异种猪瓣移植人体后衰败的病理形态和超微结构研究

目的 研究植入人体经戊二醛处理的生物猪瓣衰变后的形态和组织病理学变化特点。方法 取20枚再次二尖瓣置换患者手术时切除的衰变猪二尖瓣，观察其大体形态的变化和瓣叶的镜下超微结构及免疫组化的变化，同时和3枚未植入人体生物猪瓣比较。结果 20枚生物瓣植入人体60－156（平均96.8)mo，切除后发现有16枚瓣叶撕裂，3枚瓣叶穿孔，1枚为感染性瓣膜炎，所有瓣膜均有不同程度的钙化；镜下见：胶原纤维透明变性，局灶性溶解，颗粒性物质增多和炎细胞侵润，纤维间粘多糖物质明显增加，尚见红细胞渗出和脂质体沉积。免疫组化显示抗Ⅰ、Ⅲ型胶纤维单克隆抗体的表达较未移植猪瓣叶明显减弱。结论 戊二醛处理的猪瓣植入人体后，瓣叶胶原纤维退行性变化，撕裂与钙化是生物瓣衰败的病理基础，多糖类物质渗入和巨噬细胞蚕噬作用加速病变过程。     

猪到人异种移植匹配性研究

器官移植是治疗人类脏器终末期功能衰竭疾病的唯一有效手段。供器官严重短缺是限制临床移植发展的瓶颈之一。全球认为猪是最具潜力的异种供器官源。但其能否应用于临床的最重要指标是猪-人器官功能是否匹配,是否长期安全和免疫差异能否克服。本研究旨在选择我国自主知识产权的版纳微型猪近交系(Banna minipig inbred line,BMI)和五指山猪近交封闭群(Wuzhisan pig,WZSP),研究其脏器结构、功能与人相应器官的移植匹配性、猪→人异种移植的免疫障碍、评价猪→人异种移植的可行性和安全性。1.近交系或封闭群猪遗传背景调查——DNA指纹图与…     

猪病毒转移威胁异种移植

研究人员发现,在实验室条件下,猪逆转录病毒能感染人细胞,并能自我复制。此研究结果将影响异种移植(将动物组织转移入人体)的前途。今年早期英国当局决定,在进行猪器官移植到人体的试验之前,必须进行更多的研究。一份有关“动物组织移植入人体”的报告指出,动物病毒有可能转移入人体。然而美国在移植团体的压力下,只有不严格的应用动物做为器官供者的指导方针,并且将制定异种移植政策的责任交给外科医师及地方接待部门。     

猪作为异种移植临床的供体

随免疫抑制剂等研究的进步使器官移植的成绩有了划时代的提高,随之器官移植的适用范围得到了惊人的扩大,欧美等国出现了供体严重不足。为此,研究人员已开始研制人工脏器,近来人们也进行了将狒狒等动物作为供体,进行异种移植的临床研究,并有存活数十天的报告。这些背景下,已有了可使血型不合的肾移植患者长期存活的临床病例。     

国产弹性架猪异种瓣的研制和临床应用

本文介绍第二军医大学第一附属医院研制的弹性架猪异种瓣。支架由聚甲醛构成,采用三瓣叶等距设计,架高15mm;经物理,化学及生物学试验,证明性能稳定,富有弹性,抗蠕变,抗疲劳性能好。动物体内埋藏,对组织无不良反应。于1980年10月开始应用于临床,至1981年1月共14例,1例术后死亡与瓣膜无关,其余13例长期生存,心功能均有明显改善,近期效果满意。本文对弹性支架性能及设计问题进行了讨论。     

SDS脱细胞处理猪气管黏膜后的异种移植的初步研究

目的 探讨在不使用免疫抑制剂的情况下,十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate,SDS)脱细胞方法用于气管异种移植的可行性.方法 采用健康家猪9只,体质量50～60 kg,雌雄不限.健康成年比格犬9只,体质量11～14.5 kg,雌雄不限.将获取的9段家猪气管随机分为3组:1％SDS处理组(气管管腔...     

