神经节苷脂对大鼠脊髓损伤诱导的自噬性神经元死亡的影响

目的 探讨神经节苷脂(monosialotetrahexosy-1 ganglioside,GM1)对脊髓损伤诱导的神经元自噬性死亡的影响. 方法 90只SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、等渗盐水组和GM1组,每组30只.等渗盐水组和GM1组采用Allen法建立T10脊髓损伤动物模型,荧光显微镜下观察内源性细胞自噬相关蛋白(LC3)的表达;Western印迹法检测LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值、细胞蛋白(Beclin-1)表达. 结果 与假手术组比较,等渗盐水组LC3表达水平明显上调(P＜0.05):与等渗盐水组比较,GM1组LC3表达水平明显下调,自噬体形成明显减少(P＜0.05).与假手术组比较,等渗盐水组LC3-Ⅱ、Beclin-1表达水平以及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值均明显上调(P＜0.05);与等渗盐水组比较,GM1组LC3-Ⅱ、Beclin-1表达水平以及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值均明显下调(P＜0.05). 结论 GM1通过抑制脊髓损伤后自噬性细胞死亡,起到保护神经元作用.     

神经节苷脂对急性脊髓损伤的治疗作用

目的 观察不同剂量神经节苷脂（ＧＭ－１）对争性脊髓损伤病人神经功能恢复的治疗效果。方法 ２９例急性脊髓损伤病人随机分为大剂量（１００ｍｇ）ＧＭ－１组（例数＝７）、小剂量（４０ｍｇ）ＧＭ－１组（例数＝９）和安慰剂组（例数＝１３）。在病人到达急诊室、伤后３和６个月时,分别对病人神经功能进行评价。结果 大剂量组病人神经功能恢复较其他两组明显,尤以运动功能〔按美国脊髓损伤协会（ＡＳＩＡ）评分标准评价〕改善     

神经节苷脂对急性低氧大鼠脑皮层神经元的保护作用研究

目的 观察外源性神经节苷脂对急性减压低氧大鼠脑神经元的保护作用，为临床应用提供依据。方法 １５只Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分为：低氧组Ａ、低氧组Ｂ与常氧组。低氧组Ａ置于海拔７０００ｍ，持续５ｈ，低氧组Ｂ在低氧３ｄ前腹腔注射神经节苷脂（１００ｍｇ／ｋｇ／ｄ），其余与低氧组Ａ相同。电镜观察各组脑皮层神经元的超微结构改变。结果 低氧组Ｂ动物的脑神经元胞体、细胞骨架和突触结构损伤的程度明显轻于低氧组Ａ。结论 神     

神经干细胞移植联合神经节苷脂治疗大鼠脊髓损伤

目的 观察神经干细胞(neural stem cells,NSCs)联合单唾液酸四己糖神经节苷脂(monosialotetrahexosyl ganglioside,GM1)治疗大鼠急性脊髓损伤的作用。 方法 采用成年SD大鼠,制作T8节段脊髓压迫损伤模型。动物按随机数字表法分为三组：对照组、NSCs组、NSCs+GM1组。连续观察1,2,4,8周,应用运动功能评分、病理组织学、透射电镜、体感诱发电位(SEP)等检查,比较大鼠脊髓神经功能的恢复情况。 结果 伤后动物后肢运动功能均有不同程度恢复,4,8周时NSCs+ GM1组显著高于其他组(P＜0.01),降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)染色阳性细胞较其他各组增多。与对照组和NSCs组比较,8周时NSCs+ GM1组只在损伤中心处出现灶性坏死,小血管增生明显。电镜扫描结果显示,8周时对照组仍可见大的神经髓鞘轴膜下水肿,而NSCs+ GM1组可见大量完整的神经髓鞘和分化正常的神经细胞,轴突末端还可见多种突触小泡。SEP结果显示,移植后2周NSCs+ GM1组SEP的潜伏期即明显缩短(P＜0.05),4,8周SEP缩短以NSCs组为显著,但仍高于实验正常鼠潜伏期。 结论 脊髓损伤大鼠移植NSCs联合应用GM1能够保护受伤的神经组织。GM1可促进植入的NSCs分化,并与宿主形成突触连接,重建脊髓功能。     

