黄体酮对鼠脑外伤后脑组织炎性信号因子表达的干预作用

目的观察黄体酮对脑外伤后脑组织内炎症反应信号转导因子核因子-κB（NF-κB）、炎症细胞因子子如瘤坏死因子（TNF-α）和白介素-1β（IL—1β）水平的影响，探讨其对创伤性脑外伤（TBI）继发性脑损伤的保护作用及可能的作用机制。方法采用Freeney法造成大鼠脑挫裂伤模型，在伤后1、3、5、7天不同时相点用ELISA法、免疫组化法分别检测4组大鼠脑组织中NF-κB、TNF-α、IL-1β水平的变化。结果伤后注射黄体酮治疗组脑组织NF—κB、TNF—α、IL-1β3种炎性因子水平均比脑创伤组低（P〈0.05）。结论注射黄体酮能降低脑外伤后炎性信号因子表达，减轻脑外伤后脑组织的炎症反应，对脑组织起一定的保护作用。     

黄体酮对大鼠脑外伤后皮层Toll样受体和核因子-κB表达的影响

目的 探讨黄体酮对创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)后脑皮层中Toll样受体(toll-like receptors,TLR)和核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)表达的调控作用.方法 雄性Wistar大鼠18只,随机分为对照组、创伤组和黄体酮治疗组,采用自由落体撞击致重型颅脑损伤,黄体酮注射剂量为16 mg/kg,连续注射5 d,伤后第5天处死动物,取脑挫裂伤周围区脑皮层标本,分别测定TLR2、TLR4的mRNA表达和NF-κB结合活性.结果 与对照组相比,创伤组TLR2、TLR4的mRNA水平和NF-κB活性明显上调(P＜0.01);黄体酮治疗组中,TLR2、TLR4和NF-κB活性显著下降(P＜0.01).结论 黄体酮能够抑制TBI后皮层中TLR2、TLR4和NF-κB的表达,这可能是黄体酮实现神经保护作用的机制之一.     

黄体酮对鼠脑外伤后脑组织炎性信号因子表达的干预作用

目的 观察黄体酮对脑外伤后脑组织内炎症反应信号转导因子核因子-κB(NF-κB)、炎症细胞因子如肿瘤坏死因子(TNF-α)和白介素-1β(IL-1β)水平的影响,探讨其对创伤性脑外伤(TBI)继发性脑损伤的保护作用及可能的作用机制.方法 采用Freeney法造成大鼠脑挫裂伤模型,在伤后1、3、5、7天不同时相点用ELISA法、免疫组化法分别检测4组大鼠脑组织中NF-κB、TNF-α、IL-1β水平的变化.结果 伤后注射黄体酮治疗组脑组织NF-κB、TNF-α、IL-1β 3种炎性因子水平均比脑创伤组低(P＜0.05).结论 注射黄体酮能降低脑外伤后炎性信号因子表达,减轻脑外伤后脑组织的炎症反应,对脑组织起一定的保护作用.     

黄体酮对大鼠脑损伤后脂质过氧化的抑制作用

脂质过氧化在创伤性脑损伤（traumatic brain injury，TBI）的发病机制中起到重要作用。而黄体酮已被许多实验证明具有神经保护作用，可以减轻脑水肿、促进神经功能的恢复。笔者通过检测脑组织中8-异前列腺素F2α（8-isoprostagladin F2α，8-iso PGF2α）和硫代巴比妥酸反应物质（thiobarbituric acid reactive substances，TBARS）来观察黄体酮是否可以减轻脑损伤后的脂质过氧化反应。     

核因子-κB及其在创伤后炎症反应中的作用

核因子-κB(NF-κB)是调控炎症细胞因子基因表达的主要转录调控因子之一,在创伤后的炎症反应中发挥着重要的作用。机体受到创伤后,NF-κB被激活,从胞浆中进入到细胞核内,结合到被诱导基因启动子序列上的κB位点,诱导基因转录,合成各种炎症细胞因子,引起局部乃至全身的炎症反应,并且通过反馈环路导致炎症过程的放大和持续。NF-κB抑制剂可阻断NF-κB的激活而具显著的治疗应用价值。     

