血管生成素-1在高氧诱导新生鼠支气管肺发育不良的表达及与肺发育的关系

目的探讨血管生成素(Ang-1)在高氧诱导支气管肺发育不良(BDP)新生大鼠中的表达。方法 48只生后2~3日龄的新生大鼠随机分为高氧组和对照组,每组24只,分别置于高氧(氧浓度≥95%)和空气中持续喂养;于高氧暴露第1、3、7天,光镜下观察大鼠肺组织形态结构变化,并采用实时荧光定量PCR和Western blotting方法分别检测大鼠肺组织中Ang-1 mRNA和蛋白表达水平。结果随着高氧暴露时间延长,光镜下高氧组逐渐表现出肺组织发育不良、肺泡结构简单化、肺泡数目减少和肺微血管发育受阻等病理改变。高氧暴露第7天,高氧组的Ang-1 mRNA和蛋白相对表达为0.33±0.18和0.20±0.07,低于对照组的0.83±0.46和0.57±0.44,差异有统计学意义(P均0.05)。结论 Ang-1是肺血管发育过程中的重要调节因子,参与了BPD病理发生。     

不同剂量促红细胞生成素对新生大鼠高氧肺损伤血管保护作用的研究

目的　探讨不同剂量重组人促红细胞生成素(recombinant humanerythropoietin,rhEPO)作为血管生长样因子对新生大鼠高氧肺损伤的血管保护作用.方法 新生Sprague-Dawley大鼠60只,分为空气组、高氧组(持续吸入95％的高浓度氧)、高氧+大剂量rhEPO组(于高氧暴露前1h及暴露3d后,腹腔注射rhEPO5000 U/kg)及高氧+小剂量rhEPO组(时间点同前,腹腔注射rhEPO800 U/kg),每组15只.而空气组和高氧组分别于同一时间点腹腔注射等量生理盐水.高氧暴露6d时,观察各组大鼠存活率变化,免疫组织化学法检测肺组织血管内皮标志CD31及肺血管内皮细胞生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的变化.结果 高氧暴露6d后,与高氧组相比,高氧+大剂量rhEPO组大鼠存活率显著提高[86.7％ (13/15) vs 60.0％(9/15)];肺组织CD31阳性面积比[(38.69±1.69)％ vs (33.57±4.12)％,P＜0.05]和VEGF的表达(124.4296±7.282 3 vs 114.205 9±8.345 7,P＜0.05)明显增高;而高氧+小剂量rhEPO组肺组织CD31阳性面积比[(36.34±1.89)％]及VEGF的表达(115.4296±6.7199)无明显改善,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 大剂量rhEPO(5000 U/kg)可以促进肺血管的发育和修复,对新生鼠高氧肺损伤有血管保护作用,而800 U/kg rhEPO无明显的高氧肺损伤血管保护作用.     

高氧暴露对新生大鼠肺成纤维细胞α-平滑肌肌动蛋白与Ⅰ型胶原蛋白表达的影响

目的 探讨持续吸入高氧后新生大鼠肺成纤维细胞中α平滑肌肌动蛋白(α-smoothmuscle actin,α-SMA)及Ⅰ型胶原蛋白表达的影响.方法 30只足月新生Wistar大鼠,于生后12h内分别持续吸入90％的高浓度氧(高氧组,15只)和空气(空气组,15只).各组于3d,7d和14 d随机处死大鼠后,进行肺成纤维细胞的原代培养,应用免疫组织化学法检测大鼠α-SMA表达,ELISA法检测细胞培养液上清中Ⅰ型胶原蛋白的含量.结果 持续吸入高氧3d,高氧组与空气组大鼠α-SMA表达与Ⅰ型胶原蛋白含量比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).持续吸入高氧7d和14 d,高氧组大鼠肺成纤维细胞α-SMA表达的吸光度与空气组比较显著增加(112.60±4.61 vs 94.69±2.38,200.30±3.97 vs 103.04±1.91,P＜0.01).同时,细胞培养液上清中Ⅰ型胶原蛋白含量高氧组7d、14 d时也较空气组明显增加[(28.66±1.15) μg/L vs (24.62±3.15) μg/L,(30.60 ±0.65) μg/L vs (27.46±1.68) μg/L,P ＜0.05].高氧组大鼠α-SMA表达与Ⅰ型胶原蛋白含量呈正相关(r=0.72,P＜0.01).结论 高氧可促进新生大鼠肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化,Ⅰ型胶原合成增加,最终导致肺纤维化的发生.     

