虎杖苷吸入剂对哮喘大鼠模型炎性细胞的影响

目的分析虎杖苷吸入剂对支气管哮喘大鼠模型的干预效果。方法以10%的卵蛋白（OVA）和3%的氢氧化铝混合液腹腔注射实验大鼠2次致敏,然后以2%的OVA诱喘并进行虎杖苷和氨茶碱干预及生理盐水对照实验两周。观察实验大鼠诱喘和药物干预后的行为变化和肺组织切片、检测各组大鼠心室血中白细胞（WBC）、嗜酸性粒细胞（EOS）、嗜碱性粒细胞（BASO）、中性粒细胞（NEUT）和淋巴细胞（LYM）的数量变化。结果在诱喘过程中,虎杖苷干预组大鼠的哮喘症状得到明显改善,虎杖苷干预组大鼠EOS、LYM和MONO数量［（0.1339±0.01794）×109/L,（6.5440±0.49530）×109/L,（0.2148±0.08287）×109/L］较哮喘对照组大鼠的EOS、LYM和MONO［（0.1948±0.02454）×109/L,（8.0090±0.71166）×109/L,（0.2946±014257）×109/L］有所下降（P〈0.05,P〉0.05,P〉0.05）,且与正常对照组水平（0.1257±0.02454,6.9610±0.97243,0.1974±0.11765）接近。结论虎杖苷干预能够有效改善哮喘大鼠模型的哮喘症状。     

C57BL/6哮喘小鼠肾组织瞬时感受器电位M6离子通道mRNA表达

【目的】观察C57BL/6哮喘小鼠肾组织瞬时感受器电位M6离子通道（TRPM6）mRNA的表达,探讨哮喘低镁血症的可能原因。【方法】健康4～6周龄清洁级雌性C57BL/6小鼠48只,体质量（12±2）g,随机数字表法分为哮喘组和对照组,每组各24只。哮喘组应用卵蛋白（OVA）建立哮喘小鼠模型。第1天（1d）、21d、34d天每组分别随机抽取8只检测血浆Mg^2＋、红细胞内Mg^2＋、肾组织TRPM6mRNA的表达。【结果】1d血浆Mg^2＋、红细胞内Mg^2＋、肾组织TRPM6mRNA表达水平哮喘组与对照组之间差异无显著性：[（0.85±0.07vs.0.89±0.12）mmol/L、（2.48±0.14vs.2.49±0.07）mmol/L、0.51±0.08vs.0.49±0.06,P均〉0.05];21d哮喘组血浆Mg^2＋、红细胞内Mg^2＋、肾组织TRPM6mRNA表达水平均显著低于对照组：[（0.84±0.09vs.0.95±0.07）mmol/L、（2.39±0.14vs.2.44±0.09）mmol/L、0.32±0.06vs.0.52±0.05,P均〈0.05];34d哮喘组血浆Mg^2＋、红细胞内Mg^2＋、肾组织TRPM6mRNA表达水平亦显著低于对照组：[（0.67±0.10vs.0.94±0.10）mmol/L、（2.17±0.08vs.2.43±0.08）mmol/L、0.24±0.05vs.0.53±0.06,P均〈0.05]。肾组织TRPM6mRNA表达水平与血浆Mg^2＋浓度呈正相关（r=0.630,P〈0.001）;肾组织TRPM6mRNA表达水平与红细胞内Mg^2＋浓度呈正相关（r=0.715,P〈0.001）。【结论】肾组织TRPM6mRNA的低表达可能是导致C57BL/6哮喘小鼠低镁血症的原因。     

TNF-α与特发性血小板减少性紫癜患者激素抵抗的相关性研究

目的研究特发性血小板减少性紫癜（idiopathic thrombocytopenia purpura,ITP）患者肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）的表达及其对糖皮质激素受体（glucocorticoid receptor,GR）表达的影响,探讨TNF-α与糖皮质激素抵抗的相关性。方法ELISA方法检测ITP激素敏感型、激素抵抗型患者及正常对照组的血浆中TNF-α的含量;分离健康志愿者外周血单个核细胞（PBMC）,一组用TNF-α刺激培养,一组单独培养作为对照,分别采用RT-PCR方法及Western blot法分析其GRα和GRβmRNA及蛋白表达的变化。结果血浆TNF-α浓度在ITP患者激素敏感组、激素抵抗组、正常对照组分别为（13.69±4.92）pg/mL、（19.73±4.66）pg/mL、（7.51±2.79）pg/mL,二组ITP患者血浆中TNF-α的含量均高于正常对照组（P〈0.01）,其中激素抵抗组ITP患者血浆中TNF-α的含量高于激素敏感组（P〈0.05）;经TNF-α刺激培养24 h后,培养组与对照组GRα/GAPDHmRNA分别为1.16±0.73,1.20±0.51,培养组与对照组相比,其GRαmRNA表达无显著变化（P〉0.05）;培养组与对照组GRβ/GAPDHmRNA分别为1.62±0.59,0.81±0.66,培养组与对照组相比,GRβmRNA表达明显增加（P〈0.05）;GRα蛋白的表达在各组之间无显著差别,但GRβ蛋白的表达在TNF-α刺激组较对照组明显增高。结论ITP激素抵抗型患者血浆TNF-α含量增高;TNF-α可以增加PBMC中GRβ的表达,这可能是炎性细胞因子诱发糖皮质激素抵抗的内在机制。     

