呼吸机相关肺炎患者病原菌分布及血清miR-146a、miR-155的检测分析

目的 探讨呼吸机相关肺炎(VAP)患者病原菌分布及血清微小RNA-146a(miR-146a)、miR-155表达水平及临床意义.方法 选择2018年12月-2021年4月在大连大学附属中山医院进行机械通气治疗的患者197例作为观察对象,其中符合VAP诊断标准的107例患者作为VAP组,未感染患者90例作为非VAP组,...     

miR-146a经TLR4/MyD88途径加速巨噬细胞迁移所致动脉硬化的作用机制

目的 探讨微小RNA-146a(miR-146a)经Toll样受体4(TLR4)/髓系分化因子88蛋白(MyD88)途径调控巨噬细胞迁移所致动脉硬化的具体机制。 方法 RAW264.7巨噬细胞分为空白组、ox-LDL组、miR-146a mimic组、miR-146a inhibitor组、shRNA-MyD88组、shRNA-NC组、shRNA-MyD88+miR-146a mimic组、shRNA-MyD88+miR-146a inhibitor组,除空白组,其他各组均用50 mg/L ox-LDL进行干预;采用Western blotting法检测TLR4、MyD88、核因子κB(NF-κB)、白细胞介素-6(IL-6)蛋白表达水平。采用qPCR法检测miR-146a、TLR4、MyD88、NF-κB、IL-6基因表达水平。采用Transwell法检测巨噬细胞迁移能力。 结果 (1)ox-LDL组细胞内TLR4、IL-6蛋白含量及巨噬细胞迁移率均高于空白组(P均<0.01),miR-146a低于空白组(P<0.01);(2)miR-146a mimic组细胞TLR4 mRNA相对表达量及蛋白含量、巨噬细胞迁移率低于ox-LDL组,miR-146a mRNA相对表达量高于ox-LDL组(P均<0.01);miR-146a inhibitor组细胞TLR4 mRNA相对表达量及蛋白含量、巨噬细胞迁移率高于ox-LDL组,miR-146a mRNA相对表达量低于ox-LDL组(P均<0.01);(3)shRNA-MyD88组MyD88、NF-κB、IL-6蛋白含量、巨噬细胞迁移率低于ox-LDL组(P<0.01),miR-146a、TLR4表达无明显差异(P>0.05);shRNA-MyD88+miR-146a mimic组miR-146a表达高于shRNA-MyD88组,TLR4蛋白含量低于shRNA-MyD88组(P<0.01),MyD88、NF-κB、IL-6蛋白含量表达、巨噬细胞迁移率与shRNA-MyD88组无明显差异(P>0.05);shRNA-MyD88+miR-146a inhibitor组miR-146a表达低于shRNA-MyD88组,TLR4蛋白含量表达高于shRNA-MyD88组(P<0.01),MyD88、NF-κB、IL-6蛋白含量表达、巨噬细胞迁移率与shRNA-MyD88组无明显差异(P>0.05)。 结论 miR-146a是动脉粥样硬化的保护性因子,通过拮抗TLR4/MyD88途径调控炎症因子分泌进而抑制巨噬细胞迁移所致动脉粥样硬化进程,为动脉粥样硬化的防治提供新的治疗靶点。     

miR-21和miR-146 a在癫痫患者中的表达及临床意义

目的 分析微小RNA-21(miR-21)和miR-146a在癫痫患者血清中的表达及临床意义.方法 选择2017年4月—2019年5月成都中医药大学附属第五人民医院/成都市第五人民医院神经内科诊治的癫痫患者99例作为癫痫组,选择同期在医院进行体检的健康者99例作为健康对照组.比较2组血清miR-21和miR-146a表...     