创伤性脑损伤后脑组织核因子-κB和基质金属蛋白酶-9的表达

目的 研究创伤性脑损伤（TBI）后损伤区脑组织核因子κB（NF-κB）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的表达,探讨其在继发性脑损害中的作用机制。方法 采用自由落体撞击法造成大鼠右侧顶叶脑挫裂伤,Wistar大鼠随机分为对照组、伤后3、12、24、72小时和7天组。采用EMSA测定NF-κB的活性,免疫组化测定MMP-9的表达。结果 TBI后NF-κB的活性和MMP-9的表达逐渐增强,至伤后72小时达高峰,伤后7大仍保持任较高水平。NF-κB和MMP-9任表达时相和强度上呈正相关关系。MMP-9表达阳性细胞包括血管内皮细胞、神经胶质细胞和少数神经元细胞及侵入的中性粒细胞。结论 TBI可引起损伤区脑组织NF-κB活性和MMP-9的表达明显增强,可能在脑组织的继发性损害中起重要作用。     

大鼠放射性脑损伤模型中核转录因子-κB表达的动态变化规律

目的 探讨放射性脑损伤发生过程中核转录因子-κB(NF-κB)的表达变化。方法 健康SD大鼠82只,按随机数字表法分为健康对照组(32只,给予相同的麻醉但不照射)和照射组(50只,单次全脑照射20 Gy建立放射性脑损伤模型),分别于照射后1、3、7、14、28 d处死,断头取脑。通过实时荧光定量反转录聚合酶链反应(QRT-PCR)检测NF-κB mRNA表达变化,用ELISA及Western blot检测NF-κB蛋白质表达情况,免疫组织化学染色观察NF-κB蛋白在海马区域的定位表达情况。结果 照射组NF-κB mRNA水平在照后开始升高,第3天达到表达高峰,其中第3、7天表达量与健康对照组相比,差异有统计学意义(t=37.79、35.30,P<0.05)。NF-κB蛋白的表达在照后第1天即达最高峰,随后开始逐渐下降,至照后第28天恢复正常水平。ELISA结果显示,与健康对照组相比,受照后第1、3、7、14天蛋白表达差异有统计学意义(t=30.94、14.87、27.17、13.27,P<0.05)。免疫组织化学染色结果显示,在受照后第1、3、7天海马区域的NF-κB染色强度增强,阳性表达细胞数量增多,与健康对照组相比,差异有统计学意义(t=-8.49、-4.47、-3.46,P<0.05)。结论 NF-κB的基因及蛋白水平表达趋势均先升高后降低,促进了放射性脑损伤的发生发展。     

NF-κB在大鼠颅脑损伤后表达水平与细胞凋亡的关系

目的 探讨颅脑损伤后不同阶段NF-κB及其下游炎症因子与神经元凋亡的共变关系及可能的机制. 方法采用随机数字表法将大鼠分为颅脑损伤组、颅脑损伤+吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)组和假手术对照组,并在处理后6,24,168 h分别用免疫组化、RT-PCR、TUNEL法测定脑组织NF-κB、TNF-α和神经元凋亡水平. 结果在颅脑损伤后急性、亚急性期,颅脑损伤组损伤灶周围脑组织中NF-κB、TNF-α较假手术对照组和PDTC组表达明显增高,与神经元凋亡指数呈正相关;在颅脑损伤晚期颅脑拟伤组损伤灶周围脑组织中NF-κB、TNF-α表达有所下降,但仍高于假手术对照组和PDTC组,与神经元凋亡指数呈负相关. 结论 NF-κB和下游炎症因子可能在颅脑损伤后急性、亚急性期有促进神经元凋亡作用,在慢性期有抑制神经元凋亡作用.     

尼莫同对大鼠创伤性脑损伤后脑组织NF-κB表达和活化的影响

目的 观察尼莫同对大鼠创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)后NF-κB表达和活化的影响. 方法制作SD大鼠落体撞击脑损伤模型,分别给予地塞米松和尼莫同干预,检测脑组织NF-κB P65和IκBα的表达. 结果 TBI后脑组织NF-κB P65的表达明显增加,伤后24 h最低,持续到96 h仍有明显表达;IκBα表达明显减弱,伤后24 h达到低峰.尼莫同与地塞米松可以显著降低TBI后NF-κB P65的表达和增加IκBα的表达(P<0.01),尼莫同作用优于地塞米松(P<0.05). 结论尼莫同可以抑制TBI后NF-κB表达和活化,从而调节脑损伤后的炎症反应.     