高氧致慢性肺疾病新生鼠肺组织Smad4、Smad7表达及其可能作用

目的 探讨在高氧致新生鼠慢性肺疾病（chronic lung diseases,CLD）发生、发展过程中,肺组织Smad4、Smad7蛋白的变化及其可能的作用.方法 将出生12h内的64只新生Wistar大鼠,采用随机数字表法随机分为高氧组和空气组（对照组）,每组均为32只.采用高体积分数氧诱导CLD模型,于实验1、3、7、14d分离大鼠肺组织.应用Masson染色观察大鼠肺组织形态学改变,采用肺组织纤维化评分以确定肺纤维化程度.免疫组织化学、Western blot测定大鼠肺组织中Smad4、Smad7的表 达水平.结果 与空气组比较,高氧组大鼠肺组织纤维化程度明显增强（肺组织纤维化评分7 d：2.67±0.21 vs 0.58±0.17;14 d：4.48±0.24 vs 0.63±0.13,P＜0.05）;肺组织Smad4、Smad7蛋白主要定位于肺上皮细胞及间质成纤维细胞;Smad4蛋白表达强度明显增强（7 d：122.35±10.30 vs 140.08±7.77;14 d：129.70±7.33 vs 144.99 ±6.49,P＜0.05）;Smad7蛋白表达第14天明显减弱（132.16±4.38 vs126.22±6.49,P＜0.05）.结论 暴露高氧中的新生鼠,肺组织信号传导蛋白Smad4表达上调及Smad7表达下调可能与CLD肺纤维化的发生、发展密切相关.     

二氧化硫对低氧性肺动脉高压大鼠内源性硫化氢体系的调节作用

目的 研究二氧化硫( SO2)对低氧性肺动脉高压大鼠肺动脉内源性硫化氢(H2S)/胱硫醚-γ-裂解酶( CSE)以及H2S/巯基丙酮酸转硫酶(MPST)体系的调节作用.方法 将雄性Wistar大鼠(32只)随机分为对照组、低氧组、低氧+ SO2组和低氧+天冬氨酸异羟肟酸(hydroxamate,HDX)组,每组8只.低氧处理采用常压低氧的方法,氧浓度为10％,每天低氧6h,持续21 d.对照组大鼠在常氧环境中饲养.低氧处理结束后采用右心导管法测定肺动脉平均压,采用硫电极法测定肺组织H2S含量和H2S产率,采用免疫组化法检测各组大鼠肺小动脉内膜及中膜CSE和MPST的蛋白表达.结果 低氧组大鼠肺动脉平均压较对照组高[(33.38 ±6.32) mm Hg vs(16.74±3.81) mm Hg,1 mm Hg=0.133 kPa,P＜0.01];低氧+SO2组大鼠肺动脉平均压较低氧组低[(29.65±2.53)mm Hg vs(33.38±6.32) mm Hg,P＜0.01],低氧+HDX组大鼠肺动脉平均压较低氧组高[(39.44±6.26) mm Hg vs(33.38±6.32) mm Hg,P＜0.01].低氧组大鼠肺组织H2S含量[(2.02±0.43) μmol/g vs (3.11±0.42) μmol/g,P＜0.01]及H2S产率[(19.64±3.48) nmol/(g· min)vs(28.20±5.95) nmol/(g·min),P＜0.05]均较对照组低.给予SO2供体后,低氧+SO2组肺组织H2S含量[(2.73±0.20)μmol/g vs(2.02±0.43)μmol/g,P＜0.01]及H2S产率[(26.24±1.92) nmol/(g· min)vs(19.64±3.48) nmol/(g· min),P＜0.01]均较低氧组升高.当给予内源性SO2生成酶抑制剂HDX后,低氧+HDX组肺组织H2S含量[(1.64±0.23) μmol/g vs (2.02±0.43)μmol/g,P＜0.05]及肺组织H2S产率[(13.94±3.63) nmol/(g·min) vs (19.64±3.48) nmol/(g·min),P＜0.05]均较低氧组低.低氧组大鼠肺小动脉内膜[(0.31±0.02)vs(0.36±0.01),P＜0.01]及中膜[(0.27±0.01)vs (0.30±0.01),P＜0.01]中CSE蛋白表达均较对照组低.低氧+SO2组大鼠肺小动脉内膜CSE蛋白表达较低氧组高[(0.35±0.02) vs (0.31 ±0.02),P＜0.01].低氧+HDX组大鼠肺小动脉内膜CSE蛋白表达较低氧组低[(0.26±0.01) vs (0.31±0.02),P＜0.01].与对照组相比,低氧组大鼠肺小动脉内膜及中膜MPST的蛋白表达差异没有统计学意义.低氧+SO2组大鼠肺小动脉中膜MPST的蛋白表达较低氧组高[(0.32±0.02) vs (0.29±0.01),P＜0.01];而与低氧组相比,低氧+ HDX组大鼠肺小动脉内膜及中膜MPST的蛋白表达差异没有统计学意义.结论 外源性给予SO2供体可上调低氧性肺动脉高压大鼠肺小动脉内膜H2S生成酶CSE及肺小动脉中膜MPST蛋白表达,促进H2S生成增多,从而间接缓解低氧性肺动脉高压的形成.     