不同剂量的神经节苷酯钠对急性脊髓损伤的疗效比较

目的通过对急性脊髓损伤患者使用不同剂量的单唾液酸四己糖神经节苷酯钠（GM-1）的疗效进行比较,观察GM—l的剂量对急性脊髓损伤的疗效的影响。方法回顾性分析我院2006年12月～2012年12月82例急性脊髓损伤病例,按照使用的药物剂量分3个小组：0剂量组（未使用）、低剂量组（20—40mg／d）、高剂量组（100mg／d）;再按照美国脊髓损伤学会（ASIA）92损伤分级分为A、B、C、D级。对伤后24h、2周、1个月、2个月时患者的浅感觉、运动及小便功能等方面进行对比来评价不同剂量的GM-1对急性脊髓损伤严重程度的疗效影响。结果3组患者的用药前后浅感觉和运动功能的恢复评分各进行q检验,浅感觉和运动功能的恢复疗效均存在着显著性的差异（P〈0．05）,具有统计学意义。3组患者用药前后的小便功能分级结果进行X。检验,小便功能恢复疗效有显著性差异（P〈0．05）,具有统计学意义。结论GM-1对脊髓损伤患者的神经功能的恢复有促进作用,同时具有浓度依赖效应。大剂量的GM．1对脊髓损伤后的神经功能的恢复促进作用更加明显,尤其是在损伤的急性期。     

神经节苷脂对去垢剂损伤红细胞膜的保护作用

神经节苷脂对去垢剂损伤红细胞膜的保护作用沈红李玉书范明汪家政军事医学科学院基础医学研究所北京１００８５０神经节苷脂是存在于脊椎动物细胞浆膜外层上的糖鞘脂。在哺乳动物脑中含量最高，尤其浓集于神经元的突触膜上。外源性神经节苷脂在神经系统的发育和损伤修复中...     

神经节苷脂快速测定法

目的 建立GLS快速测定法。方法 从血清中提取糖脂,再让GLS分子上特异糖基反应显色后用分光光度法测定。对患者血清GLS分组统计分析。结果 42例头颈部恶性肿瘤患者血清GLS(755±191)显著增高;24例良性肿瘤和20例非肿瘤患者血清GLS分别为504±87与581±120。以GLS>600为阳性,该法对头颈部恶性肿瘤敏感度、特异度、准确度、诊断效率为73.8％、88.6％、81.4％、65.4。结论 GLS快速测定法简便、快速、稳定、可靠;该法对头颈部恶性肿瘤诊断具有显著临床应用价值。     

细胞凋亡阻断药物对脊髓损伤后神经细胞凋亡的保护作用观察

为观察放线菌酮、甲基强的松龙和神经节苷脂对损伤脊髓神经组织中凋亡细胞的保护作用,将60只SD大鼠致以重度脊髓损伤,并随机分为对照组、放线菌酮组、甲基强的松龙组和神经节苷脂组（n=15）。给药后分别观察体重、局部血流量、凋亡细胞原位标记等指标,并进行神经功能评价和定量组织学分析。结果显示,药物对照局部血流量无明显作用;治疗组神经功能评分、残余神经组织面积明显高于对照组,而TUNEL阳性细胞数量明显低于对照组,说明3种药物均对损伤脊髓组织有明显保护作用,可能是通过对神经细胞凋亡阻断来发挥作用的。     

神经营养因子对大鼠损伤脊髓神经元的影响

探讨神经营养因子防止成鼠脊髓轴突损伤后引起神经元萎缩的作用。方法采用发言奶的Ａｌｌｅｎ’ｓ打击法致伤大鼠脊髓,将实验动物分为５组,Ａ组：单损伤组;Ｂ组合 ：损伤＋ＮＧＦ组;Ｃ组：损伤＋ＣＮＴＦ组;Ｄ组：损伤＋ＮＴ－３组;Ｅ组：损伤＋ＢＤＮＦ组。     