miR-23a、miR-146a在种植体周围炎龈沟液中的表达及临床意义

目的:探究miR-23a、miR-146a在种植体周围炎患者龈沟液中的表达水平及临床意义。方法:选取56例种植体周围炎患者作为种植体周围炎组,同时选取47例健康体检者作为对照组,检测所有受试者菌斑指数(PLI)、探诊深度(PD)、附着水平(CAL)、龈沟出血指数(SBI)。收集龈沟液并采用Elisa法检测其中白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)水平,采用实时定量PCR法分析其中miR-23a、miR-146a水平。结果:与对照组相比,种植体周围炎组龈沟液中miR-23a、miR-146a表达,TNF-α、IL-1β、IL-6水平,PD、CAL、PLI、SBI水平均显著升高(P<0.05)。miR-23a、miR-146a与TNF-α、IL-1β、IL-6、PD、CAL、PLI、SBI均呈显著正相关(P<0.05)。Logistic多因素回归分析表明,IL-6、PD、CAL、PLI、miR-23a、miR-146a均为影响种植体周围炎发生的独立危险因素。ROC分析显示,miR-23a诊断种植体周围炎的AUC为0.835(95%CI:0.762～0.914);miR-146a的AUC为0.865(95%CI:0.783～0.956)。结论:miR-23a、miR-146a在种植体周围炎患者龈沟液中表达上调与种植体周围炎炎症水平、疾病程度相关,在种植体周围炎发生中具有一定的预测价值。     

miR-181a与消化系统常见肿瘤关系的研究进展

消化系统肿瘤是严重影响人类健康的疾病,目前其发生发展、侵袭转移、化疗耐药等机制尚未明确。miR-181a是miRNA家族的重要一员,研究发现其在消化系统肿瘤的发生发展、侵袭转移等方面具有重要作用。故本文对miR-181a与消化系统肿瘤的关系作一综述,为探索消化系统肿瘤的发生发展及临床治疗提供一定的理论依据。     

脓毒症患者血浆miR-146a的表达及早期诊断

目的研究脓毒症患者血浆中miR-146a的表达,评价其对脓毒症早期诊断的价值。方法采集脓毒症患者(脓毒症组,30例)及同期进行体检的健康人员(健康对照组,20例)的血标本。采用实时荧光定量PCR(RTqPCR)检测血浆miR-146a水平;检测降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)水平,并记录APACHEⅡ评分。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价血浆miR-146a、PCT、CRP对脓毒症的预测价值;分析miR-146a的表达与PCT、CRP及APACHEⅡ评分的相关性。结果脓毒症组miR-146a的表达倍数明显高于健康对照组[(7.03±3.17)比(2.39±1.47),P<0.05],PCT及CRP含量、APACHEⅡ评分亦高于健康对照组(均P<0.05);且miR-146a与PCT、CRP及APACHEⅡ评分呈正相关(r分别为0.767、0.797、0.672)。miR-146a诊断脓毒症的敏感性和特异性分别为86.67%、45.00%,ROC曲线下面积(AUC)为0.898。结论血浆miR-146a对脓毒症的早期诊断指标具有较高的敏感性及特异性。 更多还原     

miR-146a在HepG2.2.15细胞中对c-Myc基因表达影响的研究

目的 构建has-miR-146a真核过表达载体pmR-146a,探究其在HepG2.2.15肝癌细胞中对c-Myc基因的表达调控作用.方法 PCR扩增has-miR-146a的前体基因片段(pre-has-miR-146a),双酶切后连接到pmR-mCherry载体上,通过菌落PCR、双酶切和测序验证重组载体的准确性;将重组载体转染到HepG2.2.15肝癌细胞中作为实验组,同时设空载体组(转染pmR-mCherry空质粒组),空白组(转染试剂Lipofectamin0 2000+ PBS),24、48 h后观察载体荧光蛋白表达量,qPCR检测各组细胞has-miR-146a表达情况;转染24、48 h后qPCR检测c-Myc基因mRNA表达量,48 h后Western blot检测c-Myc蛋白表达水平.结果 经菌落PCR、双酶切和测序证实,pre-has-miR-146a基因片段插入pmR-mCherry载体中;实验组和空载体组转染24、48 h荧光显微镜观察可见强荧光,与非荧光条件下作对比,转染效率在50％～60％;实验组has-miR-146a表达量明显高于空载体组和空白组(P＜0.01);转染24、48 h后实验组细胞c-Myc基因mRNA表达量较空载体组和空白组低(P＜0.05);转染48 h后,蛋白表达量较空载体组和空白组低(P＜0.01).结论成功构建has-miR-146a真核过表达载体pmR-has-146a,该重组载体可稳定表达has-miR-146a;has-miR-146a可以下调c-Myc癌基因的表达,可以作为治疗原发性肝癌的潜在靶点之一.     

