模拟航天环境对大鼠内耳淋巴液容积的影响

目的探讨模拟中长期飞船舱内失重及噪声复合因素对大鼠听力及内耳淋巴液容积的影响。方法健康SD大鼠22只随机分为实验组(失重+噪声组)12只,对照组10只。分别于暴露前、暴露后2周、4周、8周检测其双耳听性脑干诱发电位(ABR)阈值,并进行内耳MRI扫描,通过专用软件对内耳淋巴液容积进行计算。结果 1.实验组动物ABR阈值在暴露4周时开始与实验前出现统计学差异(P<0.05),且8周时ABR阈值与实验前有统计学差异(P<0.01)。2.实验组动物双耳内耳淋巴液容积在暴露2周时与暴露前无统计学差异(P>0.05),在暴露4周时与暴露前开始出现统计学差异(P<0.05),在暴露8周时与暴露前有统计学差异(P<0.01)。对照组动物内尔淋巴液容积在实验前后均无统计学差异。结论模拟中长期飞船舱内失重和噪声复合因素可造成SD大鼠听觉电生理的损伤,且会导致大鼠内耳淋巴液容积增大。     

失重和飞船舱内噪声复合因素对豚鼠内耳Caspase-3表达的影响

目的探讨失重及飞船舱内噪声复合因素对豚鼠听功能的损伤作用,及其对凋亡标志物Caspase-3在豚鼠内耳表达的影响。方法36只豚鼠随机分为4组,其中对照组6只,单纯失重组（A组）、单纯噪声组（B组）及失重+噪声组（C组）各10只。单纯失重组（A组）仅给予后肢悬吊模拟失重处理;单纯噪声组（B组）仅给予模拟飞船舱内噪声暴露;噪声+失重组（C组）同时给予噪声暴露和模拟失重的复合因素处理。实验前、暴露后即刻和恢复3天测试听性脑干反应阈值。于暴露后8小时和3天两个时间点取耳蜗,利用免疫组织化学染色方法显示凋亡标志物Cas-pase-3在实验动物内耳毛细胞、血管纹及螺旋神经节细胞中的表达。结果在暴露后8小时和恢复后3天两个时间点上,A组ABR阈值分别与B组、C组比较差异有统计学意义（p<0.05）,而B组与C组间差异无统计学意义（P>0.05）。在暴露前后,A组分别与B组、C组比较差异有统计学意义（p<0.05）,而B组与C组间差异无统计学意义（P>0.05）。比较在恢复前后ABR,A组与C组间差异无统计学意义（P>0.05）,B组分别与A组、C组比较差异有统计学意义（p<0.05）。Caspase-3免疫组化结果显示,单纯失重组（A组）、单纯噪声组（B组）和失重+噪声组（C组）在暴露后、恢复3天两个时间点上,毛细胞和血管纹Caspase-3表达均为阳性。三个实验组暴露后螺旋神经节的凋亡标志物Caspase-3表达均为阳性,其中A、C组为强阳性表达,B、C组为弱阳性表达。而恢复3天后,A组动物Caspase-3表达为阴性,较实验后表达明显降低,B、C组动物Caspase-3表达均为阳性,较暴露后表达有所增强。结论失重和模拟飞船噪声均可造成豚鼠ABR阈值的升高,当两者复合作用时,噪声暴露可能对其造成的听力损失的影响更大。相比于单纯噪声暴露,失重与噪声因素复合作用时可减缓听力恢复的进程。二者复合作用引起的听力损失与内耳毛细胞、螺旋神经节和血管纹细胞的凋亡有关。     

内耳淋巴液压力及其对内耳功能的影响

本就内、外淋巴压力的测量方法，正常和实验性内淋巴积水耳内、外淋巴压力的变化及其对内耳功能的影响进行综述。认为正常耳内、外淋巴压力相等，且有一致性变化；实验性膜迷路积水早期、内、外淋巴压力变化一致，但已有内功能损害；内淋巴囊阻塞术后５周以上，即积水晚期，多数出现肉淋巴压力增高，内、外淋巴压力有“分离”现象，即内、外淋巴出现压力梯度。内、外淋巴压力梯度的存在可能引起内耳微机械和微循环改变而导致内耳功     

