蛋白激酶C抑制剂对SACC—83系P21^ras,c—mys表达的影响

本实验采用ＰＫＣ抑制剂Ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ作用于ＳＡＣＣ－８３系,观察对Ｐ２１＾ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ表达的影响,结果表明,Ｓｔａｕｒｏｐｏｒｉｎｅ可明显降低Ｈ－ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ表达程度,这提示ＰＫＣ对ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ基因表达具有调控作用,ＰＫＣ抑制剂可能通过调控癌基因的表达来表现抗肿瘤作用的。     

口腔白斑和鳞癌中P_(53)、C-myc基因的免疫组化研究

本实验应用免疫组化－链霉素抗生物素蛋白－过氧化酶连接法（ＳＰ）对正常口腔粘膜、白斑和鳞癌中Ｐ５３、Ｃ－ｍｙｃ基因的表达进行研究．结果表明：正常粘膜无一例阳性；轻、中、重度异常增生白斑和鳞癌Ｐ５３蛋白表达率为１２．５％，２５．０％，３３．３％和５０．０％；Ｃ－ｍｙｃ表达率为０．０％，１２．５％，１６．７％和２３．３％．白斑和鳞癌间Ｐ５３变化有显著性差异，Ｃ－ｍｙｃ表达无显著性差异．此两基因的表达与鳞癌有否淋巴结转移无关，且在鳞癌发生中有协同作用     

nm23基因在涎腺腺样囊性癌中的表达及其与肺转移的关系

为探讨肿瘤转移抑制基因ｎｍ２３与涎腺腺样囊性癌（ａｄｅｎｏｉｄｃｙｓｔｉｃｃａｒｃｉｎｏｍａ，ＡＣＣ）的关系，应用ＬＳＡＢ免疫组化染色方法，研究ｎｍ２３表达产物二磷酸核苷激酶（ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｄｉｐｈｏｓｐｈａｔｅｋｉ－ｎａｓｅ，ＮＤＰＫ）在ＡＣＣ中的表达。结果：ＮＤＰＫ／ｎｍ２３在ＡＣＣ中有较高表达，阳性率为６４．０％（１６／２５）；其中，有肺转移者阳性率为１２．５％（１／８），无肺转移者阳性率为８８．２％（１５／１７），差异有极显著性（Ｐ＜０．０１）；ＮＤＰＫ表达与临床分期有关，分期越高，阳性率越低，差异有显著性（Ｐ＜０．０５），与病理分型差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。结论：ｎｍ２３基因在人ＡＣＣ肺转移过程中起到抑制转移的作用，可作为临床颈侧ＡＣＣ患者转移和预后的指标。     

蛋白激酶C亚型在涎腺腺样囊性癌中的表达

目的：探讨蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）与涎腺腺样囊性癌（ＳＡＣＣ）发生发展的关系。方法：采用Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔｔｉｎｇ技术对ＰＫＣ５种亚型α,βⅠ,βⅡ,ε,δ在该肿瘤亚细胞水平的表达进行研究。结果：（１）ＳＡＣＣ及临近正常组织胞浆中均可见ＰＫＣ－α、ＰＫＣ－βⅠ,ＰＫＣ－βⅡ的表达,与临近正常组织相比,肿瘤组织胞浆中上述３种ＰＫＣ亚型表达明显降低（Ｐ〈０．０１）;（２）临近正常组织胞膜中未见ＰＫＣ     

nm23基因在涎腺腺体囊性癌中的表达及其与肺转移的关系

为探讨肿瘤转移抑制基因ｎｍ２３与涎腺腺性囊性癌（ａｄｅｎｏｉｄｃｙｓｉｔｃｃａｒｃｉｎｏｍａ，ＡＣＣ）的关系，应用ＬＳＡＢ免疫组化染色方法，研究ｎｍ２３表达产物二磷酸核苷激酶（ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｄｉｐｈｏｓｐａｔｅｋｉｎａｓｅ，ＮＤＰＫ）在ＡＣＣ中的表达，结果：ＮＤＰＫ／ｎｍ２３在ＡＣＣ中较高表达，阳性率为６４．０％（１６／２５）；其中，在肺转移者阳性率为１２．５％（１／８）无肺转移阳性率为８８     

c-myc反义寡核苷酸对粘液表皮样癌细胞生长的抑制作用

目的：探讨ｃ－ｍｙｃ基因的反义寡核苷酸（ＡＳＯＤＮ）在涎腺粘液表皮样癌基因治疗中的作用。方法：人工合成与ｃ－ｍｙｃ基因第二外显子翻译起始区序列互补的寡核苷酸,处理培养的人涎腺粘液表皮样癌ＭＥＣ－１细胞。应用ＭＴＴ比色法观察其对细胞增殖的影响;流式细胞仪检测对细胞周期的影响;并采用免疫组化法检测Ｃ－ＭＹＣ蛋白的表达。结果：ｃ－ｍｙｃ反义寡核苷酸能抑制粘液表皮样癌ＭＥＣ－１细胞的增殖,抑制作用具有浓度     

