哮喘激发开始(造模第3周)至处死前每天灌胃给药,激发并给药4周后处死大鼠,采用RT-PCR法检测MMP- 9 mRNA的表达,HE染色法观察肺和支气管病理组织学变化。结果与正常对照组相比较,模型对照组大鼠支气管管壁和平滑肌厚度、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞数以及肺组织MMP-9 mRNA表达均明显增加(P<0.01);与模型对照组比较,各治疗组均可显著降低支气管管壁和平滑肌厚度、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞数以及MMP-9 mRNA的表达(P<0.01)。结论咳喘宁能够降低肺组织MMP-9 mRNA的表达,抑制气道炎症和气道重塑。     

加味过敏煎对支气管哮喘大鼠嗜酸性粒细胞凋亡及Fas、Bcl-2调节作用的研究

目的:观察支气管哮喘大鼠模型肺组织中嗜酸性粒细胞(EOS)的凋亡及其调控蛋白Fas、Bcl-2的表达,探析加味过敏煎对模型的干预作用。方法:将50只大鼠随机分为空白组、模型组、加味过敏煎组、激素组、加味过敏煎联合激素组,每组10只。用氢氧化铝/卵蛋白[Al(OH)₃/OVA]致敏,雾化吸入含OVA的0.9%氯化钠溶液激发,建立哮喘模型。各治疗组均给予相应药物连续灌胃14 d,并在灌胃治疗后雾化含OVA的0.9%氯化钠溶液激发,每次雾化20 min,连续雾化7 d。模型组与空白组均用0.9%氯化钠溶液进行灌胃与雾化。采用TUNEL免疫荧光染色法观察肺组织中EOS凋亡情况;免疫印迹法、免疫组化法检测肺组织中Fas、Bcl-2蛋白的表达情况。结果:模型组大鼠肺组织中EOS计数显著增加,EOS凋亡率明显降低,Fas蛋白表达显著降低,Bcl-2蛋白表达显著增高(P<0.05);治疗后,各治疗组大鼠肺组织中EOS凋亡率均有不同程度的增高,Fas蛋白表达均增高,Bcl-2蛋白表达均降低,其中以加味过敏煎联合激素组变化程度最明显(P<0.05)。结论:加味过敏煎可能通...     

三子养亲汤、桃红四物汤单用及联用治疗哮喘大鼠作用的比较

目的 比较三子养亲汤、桃红四物汤单用及联用对哮喘大鼠的作用效果。方法 SD大鼠以卵清白蛋白(OVA)致敏激发复制模型,并予药物进行干预。采用ELISA法检测肺泡灌洗液(BALF)中γ干扰素(IFN-γ)、白介素4(IL-4)含量,并用Western Blot法检测肺组织中磷酸化p38蛋白激酶(p38 MAPK)的表达水平。结果 与正常对照组比较,模型组大鼠BALF中IL-4含量明显升高(P ＜ 0.01),IFN-γ含量明显降低(P ＜ 0.01),IFN-γ/IL-4比值下降(P ＜ 0.01);与模型组比较,各药物组IL-4水平下降、IFN-γ水平提高,IFN-γ/IL-4比值升高,差异均有统计学意义(P ＜ 0.05,P ＜ 0.01);化痰活血方组与三子养亲汤及桃红四物汤组比较,差异均有统计学意义(P ＜ 0.05,P ＜ 0.01)。模型组大鼠肺组织磷酸化p38 MAPK表达较正常对照组明显增加(P ＜ 0.01),各药物组磷酸化p38 MAPK表达下降,且化痰活血方组与三子养亲汤组、桃红四物汤组比较,差异均有统计学意义(P ＜ 0.05,P ＜ 0.01)。结论 三子养亲汤、桃红四物汤联用组成的化痰活血方对哮喘大鼠的治疗作用优于单用,可能与抑制p38 MAPK磷酸化,调节Th1/Th2平衡有关。     