猪抗原和对应抗体在异种移植中的研究进展

移植中,半乳糖-α1,3半乳糖(Gal)是一种主要的抗原,但α半乳糖转移酶基因敲除(GalT-KO)的猪不表达Gal抗原。而GalT-KO的猪器官用于异种移植明显降低了免疫排斥但不能完全消除排斥反应,这表明异种器官移植受体中除抗Gal抗体外还存在非Gal抗体。利用多糖分析和蛋白质组学的方法分别鉴定出了两种新的异种抗原(N-羟乙酰神经氨酸和Sda血型抗原),然而它们在异种移植中的病理作用仍有待进一步研究。除Gal抗原以外,其他多个非Gal抗原缺失基因工程猪的构建是将来异种移植研究的重要方向。     

不同方法保存猪软骨异种移植的实验研究

为了探索不同方法保存猪肩胛软骨对异种移植的影响，为临床应用提供科学依据。采用４种方法保存猪肩胛软骨，并按保存方法及保存时间分７组移植到日本大耳白兔背部皮下，每组５只动物，共３５只进行观察比较。①γ－射线辐射处理，４℃保存３个月为Ａ组，１个月为Ｂ组；②　（戊二醛）＝０．５％磷酸缓冲液浸泡，４℃保存３个月为Ｃ组，１个月为Ｄ组；③深低温－８０℃保存３个月为Ｅ组，１个月为Ｆ组；④新鲜软骨为Ｇ组。移植术后每周１次活体检查软骨位置及大小，术后１周、１个月、３个月、６个月，每只动物取一块软骨行大体标本和光学显微镜观察，术后６个月取软骨标本行电子显微镜观察。实验结果显示：　（戊二醛）＝０．５％浸泡、γ－射线辐射处理可降低软骨抗原性，４℃保存时间≤１个月为最佳保存时间，按软骨被吸收卒大小，依次为Ｅ、Ｆ、Ａ、Ｂ、Ｇ、Ｃ、Ｄ组。结果提示：①猪肩胛软骨可作为异种移植代用材料的最佳供体之一；②猪肩胛软骨异种移植到家兔皮下，可长期存留６个月；③本实验４种猪软骨保存方法相比较，按异种移植后软骨抗原性降低和被吸收、变形程度轻重，以　（戊二醛）＝０．５％磷酸缓冲液浸泡保存方法为最佳条件，γ－射线辐射处理次之；④　（戊二醛）＝０．５％磷酸缓冲     

猪胰岛细胞治疗糖尿病大鼠的异种移植研究

用猪的胰岛细胞移植于糖尿病大鼠模型，实验期间监测大鼠的空腹血糖变化，结果提示，异种移植后１周内可使糖尿病大鼠的血糖水平降低（Ｐ〈０．０５）；大鼠未因异种移植造成严重的排斥反应死亡，提示猪胰岛细胞与大鼠作移植有一定安全性，在提高猪胰岛细胞的分离培养制作技术和单位体积胰岛细胞的收获量后，这种异种移植可使降血糖的作用时间得到进一步延长。     

猪-人椎间盘异种移植的可行性研究

目的 探讨异种椎间盘移植的可能性。方法 观察成人新鲜尸体颈椎和近交系版纳小耳猪腰椎椎间盘的解剖形态、组织形态、生物化学、生物力学及猪椎间盘组织中异种抗原α-Gal的分布。结果 近交系版纳小耳猪的腰椎椎间盘既有适当的接触面积和高度，又有维持活动度的生化、组织基础，虽然猪与人椎间盘中的纤维比例和生化成分有所差异，但就是基于这种组织基础上，猪的腰椎椎间盘仍可在所承受的载荷上提供稳定性，而且猪椎间盘组织中异种抗原分布少。结论 猪椎间盘组织可能成为临床损伤修复移植的材料来源。     

