骨膜蛋白在实验性病毒性心肌炎小鼠的表达及意义

目的 探讨骨膜蛋白(periostin)在病毒性心肌炎(VMC)中的表达及可能作用.方法 应用柯萨奇病毒B3(CVB3)感染4周龄Balb/c小鼠,建立VMC小鼠模型.100只小鼠分为正常对照组(n ＝ 40)和病毒组(n ＝ 60).在CVB3感染后第0、7、14、28、56天留取标本,测定各实验组不同时间点心肌胶原容积分数(CVF)值(Masson染色)、血清血管紧张素(Ang)Ⅱ水平(ELISA法)、心肌组织中骨膜蛋白和转化生长因子(TGF)β1 mRNA相对表达量(RT-PCR).将骨膜蛋白 mRNA相对表达量与其他指标进行直线相关性分析.结果 VMC组小鼠骨膜蛋白mRNA表达量从病毒感染后第7天开始增加,第28天持续升高,第56天时表达量最高(P ＜ 0.01).骨膜蛋白mRNA表达量与CVF、血清AngⅡ、TGFβ1 mRNA相对表达量均呈直线正相关(r ＝ 0.870 ～ 0.943,P均＜ 0.01).结论 骨膜蛋白的异常表达在VMC的发生、发展中起重要作用,可能参与了VMC心肌纤维化的发生过程.同时骨膜蛋白与AngⅡ及TGF-β1表达相关,可能成为抗VMC心肌纤维化的新靶点.     

不同时期卡维地洛干预对柯萨奇病毒致心肌纤维化模型小鼠心肌组织炎性因子表达的影响

目的 研究柯萨奇病毒诱导小鼠病毒性心肌炎后心肌纤维化发病中转化生长因子β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)、内皮素-1(ET-1)等炎性因子的表达及不同时期应用卡维地洛干预对其影响.方法 雄性BALB/c小鼠40只随机分为对照组、模型组、急性期治疗组、慢性期治疗组,每组10只.对照组皮下注射9 g/L盐水,其余组腹腔注射100TCID50的柯萨奇病毒B3(CVB3) 0.1 mL,以后每2周腹腔接种同批次CVB3,每次递增0.05 mL,共6周;急性期治疗组第2天开始、慢性期治疗组第4周开始给予卡维地洛10mg/(kg·d)灌胃,共2周;对照组和模型组均给予等量9 g/L盐水灌胃.第6周末各组取心脏计算心脏质量指数(HWI),心肌组织行Masson染色测胶原容积积分(CVF);酶联免疫吸附试验法检测心肌组织ET-1水平,免疫组织化学检测TGF-β1和CTGF水平;反转录-聚合酶链反应测定三者mRNA表达.结果 与对照组相比,模型组小鼠HWI及心肌组织CVF明显升高,差异有统计学意义(P均＜0.01);急、慢性期治疗组较模型组下降,差异有统计学意义(P均＜0.01);且急性期治疗组低于慢性期治疗组,差异有统计学意义(P均＜0.05);模型组心肌组织中TGF-β1、CTGF、ET-1 mRNA和蛋白的表达明显升高(P均＜0.01),急、慢性治疗组较模型组下降,且急性期治疗组较慢性期治疗组降低(P均＜0.01).结论 TGF-β1、CTGF、ET-1参与CVB致心肌纤维化的发病过程,卡维地洛可通过下调炎性因子的过度表达减轻心肌纤维化程度,早期应用效果好.     