固本防哮饮对支气管哮喘缓解期小鼠免疫失衡的影响

目的探讨固本防哮饮治疗支气管哮喘缓解期的可能作用机制。方法 36只BALB/c雌性小鼠随机分为正常组、模型组、孟鲁司特钠组、固本防哮饮预防组、固本防哮饮高剂量组及固本防哮饮等效剂量组,每组6只。除正常组外其余各组采用卵蛋白致敏、雾化联合呼吸道合胞病毒滴鼻诱导建立支气管哮喘缓解期小鼠模型。造模后正常组、模型组给予蒸馏水20 ml/kg灌胃,固本防哮饮等效剂量、高剂量组分别给予24、36 g/(kg·d)固本防哮饮灌胃,孟鲁司特钠组给予孟鲁司特钠片2. 6 mg/(kg·d)灌胃,每日1次,共28天。固本防哮饮预防组从致敏第1天给予24 g/(kg·d)的固本防哮饮每日灌胃1次,共83天。比较各组小鼠肺组织病理变化,采用实时定量PCR法检测肺组织中胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)、胸腺基质淋巴细胞生成素受体(TSLPR)、GATA3 mRNA表达,Western Blotting法检测TSLP、TSLPR、GATA3蛋白表达水平,酶联免疫吸附试验测定血清TSLP、TSLPR蛋白表达。结果病理学结果显示,正常组小鼠气道上皮平整,支气管管腔光滑,无明显炎性细胞浸润;模型组小鼠气道上皮不完整,肺泡壁增厚,同时气道黏膜层、黏膜下层以及血管周围组织可见大量炎性细胞浸润;固本防哮饮各治疗组和孟鲁司特钠组小鼠肺组织病理炎症均较模型组减轻,且各治疗组病理差异不明显。与正常组比较,模型组小鼠肺组织TSLP、TSLPR、GATA3 mRNA及蛋白表达显著升高(P 0. 05)。与模型组比较,各给药组小鼠肺组织TSLP、TSLPR、GATA3 mRNA及蛋白表达均不同程度降低(P 0. 05)。各组小鼠血清中TSLP、TSLPR蛋白表达差异无统计学意义(P 0. 05)。结论固本防哮饮可改善支气管哮喘缓解期的肺组织病理改变,其机制可能是抑制肺组织TSLP、TSLPR、GATA3表达,纠正肺组织Th1/Th2的偏移,从而调控机体的免疫功能。     

固本防哮饮对支气管哮喘模型小鼠肺组织炎症因子及STAT1蛋白表达的影响

目的探讨固本防哮饮防治支气管哮喘的可能作用机制。方法将70只BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组、孟鲁司特钠组和固本防哮饮低、中、高剂量组及固本防哮饮预防组,每组10只。除正常组外,其余各组小鼠采用卵蛋白致敏和激发联合呼吸道合胞病毒感染的方法,建立支气管哮喘模型。孟鲁司特钠组给予孟鲁司特钠片1.5 mg/(kg·d),固本防哮饮低、中、高剂量组分别给予固本防哮饮13.5、27.0、54.0 g/(kg·d),以上各组均于造模第56天开始灌胃给予相应药物,每天1次,连续28天。固本防哮饮预防组给予固本防哮饮13.5 g/(kg·d),于造模第1天开始灌胃,连续84天。取各组小鼠右肺中叶进行HE染色,检测肺组织白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA的表达及STAT1蛋白表达。结果 HE染色结果显示,模型组可见肺小叶正常结构破坏,肺泡壁明显增厚、充血、水肿及炎性细胞浸润,气道壁增厚,管腔狭窄;各药物组小鼠肺组织仅有轻度的炎性病变,较模型组明显减轻。与正常组比较,模型组小鼠肺组织STAT1蛋白及IL-6、IL-8、TNF-αmRNA表达水平显著升高(P0.05);与模型组比较,孟鲁司特钠组和固本防哮饮低、中、高剂量组及预防组小鼠肺组织中STAT1蛋白、IL-6、IL-8 mRNA表达明显降低(P0.05),孟鲁司特钠组和固本防哮饮中、高剂量组及预防组小鼠肺组织中TNF-αmRNA表达明显降低(P0.01)。结论固本防哮饮防治支气管哮喘可能与抑制肺组织中STAT1蛋白的活化,降低IL-6、IL-8、TNF-αmRNA的表达有关。     