核因子-κB对TNF-α诱导的脂肪细胞葡萄糖转运蛋白4表达的影响

【目的】观察TNF-α对3T3-L1脂肪细胞葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）mRNA与蛋白表达的作用,并探讨核因子-κB（NF-κB）对上述作用的影响。【方法】成熟的3T3-L1脂肪细胞分成3组：A组正常对照组,B组肿瘤坏死因子α（TNF-α）组,C组吡咯烷二硫基甲酸酯（NF-κB活性抑制剂）＋TNF-α组。各组干预48h后检测phospho-NF-κBp65（Ser536）的蛋白水平、GLUT4mRNA及蛋白水平。蛋白检测采用Western法,mRNA检测采用RT-PCR法。【结果】B组phospho-NF-κBp65蛋白水平（71.1±5.9）高于A组（41.3±1.7,P〈0.001）和C组（25.4±4.7,P〈0.001）。B组GLUT4的mRNA水平（0.86±0.14,P〈0.001）与蛋白水平（31.6±7.2,P〈0.001）低于A组（2.01±0.65;60.7±8.4）,C组mRNA水平（0.46±0.12）与B组比较有下降趋势但无统计学意义（P=0.100）,C组蛋白水平（9.5±3.0）低于B组（P=0.001）。【结论】TNF-α下调3T3-L1脂肪细胞的GLUT4表达,抑制NF-κB活性后GLUT4表达进一步下调。这提示了TNF-α可能不是通过激活NF-κB而使GLUT4的表达下调。     

抑制UPS对缺血再灌注大鼠心肌Hsp27和TNF-α的影响

目的研究泛素-蛋白酶体系统（ubiquitin—proteasomesystem，UPS）对心肌缺血再灌注大鼠热休克蛋白27（heatshockprotein，Hsp27）的影响及与肿瘤坏死因子-α（TNF—α）的关系，探讨抑制UPS后可能的心肌保护作用机制，为降低心肌缺血再灌注损伤提供新的干预途径。方法64只SD大鼠结扎左冠状动脉前降支30min制作心肌缺血再灌注模型。缺血再灌注＋治疗（I／R＋T）组于再灌注前5min静脉注射蛋白酶体抑制剂MG-1320．75mg/kg，缺血再灌注（I／R）组、缺血（I）组及假手术（Sham）组注射与之相同容积的生理盐水。观察各组心肌梗死范围、再灌注6h后各组大鼠心肌组织Hsp27及TNF—α的表达。结果与I／R组相比，I／R＋T组大鼠心肌梗死范围明显减少（P〈0．05），Hsp27表达显著增加[mRNA水平分别为（95．37±18．38）和（68．14±17．58），P〈0．01；蛋白质积分光密度值分别为（82．57±6．39）和（39．96±7．28），P〈0．001]。TNF—α表达降低[mRNA分别为（45．53±10．65）和（76．52±19．12），P〈0．01；蛋白质积分光密度值分别为（60．12±9．32）和（42．33±5．95），P〈0．01]。结论适当抑制UPS能够显著升高Hsp27的水平，抑制TNF-α表达，减少心肌梗死范围，具有心肌保护作用。     

替米沙坦对高血压病脉压和CRP、TNF-α、IL-6的影响

【目的】检测高血压病患者血浆hs-CRP、TNF-α、IL-6水平,探讨其与脉压的关系、观察其受替米沙坦/HCT和比索洛尔的影响,分析两类药物抗炎和降低脉压作用的差异。【方法】90例高血压病患者和15例健康对照者,检测血浆hs-CRP、TNF-α、IL-6水平;高血压病患者随机分为两组,分别应用替米沙坦/HCT（80mg/12.5mg,qd）和比索洛尔（5mg,qd）治疗6周,观察两亚组患者血压、脉压及血浆hs-CRP、TNF-α、IL-6水平的变化。【结果】和健康对照组比较,高血压病患者血浆炎症因子水平升高[hs-CRP（mg/L）3.4±3.1 vs 1.2±1.6,TNF-α（pg/L）4.5±3.1 vs 1.1±1.3,IL-6（pg/L）187±43 vs 36±11,均P〈0.05];高血压病患者分组治疗6周后,替米沙坦/HCT组患者血浆炎症因子水平明显下降,而比索洛尔组无明显变化[降低值hs-CRP（mg/L）1.83±1.67 vs 0.10±1.50,TNF-α（pg/L）2.4±1.9 vs 0.2±1.2,IL-6（pg/L）48±13 vs 12±8,均P〈0.05],替米沙坦组脉压的下降较比索洛尔组明显[PP（mmHg）8.5±7.6 vs 2.1±8.9,P〈0.05）]。【结论】高血压病患者血浆hs-CRP、TNF-α、IL-6水平升高、可能与脉压有关,替米沙坦/HCT较比索洛尔更明显降低脉压和炎症因子水平。     