整合素连接激酶在病毒性心肌炎中的表达及作用

目的 探讨整合素连接激酶(ILK)在病毒性心肌炎(VMC)的发生、发展过程中的作用,及ILK和转化生长因子(TGF)-β1在心肌纤维化形成过程中的作用.方法 应用柯萨奇病毒B3(CVB3)感染Balb/c小鼠,建立VMC小鼠模型.实验分为正常对照组(n=30)和病毒组(n=40).在CVB3感染后第7、14、28、56天应用免疫组织化学方法检测各实验组ILK和TGF-β1的表达,对心肌胶原纤维进行Masson染色和测定血清CK-MB水平,同时分析各实验组不同时间点心肌组织中ILK和TGF-β1阳性表达与心肌胶原纤维Masson染色阳性面积及与血清CK-MB水平的相关性.结果 正常对照组无或仅有极少量的ILK和TGF-β1阳性表达,病毒组在病毒感染后各时间点ILK和TGF-β1阳性表达面积均明显增加,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),且ILK和TGF-β1阳性表达面积存在直线相关性(r=0.970,P<0.01);病毒组小鼠于病毒感染后第14天开始Masson染色阳性面积明显增多(P<0.05);且病毒组小鼠心肌组织中ILK阳性表达面积与心肌胶原纤维Masson染色阳性面积存在直线相关性(r=0.996,P<0.01);心肌组织中ILK的阳性表达面积与血清CK-MB无相关性(r=-0.624.P>0.05).结论 ILK的异常表达在VMC的发生、发展中起重要作用,在VMC发病进程中ILK参与了心肌纤维化的形成过程.     

病毒性心肌炎小鼠模型中Caveolin-3表达及银杏叶提取物的相关干预研究

目的观察小凹蛋白-3(Caveolin-3)在病毒性心肌炎(viral myocarditis,VMC)小鼠模型心肌组织中的表达情况及银杏叶提取物的干预效果。方法选取160只Balb/c小鼠,随机分成正常对照组、病毒性心肌炎组(VMC)、参麦治疗组(SM)、银杏叶提取物治疗组(GL),每组各40只。建立VMC小鼠模型。在柯萨奇病毒B3(CVB3)感染后第5、10、15天各组随机处死8只小鼠,HE染色、Masson染色法观察心肌病变,半定量RT-PCR方法检测小鼠心肌组织中Caveolin-3 mRNA的相对表达量,并作相关性分析。结果 VMC小鼠的心肌表现为炎性病变;SM及GL组小鼠的炎性改变在各时间点均较VMC组轻;VMC组小鼠第10、15天的CVF明显高于对照组(P均<0.01),SM及GL组小鼠均较VMC组改变轻(P均<0.01);VMC组小鼠Caveolin-3 mRNA的相对表达量随着时间的推移增加明显;SM组及GL组干预后,Caveolin-3 mRNA的相对表达量亦有所降低(P均<0.05)。Caveolin-3 mRNA的相对表达量与病理积分、CVF密切相关(r=0.959、-0.896,P均<0.05)。结论 Caveolin-3可能参与了病毒性心肌炎的发病,银杏叶提取物对病毒性心肌炎具有一定的治疗作用。     

柯萨奇病毒B3病毒性心肌炎小鼠心肌组织微小RNAl初始体和连接蛋白43的表达

目的 观察柯萨奇病毒B3(CVB3)病毒性心肌炎(VMC)小鼠心肌组织微小RNA1初始体(pri-miRNA-1)和连接蛋白43(Cx43)的表达变化,探讨VMC室性心律失常的发生机制.方法 4周龄雄性Balb/c小鼠70只随机分为VMC组40只(14 d和28 d2个亚组各20只)和对照组30只(14 d和28 d2个亚组各15只).VMC组腹腔注射CVB3Nancy株悬液0.1 mL,对照组腹腔注射不含病毒的RPMI 1640培养基0.1 mL.2组小鼠分别在接种第14、28天无痛苦处死,取心室肌,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测其心室肌组织pri-miRNA-1、dicer1 mRNA的表达,免疫组织化学法检测其Cx43的表达.结果 1. VMC组14 d和28 d小鼠心室肌组织pri-miRNA-1表达水平均显著高于对照组(0.82±0.04 vs 0.64±0.01,0.79±0.03 vs 0.62±0.01 Pa<0.01);2.VMC组14 d和28 d小鼠心室肌组织dicer1 mRNA表达水平均显著高于对照组(0.91±0.03 vs 0.72±0.02,0.87±0.02 vs 0.71±0.02 Pa<0.01);3.VMC组小鼠心室肌组织炎性病灶中变性、坏死周围心肌细胞Cx43表达明显减弱,甚至阴性,分布不规则,VMC组14 d和28 d亚组Cx43蛋白表达均显著低于对照组(0.27±0.01 vs 0.42±0.02,0.22±0.02 vs 0.44±0.02 P.<0.01);4.VMC组小鼠心室肌组织pri-miRNA-1表达水平与Cx43蛋白水平呈显著负相关(r=-0.798 P<0.01),与dicerl mRNA表达水平呈显著正相关(r=0.828 P<0.01).结论 VMC小鼠心肌组织pri-miRNA-1和dicer1参与了CVB3的发生机制,dicer1表达升高可能通过促进miRNA-1生成、抑制Cx43的表达促进室性心律失常的发生.实用儿科临床杂志,2009,24(10):754-756     