Bax/Bcl-2在高体积分数氧致新生大鼠慢性肺疾病肺组织及成纤维细胞中的动态变化

目的 制备高体积分数氧(高氧)诱导新生大鼠慢性肺疾病(CLD)模型,探讨持续吸入高氧对新生大鼠肺组织及成纤维细胞Bax及Bcl-2蛋白表达的影响.方法 足月新生大鼠出生12 h内分别持续吸入氧体积分数为900 mL·L-1的高氧(高氧组)和空气(空气组),于3 d、7 d和14 d随机处死动物后,肺组织取材同时进行肺成纤维细胞的原代培养,应用免疫组织化学半定量法检测其Bax及Bcl-2蛋白水平变化.结果 在肺组织中,高氧组Bcl-2蛋白的表达水平在7 d、14 d有所升高(P<0.001),3 d时表达无变化(P>0.05);而高氧组Bax蛋白的表达水平及Bax/Bcl-2比值在3 d、7 d和14 d均明显高于空气组,且具有时间敏感性(Pa<0.01).在肺成纤维细胞,高氧组3 d、7 d Bcl-2蛋白表达水平无变化(P>0.05),14 d时有所增高(P<0.001),但不如Bax蛋白增加明显;高氧组3 d、7 d和14 d肺成纤维细胞Bax蛋白的表达水平及Bax/Bcl-2比值均明显高于空气组(Pa<0.01).结论 高氧可促进新生大鼠肺组织及成纤维细胞Bax蛋白的表达,从而通过上调Bax/Bcl-2比值促进凋亡发生,参与CLD的发生发展过程.     

高氧致肺纤维化新生大鼠肺组织肾素-血管紧张素系统与Ⅰ型胶原及细胞间黏附分子-1的动态变化

目的 观察高氧致肺纤维化新生大鼠肺组织血管紧张素转换酶(ACE)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、Ⅰ型胶原及细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的动态变化.方法 足月新生Wistar大鼠120只,随机分为实验组和对照组,各60只.实验组将足月新生Wistar大鼠(连同母鼠)生后即置于有机玻璃氧舱内持续吸入高浓度氧(FiO2∶0.9)21 d造成高氧肺损伤模型,对照组吸入空气.每组分别于实验后1、3、7、14、21 d随机选取6只麻醉后处死.肺组织采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定Co Ⅰ及ICAM-1蛋白含量,用生化分析仪测定ACE的活性,用放射免疫法测定AngⅡ蛋白含量.用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织ACE、AngⅡ及Co Ⅰ mRNA的动态变化并同时观察肺组织形态学变化.结果 实验组肺组织各项测量指标在第14天均有明显升高.ACE活性及AngⅡ、Ⅰ型胶原、ICAM-1的蛋白含量分别达到(241.00±31.84)、(707.21±282.90)、(397.97±88.76)和(691.76±90.36)μg/g,除了ACE,其他与对照组比较,差异均有显著性(P＜0.05);而ACE、AngⅡ及Ⅰ型胶原mRNA表达在第14天较对照组均有明显升高,差异均有显著性(P＜0.05);实验组肺组织各项测量指标在第21天达到高峰,ACE活性及AngⅡ、Ⅰ型胶原、ICAM.1的蛋白含量分别达到(249.20±20.19)、(838.22±197.75)、(539.85±81.03)、(577.06±61.17)μg/g,与对照组比较差异均有显著性(P＜0.05);ACE、AngⅡ及Ⅰ型胶原mRNA表达在第21天分别达到2.67±0.52、2.50±0.84及3.0±0.05,与对照组比较差异均有显著性(P<0.05).肺组织形态学改变:实验组第14天肺间质细胞增多,肺组织出现纤维化改变;第21天正常肺泡结构消失,残留肺泡直径明显缩小.结论 高氧致肺纤维化新生大鼠肺组织ACE、Ang Ⅱ、Ⅰ型胶原、ICAM-1蛋白含量及mRNA表达在高氧后14 d、21 d明显高于对照组,同时肺组织出现纤维化改变;肾素-血管紧张索系统参与了高氧肺损伤、肺纤维化.     