小型猪在异种移植中的应用前景

目的 建立狂犬病病毒感染动物疾病模型.方法 狂犬病病毒CVS-B2C毒株以10LD50剂量腿部肌肉注射接种4～6周龄的BALB/c小鼠,0.2 mL/只,于BSL2实验室负压IVC设备内饲养观察,并对其模型进行评价.结果 小鼠接种狂犬病病毒后一周左右就出现临床症状,表现为饮食量下降,毛皮慢慢失去原先的光泽,体重下降,并出现麻痹等症状,进而死亡,部分小鼠出现躁狂的症状或抽搐性和强直性痉挛,而对照组小鼠则表现正常.DFA法检测结果:感染上狂犬病毒的小鼠脑组织涂片中出现特异性荧光抗体染色反应,而对照组动物的小鼠脑组织涂片未出现荧光抗体染色反应.RT-PCR法检测结果:从感染小鼠脑组织标本中提取病毒RNA,引物扩增出的目的 基因片段,大小约为1kb,为N蛋白.免疫组化法检测结果:感染狂犬病毒的小鼠脑切片显示出棕色阳性颗粒,对照组小鼠脑切片染色阴性.病理检测结果:HE染色可见感染小鼠脑组织炎性细胞浸润.神经细胞胞质内出现内基体以及神经细胞退行性病变.结论 成功的复制出小鼠狂犬病病毒感染模型,为研究和控制狂犬病奠定了基础.     

胎猪皮肤前体组织异种移植模型的研究

目的探讨胎猪皮肤前体组织异种移植模型及移植后发育过程。方法取精确胎龄为56d的胎猪皮肤前体组织,分组进行移植,①背部创面模型组：制备成微粒皮后移植到BALB／c裸鼠背部创面,以人尸体皮覆盖;背部皮下模型组：制备成小张邮票皮,植入裸鼠背部皮下;耳廓皮下模型组：制备成微粒皮植入裸鼠耳廓皮下。各组于移植后观察其生长发育特性,并于移植后6周和12周取材行HE染色观察其组织结构形态。新生组织块大小采用双样本t检验。结果各模型的胎猪皮肤前体组织移植后均能存活并继续生长,背部创面模型组生长能力显著大于耳廓皮下模型组,新生皮肤组织均具有真皮和表皮,耳廓皮下模型的真皮附属器仅见毛囊（毛发）．偶见皮脂腺,未见汗腺,但是背部创面模型组及背部皮下模型组不仅能发育成毛囊（毛发）、还见大量皮脂腺和汗腺。结论背部创面移植模型最适合于胎猪皮肤前体组织异种移植及移植后发育的研究。     

不同方法保存存猪软骨异种移植的实验研究

为了探索不同方法保存猪肩胛软骨对异种移植的影响，为临床应用提供科学依据。采用４种方法保存猪肩胛软骨，并按保存方法及保存时间分７组移植到日本大耳白兔背部皮下，每组５只动物，共３５只进行观察比较。①ｒ－射线辐射处理，４℃保存３个月为Ａ组，１个月为Ｂ组；②ｙ（戊二醛）＝０．５％磷酸缓冲液浸泡，４℃保存３个月为Ｃ组，１个月为Ｄ组；③深低温－８０℃保存３个月为Ｅ组，１个月为Ｆ组；④新鲜软骨为Ｇ组。移植术后每     

人源化的猪心脏促进异种移植

位于剑桥的Imutran生物技术公司的David White等宣布,人类加速衰退因子基因的转基因猪心脏移植给cynomolgous猴子未诱发超急排斥反应,此种反应在种属之间移植后常在2～4分钟发生。他们准备在波士顿第三届国际异种移植讨论会上公布其资料。此小组已异位移植十个转基因猪心脏于十个cynomolgous猴子。此外来心脏植入腹腔,虽然跳动和猴子自己的心脏同样的好,但新心脏不维持生命。     

中国版纳小型猪近交系动脉异种移植靶抗原研究

目的　研究中国版纳小型猪近交系动脉的异种靶抗原α -Gal的分布和半定量分析 ,为研究异种移植超急性排斥反应和异种生物材料提供资料。方法　通过亲和免疫组织化学法和图象分析对 10头版纳小型猪的四级动脉进行α Gal的分布和半定量研究。结果　 (1)各级血管组织中血管内皮细胞阳性表达明显 ,弹性纤维、胶原纤维和平滑肌细胞未见表达 ,外膜有微弱表达 ;(2 )图象分析显示 ,管径越细 ,其内皮细胞的表达越高 (P <0 .0 1) ,各级动脉内皮细胞阳性表达的面积密度比的组间差异显著 (P <0 .0 1) ,t检验发现每两组间的动脉内皮细胞阳性表达面积密度比相差显著 (P <0 .0 1)。结论　 (1)版纳小型猪动脉内皮细胞均有异种抗原α Gal分布 ,但是分布不均匀 ;(2 )微血管血栓是异种移植超急性排斥反应中的重要环节 ,小型猪的异种器官移植、彻底解决异种移植超急性排斥反应的关键是防治微血管栓塞     