葡萄糖转运蛋白在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的：探讨葡萄糖转运蛋白（Glucose transporter，Glut）的两种异构体Glutl、Glut3及缺氧诱导因子-1（Hypoxia induciblefactor-1，HIF-1）的亚基HIF—1α，在非小细胞肺癌中的表达及临床意义。方法：选取34例手术切除非小细胞肺癌（包括癌组织和癌旁组织）和17例肺良性病变标本，用免疫组织化学法测定Glutl、Glut3及HIF-1α在肺组织中的表达；用RT—PCR半定量检测Glutl、Glut3及HIF-1α的mRNA表达；用Western Blot检测Glutl、Glut3及HIF-1α蛋白的表达，并测两者相关性。结果：Glutl、Glut3及HIF-1α在肺癌组织中mRNA相对含量为0．689±0．245、0．506±0．246、0．693±0．248，对应癌旁组织为0．338±0．157、0．482±0．238、0．351±0．184，Glutl和HIF-1α在肺癌组织中显著升高（P〈0．001），而Glut3差别无显著性（P〉0．05）。Glutl、Glut3、HIF—1α在癌组织中蛋白相对含量为0．582±0．247、0．551±0．251、0．525±0．246，癌旁组织为0．288±0．151、0．436±0．224、0．261±0．135，在肺良性病变中为0．291±0．142、0．402±0．206、0．271±0．176，Glutl和HIF-1α在癌组织中的表达均明显高于癌旁组织（P〈0．001）和肺良性病变组织（P〈0．001）；而Glut3差别无显著性（P〉0．05）。Glutl和HIF-1α在低分化组明显高于中高分化组（P〈0．05），Ⅲ期明显高于Ⅰ和Ⅱ期（P〈0．05），且HIF-1α的表达与Glutl明显相关（r=0．854，P〈0．01）。结论：在非小细胞肺癌中，Glutl和HIF-1a存在高表达，其表达与细胞分化程度、TNM分期密切相关，且Glutl和HIF-1α具有相关性。     

标准桃金娘油对慢性阻塞性肺疾病大鼠气道炎症的影响

[目的]研究标准桃金娘油对慢性阻塞肺疾病（COPD）大鼠模型气道炎症的影响。[方法]24只Wistar大鼠随机分为3组：①对照组：不加任何干预;②COPD组：吸烟14支／次×2次／d×6d／周×12周;③标准桃金娘油组：吸烟情况同COPD组,每日吸烟前给予标准桃金娘油灌胃治疗至第12周末。12周后测定肺功能;行支气管肺泡灌洗计数白细胞;用ELISA法测定肺部TNF—α、IL-6的含量;用HE染色评估肺部病理改变;用免疫组化法测定气道上皮ICAM-1的表达。[结果]①COPD组和标准桃金娘油组大鼠出现明显肺气肿病理改变和气流阻塞。②BALF细胞总数及中性粒细胞数结果：正常对照组分别为（1．30±0．10）×10^7／L与（0．09±0．04）×10^7／L,COPD模型组分别为（1．99±0．94）×10^7／L与（0．27±0．13）×10^7／L,P均〈0．05;标准桃金娘油组为（1．71±0．97）×10^7／L与（0．15±0．05）×10^7／L,较COPD模型组减少（P均〈0．05）。③支气管上皮ICAM—1表达及肺组织内TNF—α、IL-6表达：COPD模型组分别为6．99±0．81,（860．82±53．62）pg／mL,（689．01±49．05）pg／mL,较对照组[分别为4．22±0．74,（159．08±46．65）pg／mL,（411．5±26．60）pg／mL]增高（P均〈0．05）;标准桃金娘油组表达分别为5．04±0．88,（668．36±31．07）pg／mL,（589．64-4-19．03）ps／mL,较COPD组降低（P均〈0．05）。④COPD组BALF中性粒细胞数与支气管上皮ICAM-1表达强度呈正相关（r=0．571,P〈0．05）,也与肺组织中TNF-α、IL-6含量呈显著正相关（r=0．623、0．691,P均〈0．05）。[结论]吸烟可增加大鼠气道炎症反应,标准桃金娘油能改善由吸烟导致的气道炎症。     