人脑外伤后皮层核因子-κB的表达

目的 探讨核因子-κB（nuclear factor—κB，NF—κB）在人创伤性脑损伤（traumatic brain injury，TBI）后挫伤皮层中的表达情况，包括表达位置、表达强度和表达时相。方法 挫伤区皮层的标本来自24例TBI患者，取样时间为伤后5h-5d，利用凝胶电泳迁移分析法（electrophoretic mobility shift assay，EMSA）和免疫组化技术测定NF—κB的活性和表达强度。结果 在人TBI后的挫伤区皮层中，NF—κB表达明显上调，表达高峰为伤后48—72h，NF—κBP65主要在血管内皮细胞和神经胶质细胞中表达，NF—κBP50主要在神经胶质细胞和少量神经元中表达，NF—κBP65的表达强度高于NF—κBP50。结论 NF—κB在人TBI后的挫伤区皮层中表达上调，提示其可能在TBI后的病理生理过程中起着重要作用。     

亚低温对大鼠脑损伤后脑组织炎性反应的影响

目的探讨颅脑外伤后早期应用亚低温治疗对脑组织炎性反应的影响。方法采用Feeney自由落体改良模型,设定对照组、颅脑外伤模型组及亚低温组,每组再根据伤后不同生存时间随分为3个亚组。取伤灶脑组织检测髓过氧化酶(MPO)活性,做细胞间黏附子-1(ICAM-1)免疫组化染色,光镜下计数ICAM-1阳性血管数。结果亚低温组各时间点伤灶区ICAM-1阳性血管数明显低于颅脑外伤模型相应时间点(P<0.01)。亚低温组各时间点MPO活性均明显低于颅脑外伤模型组相应时间点(P<0.01)。结论亚低温治疗能明显减少伤灶区白细胞浸润及ICAM-1的表达,有助于改善颅脑外伤后脑组织炎性反应引起的继发性脑损伤。     

安宫牛黄注射液对大鼠脑外伤后炎性反应的干预作用

目的观察安宫牛黄注射液对脑外伤后脑内炎性反应因子白细胞介素（IL）-1β、细胞间黏附分子（ICAM）-1、血清S100B蛋白和神经元特异性烯醇化酶（NSE）水平的影响，探讨其对外伤脑组织的保护作用。方法采用Feeney法造成鼠脑挫裂伤模型，在伤后不同时相点用酶联免疫法检测治疗组和对照组脑组织IL—1β、ICAM—1水平、血清S100B蛋白和NSE水平变化。结果除外IL-6β伤后6h外，伤后6—48h治疗组脑组织IL—1β、ICAM—1、血清S100B蛋白和NSE均比对照组低（P〈0．05）。结论安宫牛黄注射液能减轻脑外伤后脑组织的炎症反应，对脑组织起一定的保护作用。     

脑外伤患者血浆抵抗素浓度的变化

目的 揭示脑外伤患者血浆抵抗素浓度的变化,探讨其在脑损伤中的作用及对预后的预测价值.方法收集中型脑外伤54例,重型脑外伤71例,健康体检人群40例(对照组).对照组静脉血体检时获得;脑外伤患者静脉血在入院时获得.酶联免疫吸附试验测定血浆抵抗素浓度.结果脑外伤后3个月,中型和重型脑外伤患者预后不良(GOS 1～3分)20例(37.0%)和53例(74.6%).经协方差分析,中型和重型脑外伤患者血浆抵抗素浓度(21.9 ±8.4)ng/ml和(29.2±9.6)ng/ml,均显著高于对照组(9.3±2.6)ng/ml(P＜0.01).经多元线性回归分析,中型和重型脑外伤患者血浆抵抗素浓度与入院时GCS评分(t=3.120,P=0.007;t=3.986,P=0.003)和血浆C-反应蛋白浓度(t=2.212,P=0.035;t=2.274,P=0.014)均显著相关.Logistic回归分析显示,入院时血浆抵抗素浓度显著升高(OR=1.124,95%CI=1.040～1.221,P=0.011;OR=1.145,95%CI=1.044～1.232,P=0.009)是中型和重型脑外伤预后不良的危险因素.受试者工作特征曲线分析显示,血浆抵抗素浓度预测中型和重型脑外伤后3个月预后不良均有显著预测价值(AUC=0.719,95%CI=0.642～0.829,P=0.000;AUC=0.735,95%CI=0.671～0.893,P=0.000),且判定血浆抵抗素浓度22.4 ng/ml和30.5 ng/ml,对预测中型和重型脑外伤后3个月预后不良有70.0%和79.2%的灵敏度和70.6%和72.2%的特异度.结论 脑外伤后血浆抵抗素浓度升高,可能参与脑损伤的炎症反应,临床检测这个指标有助于早期判断脑外伤患者的预后.