急性病毒性心肌炎小鼠肿瘤坏死因子-α、单核细胞趋化蛋白-1的表达及卡维地洛的干预作用

目的 探讨TNF-α、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)在急性病毒性心肌炎(VMC)发病中的作用及β受体阻滞剂卡维地洛对其影响.方法 将80只4周龄雄性Balb/c小鼠随机分为3组:心肌炎组(n=30)、卡维地洛组(n=30)和对照组(n=20),心肌炎组及卡维地洛组经腹腔接种柯萨奇病毒B3(CVB3)诱发急性VMC,对照组接种不含病毒的Eagle's液;卡维地洛组于接种病毒次日开始灌服卡维地洛5 mg/kg,心肌炎组和对照组灌服9 g/L盐水,每天2次.于接种后的第7、14天随机从各组抽取8只小鼠取血后处死,HE染色检测小鼠心肌病理积分,ELISA法检测血清TNF-α水平,RT-PCR检测心肌组织MCP-1 mRNA的表达.结果 心肌炎组心肌组织病理积分较对照组明显增高(P＜0.01),卡维地洛组较心肌炎组病理积分降低(P＜0.05);心肌炎组小鼠血清TNF-α水平较对照组升高(P＜0.01),且与心肌病理积分呈正相关(r=0.42,P＜0.05),卡维地洛组TNF-α水平较心肌炎组显著下降(P＜0.05);与对照组比较,心肌炎组小鼠心肌MCP-1 mRNA表达明显增加(P＜0.01),卡维地洛组小鼠心肌MCP-1 mRNA表达较心肌炎组明显下降(P＜0.05).结论 TNF-α和MCP-1参与VMC的发病过程,卡维地洛可能通过下调TNF-α、MCP-1的过表达减轻CVB3感染小鼠的心肌损害,起心肌保护作用.     

半乳糖凝集素-3在病毒性心肌炎小鼠心肌组织中的动态变化及临床意义

目的 探讨半乳糖凝集素-3(Gal-3)在小鼠柯萨奇病毒B3(CVB3)所致病毒性心肌炎(VMC)中的表达及其临床意义.方法 选取58只健康雄性Balb/C小鼠,随机分为VMC组(n=50)和对照组(n=8).VMC组小鼠腹腔接种半数组织培养感染剂量( TCID50)为10-5 L-1的Nancy株CVB3病毒液0.1mL,分别于接种第7、10、14、28天随机取8只处死;对照组小鼠腹腔接种不含病毒的eagle氏液0.1 mL,于第28天处死.光镜下观察小鼠心肌组织的病理变化并计算心肌病理积分;运用实时荧光定量PCR检测心肌组织中Gal-3 mRNA的表达,应用ELISA法检测外周血Gal-3水平,并与心肌病理积分作直线相关性分析.结果 1.与对照组小鼠比较,VMC组小鼠心肌组织Gal-3 mRNA的表达在第7天(0.91 ±0.64 vs 10.09 ±2.78)、第10天(0.91 ±0.64 vs 12.49 ±6.08)和第14天(0.91 ±0.64vs2.86±2.90)均明显增高(Pa＜0.05).2.与对照组小鼠外周Gal-3水平(5.27±1.11)比较,VMC组小鼠外周血Gal-3水平在第7天(9.70±2.39)、第10天(8.98±3.03)和第14天(7.73±1.88)也均明显增高(Pa＜0.05).3.小鼠心肌组织中Gal-3 mRNA与外周血中Gal-3表达水平均与心肌病理积分呈直线正相关(r=0.77、0.69,Pa＜0.05).结论 Gal-3参与VMC的发生与发展,且与VMC的病情严重程度有关,可作为VMC新的检测指标.     