奥扎格雷钠对慢性肺心病急性发作患者血清脂联素水平的影响

目的观察奥扎格雷钠对慢性肺心病急性发作患者血清脂联素水平的影响,探讨其治疗慢性肺心病急性发作的可能机制。方法将75例慢性肺心病急性发作期患者随机分为治疗组（38例）和对照组（37例）。对照组仅给予常规治疗,治疗组在接受常规治疗的同时给予奥扎格雷钠静脉滴注,1次/d,10d为1个疗程。比较两组患者治疗后的疗效;对比两组患者治疗前后血清脂联素、白介素（IL）-6、和肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平。结果治疗后治疗组显效21例,有效13例,无效4例;对照组分别为13例、11例、13例,两组疗效间差异有统计学意义（P〈0.05）。治疗前两组患者血清脂联素、IL-6和TNF-α水平间差异无统计学意义（P〉0.05）;治疗后治疗组血清脂联素、IL-6和TNF-α水平〔分别为（17.9±5.6）ng/L、（30.2±13.6）ng/L和（31.5±15.1ng/L）〕与对照组〔分别为（13.8±4.7）ng/L、（38.4±11.2）ng/L和（39.6±13.5）ng/L〕比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论奥扎格雷钠可能通过增加血清脂联素水平、降低血清IL-6及TNF-α水平来降低全身炎症反应,从而对慢性肺心病急性发作期起到治疗作用。     

抑制NF-κB对大鼠肾小球系膜细胞血管紧张素Ⅱ1型受体表达的影响

【目的】研究抑制NF-κB活性对SD大鼠系膜细胞血管紧张素Ⅱ1型受体mRNA表达的影响。【方法】分离SD大鼠系膜细胞分为下列3组：正常葡萄糖培养组（5.6mmol/L D-葡萄糖）,高葡萄糖培养组（25mmol/L）,吡咯烷二硫氨基甲酸酯（pyrrolidinedithiocarbamate,PDTC）＋高葡萄糖培养组。以电泳迁移率变动分析法（electrophoretic mobility shift assay,EMSA）检测NF-κB活性,RT-PCR方法检测血管紧张素Ⅱ1型受体mRNA表达,蛋白质印迹法（Western blot）检测血管紧张素Ⅱ1型受体蛋白表达,放射免疫分析法检测培养液血管紧张素Ⅱ水平。【结果】NF-κB活性在高葡萄糖培养组（20±7）显著高于正常葡萄糖培养组（8±4,P〈0.01）与PDTC＋高葡萄糖培养组（8±3,P〈0.01）,正常葡萄糖培养组与PDTC＋高葡萄糖培养组比较无显著性差异（P〉0.1）。血管紧张素Ⅱ1型受体mRNA表达,在高葡萄糖培养组（0.60±0.26）与正常葡萄糖培养组（0.50±0.22）及PDTC＋高葡萄糖培养组（0.45±0.23）均无显著性差异;血管紧张素Ⅱ1型受体蛋白质表达,在高葡萄糖培养组（0.54±0.22）与正常葡萄糖培养组（0.37±0.14）及PDTC＋高葡萄糖培养组（0.40±0.13）均无显著性差异。培养液血管紧张素Ⅱ水平在高葡萄糖培养组（9.8±2.1）显著高于正常葡萄糖培养组（7.5±1.5,P〈0.05）,PDTC＋高葡萄糖培养组（7.8±1.7,P〉0.05）与正常葡萄糖培养组比较差异无显著性意义。【结论】高葡萄糖可激活SD大鼠系膜细胞NF-κB,伴随血管紧张素Ⅱ产生增加,但是不影响血管紧张素Ⅱ1型受体表达;抑制NF-κB活性似乎可降低血管紧张素Ⅱ产生但不影响血管紧张素Ⅱ1型受体表达。     

伊贝沙坦对糖尿病大鼠肾氧化应激、NF-kB活性和ICAM-1 mRNA表达的影响

【目的】探讨伊贝沙坦对糖尿病大鼠肾脏氧化应激、NF—kB活性和ICAM-1mRNA表达水平的影响。【方法】将33只SD大鼠随机分为3组：正常对照组（C）、糖尿病组（D）和伊贝沙坦组（I）。糖尿病大鼠模型用链脲佐菌素诱导。大鼠饲养12周后,观察24h尿微量白蛋白排泄率（UAER）,取出肾脏作肾组织病理检查,测定肾组织中丙二醛（MDA）含量与超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱苷肽过氧化物酶（GSH—PX）活性变化。逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）法检测肾组织中细胞间粘附因子-1（ICAM-1）mRNA的表达。凝胶电泳迁移率变动分析（EMSA）检测核因子（NF）-kB的活性。【结果】UAER在D组（3784-100）及I组（149±58）均显著高于C组（30±13）．P〈0．01;I组UAER较D组显著降低,P〈0．01。与C组大鼠比较,D组大鼠肾组织MDA含量显著增高（5．8±0．9 vs 3．5±0．2）,P〈0．01;SOD、CAT及GSH—PX活性均显著降低（22．3±3．1,11,7±0．7,11．3±1．7vs39．2±2．0,18．2±0．5,23．2±3．9）,P〈0．01;I组肾组织MDA含量（4．3±0．6）明显低于D组．P〈0．01;SOD、CAT及GSH—PX活性（30．7±1．6,13．3±0．4,15．8±2．8）明显高于D组,均P〈0．01。NF-kB活性在D组大鼠肾组织（44．3±0．4）明显高于C组（14．6±0．8）,P〈0．01;I组（37．7±0．3）明显低于D组,P〈0．01。D组肾组织ICAM-1mRNA表达（2．14±0．2）明显高于C组（0．36±0．1）,P〈0．01;I组肾组织ICAM-1mRNA（1．37±0．1）表达明显低于D组,P〈0．01。【结论】伊贝沙坦可能部分通过减轻氧化应激反应以及下调糖尿病大鼠肾组织中NF—kB的活性,降低ICAM-1mRNA的表达水平实现对糖尿病大鼠肾脏的保护作用。     