大鼠脊髓急性损伤后神经细胞的凋亡

目的 研究脊髓急性损伤后神经细胞的凋亡及其分布特点。方法 44只大鼠分为对照组（4只）和损伤组（40只）。损伤组脊髓（T8．9）经中度压迫致伤后,分别在伤后30min、2,4,8,24,48,72h和7,14,21d处死取材（每时相点鼠数＝4只）。应用HE、尼氏染色及凋亡细胞原位末端标记法对脊髓组织进行细胞检测。结果 伤后4h,损伤段及邻近段可见末端标记阳性神经细胞;伤后8h,损伤段灰质中阳性细胞数达高峰;伤后24h,白质中阳性胶质细胞数达高峰;伤后72h,相邻节段阳性细胞数达高峰。阳性细胞以白质中胶质细胞为主,主要分布于相邻手段。结论 脊髓损伤后神经细胞凋亡是继发损伤期的重要病理变化。     

大鼠坐骨神经损伤后嗅球成鞘细胞对脊髓神经元的保护作用

目的：探讨嗅球成鞘细胞（OECs)对大鼠坐骨神经损伤引起的脊髓前角运动神经元死亡的保护作用，方法：30只SD大鼠随机分成对照（SAL）组和实验（OFCs)组，采用硅胶管套接大鼠切断的坐骨神经，硅胶管内给予等渗盐水或培养成活的新生大鼠OECs，分别于伤后7，14，30d应用尼氏染色，酶组织化学染色方法，检测神经损伤侧的脊髓前角运动神经元死亡数目和胆碱酯酶（ChE)及酸性磷酸酶（ACP）的变化。结果：与SAL组比较，伤后7，14和30d,OECs组脊髓前角运动神经元死亡率分别降低了7．04％，6．44％，和9．72％（P＜0．01），脊髓前角运动神经元中ChE活性变化幅度分别降低了4．03％，4．25％和5．72％（P＜0．01），ACP的变化幅度分别下降了51％、64％和92％（P＜0．01），结论：OECs对周围神经损伤后引起的神经元死亡有较好的保护作用。     

脊髓损伤后下丘脑部分核团c-fos蛋白表达的实验研究

目的通过观察脊髓损伤后中枢下丘脑室旁核、视上核c-fos样蛋白免疫反应了解中枢与脊髓损伤之间的关系.方法成年大鼠56只,体重(270±20)g,分为脊髓损伤组(20只)、假手术组(20只)、正常对照组(16只).损伤模型为双后肢不全瘫.伤后1,6,12,24h对下丘脑室旁核、视上核组织进行冠状面切片,运用c-fos漂片免疫组化方式对阳性细胞计数.结果脊髓损伤后不同时间组的下丘脑室旁核、视上核均有明显的c-fos阳性表达.伤后1,6,12,24 h室旁核c-fos阳性表达细胞数与假手术组、正常对照组比较,差异有非常显著性意义(P＜0.01);伤后12,24h视上核c-fos阳性表达细胞与假手术组、正常对照组比较,差异有非常显著性意义(P＜0.01).结论脊髓损伤影响正常神经信号在大脑中枢传导,下丘脑室旁核、视上核可产生明显反应.     

汉防己甲素对大鼠急性脊髓损伤后神经细胞凋亡和相关基因表达的影响

目的 动态观察汉防己甲索( tetrandrine,Tet)对大鼠急性脊髓损伤(acute spinal cord injury,ASCI)后神经细胞凋亡和相关基因表达的影响,为该病治疗研究提供实验依据. 方法 将95只成年SD大鼠随机分为空白对照组、急性脊髓损伤组(ASCI组)、汉防己甲素(Tet)组和甲基强的松龙组(Mp)组.空白对照组5只大鼠,其他每组30只大鼠.除空白对照组外,所有动物均用改良Allen重物打击法制作脊髓损伤模型.于术后8h、1,3,7,14和21 d每组处死5只大鼠,观察损伤段脊髓的形态结构、细胞凋亡调控基因(Bcl -xl和Bcl -xs)的表达,运用流式细胞仪对标本进行凋亡细胞半定量分析. 结果 (1)组织学改变:除空白组无明显改变外,ASCI组组织水肿,神经元变性,部分坏死,可见大量炎性细胞浸润;Tet组损伤程度减轻;Mp组更轻,无明显坏死及炎性细胞浸润.(2)凋亡基因表达检测:除空白组外,余各组在相同时相点,Bcl -xs表达量ASCI组较多,Tet组明显减少,Mp组更少;而Bcl -xl表达量则反之,且各组在伤后7d达高峰.(3)凋亡细胞半定量分析:除空白对照组外,各组凋亡细胞数均在伤后7d达峰值,之后逐渐减少;同一时相点各组间凋亡细胞比较,Tet组明显少于ASCI组,而多于Mp组. 结论 ASCI后Tet对凋亡调控基因的表达有明显的积极干预作用,可显著减少神经细胞凋亡;应用Tet治疗ASCI应越早越好,7d内有效;与甲基强的松龙相比,Tet对ASCI的疗效较弱.     