微RNA-146a在风湿性疾病中的研究进展

微RNA(miRNA)作为一种高度保守的、内源性非编码小分子RNA,主要在转录后调节细胞增殖、分化、凋亡及免疫应答等重要生命过程。miR-146是第一个被发现的哺乳动物先天免疫及适应性免疫的调制器,miR-146a表达失调与风湿性疾病的发生及免疫调节异常密切相关。miR-146a作为miR-146家族中的一员,在风湿性疾病发病中的作用受到广泛关注,研究miR-146a在风湿性疾病中的作用机制有助于风湿性疾病的诊断与治疗。     

miR-146 a、sIL-2 R、hs-CRP在Hp相关性胃炎疗程中动态变化及意义

目的探讨微小RNA-146a(miR-146a)、可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)在幽门螺旋杆菌(Hp)相关性胃炎疗程中动态变化及意义。方法选取2021年2月至2022年2月开封市中心医院收治的166例Hp相关性胃炎患者为研究对象,根据治疗14 d后临床疗效将患者分为有效组(125例)和无效组(41例)。比较两组治疗前、治疗3 d、7 d、14 d后血清miR-146a、sIL-2R、hs-CRP水平,分析血清miR-146a、sIL-2R、hs-CRP水平间相关性和治疗3 d、7 d后血清各指标对治疗无效的危险度。结果治疗3 d、7 d、14 d后无效组血清miR-146a、sIL-2R、hs-CRP水平较有效组高(P<0.05);治疗3 d、7 d、14 d后血清miR-146a水平与sIL-2R、hs-CRP水平呈正相关,血清sIL-2R水平与hs-CRP水平呈正相关(P<0.05);Logistic回归分析显示,血清miR-146a、sIL-2R、hs-CRP水平是Hp相关性胃炎患者治疗无效的影响因素(P<0.05);治疗3 d、7 d后血清miR-146a、sIL-2R、hs-CRP高水平患者治疗无效的危险度高于低水平(P<0.05)。结论血清miR-146a、sIL-2R、hs-CRP水平可影响Hp相关性胃炎的疗效,动态监测其水平变化对临床治疗方案的制定起到指导作用。     

ox-LDL对巨噬细胞表达miRNA-155和miRNA-146a／b的影响

目的：探讨氧化低密度脂蛋白（ox—LDL）刺激对巨噬细胞表达miRNA-155和miRNA-146a／b的影响。方法：培养人巨噬细胞,随机分为三组：空白对照组、ox-LDL（10μg／mL）组和OX—LDL（20μg／mL）组,刺激6h后,收集细胞,实时定量PCR方法检测miRNA-155和miRNA—146a／b的表达。结果：OX—LDL刺激可以增加巨噬细胞表达miRNA-155和miRNA-146a／b,且呈浓度依赖性。结论：miRNA-155和miRNA-146a／b可能参与ox-LDL致动脉粥样硬化过程。     

慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者血清 microRNA-146a 水平及其临床意义

目的 探讨慢性阻塞性肺疾病急性加重期（AECOPD）患者血清miRNA-146a 水平及临床意义。 方法 选取2019 年1 月—2019 年12 月在杭州市西溪医院就诊的150 例AECOPD 患者作为AECOPD 组,同 期该院健康体检者150 例作为对照组。逆转录聚合酶连反应（RT-PCR）测定血清miRNA-146a 水平。测 定血清C 反应蛋白（CRP）、降钙素原（PCT）、白细胞介素-6（IL-6）和第一秒用力呼气容积（FEV1）、用 力肺活量（FVC）。结果 AECOPD 组血清miRNA-146a、CRP、PCT 及IL-6 水平高于对照组（P <0.05）。 AECOPD 组FEV1、FVC 及FEV1/FVC 值低于对照组（P <0.05）。不同肺功能分级患者血清miRNA-146a 水 平比较,差异有统计学意义（P <0.05）,随着肺功能分级升高,血清miRNA-146a 水平升高（P <0.05）。死 亡患者血清miRNA-146a 水平高于存活患者（P <0.05）。AECOPD 组血清miRNA-146a 水平与血清CRP、 PCT、IL-6 水平呈正相关（r =0.526、0.571 和0.543,P <0.05）;而与FEV1、FVC 及FEV1/FVC 呈负相关（r =-0.532、 -0.584 和-0.561,P <0.05）。结论 AECOPD 患者血清miRNA-146a 水平升高,血清miRNA-146a 水平与 患者炎症反应程度、肺功能、病情和预后的关系密切。     

