阴沟肠杆菌去阻遏持续高产AmpC酶和超广谱β—内酰胺酶（ESBLs）的检测

目的：去阻遏持续高产AmpC酶,或产生超广谱β-内酰胺酶（ESBLs),或同时高表达这两类酶,是阴沟肠杆菌对多种β-内酰胺类抗生素耐药的主要机制。方法：建立了一种改良的酶提取物三维试验法,在常规NCCLS纸片扩散法基础上接种大肠杆菌ATCC25922,在头孢西叮药敏纸片周围放射性切出琼脂小槽,待测菌的粗酶提取物在槽内扩散,与头孢西叮纸片扩散相交。结果：由于AmpC酶水解头孢西叮,出现抑菌圈内生长细菌,这一现象能被加入槽内的邻氯活性,同样用头孢曲松取代头孢西叮纸片,用邻氯西林抑制槽内AmpC酶,可测出ESBLs,使用该法检测分别产AmpC酶、ESBLs的标准株和24株临床分离多重耐药的阴沟肠杆菌。结果各种标准株检测无误。24株阴沟肠杆菌中,14株去阻遏持续高产AmpC酶试验阳性,4相提并论产ESBLs试验阳性,5株此两类酶检测均阳性,1株此两类酶检测均阴性,原因待分析。结论：对于阴沟肠杆菌。这种改良的酶提取物三维试验法能较好地鉴别持续高产AmpC酶和ESBL的阴沟肠杆菌,并适用于临床常规检验。     

阴沟肠杆菌超广谱β-内酰胺酶、AmpC酶基因检测及耐药性分析

目的了解阴沟肠杆菌超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）和AmpC酶的产生情况，研究β-内酰胺酶的基因型别，并分析产酶特性和耐药表型的相关性。方法用酶提取三维试验检测ESBLs和AmpC酶，聚合酶链反应（PCR）扩增β-内酰胺酶的基因；VITEK全自动药敏分析系统和KB法检测细菌耐药性。结果101株阴沟肠杆菌中，检出ESBLs阳性株39株，高产AmpC酶阳性株53株，其中16株ESBLs和AmpC酶均阳性，非产酶菌25株；12株AmpC酶阳性菌中，7株扩增出blaDHA。基因，8株扩增出6laMIR基因，其中5株同时携带blaDBA．和blaMIR基因，1株同时携带blaMIR和blaFOX基因，4株三维试验阴性菌株blaMIR基因阳性；16株ESBLs阳性菌中，8株扩增出blaTEM基因，2株ESBLs三维试验阴性菌株blaTEM基因阳性，未检出blaSHV基因。阴沟肠杆菌对多种抗生素高度耐药，产酶菌株的耐药性明显高于非产酶株。结论阴沟肠杆菌中ESBLs和AmpC酶检出率均很高，AmpC酶以blaDHA、blaMIR基因型为主。产ESBLs和AmpC酶是阴沟肠杆菌耐药的主要原因。     

阴沟肠杆菌产超广谱β-内酰胺酶的基因型调查

目的了解北京朝阳医院阴沟肠杆菌中产ESBLs的流行情况,并对携带的ESBLs基因型进行调查。方法采用表型筛选法对58株对第三代头孢菌素或氨曲南敏感性降低的阴沟肠杆菌进行检测。对20株初筛阳性的细菌进行琼脂稀释法药敏试验、等电点测定,并对β-内酰胺酶编码基因进行克隆测序。结果表型筛选法对58株阴沟肠杆菌检测的结果显示产ESBLs菌株的检出率为34.48%(20/58)。药敏结果显示,单独产生ESBLs的菌株对头孢西丁、头孢吡肟、哌拉西林/三唑巴坦和头孢哌酮/舒巴坦的敏感率分别为100%、32.5%和87.5%。同时携带ESBLs和AmpC酶的菌株只对亚胺培南敏感。20株检测阳性的细菌中,14株ESBLs编码基因PCR结果阳性,分别为:SHV-2、SHV-2a、SHV-12、CTX-M-14和CTX-M-22型ESBLs。对另外6株进行粗酶等电点测定发现分别存在7.89、8.0、8.57等电点条带,并被克拉维酸抑制。结论产生超广谱β-内酰胺酶是造成阴沟肠杆菌对第三代头孢菌素耐药的另一重要原因。     