应用3.0T高分辨率磁共振成像活体动态观测豚鼠内耳内淋巴液

目的探讨临床用3.0T磁共振成像系统能否在活体豚鼠区分内外淋巴液。方法5只豚鼠在3.0T磁共振下行内耳容积扫描后即刻颈内静脉注射钆喷酸葡胺（3ml/kg),注射后30分钟、60分钟、90分钟、120分钟、150分钟、180分钟、210分钟、240分钟行内耳容积扫描,观测内耳内外淋巴液成像变化。结果未注射对比剂前仅能显示耳蜗及前庭轮廓,尚不能区分内外淋巴液,注射30分钟后对比剂首先进入前庭及耳蜗底转及蜗顶,注射120分钟见对比剂扩展到全内耳并有较好的显像。结论临床用3.0T磁共振成像可区分豚鼠内外淋巴液,为研究膜迷路积水提供便利。     

模拟失重条件下飞船内噪声对豚鼠耳蜗形态与功能的影响

目的探讨模拟失重条件下,飞船内稳态噪声对豚鼠耳蜗形态与功能的影响。方法32只豚鼠随机分为单纯失重组16只、失重＋稳态噪声组16只。后肢悬吊法模拟失重,暴露于模拟飞船内在天飞行段的噪声环境,共5天。实验前、实验结束后即刻和实验结束后3天测试脑干诱发电位（ABR）阈值,取耳蜗标本行扫描电镜和透射电镜观察。结果实验组实验结束后即刻ABR阈值较实验前及实验结束后3天均增高（P〈0.01）;实验结束后3天ABR阈值较实验前高（P〈0.05）;实验结束后即刻及实验结束后3天失重＋稳态噪声组ABR阈值均较单纯失重组高（P〈0.01）。扫描电镜观察实验组实验结束后即刻耳蜗内、外毛细胞均受损。实验结束后3天,单纯失重组少数耳蜗各回内、外毛细胞的损伤程度比实验结束即刻加重;失重＋稳态噪声组耳蜗各回内毛细胞损伤较实验结束即刻重,外毛细胞损伤较实验结束即刻轻。实验组各时间段内毛细胞的损伤均重于外毛细胞,自第一回至第四回毛细胞损伤逐渐加重。透射电镜观察实验组耳蜗毛细胞及神经节细胞均可见空泡样改变,线粒体分布减少,细胞核固缩,可见细胞凋亡和细胞坏死两种细胞死亡现象。结论失重及失重＋稳态噪声均可造成豚鼠耳蜗形态和功能损伤,后者造成的损伤更重。失重对耳蜗毛细胞损伤以内毛细胞为重,损伤从底回至顶回逐渐加重。实验结束后3天较实验后即刻的听功能有所恢复但内毛细胞损伤加重。     

电钻噪声对豚鼠内耳功能和形态影响的实验研究

目的：观察耳科电钻噪声对豚鼠内耳功能的形态的影响,并探讨电钻噪声对内耳的损伤机制。方法：应用听性脑干反应（ABR）记录技术评价电钻噪声在不同时间暴露前后豚鼠听功能的变化。电钻噪声对豚鼠Corti器超微结构及组织化学的影响,采用定量组织化学技术测定豚鼠耳蜗外毛细胞（OHC）的琥珀酸脱氢酶（SDH）显色的灰度值,比较电钻噪声暴露前、暴露后6小时、1天、7天和15天时OHC的SDH的活性变化,并在光镜下观察耳蜗改变的情况。应用扫描电镜观察电钻噪声暴露后即刻(2h内）、1天、7天和15天豚鼠Corti器的超微结构改变。将豚鼠耳后切口置于电钻噪声连续暴露30分钟和60分。结果：听功能检测结果显示电钻噪声暴露后各组动物ABR值、潜伏期和波间期较正常时略有升高,但无明显差异（P＞0．05）。组织化学观察显示：电钻噪声连续60分钟暴露后各组动物耳蜗OHC和SDH显色灰度值与正常对照组和空白对照组无明显差异（P＞0．05）。扫描电镜观察发现各组动物耳蜗受损区域分布于外毛细胞第三排,尤以底转区和第二转明显,主要的病理变化有OHE纤毛轻蔗散乱,倒伏、融合及个别脱落。结论：说明耳科电钻就当前临床应用的强度,应用时间范围内来说,电钻噪声还未达到使其内耳超微结构损失的程度而造成内耳功能的改变。     