大鼠脊髓损伤后去甲肾上腺素能神经元变化的初步研究

目的　比较正常脊髓与损伤脊髓内去甲肾上腺素 (NA)能神经元的分布、形态、数量、大小等变化 ,以探讨脊髓损伤后NA能神经元的变化机制。　方法　健康Wistar大鼠 2 0只 ,随机取 10只大鼠作为正常脊髓组 ,灌注后取出脊髓 ,经固定、脱水后冰冻切片 (片厚 2 0 μm) ,再将组织切片进行免疫组化漂染 (SABC法 ) ,一抗为多巴胺 β羟化酶 (DBH)抗血清 (浓度为 1∶3 0 0 0～1∶90 0 0 ) ;取另外 10只大鼠制作脊髓损伤模型 ,于伤后 2 4h灌注后取出脊髓做免疫组化染色 ,方法同前。借助计算机图像系统分析免疫组化结果。　结果　正常脊髓内NA能纤维广泛分布于整个脊髓节段灰质 ,但主要集中在后角浅层、前角运动神经元池、胸髓侧角等区域 ,脊髓前角内可见少量DBH阳性神经元胞体 [(11± 3 )个 ];损伤脊髓的前角、后角和胸髓侧角出现大量染色深的DBH阳性神经元 ,数量分别为 (3 8± 6)个、(43± 5 )个、(3 1± 7)个。正常脊髓与损伤脊髓内NA能神经元数量与染色深浅的差异具有非常显著性意义 (P <0 .0 1)。　结论　大鼠脊髓损伤后NA能神经变化的机制可能为 :(1)脊髓损伤后NA能神经元内DBHmRNA表达增强 ,DBH合成加速 ,以满足大量NA合成的需要 ;(2 )在损伤等应激状态下 ,一些神经元发生了化学性质的转化 ,其他化学性质的神经     

银杏叶提取物对大鼠脊髓损伤后神经细胞凋亡和一氧化氮合酶表达的影响

目的 探讨银杏叶提取物(extract of Ginkgo biloba,Egb)对脊髓损伤后神经细胞的保护作用及其机制.方法 雌性SD大鼠48只,体重200～230 g,用随机数字表法把大鼠分为等渗盐水组(NS组)24只,银杏叶提取物组(Egb组)24只.在T9椎板水平半切脊髓.术后NS组大鼠每天给予2 ml等渗盐水灌胃,EGb761组大鼠每天给予2 ml(20mg)Egb灌胃.分别于术后1,7,14,21 d取材,行髓鞘染色、焦油紫染色、诱生型一氧化氮合酶(iNOS)免疫组化和TUNEL法标记凋亡细胞.结果 术后各时相点Egb组大鼠脊髓损伤周围邻近区脱髓鞘明显减轻,坏死囊腔明显减小,损伤侧与正常侧脊髓前角神经元数目比率明显高于NS组(P<0.05),神经细胞凋亡指数和iNOS表达阳性细胞率低于Ns组(P<0.01或P<0.05);而且,iNOS阳性细胞率与细胞凋亡指数间呈正相关(r=0.729,P<0.01).结论 Egb能减少脊髓损伤后神经细胞的凋亡,其机制可能与抑制iNOS表达有关.     