转化生长因子-β1及结缔组织生长因子在病毒性心肌炎小鼠中的表达及缬沙坦的干预作用

目的 探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)及结缔组织生长因子(CTGF)在病毒性心肌炎(VM)小鼠中的表达及缬沙坦的干预作用.方法 雄性Balb/c小鼠54只随机分为对照组、模型组和治疗组.模型组和治疗组小鼠腹腔注射CVB3悬液0.1 mL建立VM模型,治疗组从接种病毒日起口饲含缬沙坦10 ms/(kg·d)的饮水.分别于第7、14、28天每组随机抽取6只小鼠断颈处死.对其心脏称重后采用40 g/L多聚甲醛固定,HE染色后光镜下观察其心肌组织形态学改变,半定量计算其病理积分.免疫组织化学法检测其心肌Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达,并应用病理图像分析仪进行图像分析,分别计算Ⅰ型、Ⅲ型胶原面积.大鼠心肌组织CTGF、TGF-β1水平采用免疫组织化学法测定.结果 与对照组比较,模型组病理积分,心肌Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达,心肌组织CTGF、TGF-β1表达水平均显著升高(Pa<0.05).治疗组病理积分,心肌Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达、心肌组织中CTGF、TGFβ1表达水平均较模型组显著降低(Pa<0.05).相关分析显示,心肌Ⅲ型胶原蛋白表达与CTGF、TGF-β1水平呈正相关,TGF-β1与CTGF表达亦呈正相关.结论 TGF-β1及CTGF协同参与了VM小鼠心肌纤维化的发生、发展过程.缬沙坦可延缓心肌纤维化的发生发展,其与降低VM小鼠的CTGF、TGF-β1的表达有关.     

碱性成纤维细胞生长因子及转化生长因子β1在病毒性心肌炎小鼠中的表达

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及转化生长因子β1(TGF-β1)在小鼠柯萨奇病毒性心肌炎心肌纤维化中的可能作用及相互关系。方法雄性BALB/c 4周龄小鼠80只随机分为实验组和对照组,实验组用柯萨奇病毒B3重复感染建立心肌炎模型,对照组同期腹腔注射同等剂量磷酸盐缓冲液,实验组及对照组分别于初次接种病毒后第7、14、28、42天,随机抽取8只存活小鼠处死并留取标本,测定小鼠不同时期心肌胶原容积分数(CVF)值(Masson染色)、bFGF和TGF-β1的蛋白及mRNA表达(免疫组化及RT-PCR方法 ),并作相关性分析。结果在各时间点,实验组小鼠bFGF、TGF-β1的蛋白及mRNA表达均高于对照组,并随时间推移逐渐增高,差异有统计学意义(P均0.01),且均与CVF呈正相关(r=0.86~0.95,P均0.01),bFGF与TGF-β1的表达(mRNA和蛋白)也呈显著正相关(r=0.94、0.92,P均0.01)。结论 bFGF与TGF-β1可能协同促进病毒性心肌炎心肌纤维化的发生发展,可为今后心肌纤维化的治疗提供新的靶点。     

