南京市食源性致泻大肠埃希氏菌多位点序列分型及耐药基因分析

目的 对南京地区食源性疾病监测中致泻性大肠埃希氏菌(diarrheagenic Escherichia coli,DEC)分离株进行多位点序列分型（Multilocus Sequence Typing,MLST）,了解超广谱β-内酰胺酶(Extended-spectrum beta-lactamases, ESBLs)耐药基因blaTEM、blaCTX-M和质粒介导的喹诺酮耐药基因(plasmid-mediated quinolone resistance,PMQR)qnrA、qnrB、qnrS、oqxA、oqxB、qepA、aac(6’)-Ib-cr的流行情况及其与MLST型别之间的关联。方法对食源性监测中60株DEC分离株的管家基因（adk、fumC、gyrB、icd、mdh、purA、recA）进行PCR扩增和测序,用EnteroBase上下载的ST(Sequencetype)分型方案确定菌株序列型。PCR法检测超广谱β-内酰胺酶ESBLs耐药基因和质粒介导的喹诺酮耐药基因PMQR。结果60株DEC可分为34个ST型别,其中ST48为优势型别（16.67%）,发现两个新等位基因型,fumC1413和purA746,一个新序列型ST9953。共有43株（71.67%）携带ESBLs耐药基因,10株（16.67%）携带喹诺酮耐药基因PMQR。ESBLs阳性的大肠埃希氏菌株中占比最高的是ST10组群。结论 南京地区食源性疾病监测中致泻性大肠埃希氏菌最常见的序列型是ST48。特定的ST型别在DEC不同类型中的分布不同,两者之间呈现一定相关性。ESBLs广泛流行,blaTEM为主要流行基因,最流行的PMQR基因是qnrS。     

应用单核苷酸多态性技术对食品中大肠埃希氏菌的地理溯源

目的 利用大肠埃希氏菌持家基因中高分辨力单核苷酸多态性(SNP)位点对不同地理来源食品中的大肠埃希氏菌进行地理溯源,为追溯、控制食源性感染提供技术保障.方法 根据大肠埃希氏菌多位点基因序列分型(MLST)数据库中序列信息,利用SNP分析软件Minimum SNPs测算得到大肠埃希氏菌4个持家基因中的12个高分辨力SNP位点.利用这些位点组合对来源于12个国家或地区的食品中分离出的253株大肠埃希氏菌进行分析.结果 得到了大肠埃希氏菌特异性的地理标记;盲样分析证明洲际溯源准确率为80％,国家或地区溯源准确率为60％.结论 持家基因中的高分辨力SNP位点组合具有对不同地理来源大肠埃希氏菌进行追溯的能力.     

食品中多重耐药大肠埃希氏菌和沙门氏菌质粒图谱分析

目的：对自深圳市自由市场生肉类食品中分离得到的30株对3种和3种以上抗生素耐药的大肠埃希氏菌和31株对3种以上抗生素耐药的沙门氏菌进行质粒图谱分析，探讨质粒与耐药性的关系。方法：碱裂解法。结果：耐药谱不同的大肠埃希氏菌的质粒分子分型结果可以相同，31株多重耐药沙门氏菌有25种不同的分型结果。结论：细菌的耐药性与其携带的质粒的多少和大小没有直接的关系。     

不同标本来源大肠埃希菌分布菌毛及基因分型研究

目的 调查医院不同标本分离大肠埃希菌P菌毛基因分型,探究基因分型与标本来源之间的关系.方法 收集2009年1-12月温州医学院附属第二医院分离大肠埃希菌120株,采用Microscan Walk away 96SI微生物鉴定仪进行鉴定和药敏试验,按CLSI 2009年标准判定;用PCR法检测P菌毛和Ⅰ型菌毛基因;采用X2检验,P＜0.05为差异有统计学意义.结果 papC基因阳性率为39.19％,其中尿液分离株阳性率为54.50％,显著高于痰液、引流液以及脓液分离株(P＜0.05);pa pG分型率为64.20％,pa pGⅡ型检出率为46.67％,其中尿液分离株阳性率为70.54％,显著高于痰液和血液分离株(P＜0.05);pa pGⅢ型检出率为17.50％,其中尿液分离株阳性率为25.00％,显著高于痰液分离株(P＜0.05);未检测出pa pG Ⅰ型.结论 不同标本分离大肠埃希菌pa pC基因携带率不同,尿液中肾盂肾炎大肠埃希菌(UPEC)的分离率最高,pa pG分型以pa pGⅡ型为主,存在部分pa pGⅢ型.     