持续高氧对新生大鼠肺组织胶原的动态影响

目的探讨持续高氧对新生大鼠肺组织胶原的影响。方法足月新生大鼠分别持续吸入90%以上的高氧和空气,于3、7、14、21d,通过染色、化学法和免疫组化,动态比较肺组织中胶原相对含量、羟脯氨酸含量以及I型胶原蛋白的分布和半定量变化。结果(1)7d时肺间质蓝色胶原所占的面积百分比较对照组增加(P<0.05),14d和21d更为明显(P<0.01);(2)7d起高氧组羟脯氨酸含量高于空气组(P<0.05),在14d(P<0.05)和21d(P<0.01)持续高于对照组。(3)7d时高氧组较空气组胶原在肺间质中的表达增加(P<0.05),14d(P<0.05)和21d(P<0.01)也明显高于对照组。结论持续吸入高氧可致胶原在新生大鼠肺组织间质中的沉积增加。     

角质细胞生长因子对吸入高体积分数氧新生大鼠肺组织的影响

目的 研究角质细胞生长因子(KGF)对高体积分数氧(高氧)暴露下新生大鼠肺组织结构的影响.方法 将新生的108只SD大鼠随机分为空气组、高氧组和KGF干预组,每组36只.每组又分为3d、7d、14d3个亚组.高氧组、KGF干预组大鼠持续暴露于氧体积分数＞950mL·L-1氧箱中,KGF干预组于吸氧同时背部皮下注射重组人角质细胞生长因子(rhKGF)1mg·d-1,连用3d后改为0.5mg·d-1直至实验结束.空气组和高氧组给予等量9g·L-1盐水.空气组大鼠呼吸空气.3d、7d、14d亚组在相应时间点取肺组织,通过肉眼及光镜下观察其肺组织病理学变化,并作肺泡辐射状计数(RAC).结果 空气组7d时出现肺泡化,14d时肺泡化成熟.高氧组时小血管扩张充血,肺间质细胞增多,7d时肺间隔变厚,肺泡腔大小不一,肺泡数减少,14d时肺泡数明显减少,肺泡大小不等,出现明显纤维化.KGF干预组7d时可见肺泡结构较完整,14d时少数肺泡融合,间质细胞增生不严重.高氧组3d时RAC与空气组相比差异无统计学意义(P＞0.05),7d、14d时RAC与空气组相比差异均有统计学意义(Pa＞0.01).KGF干预组各时间点RAC与空气组比较差异均无统计学意义(Pa＞0.05).结论 长时间暴露于高氧环境,可导致新生大鼠肺组织发育障碍,但KGF能促进肺泡的发育,减轻纤维化,可有效减轻高氧吸入对新生大鼠肺组织的损伤.     

丹参对高体积分数氧致新生大鼠支气管肺发育不良的影响

目的 探讨丹参对高体积分数氧(高氧)致新生大鼠慢性支气管肺发育不良(BPD)的影响.方法 出生2 d的新生SD大鼠随机分为空气加9 g/L盐水组(Ⅰ组)、空气加丹参组(Ⅱ组)、高氧加9 g/L盐水组(Ⅲ组)、高氧加丹参组(Ⅳ组).Ⅲ和Ⅳ组持续暴露于高氧中,Ⅱ和Ⅳ组予腹腔注射丹参10 mg/(kg·d),Ⅰ和Ⅲ组腹腔注射同等体积的9 g/L盐水,生后14 d对各组大鼠行肺组织病理学检查,分别采用硫代巴比妥酸法、亚硝酸盐法、二硝基苯甲酸法检测辐射状肺泡计数(RAC),检测各组大鼠肺组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平.采用SPSS 11.5软件进行组间t检验.结果 1.Ⅲ、Ⅳ组显示明显的肺泡发育受阻,肺纤维化明显,RAC值较Ⅰ、Ⅱ组均减少(Pa＜0.05),但Ⅳ组RAC(8.6±0.2)较Ⅲ组(7.2±0.5)显著增加(P＜0.05).2.Ⅲ、Ⅳ组肺湿质量/干质量重(W/D)均高于Ⅰ、Ⅱ组(Pa＜0.05),提示高氧组肺纤维化、肺水肿均较空气组严重,使用丹参后肺W/D显著下降(P＜0.05).3.Ⅲ、Ⅳ组MDA水平显著高于Ⅰ、Ⅱ组(Pa＜0.05),Ⅳ组MDA水平较Ⅲ组明显下降(P＜0.05),Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组SOD、GSH-Px比较无明显差异,使用丹参后其水平上升,与Ⅲ组比较有统计学差异(P＜0.05).结论 丹参可部分抑制高氧所致的慢性BPD,其机制可能是通过抗氧自由基、减轻肺部炎性反应而发挥作用.     