模拟高原环境下高原肺水肿大鼠模型的建立

目的 在人工实验舱模拟高原环境下,探讨建立高原肺水肿大鼠模型的条件。方法 Wistar大鼠,雌雄各半,随机分为5组：空白对照组、低氧24 h组、低氧48 h组、低氧72 h组、低氧7 d组,测定大鼠肺组织含水量,肺组织中TNF-α、IL-6含量及病理改变。结果 与正常对照组相比,低氧24、48、72 h组大鼠肺组织含水量依次为（81.58±0.86）%、（82.13±0.57）%、（82.21±0.88）%,高于正常对照组（78.72±0.52）%,肺组织中IL-6依次为（329.30±133.58）、（323.92±127.42）、（506.29±197.19）pg/mL,TNF-α依次（221.08±20.26）、（208.05±20.33）、（244.63±51.53）pg/mL,高于正常对照组IL-6（187.26±69.49）pg/mL,TNF-α为（91.81±22.24）pg/mL。低氧7d组肺组织含水量（81.47±0.65）%、肺组织中IL-6（241.33±83.60）pg/mL、TNF-α（109.99±31.98）pg/mL,均显著低于低氧72h组,病理学结果显示72h组肺组织有炎性细胞浸润,肺泡壁有明显的充血和水肿。结论 模拟海拔5000 m环境,建立大鼠肺水肿模型的较好的时间为72 h。     

CpG寡脱氧核苷酸对慢性哮喘小鼠模型气道炎症的预防作用

目的研究含非甲基化的胞嘧啶-磷酸-鸟嘌呤（CpG）寡脱氧核苷酸（CpG-oligodeoxynueleotides,CpG- ODN）能否预防或减轻慢性哮喘小鼠气道炎症的发生。方法40只雌性C57BL／6小鼠随机均分为4组,A组（慢性哮喘组）、B组（CpG-ODN干预组）和C组（GpC-ODN对照组）分别腹腔注射卵蛋白致敏,然后用卵蛋白雾化吸入激发以制作慢性哮喘模型,D组（生理盐水对照组）用生理盐水进行致敏和激发。B组在致敏同时（d1, d14）和激发阶段（每2周1次）分别给予60μg／mLCpG-ODN腹腔注射,共6次。C组将CpG替换为鸟嘌呤-磷酸-胞嘧啶（GpC）作为对照。在末次激发24 h后,取血测嗜酸粒细胞（eosinophil,EOS）数,血清IgE、IgG1和IgG2α;收集支气管肺泡灌洗液（bronehoalveolar lavage fluid,BALF）作细胞分类计数;测定肺组织中白介素-4 （interleukin-4,IL-4）、白介素-13（interleukin-13,IL-13）和γ-干扰素的mRNA（interferon-γ,IFN-γ）表达量;以及肺组织病理学检查。结果A组外周血EOS数[（89±10）×10^4／mL]、血清IgE值[（279±53）ng／mL）、IgG1（A值2．151±0．628）、IgG2α（A值0．772±0．245）、BALF中EPS（6．3±1．3）]×10^5／mL）及百分比[（18．1±3．0）％]较D组明显增高（P〈0．01）;且肺组织中IL-4、IL-13和IFN-γ等细胞因子mRNA表达量[（分别为（5．72±3．89）×10^-2、（9．45±5．91）×10^-2和（3．23±1．69）×10^-2）]也明显高于D组（P〈0．05）。用CpG-ODN干预后（B组）,除IgG2α（A值1．186±0．414）和IFNγmRNA表达量[（18．91±9．85）×10^-2]增高外（P〈0．05）,其余指标均低于A组（P〈0．05）。C组的上述各指标与A组相比差异均无显著性（P〉0．05）。结论CpG- ODN对小剂量OVA反复激发所致的慢性气道炎症有一定的预防作用。     