苦参素抗慢性病毒性心肌炎心肌纤维化作用的研究

目的 初步探讨苦参素抗慢性病毒性心肌炎(CVMC)心肌纤维化的作用及其作用机制.方法 以柯萨奇病毒B3株重复增量感染小鼠建立CVMC模型,正常对照组1及正常对照组2同期腹腔注射等体积生理盐水.42 d取模型组8只及正常对照组1小鼠评估CVMC模型制备情况.后将CVMC模型组小鼠随机分为CVMC对照组、卡托普利干预组及苦参素干预组,卡托普利干预组及苦参素干预组按100 mg/(kg·d)灌胃给药28 d;同期给予CVMC对照组及正常对照组2等体积生理盐水灌胃,随后杀死各组小鼠.以苦味酸天狼猩红行心肌胶原组织特异性染色,免疫组织化学方法 及反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测心肌组织中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)蛋白及基因水平表达;免疫组织化学法及蛋白免疫印迹(Western blotting)法检测小鼠心肌组织中转化生长因子(TGF-β1)蛋白水平的表达;并运用图像分析软件计算心肌组织中的胶原容积积分(CVF,%)、Ang Ⅱ及TGF-β1阳性面积百分率.结果 42 d CVMC组小鼠心脏左室舒张末期内径(3.95±0.31)mm、左室收缩末期内径(3.13±0.26)mm较正常对照组1[(3.61±0.26)mm、(2.33±0.20)mm]均明显扩大(P均＜0.01);射血分数[(42.1±5.3)%]、短轴缩短率[(20.3±2.4)%]及主动脉血流峰值速度[(61.1±6.7)cm/s]较正常对照组1[(72.9±7.3)%、(36.8±4.1)%、(83.3±9.2)cm/s]均显著降低(P均＜0.01);心率[(375.3±32.2)次/min]较正常对照组1[(343.4±31.3)次/min]明显增快(P＜0.01).42 dCVMC组小鼠心肌组织CVF[(13.95±1.08)%]较正常对照组1[(6.52±1.31)%]显著增加(P＜0.01).70 d CVMC对照组小鼠心肌组织CVF[(14.88±1.11)%]较正常对照组[(26.77±1.32)%]、卡托普利干预组[(9.83±1.15)%]及苦参素干预组[(9.94±1.35)%]均显著增加(P均＜0.01);卡托普利干预组AngⅡ的蛋白[(5.05±1.80)%]及基因(0.248±0.035)表达较CVMC对照组[(26.92±3.21)%、(0.598±0.049)]明显减少(P均＜0.01),但苦参素干预组小鼠心肌组织AngⅡ的蛋白[(23.94±4.58)%]及基因(0.56±0.033)表达较CVMC对照组[(26.92±3.21)%、(0.598±0.049)]无明显差异(P均＞0.05);苦参素干预组小鼠心肌组织TGF-β1的蛋白表达[(7.925±2.082)%、(0.254±0.036)]及卡托普利干预组TGF-β1的表达[(8.138±2.058)%、(0.222±0.038)]均较CVMC对照组[(24.86±3.813)%、(0.544±0.044)]明显降低(P均＜0.01),两组相比差异无统计学意义(P＞0.05).结论苦参素可抑制慢性病毒性心肌炎心肌组织的纤维化,下调心肌组织中TGF-β1的表达可能是其作用机制之一.     