吸入高浓度氧对大鼠肺泡发育过程促红细胞生成素受体的影响

目的 探讨大鼠肺泡发育阶段促红细胞生成素受体(erythropoietin receptor,EPOR)的动态变化以及吸入高浓度氧对EPOR的影响.方法 将48只新生Wistar大鼠生后12 h内随机分为空气组和高氧组.高氧组将动物置于自制密闭氧箱中,持续输入氧气,FiO2=0.85±0.02.在实验3,7和14 d每组随机选取8只处死,采集标本.采用HE染色观察肺组织病理改变,放射状肺泡计数评价肺泡化程度,免疫组织化学法检测肺组织血小板内皮细胞黏附分子-1(platelet endothelial cell adhesion molecule-1,PECAM-1)及EPOR表达,PT-PCR及Western blot法检测肺组织EPOR基因和蛋白表达.结果 高氧组3 d时肺毛细血管扩张、充血,7 d时肺泡体积增大、数量减少,14 d时肺泡数量及毛细血管进一步减少.空气组RAC值随日龄增长而增加,与空气组相比,高氧组7 d时RAC值降低[(6.85±104):(7.33±1.0),P＜0.01],差异在14 d更显著[(6.20±1.58):(9.07±0.69),P＜0.001].空气组PECAM-1表达随日龄增长逐渐增强,高氧组7 d和14 d PECAM-1表达较空气组明显减弱[(15.14±1.51):(31.47±2.43),(11.04±1.76):(41.41±3.83),P＜0.001].空气组EPOR染色在生后3 d最强,随日龄增长逐渐减弱,与空气组相比,高氧组各时点EPOR表达均明显减弱[(1.62±0.04):(1.82±0.06),P＜0.05;(0.48±0.01):(1.10±0.07),(0.39±0.04):(0.87±0.03),P＜0.001].空气组EPOR mRNA表达在生后3 d最强,高氧组各时点EPOR mRNA表达较空气组明显减弱[(0.87±0.07):(1.1±0.17),(0.18±0.07):(0.36±0.08),P＜0.01;(0.14±0.05):(0.36±0.09),P＜0.001].结论 EPOR可能在正常肺泡发育过程发挥调节作用,吸入高浓度氧导致的肺泡及血管发育阻滞可能与EPOR及PECAM-1蛋白表达减弱有关.

Abstract：

Objective Oxygen toxicity is thought to be a major contributing factor in the pathogenesis ofbronchopulmonary dysplasia (BPD). Animal experiments reveal that erythropoietin (EPO) may have protective effects against hyperoxic lung injury, but the mechanisms remain unknown.The aim of this study was to evaluate effects of hyperoxia on erythropoietin receptor expression in lung development of neonatal rats.Methods Several litters of Wistar pups were pooled together within 12 hours after birth and randomly divided into two groups (n = 24 in each ): air-exposed control group and hyperoxia-exposed group. In hyperoxia-exposed group, the rats were exposed to 85% oxygen. Pups ( n = 8 ) from each group were sacrificed on postnatal days 3, 7, and 14.The pulmonary histologcal and morphometric changes were observed after hematoxylin-eosin (HE) staining under light microscope. Radical alveolar counts ( RAC )were compared between the two groups to evaluate the differences of aveolarization. Expressions of platelet endothelial cell adhesion molecule-1 ( PECAM-1 ) and erythropoietin receptor (EPOR) in lung tissue were measured by immunohistochemistry.Expressions of EPOR mRNA and EPOR protein were measured by RTPCR and Western blotting. Results In hyperoxia-exposed group, there were a few inflammatory cells infiltration in interstitium on day 3 and inflammatory response worsened on day 7. Alveolar and capillary hypoplasia and interstitial fibrosis were evident on day 14.RAC increased in air-exposed control group along with the age in days. RAC decreased from day 7 in hyperoxia-exposed group compared with air-exposed control group [( 6.85 ± 1.04 ) vs.( 7.33 ± 1.0 ), P ＜ 0.01], which was more evident on day 14 [( 6.20 ±1.58 ) vs.(9.07 ± 0.69 ), P ＜ 0.001].Expression of PECAM-1 protein increased in air-exposed control group along with the age in days.But in hyperoxia-exposed group, it decreased on day 7 and 14 [( 15.14 ±1.51) vs.(31.47 ±2.43),(11.04 ± 1.76)vs.(41.41 ±3.83),P＜0.001]compared with air-exposed control group.Expression of EPOR on day 3 in air-exposed control group was the strongest and weakened gradually with the increase of postnatal days.Expression of EPOR in hyperoxia-exposed group decreased on day 3 and became more evident on day 7 and day 14 compared with air-exposed control group [( 1.62 ±0.04) vs.(1.82±0.06), P＜0.05;(0.48 ±0.01)vs.(1.10±0.07), (0.39±0.04) vs.(0.87±0.03 ) ,P ＜0.001].Expression of EPOR mRNA on day 3 in air-exposed control group was the strongest and was decreased significantly in hyperoxia-exposed group compared with air-exposed control group at all time points [(0.87±0.07)vs.(1.1±0.17),(0.18±0.07)vs.(0.36±0.08),P＜0.01;(0.14±0.05)vs.(0.36 ± 0.09 ), P ＜ 0.001]. Conclusions EPOR may participate in the modulation of normal lung development.Depressed expression of EPOR and PECAM-1 may be involved in the pathogenesis of alveolar and capillary hypoplasia induced by hyperoxia.     