牙齿发育中c-myc mRNA转录及蛋白表达的意义

目的：观察牙胚发育过程中ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ转录及蛋白表达的变化,探讨ｃ－ｍｙｃ基因在牙齿发育中的作用。方法：利用原位杂交技术、免疫组织化学技术检测ＳＤ大鼠牙胚发育不同ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ转录及蛋白的表达情况。结果：ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ及蛋白的表达在蕾状和帽状期明显,钟状期减弱,而牙体组织形成期成釉细胞、成本本质细胞及间充质牙乳头细胞表达又增强。ｃ－ｍｙｃ蛋白表达和分布与ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ转录基     

口腔癌及癌前病变中C-myc癌基因与Rb抗癌基因表达的意义

目的 研究Ｃ－ｍｙｃ癌基因与ｒｂ抗癌基因在口腔癌的发生及癌前病变恶心为过程中的意义。方法 采用流式免疫荧光技术对４０例口腔鳞状细胞癌,１０例口腔白斑和１４例口腔扁平苔藓中Ｃ－ｍｙｃ和Ｒｂ基因蛋白的表达量进行量研究。结果 Ｃ－ｍｙｃ癌基因在口腔癌、白斑、扁平苔藓中表达的阳性分别为６５％、３０％和２１％。在Ｃ－ｍｙｃ癌基因的平均表达量中,口腔癌明显高于白斑和扁平苔藓,差异均有显著性（Ｐ〈０．０５和Ｐ〈     

涎腺良恶性多形性腺瘤中癌基因C—myc表达的斑点杂交研究

目的 探讨癌基因Ｃ－ｍｙｃ的改变与良恶性多形性腺瘤发生的关系。方法 采用斑点杂交研究４２例涎腺良恶性多形性腺瘤中Ｃ－ｍｙｃ癌基因的表达。结果 涎腺多形性腺瘤中Ｃ－ｍｙｃ癌基因表达均值高于正常腮腺组织（Ｐ〈０．０５）。结论 在涎腺良恶性多形性腺瘤的发生过程中,Ｃ－ｍｙｃ癌基因有激活和过量表达。     

c-myc基因在牙齿发育中对细胞凋亡的调控研究

观察牙齿发育过程中ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ转录和蛋白表达凋亡的发生情况,探讨ｃ－ｍｙｃ基因在牙齿发育中对细胞凋亡的可能作用。方法利用原位末端标记法、原位杂交及免疫组织化学技术分别对ＳＤ大鼠牙胚发育不同时期ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ、蛋白的表达及细胞凋亡情况进行检测。结果在牙齿发育的各期成釉器及间充质细胞中均有ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ,     

rasP21与P53在涎腺多形性腺瘤中表达的定量研究

为探讨涎腺良、恶性多形性腺瘤中ｒａｓＰ２１与Ｐ５３癌基因在该瘤生物学行为中的作用，作者采用流式细胞术和细胞免疫荧光染色技术，对ｒａｓＰ２１与Ｐ５３基因蛋白的表达量进行定量研究。结果发现，在良恶性多形性腺瘤中，ｒａｓＰ２１表达率分别为７８％和１００％；Ｐ５３表达率分别为８１％和１００％。正常腮腺组织不表达ｒａｓＰ２１与Ｐ５３。各组表达量之间差异有极显著性（Ｐ＜０．００１）。实验结果表明，ｒａｓ癌基因的激活与Ｐ５３基因突变可能在多形性腺瘤的发生及恶变过程中具有重要作用。     