lncRNA-MIAT对肿瘤相关巨噬细胞M2型极化的作用及其机制

目的：探讨lncRNA-MIAT对肿瘤相关巨噬细胞M2型极化的作用,并阐明其可能的作用机制。方法：体外培养THP-1细胞,将过表达（LV-MIAT）与下调lncRNA-MIAT表达（LVshMIAT）的慢病毒颗粒及空载体（LV-Vector）转染入THP-1细胞中,将THP-1细胞诱导活化为巨噬细胞,并采用Transwell共培养体系将活化后的巨噬细胞与骨肉瘤（OS） MG63细胞共培养,将上述共培养体系分为MG63+LV-Vector组（阳性对照组）、 MG63+LV-shMIAT组、 MG63+LVMIAT组和IL-4+LV-Vector组。检测各组THP-1细胞中lncRNA-MIAT表达水平,流式细胞术检测各组细胞中M2型巨噬细胞百分率,ELISA法检测各组THP-1细胞上清液中血管内皮生长因子（VEGF）、、白细胞介素4 (IL-10)和转化生长因子β1 (TGF-β1)水平,检测各组HUVEC中血管内皮细胞生长因子受体2 (VEGFR2)、Notch1和δ样蛋白4 (DLL4)表达水平。取各培养体系中的巨噬细胞与人脐静脉内皮血管细胞（HUVEC）共培养,EDU染色法检测各组...     

miRNA-146a在炎症与肿瘤之间的调节作用

越来越多的临床证据和研究显示,慢性感染和炎症可以导致癌变。其中,MicroRNA(miRNA)与炎症、肿瘤相关的信号转导通路具有密切的联系。miRNA是一种非编码的短链RNA,它在转录后水平调节多个靶基因的表达,进而参与机体诸多生理、病理过程。miRNA-146a更是今年来研究的热点,NF-κB依赖的miR-146a,在炎症与肿瘤之间可能具有桥梁作用;同时我们推测miR-146a对肿瘤相性巨噬细胞(TAM)的功能也有强烈的调控作用,miR-146a的过表达将有助于TAM对肿瘤的促发展作用。我们就miR-146a在炎症及肿瘤中调节作用的研究进展进行综述。     

乳腺癌患者血清中miRNA-21、miRNA-210、miRNA-1246 的表达及临床意义

目的 研究血清miRNA 在乳腺癌（BC）患者及正常人群血清中的表达情况及临床诊断中的价 值。方法 收集BC 患者及健康体检者血清,通过实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测各组miRNA-21、 miRNA-210、miRNA-1246 的表达情况。分析单个血清miRNA 及多个血清miRNA 联合检测对BC 的诊断价 值。结果 与健康体检者比较,BC 患者血清中miRNA-21、miRNA-210、miRNA-1246 表达均增加（均P = 0.000）,且3 者在BC III 期患者或有淋巴结转移的患者中高表达（P <0.05）。血清miRN-A21、miRNA-210、 miRNA-1246 诊断BC 患者的受试者工作特征曲线下面积（AUC）分别为0.936（95%CI ：0.866,0.976）、 0.980（95%CI ：0.928,0.998）、0.737（95%CI ：0.638,0.822）,特异性为0.854（95%CI ：0.722,0.939）、0.917 （95%CI ：0.857,0.995）、0.583（95%CI ：0.432,0.724）。且miRNA-210 和miRNA-1246 联合检测,miRNA-21、 miRNA-210 和miRNA-1246 联合检测的诊断效能并不优于miRNA-210 单独检测。Fisher 判别分析建立BC 的最佳诊断模型,该模型排除非患者的能力较好,而发现患者的能力相对较弱（敏感性为62.5% ;特异性为 100.0%）。结论 miRNA-21、miRNA-210、miRNA-1246 在BC 患者血清中高表达,miRNA-210 单独诊断效 能较好,血清miR-210 可能是一种理想的BC 诊断标志物。     

miRNA-34a对无血清培养诱导心肌细胞凋亡的影响及机制研究

目的：探讨miRNA-34a（miR-34a）对无血清培养诱导的大鼠心肌细胞凋亡及B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）表达水平的影响。方法体外培养大鼠心肌细胞H9C2,实验分实验组（转染miR-34a inhibitor）、空白对照组（无转染miR inhibitor）和阴性对照组（转染随机合成NC microRNA片段）。转染24h后无血清培养饥饿诱导细胞凋亡,Western bolt法检测Caspase-3及Bcl-2的表达。结果实验组细胞Caspase-3表达低于空白对照组和阴性对照组（P＜0.05）。Bcl-2表达明显高于空白对照组和阴性对照组（P＜0.05）。结论转染miR-34a inhibitor可以下调miR-34a的表达,减少无血清培养诱导H9C2细胞的凋亡,Bcl-2的表达增加可能参与了其保护机制。     