儿童阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征多系统影响的研究

目的 探讨阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstructive sleep apnea-hypopneasyndrome,OSAHS)对儿童多器官系统的影响.方法 选择2009年3月至2010年12月在温州医学院附属第二医院、育英儿童医院睡眠障碍诊疗中心,经多导睡眠监测仪( polysomnography,PSG)监测确诊为OSAHS的儿童89例,根据病情轻重分为轻度组59例、中重度组30例,选取同期来本院体检的健康儿童100例为正常对照组.测量身高、体重、体重指数、血压,记录腺样体面容、牙咬合情况,测定血常规、甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、血糖和胰岛素水平,检查心电图和心脏B超,比较各组结果.结果 OSAHS轻度组、中重度组体重(kg)分别为23.3 ±10.1、21.9±8.4,身高(cm) 114.9±16.2、110.8±13.3,均低于正常组(31.8±10.1、136.1±15.1)(P ＜0.05),腺样体面容发生率23.7％、26.7％,牙咬合异常率74.6％、60.0％,明显高于正常组(0,4％)(P＜0.05);OSAHS中重度组高密度脂蛋白胆固醇[(1.20±0.30) mmol/L]、胰岛素[2.79 (0.84～16.16) mU/L]低于正常组[(1.40±0.27) mmol/L、4.92(0.76～16.80) mU/L],低密度脂蛋白胆固醇[ (2.61 ±0.75) mmol/L]高于正常组[(2.32 ±0.62) mmol/L] (P ＜0.05);OSAHS轻度组、中重度组红细胞计数(×1012/L)分别为4.93 ±0.37、5.23 ±0.22,血小板计数(×109/L) 292.92±75.64、292.50±63.05,明显高于正常组(4.70 ±0.31,255.60±69.12) (P＜ 0.05),收缩压(mm Hg,1 mm Hg =0.133 kPa)分别为98.54±10.44、99.13±19.13,高于正常组(87.88±11.37) (P ＜0.05),右室内径(mm) (14.24±1.64、13.17±2.07)小于正常组(16.10±2.96),主肺动脉内径(mm)(17.05±3.33、16.33±3.14)大于正常组(14.11 ±2.52),右室壁厚(mm) (3.43±0.26、3.57 ±0.20)大于正常组(3.32 ±0.25) (P ＜0.05),OSAHS中重度组心率[(94.43 ±10.64)次/min]比正常组[ (87.12±16.20)次/min]增快(P＜0.05);OSAHS中重度组与轻度组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 儿童OSAHS颌面发育畸形明显,可以影响其他系统的功能,有生长发育减缓、代谢紊乱、血液黏度增加、血压升高、心脏结构改变的倾向.     