芦荟大黄素抑制人口腔癌KB细胞增殖和迁移的双重效应及其机制研究

目的 探讨芦荟大黄素抑制人口腔癌细胞生长和迁移的双重效应及其机制.方法 对人口腔上皮癌KB细胞分别用2.5、5、10、20和40 μmol/L的芦荟大黄素处理,对照组为含0.1%二甲基亚砜的培养液,分别用结晶紫实验和划痕损伤愈合迁移实验分析长效抗增殖作用和抗迁移效应,并用Western blotting方法 检测蛋白激酶Ca和c-myc蛋白水平的变化.结果 芦荟大黄素能长时间抑制KB细胞的生长;划痕损伤愈合迁移实验结果 显示,药物处理3 d后进入划痕区域的细胞数为(6.2±0.2)个/mm2,而对照组为(33.5±0.4)个/mm2,差异有统计学意义(P＜0.05);对照组细胞抑制蛋白激酶Ca和c-myc的水平较高,经芦荟大黄素处理后,均以剂量依赖方式下降.结论 芦荟大黄素的抗增殖和抗迁移活性与抑制蛋白激酶C信号传导途径有关.     

ras癌基因产物P21在涎腺腺样囊性癌与腺淋巴瘤中的表达意义

目的　通过对涎腺腺样囊性癌与腺淋巴瘤中的ras 癌基因产物P21 蛋白的表达研究, 探讨ras 癌基因与涎腺恶性肿瘤的关系。方法　采用免疫组化S- P 法对25 例腺样囊性癌与22 例腺淋巴瘤中ras- P21 蛋白表达状况行了检测。结果　腺样囊性癌阳性表达率为92 % (23/25) , 腺淋巴瘤阳性率为22 .7 % (5/22) 。经χ2 检验二者阳性率差异有非常显著意义( P< 0 .005) 。结论　腺样囊性癌的发病与ras 癌基因的激活有密切关系。     

绞股蓝影响白斑癌变过程中Ha-ras基因突变的实验研究

目的 观察绞股蓝对白斑癌变过程中Ｈａ－ｒａｓ癌基因突变的影响,从分子水平探讨绞股莉防癌、抑癌的机理,并对Ｈａ－ｒａｓ基因与白斑癌变动态变化过程的关系进行研究。方法 采用聚合酶链反应－单链构象多态性分析法,检测经绞股蓝总甙、甙元、Ｃ２０－ＯＨ皂甙等处理的的金地鼠颊囊白斑癌变模型标本,观察Ｈａ－ｒａｓ基因含第６１位密码子突变的阳性信号。结果 白斑癌变模型组突变率达２２．９６％,绞股蓝处理平均为７．５９     

ras p21癌基因在涎腺肿瘤中表达的定量研究

目的为了探明ｒａｓＰ２１癌基因在涎腺良恶性肿瘤生物学行为中的作用,方法 采用ＬＳＡ免疫组化染色及ＣＭＩＡＳＷＩＮ免疫组化图像分析系统,镜下定量判断正常涎腺,良恶性肿瘤ｒａｓＰ２１癌基因表达的阳性单位（ＰＵ值）,通过ｔ检验和方差分析。结果 正常涎腺组,良性肿瘤组,恶性肿瘤组均有ｒａｓＰ２１表达,良恶性肿瘤组Ｐ值明显高于正常组（Ｐ〈０．０１）,胞浆中ＰＵ值明显强于胞核,阳性细胞最多见于腺管样区,恶性肿     

Enhancement of cellular transforming activities of truncated EJ c-H-ras-1 with viral enhancers or with c-myc

The 2.9kb Sac I fragment (EJ2.9), which lacks the previously reported promoter/enhancers of the activated human c-H-ras-1, was used to study the interaction with the tumor virus promoter/enhancers or with the activated c-myc. When EJ2.9 constructs linked to the viral promoter/enhancers or to a viral enhancer even in the antisense orientation was transfected to the mouse cells, 16-39% of the foci induced with those linked in the sense orientation were formed. Further, the transforming activity decreased dramatically when the deletion was introduced from the upstream Sac I site to the 61 bases (-61) upstream of translational initiation codon, but the deletions to -144 did not significantly change the activity. Cotransfections with the activated c-myc were found also to enhance the transforming activity of EJ2.9 constructs either with or without the LTR linked in the antisense orientation. The transfected ras and myc were expressed as 1.2 and 2.5kb mRNAs, respectively, in each transformant. The in vitro mutagenesis suggested that the c-myc protein was involved in the enhancement. These results raise the possibility that the viral enhancers activate a cryptic promoter (s) within the region between -1 and -144 of p21 initiation codon by interacting with the region between -61 and -144 and that the c-myc protein also activates the same or different cryptic promoter(s) within the intron 0 or noncoding region of exon I, thus leading to the enhancement of the EJ2.9 transforming activity.     