68株大肠埃希氏菌的药物抗性分析

作者对1997年11月至1998年11月间收集的杭州和嘉兴临床医院分得的68株大肠埃希氏菌,作了对喹诺酮类、青霉素类、头孢菌素类、氨基糖苷类和复方磺胺类等11种抗菌药物的抗性频度研究。发现其抗药性已呈现迅速递增趋势,在β-内酰胺类药物中更为明显。从研究中表明,不同地区患者中检出的大肠埃希氏菌在某些药物抗性上存在显著差异。提示了不仅应注重国内外抗药动态,从临床角度来说,更应从当地菌株抗性现状出发,以菌株药敏报告为主要依据,合理选用抗生素和抗菌药物。研究还提出一些常规抗菌药物如庆大霉素和丁胺卡那霉素等,仍不失为抑杀大肠埃希氏菌的有效抗菌药物。     

人源与动物源大肠埃希菌的同源性分析

目的研究某大规模养殖场与某院临床患者分离的大肠埃希菌的同源性。方法泰安地区某大规模养殖场分离出4株耐多粘菌素大肠埃希菌,泰安中心医院临床患者分离出12株耐碳青霉烯类大肠埃希菌;对目的菌株进行耐药基因测序,通过多位点序列分型(MLST)和脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行同源性检测,探讨分析人源与鸭源大肠埃希菌的同源性。结果共有16株大肠埃希菌,4株鸭源菌株中2株ST为5912型;12株人源菌株中5株ST为167型,3株ST为405型;1株鸭源与1株人源ST相同,为ST10,但PFGE分型发现这2株菌相似度为64.7%。结论泰安地区人源与鸭源大肠埃希菌菌株同源性不高。     

误诊为志贺氏菌的16株低活性大肠埃希氏菌的细菌学分析

本文对误诊为志贺氏菌血清型的16株低活性的大肠埃希氏菌进行了全而生化、噬菌体试验分忻,提示仅以三糖铁琼脂上培养物做血清凝集,作出判断是欠妥的。本文报告的低活性大肠埃希氏菌不仅可从生化试验得到鉴别,而且可以用噬菌体方法鉴别。噬菌体方法操作简单,判断结果快速准确,是值得推荐的新方法。     

一起致病性大肠埃希氏菌食物中毒的调查报告

20 0 2年9月11日,我市某学校教职员工发生一起食物中毒,中毒人数9人,无死亡。经调查证实是一起致病性大肠埃希氏菌污染食品引起的食物中毒,现将调查结果报告如下:1　流行病学调查　9月10日教师节,下午7时某学校教师员工共4 0人到某餐厅聚餐。当晚11时开始陆续有人自觉不适,出现     

产毒性大肠埃希氏菌质粒特征初步分析

本文对来自全军五个军区和第一军医大学附属珠江医院及广州远郊九佛农村检测的２０６株埃希氏菌阳性株进行了质粒特征的初步分析。发现质粒携带率为９０．８％，携带质粒数量１￣７个不等。最大质粒分子量为８２．９Ｍｄ，最小１．１Ｍｄ，以大分子量质粒居多且稳定。５３Ｍｄ和４５Ｍｄ质粒为优势质粒。不同地区和时期有相同质粒的流行株存在，环境流行株和人群流行株质粒特征不同。     

小儿大肠埃希氏菌肺部感染96例分析

近几年大肠埃希氏菌在小儿细菌性肺部感染病原学中所占比例有上升趋势。现将我院 1999年 96例确诊为大肠埃希氏菌肺部感染的患儿进行分析。对象与方法1　对象　来源于我院 1999年住院儿童 ,根据痰培养确诊为大肠埃希氏菌肺炎 96例 ,占同期阳性痰标本的 10 8%(96 / 889) ,其中男 6 2例 ,女 34例 ,男女之比 1 8∶1;年龄分别为 :<1岁 89例 (92 7% ) ,1～ 3岁 6例 (6 2 % ) ,>3岁 1例 (1 1% ) ,年龄主要集中在 1～ 3月小婴儿 ,占 5 8例(6 0 4% ) ,平均年龄 4个月 10天。2　方法　痰标本由专业护士在无菌负压下抽吸鼻咽深部获得。选择合格的…     

健康人群肠道耐药大肠埃希菌质粒图谱分析

目的：对深圳地区健康人肠道分离的150株大肠埃希菌进行质粒图谱分析,探讨质粒谱与耐药性的关系.方法：碱裂解法.结果：耐药谱不同的大肠埃希氏菌的质粒分子分型结果可以相同.结论：细菌的耐药性与其携带的质粒的多少和大小没有直接关系.     