模拟飞船舱内中长期失重及噪声复合因素对大鼠听器官的影响

目的　探讨模拟飞船舱内2～8周的中长期失重及噪声复合因素对大鼠脑干诱发电位和耳蜗结构的影响。方法　健康成年大鼠随机分成雄性实验及对照组、雌性实验及对照组。实验组暴露于模拟失重及稳态噪声环境中,实验结束前给予脉冲噪声暴露;对照组不施加因素。分别于实验前、实验第2、4、8周及脉冲噪声暴露后检测双侧听性脑干反应阈值（ABR）,并行扫描电镜观察。结果　两实验组内脉冲噪声暴露后ABR阈值明显增高（P 均＜0.05）;实验后2、4周ABR阈值雌性实验组均较雄性实验组低（P 均＜0.05）,扫描电镜观察发现内外毛细胞缺失,大片倒伏,随着复合因素作用时间延长耳蜗毛细胞病理性改变加重。结论　中长期失重噪声复合因素可造成大鼠听功能损害,且脉冲噪声比稳态噪声更明显;损害存在性别差异;大鼠耳蜗毛细胞病理性改变随复合因素时间延长而加重。     

豚鼠内耳钆喷酸葡胺MRI显像的初步探讨

目的 通过MRI观察豚鼠鼓膜穿刺听泡内注射钆喷酸葡胺后内耳增强显影的特征,观察不同时间点造影剂在内耳的分布,找出内耳增强显影的最佳时间,同时了解钆喷酸葡胺在内耳的药代动力学特点,探讨在现有实验条件下内、外淋巴区分显影的可行性.方法 65只豚鼠随机数字表法分为13组,每组5只.豚鼠鼓膜穿刺听泡内注射生理盐水稀释8倍的钆喷酸葡胺,分别在注射前、注射后0.5、1、2、4、6、8、10、12、24、48、72及96 h行内耳MRI扫描(3D-T1 FSE序列).使用e-Film软件对内耳各部位MRI图像灰度值进行提取,应用体外试验获得的灰度值-造影剂浓度关系将灰度值转化成浓度.分别测量注射前、注射后1 d及7 d豚鼠左耳(生理盐水)和右耳(稀释造影剂)的听性脑干反应(ABR)阈值并进行对比.结果 注射后6 h为造影剂扩散至全内耳并达到较好显影条件的时间点,也即造影剂在内耳各部分达到较高浓度的时间,此时造影剂在前庭、底转鼓阶、底转前庭阶、第二转、第三转、顶转的浓度分别为589.29、552.54、570.17、255.08、107.09、139.18 μmol/L;造影剂选择性进入外淋巴,未见内淋巴增强显影.造影剂注射后1 d及7 d豚鼠左、右耳ABR阈值相比,差异无统计学意义(P值均＞0.05).结论 豚鼠听泡内注射钆喷酸葡胺后6 h为MRI内耳增强显影的最佳观察时间.造影剂可选择性显影外淋巴,对豚鼠ABR阈值无明显影响.通过MRI可以间接研究钆喷酸葡胺在内耳的代谢特点.     

头低位模拟失重状态对豚鼠耳蜗听功能与超微结构的影响

目的探讨头低位模拟失重对豚鼠耳蜗听功能与超微结构的影响。方法 22只豚鼠随机分为实验组16只和对照组6只。实验组采用头低位模拟失重法,身体纵轴与水平线呈-30°,于实验前、失重5天后即刻及脱离失重3天后分别测试豚鼠听性脑干反应(ABR),然后取耳蜗行扫描电镜和透射电镜观察。对照组不作任何处理。结果对照组豚鼠ABR反应阈为23.48±6.04dB SPL,实验组实验前为24.22±4.04,模拟失重5天后即刻ABR反应阈为41.61±7.01dB SPL,与实验前和对照组比较差异有显著统计学意义(P<0.05);脱离失重3天后实验组ABR反应阈为27.50±3.54dB SPL,与实验前相比差异无显著统计学意义(P>0.05)。扫描电镜观察发现失重5天后即刻豚鼠耳蜗内、外毛细胞散在缺失,纤毛融合、倒伏;透射电镜检查见内、外毛细胞细胞局部空泡形成,脱离失重3天后上述病变均有明显恢复,但未完全恢复正常。结论模拟失重5天即可以导致豚鼠耳蜗听觉功能和超微结构的损伤,脱离失重3天后听功能可以恢复正常,但其超微结构还没有完全恢复正常。     

