同时测定大鼠血清中大豆异黄酮及其代谢产物含量的液相色谱-串联质谱方法研究

目的:建立大鼠血清中大豆异黄酮及其代谢产物(染料木黄酮、大豆苷元、雌马酚)的液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)测定方法.方法:以芒柄花素为内标,血清中的大豆异黄酮酶解后经乙酸乙酯提取,进行HPLC-MS/MS测定.色谱柱为Zorbax Eclipse XDB-C18(150 mm×2.1 mm×5μm),流动相为甲醇-水,梯度洗脱,离子源为ESI(-),多反应临测(MRM)方式检测.结果:血清中染料木黄酮、大豆苷元和雌马酚在10～1000 ng/ml范围内线性良好,相关系数分别为0.9994、0.9959、0.9978.提取回收率范围为86.1%～103.0%,方法的准确性和精密度良好.结论:本方法操作简单、专属性强、灵敏度高、准确性好,可用于血清中大豆异黄酮代谢产物的测定.     

高效液相色谱法测定葛根类保健食品中葛根素、大豆苷、大豆苷元及染料木素

目的建立同时测定保健食品中葛根素、大豆苷、大豆苷元和染料木素含量的高效液相色谱测定法。方法选用PhenomenexLunaC18色谱柱（250mm×4．60mm,5μm）,甲醇一0．1％三氟乙酸（TFA）水溶液为流动相梯度洗脱,流速1．0ml／min,检测波长250nm。液相色谱仪测定。结果葛根素、大豆苷、大豆苷元和染料木素的质量浓度在0．1μg／ml～100μg／ml时与峰面积有良好线性关系,方法的回收率在90％一107％。结论高效液相色谱测定法简便、准确,重现性好,适用于含葛根素、大豆苷、大豆苷元和染料木素保健食品的质量控制。     

高效液相色谱法(HPLC)检测豆浆中大豆异黄酮含量的研究

目的建立一种豆浆中大豆异黄酮的检测方法,并对不同豆水比的豆浆前处理条件进行优化。方法采用高效液相色谱法检测豆浆中大豆异黄酮的含量,色谱柱为C18反相色谱柱(250 mm×4.6 mm,5.0μm),流动相为甲醇+0.20%醋酸水溶液1∶1(v∶v),柱温为30℃,流速为0.3m L/min,检测波长为260 nm,进样量为10μL。结果豆浆中的3种大豆异黄酮(大豆甙、染料木甙、大豆苷元)都能得到良好分离,其相关系数(r2)分别是0.999 4,0.999 7,1,各标准物质的加标回收试验中平均回收率分别为98.98%~104.44%,99.16%~104.42%,102.01%~106.65%,RSD分别在0.27~1.06之间。结论该方法准确、灵敏,适合于豆浆中大豆异黄酮的检测。     

应用高效液相色谱法测定保健食品中大豆异黄酮的含量

大豆异黄酮是一种从大豆中分离提取的植物雌性激素,具有抗氧化、改善心血管功能等功效。目前发现的大豆异黄酮分为游离型的苷元和结合型的糖苷2类,其中以染料木素和大豆苷元为主要活性成分。本实验通过研究用80％乙醇超声提取后,用水定容,采用高效色谱法测定大豆制品类保健食品中大豆异黄酮含量,方法回收率高,易于操作,满足检测要求。     

快速溶剂萃取-液相色谱法测定食品中大豆异黄酮的含量

目的建立一种同时测定食品中6种大豆异黄酮[大豆苷元(daidzein)、黄豆黄素(glycitein)、染料木素(genistein)、黄豆黄苷(glycitin)、大豆苷(daidzin)和染料木苷(genistin)]的快速溶剂萃取-高效液相色谱检测方法。方法样品经快速溶剂萃取仪萃取,采用phenomenex LunaC18柱,以0.05%三氟乙酸(TFA)溶液和乙腈为流动相梯度洗脱,二极管阵列检测器检测。结果连续7次测定6种大豆异黄酮,相对标准偏差为1.4%～5.9%。加标回收率82%～112%。在0.01～10μg/ml范围内线性关系良好、最低检出限10μg/kg。结论该方法操作简便,萃取液共存物质对测定方法干扰较小,仪器测定方法准确。适用于大豆异黄酮的检测。     