乌司他丁治疗儿童重症肺炎的疗效观察

目的 观察并探讨乌司他丁治疗儿童重症肺炎的临床疗效.方法 回顾性分析100例儿童重症肺炎治疗情况,其中对照组52例,予以常规治疗;治疗组48例,在常规治疗基础上加用乌司他丁静脉滴注,20kU/(kg·d),疗程5d.观察患儿临床体征变化(体温、肺部啰音消失时间);评判治疗效果(氧疗时间、PICU入住天数、总住院天数);监测感染指标[外周血WBC计数、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)和降钙素原(procalcitonin,PCT)恢复正常时间];观察有无药物不良反应.结果 经过治疗,治疗组体温恢复正常时间为(5.81±1.26)d,对照组为(8.04±1.38)d,治疗组明显短于对照组(t=-8.42,P＜0.01).感染监测指标:治疗组WBC计数、CRP及PCT恢复正常的时间分别为(5.35±1.39)d、(6.98±1.66)d、(6.13±1.72)d,明显短于对照组[(6.65±1.79)d、(8.17±1.64)d、(7.52±1.78)d] (P＜0.01).治疗组入住PICU时间为(8.44±2.47)d,明显短于对照组(10.62±3.13)d(t=-3.84,P＜0.05).两组的肺部啰音消失时间、氧疗时间和总住院时间比较无差异.未发现应用乌司他丁治疗的患儿出现药物不良反应.结论 针对儿童重症肺炎,在有效的抗感染、呼吸及营养支持等治疗基础上,加用乌司他丁作为抗炎治疗,能有效改善患儿的临床表现及相关感染指标,缩短入住ICU的时间,且无不良反应,其可作为治疗儿童重症肺炎的有效措施之一.     

CD105在高氧肺损伤小鼠肺内表达水平及意义

目的探讨吸入中浓度氧新生小鼠血清和肺部血管内皮细胞膜抗原CD105表达水平及意义,寻求高氧肺损伤新生小鼠肺微血管发育可能的机制。方法清洁级4日龄昆明小鼠50只,随机分为观察组、对照组各25只。观察组置于氧箱中(FiO2:0.6),对照组置于空气中(FiO2:0.21),建立高氧肺损伤小鼠模型,每组分别于实验第0(实验开始时)、7、14、21、28天时随机选取5只小鼠留取血标本及肺组织,HE染色观察肺组织病理形态,酶联免疫吸附法检测血中CD105含量,免疫组化染色法检测肺组织CD105表达水平,并分析血清CD105浓度与肺组织CD105表达量的相关性。结果观察组HE染色下正常肺泡结构消失、肺泡融合、肺泡间隔增厚,肺泡炎和肺组织纤维化增加,放射状肺泡计数较对照组明显减少(P<0.01),随着吸氧时间延长,CD105的表达水平呈逐渐增高趋势,实验第7、14、21、28天观察组血清CD105浓度和肺组织CD105表达水平均高于对照组,血清(ng/L):[7天:(346.4±14.7)比(265.7±2.0),14天:(400.2±20.1)比(266.3±3.2),21天:(505.1±6.1)比(267.1±5.8),28天:(451.9±10.0)比(268.6±4.5),P<0.01];肺组织累积光密度值:[7天:(2.24±0.15)比(1.19±0.14),14天:(3.42±0.20)比(1.20±0.11),21天:(4.35±0.18)比(1.16±0.18),28天:(4.04±0.12)比(1.17±0.14),P<0.01],且观察组CD105在血清中与肺组织中的表达水平呈正相关(r=0.973,P<0.001)。结论 CD105可能代替传统的血管内皮生长因子和血管生成素-1,成为氧疗通气诱导血管重塑的重要血管生长因子。     

生长因子β1对儿童哮喘的作用及孟鲁司特钠对其影响

目的 探讨生长因子β1在儿童哮喘中的作用及观察孟鲁司特钠对其的影响。方法 筛选2009年9月-2010年9月我院哮喘专病门诊轻度持续哮喘患儿60例及来院健康体检儿童30例,将哮喘患儿随机分成孟鲁司特钠组和安慰剂对照组;采用双抗夹心酶联免疫吸附试验( ELISA)、RT-PCR技术分别检测治疗前后患儿血浆中TGF-β1水平和外周血单个核细胞(PBMC)中TGF-β1mRNA表达;采用流式细胞技术,检测表达叉状头/翅膀状螺旋转录因子3的CD4T调节细胞(Foxp3+ CD4+ Treg)及各亚型的比例。结果 (1)血浆中TGF-β1水平：治疗前哮喘组[(11.51±1.12) ng/L]明显低于健康对照组[(47.92±1.52) ng/L](q=20.01,P＜0.01);治疗后,孟鲁司特钠组[ (20.03±1.14)ng/L]高于安慰剂组[(12.10±3.91) ng/L]（q=14.62,P＜0.05）,但均值仍低于健康对照组;(2)外周血单个核细胞中TGF-β1 mRNA表达：治疗前哮喘组(0.31 +0.07)明显低于健康对照组(0.61±0.2) (q =8.97,P＜0.05);治疗后,孟鲁司特钠组(0.46±0.13)表达高于安慰剂组(0.32±0.04)（q=8.25,P＜0.05）,但仍低于健康对照组;(3)流式细胞检测结果各组间比较差异有统计学意义(P＜0.05)：哮喘患儿与健康对照组相比,Foxp3+ CD4+ Treg细胞比例增加[(8.30±1.30)％,(6.05±1.80)％];其中CD45 RA+ Foxp3lo比例增高[(4.60±1.04)％,(3.27±1.03)％];CD45 RA - Foxp3h1比例降低[(0.75±0.13)％,(0.93±0.26)％];CD45 RA-Foxp3lo比例两组差异无统计学意义。治疗后,孟鲁司特钠组较安慰剂组,aTreg细胞占Foxp3+ CD4+ Treg比例增加[(1.16±0.24)％,(0.89±0.22)％],差异有统计学意义。结论哮喘儿童体内存在血浆及外周血单个核细胞中TGF-β1表达的降低,可能是导致哮喘发病的重要原因;孟鲁司特钠能有效改善TGF-β1的表达并通过调节Foxp3的表达来发挥治疗作用。     