大鼠心肌肥厚模型中血清白细胞介素-18及-10的变化

【目的】观察不同时限大鼠心肌肥厚模型血清中白细胞介素-18（IL-18）、IL-10浓度的变化,探讨IL-18和IL-10在心肌肥厚发生发展中的可能作用。【方法】采用大鼠腹主动脉缩窄心肌肥厚模型,64只F344大鼠分成8组：缩窄时限为2、3、4、8周组和相应对照组,每组8只,使用心脏超声确定心肌肥厚,采用酶联免疫吸附法检测大鼠血清IL-18和IL-10的浓度。【结果】腹主动脉缩窄2—8周后,大鼠心脏超声检查舒张期室间厚度隔（IVSTd）、舒张期左室后壁（PWLVd）明显不同程度的增厚。大鼠血清中IL。18、IL-10浓度明显高于相应对照组。2～8周时IL-18（pg／mL）两组分别为461±387vs529±394、516±428vs458±367、816±442vs5470±355、462±343vs5466±424：IL-10（pg／mL）两组分另0为926±634vs717±664、1033±661口s736±544、1221±568US700±601、891±569口5735±579。实验组随缩窄时限延长而明显增加（2,3,4周时P〈0．05）,但缩窄8周时增加不明显（P〉0．05）,各对照组之间无明显变化（P〉0．05）。【结论】大鼠心肌肥厚模型血清中IL-18、IL．10水平明显升高,且在-定程度上反映了心肌肥厚病变的严重程度。     

右归饮在治疗大鼠骨性关节炎中诱导细胞自噬与凋亡表达的研究

目的：探讨右归饮在治疗大鼠骨性关节炎中,诱导细胞自噬与凋亡表达的变化。方法：将SD大鼠分为右归饮治疗组、关节模型组和空白对照组,对治疗组和模型组的大鼠采用Hulth法进行膝骨关节炎造模。4周后对3组大鼠分别予右归饮、生理盐水进行灌胃治疗。在造模后第8周处死所有大鼠,取大鼠血清、膝关节及膝关节内滑膜进行Elisa、免疫印迹、HE染色及Mankin,s评分法检测,观察自噬与凋亡相关蛋白和血清中炎性因子的表达变化,以及关节软骨损伤的情况。结果：Elisa法检测见右归饮治疗组大鼠血清中炎性因子[IL-1β(20.27±1.41)pg/ml; TNF-α(162.63±10.76)pg/ml; iNOS(7.32±0.48)U/ml]的含量明显低于模型组[IL-1β(26.76±1.93)pg/ml; TNF-α(221.34±19.38)pg/ml; iNOS(10.13±0.96)U/ml],差异具有统计学意义（P <0.01）,而自噬和凋亡相关蛋白的表达量在右归饮治疗组[Beclin-1(0.94±0.11); mTOR(0.16±0.09); Caspase-3(0.25±0.07); Bax(0.48±0.14)]和模型组[Beclin-1(0.54±0.08); mTOR(0.61±0.18); Caspase-3(0.60±0.12); Bax(0.79±0.11)]之间的差异也具有统计学意义（P <0.01）。HE染色及Mankin,s评分见右归饮治疗组[(5.20±0.84）分]大鼠关节软骨面较毛糙,评分低于模型组[（8.20±0.84)分],差异具有统计学意义（P <0.01）。结论：右归饮在SD大鼠膝关节滑膜细胞中可以上调自噬、下调凋亡蛋白的表达,降低血清中炎性因子的含量,缓解关节软骨的损伤。     

孕激素对子宫内膜异位症患者在位内膜T淋巴细胞分泌的受激活调节因子表达的影响

目的探讨正常T淋巴细胞表达和分泌的受激活调节因子（RANTES）与子宫内膜异位症（EM）发病的关系以及孕激素治疗的可行性。方法采集子宫内膜异位症患者术前以及放置左炔诺孕酮宫内节育系统（LNG-IUS）、口服甲羟孕酮（MPA）或注射促性腺激素释放激素类似物（GnRHa）后以及对照组的在位内膜,以半定量RT-PCR方法检测内膜组织中RANTES mRNA的表达。以100U/ml肿瘤坏死因子-α（TNFα）和不同浓度的孕酮（Po）与内膜细胞共孵育24h,观察Po对TNFα刺激RANTES分泌效应的影响。以不同浓度Po预处理细胞48h后,加入TNFα（100U/ml,16h）,观察Po对TNFα刺激细胞分泌RANTES的抑制作用。采用ELISA方法检测细胞培养上清中RANTES的分泌量。结果药物干预前,EM组RANTES mRNA的相对表达量显著高于对照组（28.0±9.0vs.22.0±5.6,P〈0.05）。放置LNG-IUS（24.0±4.2vs.25.9±4.2,P〉0.05）或注射GnRHa（23.0±12.9vs.26.9±5.2,P〉0.05）后,子宫内膜RANTES mRNA的表达差异无显著性;MPA组RANTES mRNA表达较用药前显著升高（42.6±3.1vs.24.3±5.7,P〈0.05）。单纯Po刺激,培养子宫内膜细胞RANTES的分泌量无明显变化;同时以Po和TNFα刺激细胞,RANTES的分泌显著增加;Po预处理48h后,RANTES的分泌对TNFα的反应性显著减弱。结论EM患者在位内膜本身具有高趋化活性,孕激素防治EM有一定可行性。     