HPLC法同时测定葛根食品中葛根素,大豆苷,染料木苷,大豆素,染料木素的含量

目的:建立高效液相色谱法同时测定葛根食品中葛根素、大豆苷、染料木苷、大豆素、染料木素5种组分含量的方法。方法:选用Cosmosil C18-AR(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,采用甲醇和水为流动相,梯度洗脱,流速为1 ml/min,紫外检测波长为250 nm。结果:葛根素、大豆苷、染料木苷、大豆素、染料木素的线性范围分别是0.035μg～1.76μg(r=1.0000),0.051μg～0.20μg(r=0.9992),0.045μg～0.18μg(r=0.9992),0.047μg～0.18μg(r=0.9998),0.055μg～0.21μg(r=0.9997);平均加标回收率(n=6)分别为98.58%、110.38%、98.58%、100.04%、100.67%。结论:本方法提取简便,测定结果准确、可靠、灵敏度高、重现性及稳定性均较好,适用于同时测定葛根食品中以上5种组分的含量。     

高效液相色谱法测定保健食品中大豆异黄酮

目的：建立测定保健食品中大豆异黄酮含量的高效液相色谱法。方法：通过对流动相的优选，以甲醇：水=3：2为流动相，使染料木素、大豆苷元、大豆甙、染料木甙4种大豆异黄酮主要成分达到较好的分离效果，可分别测定4种成分含量及以此4种成分为主要成分的保健食品中大豆异黄酮含量。结果：方法的最低检出浓度分别为大豆甙1．9μg／ml、染料木甙1．2μg／ml、大豆苷元1．0μg／ml、染料木素0．8μg／ml；标准曲线线性范围分别为1．9—100μg／ml、1．2—100μg／ml、1．0—170μg／ml、0．8～140μg／ml；方法平均回收率分别为99．1％、98．5％、97．5％、98．8％；相对标准偏差均（10％。结论：建立的方法可准确、快速的测定大豆异黄酮的含量。     

大豆异黄酮摄入量估算值与尿液测定值相关性分析

[目的]本文评价膳食调查大豆异黄酮摄入量估算值与尿液中大豆异黄酮代谢物测定值之间的相关性。[方法]采用大豆食物频数问卷(SoyFFQ),对南京市不同社区共469名妇女大豆相关食品摄入量进行调查,利用美国食物成分数据,计算两种大豆异黄酮(染料木黄酮genistein和大豆苷元daidzein)每日摄入量;其中30名调查对象提供尿液样本,采用超高速液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)方法测定尿液中大豆异黄酮代谢物的浓度;采用高效液相(HPLC)方法测定部分大豆食品中染料木黄酮(genistein)和大豆苷元(daidzein)的含量。[结果]469名妇女膳食调查摄入量估算值:染料木黄酮(genistein):(50.7±31.6)mg/d,大豆苷元(daidzein):(33.4±35.9)mg/d;30份尿液中大豆异黄酮代谢物测定值:染料木黄酮(genistein):(515.9±674.5)μmol/mol,大豆苷元daidzein:(927.7±1107.2)μmol/mol。染料木黄酮(genistein)和大豆苷元(daidzein)膳食调查摄入量估算值与尿液中大豆异黄酮代谢物测定值相关系数分别为:0.59和0.57(P﹤0.05)。[结论]可以认为染料木黄酮(genistein)和大豆苷元(daidzein)摄入量估算值与尿液测定值具有相关性,为国内进行大豆异黄酮与乳腺癌发生风险的相关研究提供的可靠数据和方法。     