Abstract：

Objective To determine plasma resistin level in patients with traumatic brain injury (TBI) and evaluate its correlations with outcome and inflammatory reaction. Methods Fiftyfour patients with moderate TBI, 71 patients with severe TBI and 40 healthy controls were enrolled in this study. Plasma samples were obtained from the healthy controls on physical examination and from the TBI patients on admission. Enzyme-linked immunosorbent assay ( ELISA) was used to determine the plasma resistin concentrations. Results Twenty patients (37.0% ) and 53 patients (74.6% ) with moderate and severe TBI suffered from an unfavorable outcome (defined as GOS score for 1-3 points) three months after TBI respectively. Plasma resistin levels in the patients with moderate and severe TBI were substantially higher than that in the healthy controls ((21. 9 ± 8. 4) ng/ml and (29. 2 ± 9. 6) ng/ml vs (9. 3 ± 2.6) ng/ml, both P ＜0. 01] by using covariance analysis. By using the multivariate linear regression analysis, plasma C-reactive protein level (t =2.212,P =0.035; t =2. 274,P =0. 014) and GCS scores (t =3. 120,P =0.007; t=3.986,P=0.003) were associated with the plasma resistin levels. Logistic regression analysis selected plasma resistin level as an independent predictor for 3-month unfavorable outcome of the patients with moderate and severe TBI (odds ratio = 1. 124, 95% CI = 1. 040-1. 221, P = 0.011; odds ratio = 1. 145, 95% CI = 1. 044-1. 232, P = 0. 009). A receiver operating characteristic curve identified cutoff levels of plasma resistin (22.4 ng/ml and 30.5 ng/ml) that predicted 3-month unfavorable outcome of moderate and severe TBI patients with the high sensitivity (70. 0% and 79. 2% ) and specificity (70.6% and 72.2% ) ( area under curve = 0.719, 95% CI = 0.642-0.829, P = 0.000;area under curve =0.735, 95% CI =0. 671-0. 893, P = 0.000). Conclusions Plasma resistin level is increased after TBI and may be involved in inflammatory response of brain injury. Clinical detection of this indicator can help early determine the prognosis of the TBI patients.     

细胞凋亡和氧化应激在大鼠创伤性脑损伤后应激性肝损伤中的作用

目的 探讨细胞凋亡和氧化应激在大鼠创伤性脑损伤(TBI)后应激性肝损伤中的作用.方法 改良Allen法建立TBI模型.40只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为5组:正常对照组、TBI后6,12,24,48 h组.测定血清肝酶、肝组织超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛,流式细胞仪检测肝细胞凋亡率.光镜及电镜观察肝组织学变化.结果 TBI后血清ALIT和AST显著进行性升高,肝组织SOD减少,丙二醛增加;TBI早期即6 h,电镜下可见凋亡细胞,细胞凋亡率显著增加且达峰值;病理显示TBI后肝组织进行性损伤.结论 TBI后出现应激性肝损伤,细胞凋亡和氧化应激可能参与其发病过程.     