水杨酸钠对豚鼠内耳血管通透性的影响

目的 :探讨水杨酸钠耳毒性的发生机制。方法 :采用硝酸镧作为示踪剂电镜下观察正常对照组与水杨酸钠组内耳基底膜螺旋血管、血管纹和内淋巴囊毛细血管的血管通透性。结果 :正常对照组基底膜内、外螺旋血管、血管纹毛细血管不具有通透性 ,正常内淋巴囊毛细血管具有一定通透性。水杨酸钠耳毒性发生时上述血管的通透性均增强。结论 :水杨酸钠可使内耳血管通透性发生改变 ,这可能参与了水杨酸钠耳毒性的发生。     

CAP amplitude after impulse noise exposure in guinea pigs

In this study, 21 guinea pigs were submitted to a single high energy impulse noise (gun shot with blank projectiles). The auditory function was evaluated over a 7-day recovery period by recording the compound action potential (CAP) from the round window. The threshold shift and input/output function (CAP amplitude and delay function of the stimulus intensity) were studied at different frequencies. CAP amplitude fell after the noise trauma, especially at the lower sound level, resulting in a threshold shift. Latency was significantly increased. During recovery, whereas latency returned to its initial value, CAP amplitude gradually increased and, in half the animals, exceeded the control value for the higher levels of stimulus. This could have been because of progressive disinhibition or recruitment, and may correspond clinically to hyperacusis. These results are discussed referring to those obtained by other authors using other methods.     

豚鼠耳蜗结构在9.4T MRI系统中的成像特点

目的研究豚鼠耳蜗结构在9.4 T MRI系统中的成像特点。方法2015年5—10月选用5只白化豚鼠在9.4 T MRI系统中进行内耳扫描,随后右侧颈内静脉注射钆喷酸葡胺(3 ml/kg),分别于注射后10、30、60、90和120 min进行内耳扫描。使用Image J软件对耳蜗的底转、第二转、第三转和顶转四个部位的不同时间点的MRI图像灰度值进行提取,绘制静脉注射造影剂后不同时间点耳蜗各部位MRI图像灰度变化曲线图,使用GraphPad Prism 5软件对结果行one-way ANOVA分析。结果注射造影剂前,MRI仅能显示豚鼠耳蜗及前庭轮廓,不能辨别内、外淋巴液。注射造影剂后10 min(底转灰度值8203±819)耳蜗前庭在T1像上即有增强,注射后30 min(底转灰度值10489±819)和60 min(底转灰度值13965±591)后耳蜗各阶显像逐渐增强,注射后90 min(底转灰度值18050±1250)时耳蜗、前庭、半规管均充分显影,可以清晰分辨出内外淋巴液,注射后120 min(底转灰度值18952±1185)时图像显影较90 min时无明显增强。造影剂进入内耳各部位的速度和量不等,在一定时间内,内耳各部位的造影剂分布变化均呈现持续上升的过程;造影剂在内耳各个部位的分布不均匀,耳蜗底转造影剂量最多,蜗顶最少,存在浓度梯度。结论用钆喷酸葡胺增强的高分辨MRI系统可以清晰区分出豚鼠内外淋巴液,静脉注射钆造影剂后90 min为MRI内耳增强显影的最佳观察时间,使用钆造影剂的MRI成像为内淋巴积水的病理改变提供了影像学诊断依据。     

豚鼠噪声暴露后畸变产物耳声发射与外毛细胞的改变

为观察豚鼠噪声暴露后畸变产物耳声发射（ＤＰＯＡＥ）与内耳毛细胞的改变，将１６只健康豚鼠分为３组，正常对照组３只，噪声后即刻组３只，７ｄ组１０只。暴露于１１５ｄＢ ＳＰＬ模拟潜艇机舱噪声中４ｈ，暴露后即刻及７ｄ检测ＤＯＰＡＥ听力图及Ｉ／Ｏ函数曲线，光镜及扫描电镜观察耳蜗毛细胞的改变。暴露即刻组ＤＰＯＡＥ振幅消失（Ｐ〈０．０１），７ｄ后又恢复至暴震前的基线水平（Ｐ〉０．０５）。光镜及扫描电镜显示耳蜗２     

Postnatal development of substance P in the inner ear of the guinea pig

Summary Appreciable amounts of substance P (SP) were found in guinea pig cochleas. The highest values were found in the postnatal period. Data presented favor the assumption of SP acting as a neuromodulator or neurotransmitter in the inner ear.     