清半夏多糖对过敏性哮喘模型大鼠肺组织MUC5AC mRNA的影响

目的:通过观察清半夏多糖对过敏性哮喘模型大鼠气道黏液分泌的作用,研究清半夏多糖为原药材发挥"燥湿化痰"功效"大分子"成分的物质作用基础。方法:SPF级Wistar大鼠60只,除正常组外,鸡卵清蛋白(OVA)与铝镁佐剂腹腔注射诱导致敏,OVA溶液雾化激发,建立过敏性哮喘大鼠模型。造模成功后大鼠随机平均分成5组,为过敏性哮喘模型组,阳性药组(孟鲁司特钠,5 mg·kg~(-1)),清半夏多糖高、中、低剂量组(400,200,100 mg·kg~(-1))。酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清、支气管肺泡灌洗液(BALF)上清液中白细胞介素-4(IL-4),γ-干扰素(IFN-γ)含量,BALF沉渣进行嗜酸性粒细胞(EOS)的计数检测;苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织病理改变,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肺组织黏蛋白5AC(MUC5AC) mRNA的表达。结果:与正常组比较,过敏性哮喘模型组大鼠血清IL-4含量显著升高(P 0. 01),IFN-γ含量显著降低(P 0. 01),BALF中EOS计数显著升高(P 0. 01);与过敏性哮喘模型组比较,孟鲁司特钠组、清半夏多糖高、中、低剂量组均能显著降低血清中IL-4的含量(P 0. 01),清半夏多糖高、中剂量组能显著降低BALF中IL-4的含量(P 0. 05,P 0. 01),清半夏多糖中剂量组能显著增高血清中IFN-γ的含量(P 0. 05),孟鲁司特钠组、清半夏多糖各剂量组均能显著降低BALF中的EOS计数(P 0. 01)。HE染色结果显示,过敏性哮喘模型组大鼠肺组织出现明显病理改变,孟鲁司特钠组、清半夏多糖各组具有缓解作用。与正常组比较,过敏性哮喘模型组大鼠肺组织的MUC5AC mRNA表达显著升高(P 0. 01);与过敏性哮喘模型组比较,孟鲁司特钠组、清半夏多糖高、中、低剂量组MUC5AC mRNA均显著降低(P 0. 01)。结论:清半夏的"大分子"成分清半夏多糖,可能是原药材清半夏发挥"燥湿化痰"功效的物质作用基础。     

三子养亲汤对哮喘小鼠气管平滑肌细胞IP3、DAG影响的实验研究

目的通过研究三子养亲汤对哮喘模型小鼠平滑肌细胞中三磷酸肌醇(Inositol triphosphate IP3)和二酰基甘油(Diacyl glycerol DAG)的影响研究,探研其作用机制。方法采用卵蛋白(OVA)腹腔注射致敏及OVA雾化激发造成哮喘小鼠模型,并给予三子养亲汤治疗,用酶联免疫法(ELISA法)检测各组小鼠气道平滑肌细胞中三磷酸肌醇(Inositol triphosphate IP3)和二酰基甘油(Diacyl glycerol DAG)的含量。结果三子养亲汤可降低小鼠平滑肌细胞上清液中IP3的表达。结论抑制IP3介导的炎症通路是三子养亲汤改善哮喘症状的可能机制。     