HPLC法测定双黄连合剂中黄芩苷含量

目的建立测定双黄连合剂中有效成分黄芩苷含量的有效方法。方法色谱柱为Waters C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇-水-冰醋酸(50∶50∶1,v/v/v),流速1.00 ml/min,进样量10μl,检测波长274 nm,柱温30℃。结果黄芩苷在53.295~532.950μg/ml(r=0.999 0)考察的线性范围内,线性关系良好,黄芩苷成分平均回收率95.35%(RSD=1.0%),符合含量测定要求。结论采用高效液相色谱法测定双黄连合剂中的黄芩苷成分,结果准确,方法操作简便,可将此方法用于双黄连合剂质量控制。     

保健食品中总黄酮醇苷测定方法研究

目的建立保健食品中总黄酮醇苷的酸水解-高效液相色谱测定方法。方法采用甲醇回流提取总黄酮醇苷,酸水解法水解为槲皮素、山柰素和异鼠李素3种苷元,用高效液相色谱仪测定3种苷元含量,计算总黄酮醇苷含量。结果甲醇-25%盐酸(4∶1)在85℃水浴中回流提取0.5 h能使样品完全水解。最佳色谱条件:ODS C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相:甲醇-0.6%磷酸溶液(47∶53),柱温:35℃,检测波长:360 nm。槲皮素在4.766~95.52μg/m L、山柰素在5.052~101.0μg/m L、异鼠李素在2.027~48.66μg/m L的浓度范围内,线性关系良好(r=0.999 1、0.999 4、0.999 4);测定样品的相对标准偏差(RSD)为0.57%;平均加标回收率分别为98.25%、99.81%和101.8%,回收率试验的RSD分别为3.82%、3.31%和4.86%;槲皮素、山柰素检出限为0.50μg,异鼠李素为0.80μg,总黄酮醇苷为4.52μg。同一份样品采用本方法测定的总黄酮醇苷含量低于采用《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)中方法测定的总黄酮含量。结论本方法简便、结果稳定、重复性强,可应用于保健食品中总黄酮醇苷的含量测定。     

高效液相法测定八宝坤顺丸中黄芩苷的含量

目的:建立测定八宝坤顺丸中黄芩苷含量的高效液项色谱(HPLC)法.方法:采用Elite-ODS(5μm,4.6mm×250 mm)色谱柱,流动相为甲醇-0.4%磷酸(体积比47:53);流速:1.0 mL·min-1,检测波长290nm,柱温为25℃.结果:在上述条件下,黄芩苷在0.1394μg~1.2546μg范围内与色谱峰面积之间线性关系良好,加样平均回收率为98.86%.结论:本方法准快速、简便、准确,可用于八宝坤顺丸中黄芩苷的HPLC测定.     

高效液相色谱法测定纳豆中6种大豆异黄酮的含量

目的建立高效液相色谱法(HPLC)同时测定纳豆中6种大豆异黄酮含量测定方法。方法通过考察不同的预处理方法,用正交试验设计确定最佳提取条件,优化色谱条件,建立HPLC的测定方法。色谱柱:Agilent Eclipse plus-C18(4.6mm×150mm,5μm);流动相:甲醇+0.5%乙酸梯度洗脱;流速1.0mL/min;检测波长254nm;柱温40℃。结果大豆苷、大豆黄苷、染料木苷、大豆素、大豆黄素和染料木素分别在8.2~82.0、8.3~83.0、8.0~80.0、8.2~82.0、8.6~86.0和8.0~80.0μg/mL范围内线性关系良好;检出限分别为0.037、0.034、0.028、0.019、0.026和0.025μg/mL;回收率95.5%~102.8%;测得纳豆中含有大豆苷1.35mg/g、大豆黄苷0.22mg/g、染料木苷0.96mg/g、大豆素0.17mg/g、大豆黄素0.12mg/g和染料木素0.25mg/g。结论 HPLC法快捷简便、准确可靠、灵敏度高,符合日常检测要求,为纳豆保健功能开发奠定基础。     