益气补肾方对自然流产模型小鼠母-胎界面Foxp3、RORrt、 TGF-β及TNF-α蛋白表达研究

观察益气补肾方对自然流产模型小鼠母-胎界面叉头翼状螺旋转录因子3（Foxp3）、维甲酸相关核孤儿受体γt（RORγt）、转化生长因子β（TGF-β）、肿瘤坏死因子α（TNF-α ）蛋白表达及妊娠结局的影响,探讨益气补肾方对母胎免疫调节的作用机制,为益气补肾方防治复发性流产提供新的理论依据。方法：CBA/J雌鼠与BALB/c雄鼠交配建立正常妊娠模型,设为正常妊娠模型组;CBA/J雌鼠与DBA/2雄鼠交配建立小鼠自然流产模型,孕鼠随机分为自然流产模型组、环孢素组、益气补肾高、中、低剂量组,每组6只。正常妊娠模型组和自然流产模型组给予生理盐水;环孢素组给予环孢素A;益气补肾高、中、低剂量组分别给予12.24.48g/kg益气补肾方,连续14天,每天一次。给药结束后,处死孕鼠,观察子宫胚胎数量并计算胚胎吸收率;采用Western-blot法检测母-胎界面Foxp3、RORγt蛋白表达,免疫组化法检测TGF-β、TNF-α蛋白表达。结果 ：①胚胎吸收率：自然流产模型组胚胎吸收率为25%,环孢素组及益气补肾低、中、高剂量组胚胎吸收率分别为11.9%、14.3%、11.1%、13.2%,与自然流产模型组相比,环孢素组及益气补肾各剂量组胚胎吸收率均明显降低（P<0.05）;益气补肾各剂量组与环孢素组相比,无统计学差异（P＞0.05）;益气补肾各剂量组间无统计学差异（P＞0.05）。②Foxp3蛋白表达：正常妊娠模型组为1.407 0.101,自然流产模型组为0.700±0.147,环孢素组为1.223±0.240,益气补肾低、中、高剂量组分别为：0.873±0.097,1.220±0.241,1.383±0.216。与自然流产模型组相比,环孢素组、益气补肾中、高剂量组小鼠Foxp3蛋白表达显著升高（P<0.05）,益气补肾中、高剂量组与环孢素组间无统计学差异（P＞0.05）。RORγt蛋白表达：正常妊娠模型组为0.643±0.112,自然流产模型组为1.456±0.165,环孢素组为0.950±0.246,益气补肾低、中、高剂量组分别为：1.180±0.182,0.897±0.321,0.670±0.082。与自然流产模型组相比,环孢素组、益气补肾中、高剂量组RORγt蛋白表达显著降低（P<0.05）,益气补肾中、高剂量组与环孢素组间无统计学差异（P＞0.05）。③TNF-β表达：正常妊娠模型组TNF-β平均光密度值为0.084 0.033,自然流产模型为0.033±0.015,环孢素组0.102±0.046,益气补肾低、中、高剂量组分别为0.112±0.030、0.090±0.010、0.093±0.014。与正常妊娠模型组相比,自然流产模型组胎盘中TGF-β表达显著降低（P<0.05）。与自然流产模型组相比,环孢素组及益气补肾方各剂量组TNF-α表达均显著降低（P<0.05）,各组间无统计学差异（P＞0.05）。TGF-α表达：正常妊娠模型组TGF-α平均光密度值为0.051 0.018,自然流产模型为0.074±0.013,环孢素组0.030±0.003,益气补肾低、中、高剂量组分别为0.033±0.011、0.049±0.025、0.049±0.021。与正常妊娠模型组相比,自然流产模型组TNF-α表达显著降升高（P<0.05）。环孢素组及益气补肾各剂量组TNF-α表达均显著降低（P<0.05）。结论：益气补肾方可通过增加自然流产模型小鼠母-胎界面Foxp3、TGF-β表达、降低RORγt、TNF-α表达调节Treg/Th17分化、生成,使免疫平衡向Treg细胞方向移动,从而维持免疫耐受,防治复发性流产。     