固本防哮饮对支气管哮喘缓解期小鼠嗜酸性粒细胞及黏液分泌相关因子的影响

目的探讨固本防哮饮治疗支气管哮喘缓解期的可能作用机制。方法 36只小鼠随机分为正常组、模型组、孟鲁司特钠组及固本防哮饮低、中、高剂量组,每组6只。除正常组外其余各组通过采用卵蛋白致敏和呼吸道合胞病毒滴鼻建立支气管哮喘缓解期模型。末次激发后,固本防哮饮低、中、高剂量组分别给予固本防哮饮溶液12、24、36 g/(kg·d),孟鲁司特钠组给予孟鲁司特钠片2.6 mg/(kg·d),正常组、模型组给予蒸馏水20 ml/(kg·d),每日灌胃1次,共28天。检测各组小鼠肺组织中CCL24、CCR3、Muc5ac mRNA表达及p-STAT6、CCR3蛋白表达。结果与正常组比较,模型组小鼠肺组织中CCR3、Muc5ac mRNA及p-STAT6、CCR3蛋白表达水平均升高(P0.05);与模型组比较,固本防哮饮高剂量组、孟鲁司特钠组均能降低CCL24、CCR3、Muc5ac mRNA及p-STAT6、CCR3蛋白表达水平(P0.05)。结论固本防哮饮可能通过抑制STAT6蛋白活化,影响CCL24/CCR3结合及Muc5ac表达,从而抑制嗜酸性粒细胞募集和黏液高分泌,达到治疗支气管哮喘缓解期的目的。     

平喘宣肺汤对支气管哮喘大鼠炎症因子及肺组织PKC、MMP-9表达的影响

目的:观察平喘宣肺汤对支气管哮喘大鼠气道炎症反应的影响。方法:选取SPF级SD大鼠,分为正常组、模型组、地塞米松组、自拟平喘宣肺汤高、中、低剂量组,每组10只,采用卵清白蛋白致敏及雾化吸入激发的方法建立大鼠支气管哮喘模型。实验结束后对大鼠肺组织灌洗液(BALF)EOS、NEU、LYM、MAC计数,ELISA方法测定大鼠肺组织的IL-1、IL-6、NF-α水平,Western-bloting方法检测大鼠肺组织PKC、MMP-9蛋白表达。结果:自拟平喘肺汤可以降低EOS、NEU、LYM、MAC比率,与模型组比较有显著性差异(P0.05),自拟平喘宣肺汤可降低大鼠血清IL-1、IL-6、NF-α水平,与模型组比较有显著性差异(P0.05),可以减少肺组织PKC、MMP-9蛋白表达,且具有剂量依赖性。结论:自拟平喘宣肺汤可有效减轻支气管哮喘大鼠的炎症反应,可能通过调控PKC、MMP-9蛋白表达相关。     

补肾平喘膏方对支气管哮喘大鼠Th17/Treg平衡的影响

目的观察支气管哮喘(哮喘)大鼠肺组织中维甲酸受体相关孤儿受体(RORγt)和叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Foxp3)的变化情况以及补肾平喘膏方对其的影响,以探讨补肾平喘膏方防治哮喘的作用机制。方法 60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、西药组、膏方预防组、膏方治疗组和膏方防治(预防+治疗)组,每组10只。除正常对照组外,其余各组大鼠以卵蛋白(OVA)致敏并诱发哮喘模型。采用地塞米松或膏方治疗(正常组与模型组除外)后,RT-PCR法检测肺组织中RORγt和Foxp3的mRNA表达情况。结果模型组肺组织Foxp3 mRNA表达低于正常组(P0.01),经膏方干预的各组大鼠肺组织Foxp3 mRNA表达升高(P0.05),与正常组表达相似(P0.05),膏方各组组间差异无统计学意义(P0.05)。模型组肺组织RORγt mRNA表达高于正常组(P0.01),经膏方干预的各组大鼠肺组织RORγt mRNA明显降低(P0.05),膏方各组组间差异无统计学意义(P0.05)。结论补肾平喘膏方可以通过调节哮喘大鼠RORγt/Foxp3平衡,改善Th17/Treg的失衡状态,从而防治哮喘。     