大豆异黄酮的测定方法研究

目的:检测大豆及其制品中黄豆甙、大黄豆甙、染料木甙、黄豆甙元、大黄豆素和金雀异黄素,建立大豆及其制品中6种大豆异黄酮的高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-PDA)检测方法。方法:保健食品、豆腐等样品中的大豆异黄酮直接用甲醇水(80+20,v/v)超声提取30 m in,定容过0.45μm滤膜后测定;豆粉和豆奶粉等样品中的大豆异黄酮及其酯类用甲醇水(80+20,v/v)超声提取,提取液经碱性皂化,将某些酯类转化成对应的大豆异黄酮,经盐酸中和,甲醇水(80+20,v/v)定容,过滤膜后测定;酱油和豆豉等样品超声提取30 m in,提取液经OASIS HLB柱去杂质,过0.45μm滤膜,进行液相色谱分析。样品中的6种大豆异黄酮用甲醇和醋酸铵(0.025 mol/L,pH 4.1)作流动相,流速2.0 m l/m in进行梯度洗脱,经250×4.6 mm粒径10μm C18柱分离,二极管阵列检测器(210~400 nm)测定。30 m in内6种大豆异黄酮可得到良好分离。结果:测定6种大豆异黄酮的平均加标回收率在86.7%~116%,加标回收相对标准偏差均小于8%,最底检出限量小于0.04μg。结论:本方法适用于大豆及其制品中大豆异黄酮的测定。     

高效液相色谱法测定保健食品中大豆异黄酮含量的方法改进

目的建立以改进的高效液相色谱法测定保健食品中大豆异黄酮含量的方法。方法固体样品经70%乙醇超生提取30 min,过滤膜后进行液相色谱测定,液体样品过滤后直接进行液相色谱测定。色谱柱：Agilent ZORB-AX SB-C18（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相：甲醇和1%磷酸水溶液梯度洗脱;流速：1.0 ml/min;柱温：30℃;二极管阵列检测器,定量波长254 nm。结果大豆苷、大豆黄素、染料木苷、大豆素、大豆黄苷、染料木素6种组分的回收率在97.5%～105.0%之间,RSD在0.46%～3.33%之间,6种组分检出限分别为0.60、0.57、0.26、0.28、0.55、0.27μg/ml。结论该方法简便、快速、重现性好。     

高效液相色谱法测定骨力片中淫羊藿苷的含量

目的建立高效液相谱对骨力片中淫羊藿苷含量测定的方法,为制剂的质量控制提供依据。方法以淫羊藿苷为含量测定指标,色谱柱Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm×5μm);流动相:乙腈-水(25∶75),流速:1.0 ml/min,检测波长:270 nm。结果淫羊藿苷的回归方程:y=1 259.462 5x-1.051 2,r=1.000 0,加标回收率为97.7%,RSD为0.74%。结论该方法具有样品处理简便、测定周期短、灵敏度高、重现性好、专属性强的特点,可以有效地控制骨力片的质量。     

HPLC法测定新生化颗粒中苦杏仁苷的含量

目的：建立新生化颗粒中苦杏仁苷含量测定的方法.方法：色谱柱为Agilent Eclipse XDB C18（250mm×4.6 mm,5μm）;以甲醇-水（20：80）为流动相;流速1.0mL/min;检测波长210nm;柱温30℃.结果：苦杏仁苷在7.1-113.6μg/mL范围内呈良好的线性关系（r=0.9993）,加样回收率为98.61%,RSD为0.72%（n=6）;结论：本方法简便、准确、重复性好,可用于新生化颗粒的质量控制。     