益肾汤联合强的松与依那普利对IgA肾病小鼠肾MMP-9、TIMP-1表达的影响

【目的】探讨中药“益肾汤”治疗IgA肾病（IgAN）的机理。【方法】用“口服牛血清白蛋白联合尾静脉注射葡萄球菌肠毒素B”法复制小鼠IgAN模型。设正常组、模型组、益肾汤低浓度、益肾汤高浓度、强的松±依那普利、强的松±依那普利±益肾汤低浓度、强的松±依那普利±益肾汤高浓度7组。FQ—PCR法检测小鼠肾组织MMP-9、TIMP-1mRNA表达、免疫组化SABC法检测小鼠肾组织MMP-9、TIMP-1的含量。【结果】模型组小鼠肾间质MMP-9表达（PU值：6．9±2．7vs5．8±2．1;mRNA表达：0．297±0．025vs0．107±0．004）与正常组比较差异无显著性（P〉0．05）,而模型组TIMP-1表达（PU值：18．0±7．7vs5．2±2．2;mRNA表达：0．884±0．247vs0．109±0．007）则较正常组明显上调（P〈0．05）。益肾汤低浓度组与高浓度组之间肾小管间质MMP-9、TIMP-1表达差异无显著性（P〉0．05）,但益肾汤高浓度组与低浓度两组MMP-9表达均强于模型组（PU值：8．9±3．0vs6．9±2．7,8．9±3．3vs6．9±2．7;mRNA表达：0．397±0．047vs0．297±0．025,0．386±0．027vs0．297±0．025;P〈0．05）,而TIMP-1的表达均弱于模型组（PU值：14．92±6．07vs18．04±7．70,15．55±6．01vs18．04±7．70：mRNA表达：0．665±0．197vs0．883±0．247,0．713±0．221vs0．883±0．247;P〈0．05）。5个治疗组中强的松±依那普利±益肾汤高浓度组MMP-9mRNA及其蛋白表达最强（PU值：34．3±8．7;mRNA表达：1．265±0．433）、而TIMP-1mRNA及其蛋白表达最弱（PU值：9．2±3．4;mRNA表达：0．293±0．068）。【结论】益肾汤可促进IgAN小鼠肾组织MMP-9的表达、抑制TIMP-1的表达。强的松±依那普利±益肾汤的联合治疗方案较单用强的松±依那普利或单用益肾汤治疗IgAN有更好的疗效。     

哮喘大鼠模型血清IL-12及IL-18的变化及相关性研究

目的：探讨哮喘大鼠模型血清中自细胞介素-12（IL-12）与白细胞介素-18（IL-18）之间的关系及其在气道炎症发生中的机制．方法：48只Wistar大鼠随机分为3组,分别为正常对照组、哮喘组、地塞米松干预组,用卵白蛋白（OVA）腹腔注射致敏,雾化吸入OVA激发制备大鼠哮喘模型,对照组用生理盐水代替OVA,地塞米松干预组每次雾化前经腹腔注射地塞米松．雾化激发后24h取各组肺泡灌洗液进行嗜酸性细胞计数,并用ELISA方法测定血清IL-12,IL-18的水平,分析二者相关性．结果：哮喘组、地塞米松组和对照组血清IL-12水平分别为（53．1±9．6）ng／L,（82．4±8．1）ng／L和（140．1±13．4）ng／L,与哮喘组比较,地塞米松组血清IL-12水平显著升高,但低于对照组（P〈0．01）．三组血清IL-18水平分别为（353．5±11．9）ng／L,（250．6±8．4）ng／L和（100．5±12．7）ng／L,哮喘组与地塞米松组显著高于对照组（P〈0．01）．肺泡灌洗液中嗜酸性细胞数（49．3±4．0）×10^5／L,（31．9±3．6）×10^5／L和（14．8±4．1）×10^5／L,哮喘组与地塞米松组显著高于对照组．哮喘组血清IL-12,IL-18水平分别与肺泡灌洗液中EOS数量进行两两相关分析,显示IL—12与肺泡灌洗液EOS呈负相关（r=-0．746,P〈0．01）,而IL—18与肺泡灌洗液EOS呈正相关（r=0．682,P〈0．01）．结论：IL-12与IL-18可能共同参与哮喘气道炎症发病过程,并且两者的作用相互拮抗．     

实验性肝纤维化大鼠原代肝星状细胞中CTGF的表达及意义

目的：通过检测肝纤维化大鼠原代肝星状细胞（HSC）中结缔组织生长因子（CTGF）的表达,探讨HSC与CTGF间的相关生物学作用机制。方法：皮下注射四氯化碳（CCl4）制备大鼠肝纤维化模型,于注射CCl4后1、4、8周分批分离HSC后,采用免疫组化、RT-PCR方法检测原代HSC中CTGF的表达变化。结果：CCl4注射后第1、4、8周大鼠HSC平均得率分别为：（3.15±0.38）×107/只、（4.21±0.76）×107/只、（5.11±0.73）×107/只,均高于正常大鼠HSC平均得率[（2.31±0.47）×107/只]（P〈0.05）。细胞爬片免疫组化结果显示,活化的HSC胞质中可见CTGF阳性表达。RT-PCR检测结果显示,与正常对照组相比,注射CCl4后1、4、8周大鼠HSC中CTGF mRNA的表达显著增强（P〈0.05,P〈0.01）。结论：CTGF在肝纤维化发生、发展中对HSC的活化起促进作用。