RAS oncogene product expression in normal and malignant oral mucosa

Proto-oncogenes are important in both normal cellular differentiation and in carcinogenesis. The majority of transforming genes belong to the ras family and the ras gene product has been shown to be elevated in some oral carcinomas. RAP-5 monoclonal antibody was used to determine the expression of the p21ras protein in normal and neoplastic oral mucosa in an immunohistological study. The expression of p21ras protein was generally restricted to acanthous cells with strong staining in normal oral mucosa and well-differentiated carcinomas. In contrast, the p21ras protein was not detected in significant amounts in severely dysplastic lesions and poorly differentiated carcinomas. These results suggest that expression of p21ras is a normal feature of more fully differentiated tissues, both normal and neoplastic, and is not useful as an indicator of cell proliferation or 'malignant potential'.     

上调Decorin对口腔鳞癌荷瘤裸鼠EGFR、C-Myc、p21表达的影响

目的: 探讨饰胶蛋白聚糖基因（decorin,DCN）过表达对口腔鳞癌（oral squamous cell carcinoma,OSCC）裸鼠荷瘤中表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）、骨髓细胞瘤病毒癌基因（cellular-myelocytomatosis viral oncogene,C-Myc）和细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂（cyclin dependent kinase inhibitor,p21）表达水平的影响。方法: 通过脂质体转染法上调人口腔鳞癌细胞（HSC-3）中DCN基因的表达,使用裸鼠作为OSCC疾病模型构建载体,建立OSCC裸鼠荷瘤模型。H-E法确定各组裸鼠荷瘤组织的病理分级,免疫组织化学染色检测DCN过表达后各组裸鼠荷瘤组织中EGFR、C-Myc和p21蛋白的表达差异,RT-qPCR及Western印迹定量检测DCN过表达后各组裸鼠荷瘤组织中EGFR、C-Myc和p21在转录水平和蛋白水平上的表达差异,明确DCN过表达对OSCC裸鼠荷瘤组织中EGFR、C-Myc和p21表达的影响。采用SPSS 20.0软件包对数据进行统计学分析。结果: H-E染色结果显示,OSCC动物疾病模型构建成功。重量分析结果显示,质粒组裸鼠荷瘤组织轻于空载组和未转染组（P<0.05）。IHC结果显示,DCN、EGFR、C-Myc和p21蛋白在各组裸鼠荷瘤组织中均有表达,质粒组中DCN、EGFR和C-Myc蛋白的表达水平差异有统计学意义（P<0.05）,各组中p21蛋白的表达水平无统计学差异（P>0.05）。RT-qPCR和Western印迹结果显示,DCN、EGFR、C-Myc和p21在各组裸鼠荷瘤组织中均有不同程度表达（P<0.05）。结论: 上调DCN可抑制OSCC裸鼠荷瘤的生长。在OSCC裸鼠荷瘤组织中,DCN过表达下调EGFR及C-Myc的表达,上调p21的表达。DCN可能通过以上机制调节OSCC的发生、发展,发挥抑癌作用。     

Inductive effect of Porphyromonas gingivalis fimbriae on differentiation of human monocytic tumor cell line U937

This study used the human monocytic tumor cell line U937 to examine whether Porphyromonas gingivalis fimbriae induce differentiation of monocyte/macro-phage progenitors. When the progenitor cells were incubated with P. gingivalis fimbriaè, the incubation resulted in increased Fc rosette formation and increased CDllb production by the cells. The presence of a protein kinase C inhibitor, H7 or calphostin C, in the medium eliminated the stimulatory effects of P. gingivalis fimbriae on Fc rosette formation. Furthermore, CD11b expression was inhibited by calphostin C. In contrast, HA1004, an inhibitor of cyclic nucleotide-dependent protein kinase, had no effect on P. gingivalis fimbriae-induced Fc rosette formation or CD11b expression. These results demonstrate that P. gingivalis fimbriae are a potent inducer of the differentiation of the monocyte/macrophage tumor cell line U937, most probably via cyclic nucleotide-independent protein kinase C.     

不同癌基因在口腔白斑和鳞癌中表达的研究

目的 研究正常口腔黏膜，口腔黏膜白斑及口腔鳞癌组织中不同癌基因的表达。方法 通过HE染色确定口腔黏膜组织类型，提取组织中RNA，采用RT－PCR的方法研究不同组织中c-myc、ras、cyclinD1及bcl-2基因的表达。结果 正常口腔黏膜中未见c-myc、ras、cyclinD1及bcl-2基因表达；轻、中、重度异常增生白斑和鳞癌组织中c-myc、ras、cyclinD1及bcl-2基因表达显著增加。结论 c-myc、ras、cyclinD1及bcl-2基因的表达增加与口腔黏膜白斑及鳞癌的发生相关。