曲尼司特抑制病毒性心肌炎小鼠心肌纤维化的作用

目的 探讨曲尼司特对病毒性心肌炎(VMC)小鼠心肌纤维化的作用。方法 72只BALB/C小鼠完全随机分为对照组、模型组和干预组(n=24),对照组小鼠腹腔内注射Eagle's培养液,模型组和干预组腹腔注射科萨奇病毒B3建立VMC模型,干预组建模后予曲尼司特灌胃(每日200mg/kg),维持给药到取材前一天。分别在造模后7、14、28d三个时间点每组各取8只小鼠心肌组织,行苏木精-伊红染色和Masson染色观察病理改变;甲苯胺蓝和硫瑾染色观察肥大细胞(MC)计数;RT-PCR及Westernblot检测结缔组织生长因子(CTGF)、I型胶原蛋白(ColI)的mRNA及蛋白表达量;并分别对CTGFmRNA与MC计数和ColImRNA的表达进行相关性分析。结果 各时间点模型组心肌病理积分及胶原容积分数高于对照组,曲尼司特干预后降低(PPr=0.439,P=0.049);模型组7d、14d时心肌组织CTGFmRNA与ColImRNA呈正相关(r=0.646,P=0.007),28d时亦呈正相关(r=0.326,P=0.031)。结论 曲尼司特可能通过抑制MC的聚集、降低CTGF和ColI的表达,减轻VMC小鼠心肌纤维化效应。     

小儿病毒性心肌炎与Fas/Fasl介导的外周血淋巴细胞凋亡的关系

目的 探讨Fas/Fasl介导的外周血淋巴细胞凋亡在病毒性心肌炎发病中的作用.方法 选择临床诊断病毒性心肌炎患儿和正常小儿各25例,采用Annexin V/PI双参数法经流式细胞仪定量检测两组小儿外周血淋巴细胞凋亡百分率,并用双色流式细胞仪检测外周血淋巴细胞Fas、Fasl蛋白表达结果心肌炎患儿外周血淋巴细胞凋亡率[(0.697 6±0.110 9)%]较正常对照组[(0.128 8±0.106 9)%]明显升高(t=18.459,P＜0.001),且与肌酸激酶同工酶、乳酸脱氢酶、肌酸激酶、羟丁酸脱氢酶升高程度均呈正相关(r=0.817,P＜0.01;r=0.785,P＜0.01;r=0.726,P＜0.01;r=0.712,P＜0.01);心肌炎患儿外周血淋巴细胞Fas、Fasl蛋白表达[(2.8804±0.3020)、(4.4496±0.4836)]较对照组[(2.1300±0.6200)、(0.123 8±0.0384)]明显增加(t=17.321,P＜0.001;t'=44.577,P＜0.001);心肌炎患儿外周血淋巴细胞凋亡百分率与 Fas、Fasl蛋白表达均呈正相关(r=0.972,P＜0.01;r=0.958,P＜0.01)结论病毒性心肌炎患儿外周血淋巴细胞凋亡增加,可能为细胞免疫功能下降的原因之一,且与心肌损害程度相关 Fas、Fasl基因在病毒性心肌炎患儿外周血淋巴细胞凋亡中起着重要作用.     

HGF对TGF-β1诱导尿道瘢痕成纤维细胞α-SMA及细胞外基质过度合成的保护作用

目的 探讨HGF对TGF-β1诱导尿道瘢痕成纤维细胞α-SMA及细胞外基质过度合成的保护作用.方法 收集尿道下裂术后瘢痕组织的标本,进行尿道瘢痕成纤维细胞的分离和培养.待细胞生长成单层后,以胰蛋白酶消化传代.取第四代成纤维细胞用于实验,当细胞达到80%融合时,培养液中加入TGF-β1(5ng/ml)及HGF(10～40ng/ml).培养72 h后,用RT-PCR检测各组α-SMA mRNA的变化;ELISA测定细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原及纤维结合素的表达.结果 TGF-β1能显著诱导α-SMA m-RNA表达.随HGF的加入,α-SMA m-RNA的表达则明显受到抑制(P＜0.05),且随HGF浓度的升高其阻抑作用呈逐渐增强趋势.对照组、单纯TGF-β1组、加入TGF-β1与10、20、40ng/ml HGF组的Ⅰ型胶原A值分别为0.51±0.04、0.78±0.05、0.71±0.02、0.63±0.03、0.57±0.02,Ⅲ型胶原A值分别为0.12±0.01、0.29±0.02、0.21±0.02、0.14±0.01、0.08±0.01,纤维结合素A值分别为0.24±0.03、0.51±0.02、0.49±0.01、0.38±0.02、0.28土0.01.表明TGF-β1同样能诱导Ⅰ、Ⅲ型胶原及纤维结合素的表达(P＜0.01),而HGF则可以有效地阻抑其表达,其效应呈剂量依赖性(P＜0.05).结论 HGF对TGF-β1诱导的尿道瘢痕成纤维细胞α-SMA及细胞外基质过度合成具有抑制作用.这为临床预防和治疗尿道瘢痕狭窄提供了理论依据.