从食品中检出多种肠球菌及大肠杆菌的报告

[目的]了解供机食品的卫生状况，分析鉴定目的菌的特性。[方法]依据相关国家标准及VITEK操作手册对病原微生物进行检验和鉴定。[结果]从1份供机食品-豇豆中同时检出屎肠球菌、坚韧肠球菌及大肠杆菌，分别具有这3种病原菌的典型培养特性、菌体特征及生化特性。[结论]日常工作中应重视对多种病原菌的检验及加强对供机食品从原料到成品的全过程卫生监控，以保障工作人员及乘客的生命安全。     

产肠毒素大肠杆菌基因工程疫苗在小鼠中的免疫原性

目的观察肠毒素大肠杆菌(ETEC)基因工程疫苗的抗原性效果,筛选有效的防治ETEC腹泻病基因工程疫苗株。方法将表达ETEC抗原成分的重组质粒pZCF16和pZHY22分别转化入载体痢疾福氏2a菌株FWL01中,构成含不同ETEC抗原成分的工程疫苗株FE3和FE16。分别用FE3与FE16活菌和灭活菌制成的疫苗以同等剂量梯度,通过口服和鼻饲途径免疫小白鼠,经过一定时间检测2组小白鼠的免疫效果。结果在免疫后的小白鼠血液中均产生了特异性抗IgG抗体,在活菌免疫组肠道内也产生了特异性分泌型抗体IgA;抗体IgG 1周后开始升高,且在8周后达到高峰。抗体IgA的产生规律与IgG相似。结论肠毒素大肠杆菌载体菌苗FE3和FE16有较强的免疫原性,作为多价疫苗的构建是有效的,从而为ETEC腹泻的特异性免疫防治提供了可能。     

某院2007～2009年大肠埃希菌耐药性调查

[目的]分析2007年1月～2009年12月某院大肠埃希菌的耐药性变化趋势,为临床治疗提供依据。[方法]药物敏感性试验采用K-B法。[结果]分离出的大肠埃希菌及产ESBLs株有逐年增高的趋势。大肠埃希菌对亚胺培南普遍敏感,对复合磺胺、庆大霉素耐药率较高。产ESBLs菌株对17种临床常用抗生素的耐药率除亚胺培南外均较不产ESBLs菌株的高。[结论]及时有效的细菌鉴定及药物敏感性试验,可尽早发现大肠埃希菌特别是产ESBLs株的院内感染情况,对指导临床的抗感染和合理用药具有重要意义。     

某军队医院临床送检标本中大肠埃希菌的耐药性

目的对某军队医院临床送检标本中大肠埃希菌耐药现状进行分析,为指导医院对提高耐药菌治疗效果和院内感染防控工作提供依据。方法对该院2013年7-9月间所有临床送检的各类标本103份进行分离培养鉴定,对确定为大肠埃希菌的75株阳性菌进行药敏试验,检测其对临床常用20种抗生素的耐药性。结果 75株大肠埃希菌中,敏感株11株,其余均表现出了不同程度的耐药,耐药谱广,且多表现为多重耐药。其中对氨卞西林的耐药率最高,达到80%。大肠埃希菌对常用抗生素的耐药以β内酰胺类抗生素为主,对碳青霉烯类抗菌药物亚胺培南敏感率为100%。结论该院大肠埃希菌耐药问题比较严重,必须加强抗生素的使用管理,严格控制耐药菌的产生和院内感染。     

健康人肠道大肠埃希菌整合子和耐药基因盒的研究

目的：研究健康人肠道大肠埃希菌的整合子携带情况与整合子携带的基因盒种类及其与耐药性之间关系.方法：PCR检测Ⅰ类整合子,确定细菌携带整合子的情况.整合子阳性菌株进一步检测整合子的可变区,分析插入基因盒的序列.结果：150株大肠埃希菌中有38株携带Ⅰ类整合子,集中分布在对3种以上抗生素耐药的菌株中.插入基因盒集中在甲氧苄氨嘧啶耐药基因（dfr）和氨基糖甙类抗生素耐药基因（aadA）.结论：细菌的多重耐药性与整合子携带高度一致,但是细菌耐药谱和其整合子无对应关系.