大豆苷元对大鼠骨形态学及生物力学影响

目的 探讨不同剂量大豆苷元对去卵巢大鼠骨组织形态学和骨生物力学的影响.方法 72只3月龄雌性SD大鼠随机分为6组,每组12只,分别为假手术组(Sham组)和5个卵巢切除术组.术后1周开始灌胃大豆苷元,连续灌胃6个月后处死大鼠,对各组大鼠股骨几何参数进行分析,并进行骨组织形态学观察和骨生物力学的测定.结果 去卵巢组大鼠骨小梁面积、骨小梁厚度、单位面积内的骨小梁数目均呈降低趋势,分别下降25.8%,8.09%.12.4%;骨生物力学性能下降,最大载荷(Fmax)和弹性载荷显著降低(P＜0.05).一定剂量大豆苷元[＞50m/(kg·bw)]能对上述指标有所改善,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 一定剂量大豆苷元[＞50mg/(kg·bw)]对去卵巢骨质疏松大鼠的骨组织形态学和生物力学有改善作用,使其骨量增加,骨结构改善.     

梯度洗脱法测定消炎片中黄芩苷的含量

目的建立梯度洗脱法对消炎片中黄芩苷进行含量测定,为提高制剂的质量控制提供依据。方法黄芩苷为含量测定指标,采用高效液相色谱法,色谱柱为Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm×5μm);以甲醇为流动相A;以0.4%磷酸溶液为流动相B,梯度洗脱;流速:1.0 ml/min,检测波长为280 nm。结果黄芩苷的回归方程:y=2 495.299 3x-0.836 0(r=1.000 00),加样回收率为97.30%,RSD为1.56%。结论该方法具有样品处理简便、测定周期短、灵敏度高、重现性好、专属性强的特点,可以有效控制消炎片的质量。     

异黄酮对前列腺癌细胞的激素受体基因表达的影响

[目的] 通过大豆异黄酮的活性物质染料木黄酮和大豆苷元抑制前列腺癌PG-3和LNCaP细胞增殖和对激素基因表达的影响，探讨大豆异黄酮治疗和预防前列腺癌的可能机制。[方法] 0、10、20、40、60、80和160μmol／L剂量组的染料木黄酮和大豆苷元处理前列腺癌细胞，细胞存活率用MTT方法检测，α雌激素受体(ERα)、β雌激素受体(ERβ)、雄激素受体(AR)和血管上皮生长因子(VEGF)等基因的mRNA表达用RT-PCR进行检测。[结果] 染料木黄酮和大豆苷元对PC-3、LNCaP细胞具有明显的抑制生长作用，在160μmol／L的浓度时，染料木黄酮、大豆苷元作用72h后，PC-3细胞的存活率分别为12．28％和44．88％，LNCaP细胞的存活率分别为25．48％和43．14％，其抑制效应具有时间和剂量依赖性，同时发现对．PC-3细胞的VEGF、ERα和ERβ基因表达下调，AR基因处理前后没有检测到；对LNCaP细胞的VEGF和AR基因表达下调，ERα和ERβ的表达并无影响。[结论] 大豆异黄酮能抑制前列腺癌细胞的增殖效应，存在时间和剂量效应关系，雌激素受体基因可能直接在大豆苷元抑制PC-3细胞的增殖中参与作用，而染料木黄酮抑制PC-3细胞和染料木黄酮及大豆苷元抑制LNCaP细胞可能主要是通过Akt通路影响VEGF和AR等基因而实现。     

化妆品中7种抗生素及地塞米松磷酸钠和水杨酸的高效液相色谱测定法

目的建立祛痘除螨类化妆品中7种抗生素、1种糖皮质激素(地塞米松磷酸钠)和水杨酸同时测定的高效液相色谱法.方法采用C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),以甲醇:乙腈:0.01 mol/L草酸=11:22:67(体积比)为流动相,流速为0.8 ml/min,检测波长为240和268 nm,柱温为25℃,在此色谱条件下进行检测.结果该方法各组分检出限为0.1～5 mg/L,线性范围为10～600mg/L,RSD≤2.58%,加标回收率为99.1%～126.3%.结论该法操作简便、准确、快速,能够检测祛痘除螨类化妆品中7种抗生素以及地塞米松磷酸钠和水杨酸的含量.