某院2011-2017年非痰标本产AmpC酶阴沟肠杆菌的临床分布及耐药性分析

目的:为临床合理用药、医院感染控制提供参考。方法:收集2011年1月-2017年10月某院非痰标本中分离出的产头孢菌素酶(Amp C酶)阴沟肠杆菌,采用最低抑菌浓度法进行药敏试验,采用三维试验法确证产Amp C酶情况,采用双纸片协同扩散法检测产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)情况。结果:该院非痰标本中共分离出产Amp C酶阴沟肠杆菌546株,占非痰标本病原菌总数的4.80%(546/11 375),占阴沟肠杆菌总数的38.97%(546/1 401);检出率排序前3位的非痰标本依次为伤口分泌物(27.29%)、中段尿(25.82%)、血液(21.79%),检出率较高的科室依次为重症监护病房(ICU)(22.89%)、神经外科(18.68%)和普外科(16.67%)。产Amp C酶阴沟肠杆菌对大部分常用抗菌药物的耐药率>40%,其中不同年度该菌对头孢曲松、头孢噻肟、庆大霉素、呋喃妥因、左氧氟沙星、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮、头孢他啶、头孢吡肟、妥布霉素、米诺环素的耐药率比较,差异均有统计学意义(P<0.05);但对亚胺培南、美罗培南的耐药率<2%。546株产Amp C酶阴沟肠杆菌中,共检出产ESBLs菌株68株,其2011-2017年的检出率依次为5.77%、6.06%、8.70%、10.26%、13.79%、17.35%、18.75%。结论:该院产Amp C酶阴沟肠杆菌主要来自于伤口分泌物、中段尿等标本,且集中于ICU、神经外科等科室。该菌耐药情况严峻,对β-内酰胺类、喹诺酮类等抗菌药物的耐药率上升明显;产ESBLs菌株的检出率逐年上升;但对碳青霉烯类抗菌药物敏感,可将其作为经验首选药物。临床应加强产Amp C酶阴沟肠杆菌耐药及产酶情况的监测,并结合药敏试验结果合理选用抗菌药物,以阻止或延缓其耐药率的快速上升。     

阴沟肠杆菌AmpC酶的检测及耐药性分析

目的了解阴沟肠杆菌ESBLs和AmpC酶的产生情况及对临床常用抗生素的耐药特征,为临床治疗提供选药参考。方法应用VITEK-60型全自动细菌鉴定仪鉴定细菌,按NCCLS推荐的确证试验测定ESBLs和K-B纸片法测定药敏结果,采用头孢西丁纸片扩散法对阴沟肠杆菌进行产AmpC酶菌株筛;选,并用酶粗提物进行三维试验确证产AmpC酶菌株。结果阴沟肠杆菌产AmpC酶菌株的检出率为6.19%,并且所检测的7株产AmpC酶的阴沟肠杆菌均为同产ESBLs,目前,我们还未检测到单产AmpC酶菌株。AmpC酶阳性菌株与AmpC酶阴性菌株药敏结果显示：前者大多对头孢西丁、头孢唑啉、氨苄西林、哌拉西林、庆大霉素、阿米卡星、环丙沙星呈高度耐药,而后者大多对上述药物敏感,两者有显著性差异（均P〈0.05）。头孢他啶、头孢噻肟、氨苄西林/舒巴坦、头孢哌酮/舒巴坦呈中度耐药。两者对亚胺培南、头孢吡肟、哌拉西林/他唑巴坦均为敏感。结论玉环地区阴沟肠杆菌产AmpC酶细菌检出率较高。产AmpC酶菌株多呈多重耐药;亚胺培南、头孢吡肟、哌拉西林他唑巴坦是治疗产AmpC酶菌株感染的较可靠药物。     

阴沟肠杆菌产超广谱β—内酰胺酶情况及耐药性监测

超广谱β-内酰胺酶是一类对包括第三代头孢菌素及氨曲南在内的β-内酰胺类抗生素具有水解作用的酶，由质粒介导的大多数肠杆菌科细菌均可产生ESBLs，常见于大肠埃希氏菌和肺炎克雷白氏菌，亦可见于阴沟肠杆菌，弗劳地枸橼酸杆菌，大多源于TEM-1，TEM-2和SHV-1的突变。为了解我院阴沟肠杆菌产超广谱β-内酰胺酶情况及耐药状     