胶质细胞源性神经营养因子对大鼠脊髓损伤后前角神经元的保护作用

目的　研究胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)对大鼠脊髓损伤后前角运动神经元的保护作用。　方法　雄性SD大鼠 4 5只随机分为等渗盐水组、GDNF组、神经生长因子 (NGF)组 ,每组 15只 ,采用改良Nystr¨om法后路压迫大鼠胸段脊髓模型 ,经蛛网膜下腔局部注射GDNF(1μg μl,10 μg d) 1周。伤后 1,2 ,4周应用尼氏染色、酶组织化学染色方法观察前角运动神经元存活数目及胆碱酯酶 (CHE)和酸性磷酸酶 (ACP)的变化。　结果　脊髓损伤后第 1,2周 ,GDNF组前角运动神经元存活数目 [(2 1.4± 3.8,2 0 .7± 3.6 )个 前角视野 ]明显多于等渗盐水对照组的 (17.3± 2 .8,16 .5± 3.0 )个 前角视野 (P <0 .0 1) ;GDNF组前角运动神经元中CHE灰度值 (6 5 .2± 2 3.8,98.7±31.6 )低于等渗盐水组 (94 .5± 35 .2 ,12 5 .6± 4 1.6 ) (P <0 .0 1) ;ACP灰度值 (74 .2± 2 5 .7,6 8.6±30 .6 )高于等渗盐水组 (5 8.5± 18.2 ,4 9.6± 2 1.6 ) (P <0 .0 1)。　结论　外源性GDNF能保护脊髓不完全性损伤后引起的运动神经元损害。     

大鼠脊髓损伤后死亡原因分析

目的 探讨大鼠Allen脊髓损伤模型动物死亡的原因.方法 选用120只Wistar成年大鼠,采用Allen打击模型(25 g·cm),在T10段造成急性脊髓损伤,对损伤后死亡动物进行统计和解剖.结果 死亡25例,死亡率为21%,其中5只死于苏醒前,解剖未发现异常;12只死于损伤后3 d内,3只死于损伤后3～7 d,解剖发现肺部均有出血、水肿.部分动物有膀胱积血;3只死于8～14 d,1只死于损伤后15～21 d,解剖发现分别有肺部感染和泌尿系感染.3周后无死亡.结论大鼠Allen脊髓损伤模型动物早期死亡的主要原因是肺淤血和肺水肿,晚期死亡的主要原因是肺部和泌尿系感染.

Abstract：

Objective To investigate the causes for death in rats after spinal cord injury.Methods A total of 120 adult Wister rats were selected for the study. The animal model with acute spinal injury at T10 was established by using Allen' s combat (25 g · cm). The dissection analysis was performed in death rats. Results Of all, 25 patients died, with mortality rate of 21%. Of death rats, five rats were died before awakening, with no abnormal anatomy; 12 rats died within three days after injury and three died of injuries 3-7days injury. Anatomy found pulmonary bleeding and edema, even hematocele bladder in some rats. There were three rats died within 1-2 weeks, one died of injury only after 2-3 weeks, with lung infection and urinary tract infection. There was no death after three weeks. Conclusions The early causes for death of rats with spinal cord injury is mainly due to lung congestion and pulmonary edema, whereas the leading cause of late death of rats is pulmonary and urinary tract infection.     

黄芪多糖对大鼠急性颈脊髓损伤后肺水肿的影响

目的 探讨黄芪多糖对大鼠急性颈脊髓损伤后肺水肿的影响. 方法 成年Wistar大鼠200只,体重240～ 250 g,雌雄不限.大鼠按随机数字表法分为五组:黄芪多糖组、低浓度黄芪多糖组、等渗盐水组、空白对照组、假手术组,每组40只.采用C7段颈脊髓改良Allen打击法制作大鼠颈脊髓损伤模型,打击力度为10 ×2.5 g·cm;假手术组仅暴露C7段颈脊髓.各组按取材时间不同又分为造模后24h、3d、1周、2周共4个时相点,每个时相点10只大鼠.在不同时相点处死大鼠,通过光学显微镜观察肺组织的病理学变化,并测量各时相点每组大鼠肺湿重与干重(W/D)比值及血清和肺泡灌洗液蛋白浓度,计算肺W/D及肺通透性指数(LPI). 结果 同一时相点低浓度黄芪多糖组和黄芪多糖组肺W/D比值及LPI均较空白对照组及等渗盐水组低,黄芪多糖组伤后3d时最低(P＜0.05). 结论 大鼠急性颈脊髓损伤可造成肺组织水肿,伤后早期使用黄芪多糖可有效减轻颈脊髓损伤后肺水肿的程度.