Abstract：

Objective To examine the inhibitory effects of HGF on TGF-β1 induced a-SMA and extracellular matrix synthesis in cultured fibroblasts derived from urethral scar. Methods Fibroblasts isolated from urethral scar were cultured ex vivo. After the fibroblasts reached confluence, cells were detached using trypsin/ethylenediamine tetra-acetic acid. All experiments were performed using the cells at the fourth passage. At 80% confluence, TGF-β1 (5 ng/ml) and HGF (10-40 ng/ml) were added to the culture medium. After 72 hours co-incubation, the mRNA of a-SMA was studied by RTPCR. The productions of collagen Ⅰ, Ⅲ and fibronectin in supernatants were also examined using ELISA. Results TGF-β1 markedly induced a-SMA mRNA expression in cultured fibroblasts. However, HGF could abrogated TGF-β1-induced a-SMA mRNA expression in a dose-dependent manner (P＜0. 05). The levels of collagen type Ⅰ were 0. 51 ± 0. 04,0. 78 ± 0. 05,0. 71 ± 0. 02,0. 63 ± 0. 03, and 0. 57 ± 0. 02 in control, TGF-β1, TGF-β1 + 10 ng/ml HGF, TGF-β1 + 20 ng/ml HGF, and TGF-β1 +10 ng/ml HGF group, respectively. The levels of collagen type Ⅲ were 0. 12 ± 0. 01,0. 29 ± 0. 02,0. 21 ± 0. 02,0. 14 ± 0. 01, and 0. 08 ± 0. 01 in control, TGF-β1, TGF-β1 + 10 ng/ml HGF, TGF-β1 +20 ng/ml HGF, and TGF-β1 + 10 ng/ml HGF group, respectively. And the levels of fibronectin were 0.24±0.03,0.51 ± 0.02,0.49 ± 0.01,0.38 ± 0.02,0.28 ± 0.01 in control, TGF-β1, TGF-β1 +10 ng/ml HGF, TGF-β1 + 20 ng/ml HGF, and TGF-β1 + 10 ng/ml HGF group, respectively. TGF-β1 significantly stimulated collagen Ⅰ, Ⅲ and fibronectin production in fibroblasts (P＜0. 01 ). However,HGF could reduced abrogated the up-regulation of collagen Ⅰ, Ⅲ and fibronectin induced by TGF-β1 in a dose-dependent manner (P＜0. 05). Conclusions HGF can effectively inhibit TGF-β1 induced aSMA and extracellular matrix synthesis in cultured fibroblasts derived from urethral scar.     

整合素β3受体信号途径在结缔组织生长因子调控肺动脉平滑肌细胞增殖与迁移和细胞外基质基因表达中的作用

目的 探讨整合素β3受体信号途径在结缔组织生长因子(CTGF)促进肺动脉平滑肌细胞增殖、迁移和细胞外基质基因表达中的作用机制研究.方法 分离并培养SD大鼠肺动脉中膜平滑肌细胞,实验使用第3～7代细胞;细胞分为3组:(1)空白组:不加任何刺激因子;(2)CTGF组:培养体系中加入CTGF(50 ng/ml);(3)CTG...     