miRNA-449a在肺癌组织中的表达及其检测意义

目的探讨miRNA-449a在肺癌组织中的表达及其临床应用价值。方法收集右江族医学院附属医院2011年1月1日~2013年6月30日收治的58例肺癌患者为研究对象,采用反转录荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测miRNA-449a在肺癌组织和癌旁正常组织中的表达量,分析miRNA-449a与临床病理特征的关系,并采用荧光电子显微镜观察miRNA-449a模拟物对体外培养肺癌细胞株95D细胞凋亡的影响。结果鳞癌组和腺癌组miRNA-449a平均表达量均明显低于癌旁正常对照组(LSD-t=6.712,P=0.000;LSD-t=4.572,P=0.000),其相对表达量与瘤体大小(u=78.412,P=0.012)有关,与患者年龄(u=920.000,P=0.615)、性别(u=800.000,P=0.215)、病理类型(χ2=4.221,P=0.155)和临床分期(u=754.000,P=0.009)无关。与阴性对照组比较,miRNA-449a模拟物可明显促进肺癌细胞的凋亡,且呈剂量依赖性。结论 miRNA-449a在肺癌组织中呈低表达,可诱导肺癌细胞凋亡,发挥抑癌基因的作用,可能成为肺癌早期诊断与治疗的新分子靶标。     

microRNA-29a在结直肠癌组织中的表达及意义

目的 探讨microRNA-29a（miR-29a）在结直肠癌组织中的表达,以及miR-29a反义寡核苷酸对结直肠癌细胞增殖和侵袭的影响。方法 选取行手术治疗的初诊结直肠癌患者195例,利用实时荧光定量聚合酶链反应检测结直肠癌和癌旁组织中miR-29a表达,培养人结直肠癌LoVo细胞,随机分为ASO-miR-29a组、ASO-对照序列组和空白对照组,检测各组细胞中miR-29a表达,MTT法检测各组细胞增殖能力,Transwell小室检测各组细胞迁移和侵袭能力。结果 结直肠癌组织miR-29a相对表达量为（1.93±0.19）,癌旁组织为（1.26±0.12）,两者比较差异有统计学意义（P?<0.05）;结直肠癌组织中miR-29a相对表达量与TNM分期和淋巴结转移有关（P?<0.05）,多元线性回归分析结果显示,TNM分期和淋巴结转移是影响结直肠癌组织中miR-29a表达的因素（P?<0.05）;ASO-miR-29a组细胞中miR-29a相对表达量低于ASO-对照序列组和空白对照组（P?<0.05）;MTT实验结果显示,ASO-miR-29a组与ASO-对照序列组和空白对照组相比吸光度值降低（P?<0.05）;与ASO-对照序列组和空白对照组比较,ASO-miR-29a 组迁移细胞数和侵袭细胞数均减少（P?<0.05）。结论 miR-29a在结直肠癌组织中呈高表达,参与结直肠癌发生、进展过程,特异性抑制结直肠癌细胞中miR-29a表达可减少细胞增殖,抑制细胞迁移和侵袭能力。     

miR-146a在乳腺浸润性导管癌中的表达及临床意义

目的观察microRNA-146a（miR-146a）在乳腺浸润性导管癌及癌旁正常对照组织中的表达,探讨miR-146a的表达与乳腺癌临床病理特征的关系及其对乳腺癌发生发展的影响。方法采用组织芯片平台,应用原位杂交方法检测65例乳腺浸润导管癌及癌旁正常对照组织中miR-146a的表达。结果乳腺浸润性导管癌miR-146a阳性率低于癌旁正常对照组织（44.6%vs 66.2%,P〈0.05）;乳腺浸润性导管癌中miR-146a的表达与淋巴结转移有关联（P〈0.01）,与患者年龄、肿瘤大小、组织学分级、TNM分期、ER、PR、c-erbB-2、ki67、p53、E-cadherin过表达均无相关性（P〉0.05）。结论 miR-146a在乳腺浸润性导管癌中表达下调,提示其可能作为重要的抑癌因子参与乳腺癌的发生发展过程,并可能成为乳腺癌新的肿瘤标记物或预后因子。