55株阴沟肠杆菌产超广谱β-内酰胺酶情况及耐药分析

近年来,阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)已成为医院内感染的常见菌。本研究收集2006年3月至2007年3月鹤岗矿务局总医院分离的阴沟肠杆菌55株,用双纸片协同扩散法检测超广谱检测广谱β内酰胺酶(extended-spectrum be-ta-lac-tamases,ESBLs),用Kirby-Bauer法作药敏试验,以了解阴沟肠杆菌产ESBLs及耐药情况,并指导临床用药。1资料与方法1.1材料①临床菌株:2006年3月至2007年3月,由鹤矿集团总医院检验科提供从住院患者各种标本中分离的阴沟肠杆菌55株;②抗生素纸片:头孢曲松(CRO30μg),头孢他啶(CAZ30μg),头孢噻肟(CTX30μg),头孢呋辛(CXM30μg),氨曲南(ATM30μg),亚胺培南(IM10μg)阿米卡星(AK30μg),环丙沙星(CIP5μg),头孢泊肟(CPD10μg),头孢美唑(CMZ30μg),头孢哌酮/舒巴坦(CFP/SU75/30),阿莫西林/克拉维酸(AMX/CA20/10μg)为北京天坛药物生物技术开发公司产品;③M-H琼脂杭州天和生物有限公司。1.2方法①药物敏感试验:采用Kirby-Ba...     

产AmpC酶和ESBLs酶阴沟肠杆菌的耐药性分析

近年来随着广谱抗生素的大量使用,阴沟肠杆菌的耐药率呈上升趋势,而产AmpCβ内酰胺酶（AmpC酶）和超广谱β-内酰胺酶（ESBLs酶）是阴沟肠杆菌重要的耐药机制给。因此,笔者对唐山市工人医院2007年1月至2009年12月分离出阴沟肠杆菌的临床分布及耐药性进行分析,为临床合理应用抗生素提供依据。     

阴沟肠杆菌感染154例耐药性分析

目的分析阴沟肠杆菌耐药机理及现状,指导临床合理应用抗生素。方法收集医院分离到的154株阴沟肠杆菌,采用湖南天地人生物科技公司提供的微生物生化药敏卡进行药敏检测;用双纸片协同扩散法检测超广谱β-内酰胺酶;通过改良酶提取物头孢西丁和头孢曲松三维试验检测AmpC。结果阴沟肠杆菌对临床常用抗生素呈高度耐药;产酶株的耐药性明显高于非产酶株,耐药现象在同时产AmpC酶和ESBLs菌株中尤为严重,96%菌株对亚胺培南敏感。结论阴沟肠杆菌感染的治疗可根据药敏选用氨基糖苷类及喹诺酮类药物,感染严重者可采用碳青霉烯类抗生素。     

临床分离14株高产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶的阴沟肠杆菌耐药表型研究

<正>近年来,由于第3、4代头孢菌素、碳青霉烯类及氟喹诺酮类等超广谱抗菌药物在临床上的广泛使用,使阴沟肠杆菌在其选择性压力下不断产生耐药性,多重耐药形势日益严峻。AmpC     

210株肠杆菌科细菌产ESBLs检测及耐药性调查

目的调查分析三种肠杆菌科细菌产ESBLs情况及其对11种抗生素的耐药性与耐药特点。方法对四川大学华西医院2003年7月-2004年1月从临床分离的210株对第三代头孢菌素(头孢他啶、头孢噻肟、头孢曲松)任一种MIC值≥2μg／ml的肠杆菌科细菌(主要为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌)采用琼脂二倍稀释法测定11种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC)。结果三种肠杆菌科细菌对环丙沙星的耐药率(以中敏和耐药合并计算)均超过50％；有90％的分离株对亚胺培南敏感。在氨基糖苷类抗生素中，以阿米卡星和依替米星的抗菌活性最强，阴沟肠杆菌对阿米卡星和依替米星耐药率较高，分别为56．77％和65．38％。结论肠杆菌科细菌对临床常用抗菌药物的耐药率均较高，多重耐药现象普遍，仅亚胺培南对其抗菌活性最强。     