干扰素-λ2对急性病毒性心肌炎小鼠凋亡相关蛋白的研究

目的：干扰素-λ（IFN-λ)广泛存在于人体各组织中,目前研究发现其具有抗病毒、抗肿瘤等作用。但其是否能用于治疗病毒性心肌炎尚缺乏相关报道。探讨IFN-λ2在病毒性心肌炎（VMC）早期的作用,为IFN-λ2 是否能应用于临床治疗或预防VMC提供实验室依据。方法：采用腹腔注射柯萨奇B3（CVB3）病毒的方法制造病毒性心肌炎小鼠模型。实验分3组：空白对照组、病毒组、IFN-λ2 治疗组。空白对照组给予腹腔注射等量的PBS培养液,记为第0天;IFN-λ2治疗组从第1天开始,连续5 d每天经背部皮肤不同点给予小鼠IFN-λ2 400 ng （0.1 mL）,空白对照组和病毒组则每天以同样方法给予等量生理盐水。死亡小鼠从组中剔除。9 d后处死所有存活小鼠。检测各组小鼠心脏的病理改变。采用免疫组织化学技术检测各组小鼠心脏组织中凋亡相关蛋白Bcl-2 及Bax的表达。结果：①病毒组心肌病理评分要高于空白对照组及IFN-λ2治疗组。 ②免疫组化结果显示正常心肌组织有少量Bcl-2及Bax的表达,病毒组较空白对照组Bcl-2表达减少、Bax表达明显增加(P<0.01);IFN-λ2治疗组较病毒组Bcl-2表达增加、Bax表达减少(P<0.01) 。结论：INF-λ2 能减轻柯萨奇病毒所致心肌炎小鼠的心肌病理改变,能抑制小鼠心肌细胞凋亡,对VMC小鼠的心肌细胞具有保护作用。［中国当代儿科杂志,2009,11（4）：296-300］     

血管紧张素转换酶抑制剂对脂多糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞转化生长因子β1和β1整合素表达的影响

目的 观察血管紧张素转换酶抑制剂福辛普利(fosinopril,FOS)对脂多糖( lipopolysacchatide,LPS)诱导的大鼠肾小球系膜细胞(GMC)转化生长因子β1(TGF-β1)及β1整合素(Itg-β1)表达的影响.方法 建立体外培养的大鼠GMC,鉴定后3～10代用于实验.实验分组:对照组、LPS刺...     

川芎嗪对哮喘大鼠气道壁胶原沉积和TGF-β1表达的影响

目的　上皮下胶原沉积及纤维化是哮喘气道重建的典型特征 ,转化生长因子 β1(TGF β1)在此过程中发挥了重要作用。该研究旨在观察川芎嗪对大鼠哮喘模型气道壁胶原及TGF β1含量的影响。 方法　 4 0只SD大鼠随机分成对照组 (A)、哮喘组 (B)、激素干预组 (C)、小剂量 (D)和大剂量 (E)川芎嗪干预组 ,以卵蛋白致敏并长期吸入激发制备哮喘模型 ,C ,D ,E组分别在每次激发前腹腔注射地塞米松 0 .5mg 只 ,川芎嗪 4 0mg kg及川芎嗪 80mg kg。 4周后处死大鼠 ,收集肺组织标本观察病理改变 ,并采用免疫组化半定量测定气道壁I ,III型胶原和TGF β1的含量。 结果　B组气道壁III型胶原和TGF β1含量均显著高于A组 ,C ,D ,E组均较B组降低 ,差异有显著性 (均P <0 .0 1) ,E组与A组、C组含量接近 (均P >0 .0 5 ) ,D组III型胶原和TGF β1含量高于E组 ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ;气道壁TGF β1表达与III型胶原含量呈显著正相关 (rs =0 .70 6 3,P <0 .0 1)。各组间I型胶原含量差异无显著性 (均P >0 .0 5 )。结论　川芎嗪减少哮喘大鼠气道壁III型胶原沉积和TGF β1的表达 ,对III型胶原的抑制可能部分通过抑制TGF β1的表达而实现。