Improvement in inner ear blood flow by nitric oxide following experimentally induced cochlear thrombosis in anesthetized guinea pigs

The nitric oxide (NO) donor sodium nitroprusside (SNP) applied to the round window membrane has recently been found to increase cochlear blood flow (CoBF) in normal guinea pigs and in normal and presbyacusic mice. This study examined the effect of topical applications of SNP on experimentally impaired CoBF in anesthetized guinea pigs. Small (3 μl) portions of 3% SNP were applied to the round window niche of both normal and thrombosed cochleas. Local vascular impairment was produced by ferromagnetic thrombosis of cochlear blood vessels and the microcirculation measured using laser Doppler flowmetry. Ferromagnetic thrombosis resulted in a mean decrease of CoBF to 52% of baseline. There was a clear improvement in mean CoBF to 84% of baseline by the topical application of SNP that depended on the degree of ischemic damage produced. Under neuroleptanalgesia and ketamine-xylazine anesthesia, significant increases in CoBF were measured in normal ears as well as in the thrombosed ones. However, several SNP applications were needed to improve the impaired CoBF, while a single portion was sufficient in the normal cochlea to cause a drastic increase in mean CoBF to 234% of baseline. In urethane-anesthetized animals, no flow increase was found despite repeated drug administration. Careful evaluation of the laser Doppler signals was necessary to accurately determine the concentrations of the moving blood cells and their mean velocities. Received: 8 August 1997 / Accepted: 11 February 1998     

Caspase 12在强噪声诱导下豚鼠耳蜗细胞凋亡中的作用

目的 探讨caspase 12在强噪声诱导的豚鼠耳蜗细胞凋亡中的作用.方法 选用健康雄性白色豚鼠32只,随机数字表法分为4组,将实验组动物暴露于声压级120 dB、4 kHz窄带噪声环境4 h.分别对健康对照组及噪声刺激后第1、4、14天组豚鼠测试听性脑干反应(ABR).每组取4只豚鼠耳蜗作石蜡切片,另外4只豚鼠提取耳蜗总蛋白.通过透射电镜和脱氧核糖核甘酸末端转移酶介导的缺口末端标记技术(ternial-deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeing,TUNEL)检测耳蜗凋亡细胞,免疫组化及蛋白质印迹(Western blot)法检测Bip/GRP78、caspa8e 12蛋白的表达.结果 透射电镜观察到实验组第1天耳蜗外毛细胞、螺旋神经节细胞出现凋亡的特征性改变.实验组耳蜗Corti器、侧壁的血管纹和螺旋神经节存在TUNEL阳性细胞,第1天组最多;对照组未见阳性细胞.免疫组化、Western blot检测实验组Bip/GRP78蛋白明显高于对照组,且在第1、4、14天都维持在比较高的水平;caspase 12蛋白含量在噪声刺激后迅速增高,第1、4天达到高峰,第14天表达明显下降,但仍维持较高水平.结论 强噪声可以诱导豚鼠耳蜗细胞凋亡,caspase 12活化引起内质网应激反应性凋亡通道可能是此过程的信号途径之一.     

The inner ear and the in vitro system

Summary The embryologic labyrinthine development of the CBA/CBA mouse occurs parallell in vivo and in vitro. Regarding post partum inner ears, either as cultured otocysts passing a corresponding time in vitro or inner ear explants of newborn/mature animals, the extracorporal system becomes unable to maintain specialized hair cell structures for more than a few days. The sensory cells themselves, however, survive for considerably longer time. Vestibular hair cells show sensory hair fusion. Cochlear hair cells loose their surface structures but the sensory hair rootlets penetrating into the cuticle are preserved. Post partum inner ears from the guinea pig reacted in a similar way in vitro as did labyrinths from the CBA/CBA mouse.Supported by grants from Karolinska Institutet, The Swedish Medical Research Council (grant no 12X-720) and The Swedish Society of Medical Sciences     

噪声对豚鼠耳蜗电位及其超微结构的影响

目的观察噪声暴露对豚鼠耳蜗电位和超微结构的影响。方法选用健康杂色豚鼠10只,以右耳为噪声暴露耳,以左耳为对照耳,右耳持续给白噪声100dBSPL2小时。于噪声暴露前及噪声暴露后测量右耳耳蜗电位,并于噪声暴露后取噪声暴露耳和对照耳的耳蜗,应用透射电镜进行形态学的观察。结果噪声暴露后耳蜗微音电位幅度下降并且其非线性特点消失,听神经复合动作电位阈值明显升高;内毛细胞及其下方传入神经末梢空化,外毛细胞溶酶体增多、胞浆内出现空泡。结论噪声暴露不仅引起外毛细胞的损伤,还可以引起内毛细胞及传入神经纤维的损伤。