同时产CTX-M-22及TEM-1型β-内酰胺酶的阴沟肠杆菌耐药性分析

目的 了解临床分离阴沟肠杆菌株EC003产β-内酰胺酶的耐药特征和基因型。方法采用琼脂二倍稀释法对阴沟肠杆菌EC003进行MIC检测，酶提取物三维实验检测AmpC酶，双纸片法筛选及确证实验检测超广谱β-内酰胺酶（ESBLs），等电聚焦（IEF）电泳测定其等电点。以耐药质粒为模板进行PCR扩增，将β-内酰胺酶全编码基因克隆、表达，并对其扩增产物进行DNA序列测定和同源性分析。结果阴沟肠杆菌株EC003对所试多数β-内酰胺类抗生素耐药，表型检测AmpC酶为阴性。ESBLs阳性，IEF显示该菌产两种p1分别为8．7及5．4的β-内酰胺酶。PCR扩增产物DNA测序证实为CTX-M-22、TEM-1型β-内酰胺酶全编码基因，产TEM-1的克隆菌株仅对青霉素类耐药，产CTX—M-22的克隆菌株对所试多数β-内酰胺类抗生素耐药。对头孢噻肟的水解程度明显强于头孢他啶。结论临床分离阴沟肠杆菌株EC003同时产CTX—M-22和TEM-1型两种β-内酰胺酶，可导致对多数β-内酰胺类抗生素耐药。     

医院获得性下呼吸道感染阴沟肠杆菌的耐药性分析

目的了解医院获得性下呼吸道感染阴沟肠杆菌临床分离株耐药性与超广谱β-内酰胺酶的发生率。方法分析2001年3月～2003年5月126例医院获得性阴沟肠杆菌下呼吸道感染患者的分离菌，采用纸片扩散表型试验检测超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）。结果阴沟肠杆菌产ESBLs率为29．4％，呼吸内科、胸外科、神经科等重症监护室（ICU）分离的阴沟肠杆菌产ESBLs率为44％，明显高于普通病房分离的阴沟肠杆菌的产ESBLs率（7．8%，P〈0．005）。产ESBLs阴沟肠杆菌对氨苄青霉素、环丙沙星及头孢他啶等头孢菌素的耐药率分别为100％、92．1％和100％。除哌拉西林和亚胺培南外，产ESBLs阴沟肠杆菌对常用12种抗菌药物的耐药性明显高于不产ESBLs菌。亚胺培南对产ESBLs与不产ESBLs的阴沟肠杆菌的抗菌活性均较高。结论阴沟肠杆菌ESBLs的检出率为29．4％，各科ICU阴沟肠杆菌ESBLs检出率更高。临床可选亚胺培南进行治疗。     

浙江省阴沟肠杆菌超广谱β-内酰胺酶基因型分布

目的　了解浙江省产超广谱 β-内酰胺酶 ( ESBL s)阴沟肠杆菌的基因型分型。方法　根据 Gen-Bank颁布的序列 ,设计 TEM、SHV、CTX- M- 1、CTX- M- 2、CTX- M- 8、CTX- M- 9、OXA- 2和 OXA- 10的通用引物 ,对 5 3株表型筛选为产 ESBL s的阴沟肠杆菌进行 PCR检测 ,并克隆测序。表型与基因型不符的菌株用改良的三维试验法进行检测。结果　结果显示 5 3株阴沟肠杆菌中 34株扩增到 SHV型、CTX- M- 1组、CTX-M- 9组 ESBL s基因型 ,最常见的基因型是 CTX- M型 ,共有 2 9株 ,占 5 4 .72 %。CTX- M- 1组以 CTX- M- 14最多见 ( 2 0株 ) ,其次为 CTX- M- 13( 3株 )和 CTX- M- 2 4 ( 3株 )。CTX- M- 9组均为 CTX- M- 2 2 ( 5株 )。SHV PCR扩增阳性有 6株 ,均为 SHV- 12。有 16株 TEM PCR扩增阳性 ,序列分析证实均为 TEM- 1型广谱酶 ,未发现TEM型 ESBL s。有 2株细菌同时产两种以上 ESBL s。结论　浙江省阴沟肠杆菌中 ESBL s基因型主要是CTX- M型。     