19例儿童重症心肌炎诊治体会

目的 探讨儿童重症心肌炎临床特点及治疗方法。方法 对我院2005年1月至2012年1月收治的19例儿童重症心肌炎（重症心肌炎组）发病特点、临床表现、诊治经过及预后进行回顾性分析,选择同期在我院体检的正常健康儿童23例为对照组。采用ELISA法检测心肌肌钙蛋白（cardiac troponin,CTn）-Ⅰ及血清氨基末端脑利钠肽前体（N-terminal pro-brain natriuretic peptide,NT-proBNP）水平,应用彩色多普勒超声心动图检查了解左室射血分数和左室短轴缩短率变化。结果 重症心肌炎组患儿CTn-Ⅰ为（18.67 ±12.31） ng/ml,显著高于正常对照组[（0.02 ±0.01） ng/ml],差异有统计学意义（P＜0.05）。与急性期相比,病程第7天CTn-Ⅰ为（0.55±0.24） ng/ml,呈逐渐下降趋势,第14天基本接近正常[（0.06±0.03） ng/ml],差异有统计学意义（P＜0.05）。重症心肌炎组NT-proBNP较对照组明显增高[（3 067.26 ±902.79） pg/ml vs （80.04±17.79） pg/ml,P＜0.05]。与急性期相比,病程第7天NT-proBNP为（648.63±342.37） pg/ml,病程第14天基本接近正常[（213.58±129.51） pg/ml]（P＜0.05）。重症心肌炎组患儿左室射血分数[（52.63±6.98）％vs（71.39±2.41）％]及左室短轴缩短率[（32.1±2.97）％vs（40.04±2.31）％]明显低于正常对照组,差异均有统计学意义（P均＜0.05）。结论 儿童重症心肌炎起病急,病情重,病死率高,在综合治疗基础上早期应用肾上腺素皮质激素和丙种球蛋白,必要时安装临时起搏器,可改善预后。     

高浓度氧对新生大鼠肺血管内皮生长因子及其受体表达的影响

目的:研究持续吸入75%氧对新生大鼠肺血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）及其受体（VEGFR1和VEGFR2）表达的影响,探讨较高浓度吸氧对肺血管发育的影响及与支气管肺发育不良（bronchopulmonary dysplasia,BPD）的关系。方法:新生足月Sprague-Dawley大鼠48只,随机分为对照组和实验组。实验组生后12 h开始持续吸入75%氧气。分别于实验开始后的7 d、14 d和21 d处死留取肺组织标本,苏木精-伊红染色观察病理改变,免疫组化检测VEGF及其受体蛋白表达,RT-PCR检测其mRNA表达。结果实验组大鼠肺组织结构发生类似“新型”BPD的病理改变。75％氧暴露21 d时,VEGF（10.9±2.7 vs 30.8±6.4）、VEGFR1（5.4±1.4 vs 15.6±3.4）和VEGFR2（11.3±2.6 vs 21.7±4.5）的蛋白表达均较对照组减少（P<0.05）;VEGF（1.6 vs 3.3）、VEGFR1（0.4 vs 6.6）及VEGFR2（0.5 vs 4.9）的mRNA表达均较对照组减少（P<0.05）。结论:在新生大鼠中,长时间吸入较高浓度氧可能通过抑制肺血管发育导致BPD的发生。［中国当代儿科杂志,2009,11（11）：927-930］