大鼠创伤性脑损伤后神经细胞凋亡的实验研究

探讨创伤性脑损伤后神经细胞凋亡机制及其时序空间分布。方法采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的生物素脱氧尿嘧啶核苷酸缺口末端标记法、琼脂糖凝胶电泳、透射电镜、流式细胞术、凋亡调节蛋白免疫组织化学方法检测大鼠轻、重度脑损伤不同脑域神经细胞凋亡的动态变化。     

放线菌酮对大鼠脑损伤的神经保护作用

目的：探讨放线菌酮对脑创伤的神经保护作用及其机制。方法：在液压颅脑损伤模型中,观察伤后神经功能、神经病理学改变、细胞凋亡的特征以及凋亡促进基因bax的表达；比较治疗组在液压致伤前5min皮下注射放线菌酮（2.5mg/kg）对上述指标的影响。结果：治疗组伤后行走功能、平衡功能障碍程度明显低于未治疗组（P＜0．01）。治疗组大鼠伤后神经病理学改变减轻，不同脑区各个时间点凋亡细胞数均显著减少，DNA电泳未见凋亡带谱。伤后不同脑区bax蛋白水平升高，放线菌酮可抑制bax蛋白表达。结论：放线菌酮有效地抑制创伤后bax蛋白表达及神经细胞凋亡，减轻神经病理损害，具有神经保护作用。     

大鼠颅脑爆炸伤后水通道蛋白4的表达变化

目的 研究大鼠颅脑爆炸伤后水通道蛋白4（aquaporin 4，AQP4）表达变化及其与脑水肿的关系。方法Wistar成年大鼠96只随机分为爆炸伤组和假手术组（各48只），右侧颞顶部开直径为1cm的骨窗后用80mgTNT电雷管在5cm垂直距离爆炸，于伤后4，12h、1，2，5，7d分别检测损伤区脑含水量，病理学变化、血脑屏障通透性改变、AQP4 mRNA和蛋白的表达变化。结果爆炸伤后损伤区脑含水量呈进行性增加，并于伤后2d达高峰。AQP4的表达也明显升高，开始局限于损伤中心，而后增高的区域扩大，AQP4表达增高的区域与光、电镜下脑水肿区域一致，单位面积表达的量于伤后2d出现峰值，之后有所下降，但直到第7天其表达的量仍高于假手术组（P〈0．05），且与脑含水量呈正相关。爆炸伤后4h和12h，伊文思蓝渗出主要局限于损伤中心，随时间延长，尽管脑水肿程度加重，但伊文思蓝渗出范围无明显扩大。结论爆炸伤早期以血管源性脑水肿为主要表现，继发性细胞毒性脑水肿可能是爆炸伤后期脑水肿的主要原因，AQP4表达增加参与了爆炸伤后细胞毒性脑水肿的形成过程。     

重型脑损伤大鼠脑组织蛋白质组差异表达

目的 寻找重型脑损伤(severe traumatic brain injury,sTBI)大鼠伤后不同时间的蛋白质组变化规律.方法 提取创伤后3,7和14 d的鼠脑组织总蛋白进行双向凝胶电泳,筛选和鉴定差异蛋白质点.结果 共筛选出17个差异蛋白质点,它们参与细胞代谢、应激与炎症反应等过程.结论 利用双向凝胶电泳技术可寻找到多种参与重型脑损伤病程演进的蛋白质.     

创伤性颅脑损伤患者的长期预后研究

目的 探讨中重度创伤性颅脑损伤 （ traumatic brain injury, TBI）患者康复治疗出院后的长期预后，以及癫痫对长期预后的影响。方法 对102例康复治疗出院的中重度TBI患者进行随访研究。结果 死亡率为2．0％，不良预后发生率为16．7％，继发癫痫者占33．3％。功能独立性程度和就业状况比例失衡。继发癫痫组在GOS、残疾等级量表功能部分（DRS—F）、就业部分（DRS—E）等级和生存质量指数（QLI）评分上与无癫痫组比较，差异均有统计学意义（P〈0．05），继发癫痫者的长期预后相对更差。经Pearson相关性分析，GOS与DRS—F、DRS—E、QLI评分之间的相关性均达到显著性水平。结论　康复治疗后的中重度TBI患者远期死亡率为2．0％，再就业率低，癫痫对远期生活质量有显著影响。应规范TBI急性期和亚急性期的康复体系，为大样本长期预后研究打下基础。