157株剖宫产术后感染肺炎克雷伯菌产ESBLs和AmpC酶及耐药性分析

摘 要 目的：探讨我院产妇剖宫产术后切口感染的肺炎克雷伯菌产超广谱β内酰胺酶（ESBLs）和头孢菌素酶（AmpC酶）情况及其耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供依据。 方法：收集2017年1～12月产妇剖宫产术后切口感染的分泌物标本分离的肺炎克雷伯菌157株; 菌株鉴定采用VITEK 2 Compact 全自动微生物分析仪进行鉴定;产ESBLs检测按CLSI推荐的确证试验;产AmpC酶初筛试验采用头孢西丁纸片扩散法,确证试验采用三维试验;药敏试验采用K B纸片扩散法。 结果：在肺炎克雷伯菌157株中,检出产ESBLs和AmpC酶菌株共82株（52.23%）,其中单产ESBLs 36株＞同产ESBLs和AmpC酶25株＞单产AmpC酶21株。产酶株耐药率明显高于非产酶株,耐药现象在同产ESBLs和AmpC酶菌株中更为严重。单产和同产ESBLs和AmpC酶的菌株对头孢吡肟普遍具有较高敏感性,单产酶菌株除此还对哌拉西林/他唑巴坦和阿米卡星有较高的敏感性。 结论：台州恩泽医疗中心（集团）恩泽医院产妇剖宫产术后切口感染检出的肺炎克雷伯菌单产、同产ESBLs和AmpC酶菌株检出率高于非产酶株,临床应合理应用抗菌药物以减少产酶菌株的产生和蔓延。     

阴沟肠杆菌产β-内酰胺酶的研究进展

阴沟肠杆菌产β-内酰胺酶是对β-内酰胺类抗生素耐药的主要机制,所产β-内酰胺酶种类较多、特性各异,并在β-内酰胺类抗生素广泛应用的选择压力下,不断有新的β-内酰胺酶产生.文中对阴沟肠杆菌产β-内酰胺酶(EsBLs、AmpC、碳青霉烯酶)耐药性的研究进展作了简要综述.     

下呼吸道标本肺炎克雷伯菌产ESBLs和AmpC酶的检测及耐药分析

目的探讨下呼吸道标本肺炎克雷伯菌产头抱菌素酶（Ampc酶）和超广谱6-内酰胺酶（ESBLs）的情况及耐药分析。方法采用纸片扩散确证法检测ESBLs,酶提取物三维试验方法检测AmpC酶。并检测肺炎克雷伯菌对15种抗生素的耐药率。结果120株肺炎克雷伯菌中检出产酶菌株69株。检出率57．5％,其中单产ESBLs38株,单产AmpC酶17株．同时产ESBLs和AmpC酶14株,检出率分别为31．7％、14．2％和11．7％。肺炎克雷伯菌产酶菌株对15种抗生素的耐药率均高于平均水平（除亚胺培南）。结论我院下呼吸道标本肺炎克雷伯菌对抗生素耐药的主要原因是产生AmpC酶和ESBLs,对产酶菌株临床经验用药首选碳青霉烯类抗生素。     

我院2012年10月-2013年3月革兰阴性杆菌产ESBLs和AmpC酶检测及耐药性分析

目的:了解我院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和头孢菌素酶(AmpC)革兰阴性杆菌的耐药性,为临床合理用药提供参考。方法:收集我院2012年10月-2013年3月临床分离出的革兰阴性杆菌。用头孢硝噻吩纸片检测革兰阴性杆菌产β-内酰胺酶情况,双纸片法检测产ESBLs情况,头孢西丁三维试验检测产AmpC酶情况,以确定产酶表型。用K-B法进行药敏检测。结果:103株革兰阴性杆菌中,单产AmpC酶菌42株(40.8%),单产ESBLs菌21株(20.4%),同时产ESBLs和AmpC酶菌12株(11.7%)。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对含酶抑制剂复方制剂如哌拉西林/他唑巴坦,以及碳青霉烯类抗生素亚胺培南和氨基糖苷类抗生素阿米卡星的耐药率均较低。非发酵菌铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌对各抗生素耐药率均较高。结论:各革兰阴性杆菌产酶菌株对多种抗生素的耐药率较高,产ESBLs和AmpC酶可能是导致革兰阴性杆菌耐药的主要机制之一。     

阴沟肠杆菌仪器法筛选和三维试验法测定阴沟肠杆菌AmpC酶的结果分析

近20年以来,随着三代头孢菌素在临床上大量使用,阴沟肠杆菌对β-内酰胺类抗生素的耐药性不断上升,逐渐成为医院感染的重要病源菌之一。通过染色体自发突变,去阻遏持续高产AmpC酶,是阴沟肠杆菌对β-内酰胺类抗生素耐药的主要机制,此菌常引起患者长期、反复、多部位的感染,给临床治疗带来困难。本文对我院2003年1～12月从临床标本中分离的82株阴沟肠杆菌用阴沟肠杆菌（Microscan Walk Away-40）全自动细菌鉴定仪-NC-21复合板耐药谱推测,三维试验确证产AmpC酶的情况进行分析,现报道如下。