黄芪注射液对哮喘大鼠p38蛋白激酶和白细胞介素-4表达的影响

目的探讨支气管哮喘大鼠肺组织p38蛋白激酶(p38 MAPK)和白细胞介素-4(IL-4)表达的变化以及黄芪注射液对其影响。方法应用鸡卵清蛋白(OVA)腹腔注射致敏和反复超声雾化吸入刺激复制大鼠哮喘模型。随机分成3组:正常对照组,哮喘模型组和黄芪干预组。分别采用酶联免疫吸附法(ELISA)、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-4含量、肺组织IL-4 mRNA和磷酸化p38 MAPK表达的变化,并观察BALF中EOS计数以及肺组织病理学变化。结果哮喘模型组大鼠肺组织中IL-4 mRNA、磷酸化p38 MAPK表达水平及BALF中IL-4含量和EOS计数均较正常对照组显著增加(P<0.01);黄芪干预组的上述改变较哮喘模型组显著降低(P<0.01),肺组织病理学损伤程度明显减轻。肺组织磷酸化p38 MAPK表达水平与IL-4 mRNA表达、IL-4含量和EOS计数之间分别呈显著正相关(r=0.71,0.73,0.65,P<0.01)。结论 p38 MAPK可能参与了支气管哮喘的发病过程。黄芪对哮喘的治疗作用可能部分与抑制磷酸化p38 MAPK的表达和炎症介质IL-4产生有关。     

固本防哮饮对哮喘缓解期小鼠肺组织内质网应激相关凋亡基因CRT和EDEM的影响

目的:探讨中药复方固本防哮饮对哮喘缓解期小鼠肺组织内质网应激相关的凋亡基因CRT和EDEM的影响。方法:结合前期研究采用卵蛋白(OVA)致敏和OVA-呼吸道合胞病毒(RSV)联合诱导激发BALB/c雌性小鼠,建立哮喘缓解期动物模型,随机分为正常组,模型组,固本防哮饮低、中、高剂量组,孟鲁司特钠组及地塞米松组。Real-time PCR法检测肺组织中EDEM和CRT mRNA表达水平。结果:模型组小鼠肺组织中CRT表达显著高于正常组(P0.05);固本防哮饮高、中剂量组,孟鲁司特钠组及地塞米松组小鼠肺组织中CRT mRNA表达均显著低于模型组(P0.05),而EDEM在各组中表达无统计学意义(P0.05)。结论:固本防哮饮防治哮喘减轻慢性气道炎性反应的作用机制可能是通过抑制蛋白质未折叠反应相关的凋亡基因CRT表达所致。     

阳和平喘颗粒对支气管哮喘大鼠气道黏液高分泌的影响

目的探讨阳和平喘颗粒治疗支气管哮喘的可能作用机制。方法 90只SD大鼠随机分为正常组、哮喘模型组、地塞米松组和阳和平喘颗粒低、中、高剂量组,每组15只。采用卵蛋白(OVA)腹腔注射致敏及雾化吸入的方法建立哮喘大鼠模型,同时应用氢化可的松腹腔注射复制肾阳虚模型。实验第28天开始阳和平喘颗粒低、中、高剂量组大鼠分别按1.62、3.24和6.48 g/(kg·d)灌胃给药,地塞米松组按0.5 mg/(kg·d)灌胃给药,每日1次,连续给药2周;正常组、哮喘模型组以等量的生理盐水进行灌胃。采用HE染色和PAS染色分别检测肺组织病理学改变及气道黏蛋白分泌情况;Real-time PCR法检测肺组织黏蛋白5AC(MUC5AC)和黏蛋白5B(MUC5B)mRNA的表达水平;ELISA法检测肺泡灌洗液MUC5AC和MUC5B的水平变化。结果与正常组相比,哮喘模型组肺组织可见广泛炎症性细胞浸润、气道狭窄、肺泡腔增大、气道内黏蛋白的分泌量显著增多,MUC5AC和MUC5B蛋白及mRNA的表达水平升高(P0.01)。与哮喘模型组比较,阳和平喘颗粒低、中、高剂量组大鼠肺组织形态学结构明显改善、气道管腔大小明显恢复,同时MUC5AC和MUC5B蛋白及mRNA的表达水平下降(P0.01)。结论阳和平喘颗粒可能通过减少炎性细胞浸润和降低气道黏液蛋白分泌而达到治疗支气管哮喘的效果。