实验性大鼠肺纤维化病理形态及超微结构观察

目的 从形态学上研究肺纤维化的形成过程，为防治研究和客观地评价用药物治疗肺纤维化的疗效提供依据。方法 向大鼠气管内一次性注入博莱霉素(5mg／kg)，观察注药后各模型组的肺系数、肺组织定量分析、肺组织病理及超微结构的变化。结果 模型组肺系数从第7d开始呈逐渐升高趋势；定量分析：7d组肺泡炎最严重，28d组肺泡腔明显缩小，胶原纤维成分增加；光镜下7d组肺泡腔及肺泡间质内以炎细胞浸润为主，14d时肺泡间质增宽，成纤维细胞增多，28d时胶原纤维增生，部分肺泡腔萎缩消失；电镜下3d和7d时肺泡上皮线粒体肿胀，空泡化，核固缩或核染色质边集，肺毛细血管基膜水肿或增厚，14d时Ⅱ型肺泡上皮细胞增生，其内板层小体增多，成纤维细胞增多；28d时肺间质增宽，巨噬细胞及成纤维细胞增多，胶原纤维呈灶性沉集。结论 建立的大鼠肺纤维化模型符合肺泡炎一纤维化的早期演变过程。     

iPS细胞移植对猪心肌梗死后梗死区心肌超微结构的影响

目的探讨猪iPS细胞移植对缺血再灌注猪心肌梗死（简称心梗）梗死区心肌超微结构的影响。方法通过球囊封堵左前降支冠状动脉90min制备猪心梗模型,1周后开胸,直视下心肌内注射iPS细胞或PBS液。24只实验苏中幼猪随机分成3组：假手术对照组（Sham组）、PBS对照组和iPS细胞移植组。细胞移植7周后处死动物,取梗死区心肌组织,采用JEM-1010X型透射电子显微镜行超薄切片电镜检查。结果与Sham组和PBS组相比,iPS细胞移植能够明显改善心肌缺血所致的梗死区心肌细胞超微结构的损伤程度,并可形成新的心肌肌丝。结论iPS细胞移植对猪心梗死心肌细胞有保护作用,可部分修复梗死区心肌。     

人类肿瘤异种移植和癌生物学研究

人类肿瘤异种移植已有近百年的历史,近二十年来,由于遗传突变的先天性免疫缺陷动物的发现,才有了迅猛的发展。1969年,Rygaard首次报道人体肿瘤移植于裸鼠获得成功,70年代初Giovanella等也相继将体外培养的人癌细胞系成功地移植于裸鼠,这些移植的人类肿瘤生长良好并可长期传代,从而迈出     

小型猪舌超微结构及病理舌苔模型的初步研究

对小型猪舌的表面结构进行扫描。透射电镜的观察，结果表明，小型猪猪舌表面及舌上皮各层细胞结构的特点与人舌上皮基本相同。从解剖及组织学的角度来看，小型猪完全符合中医病理舌苔动物模型制作的要求，经过不同造模方法的摸索，最终用50%白酒加饱和食用碱溶液的混合液隔日灌胃的办法复制出了薄白腻苔的病理舌象模型。     

近端输卵管闭塞的病理形态及其超微结构探讨

目的探讨近端输卵管闭塞的病理形态和超微结构。方法采用回顾性方法对1985年1月-2004年12月间182例近端输卵管闭塞性不孕症患者进行分析，主要是闭塞的近端输卵管的病理形态改变，部分输卵管标本行透射电镜观察。结果导致输卵管近端闭塞的首位病因是输卵管非特异性慢性炎症，占67．02％，其次是输卯管管腔纤维闭塞和结节性输卯管炎，各占11．54％，再次为输卵管子宫内膜异位症，占6．60％，输卵管结核、输卵管异物结节以及未见明显病变者各占1．10％。透射电镜发现4例患者阻塞段输卵管切面为大量胶原纤维和少量的纤维细胞，排列较为紊乱，未见上皮和管腔；有1例仍可见输卵管上皮，但纤毛互相粘连填塞管腔，致使管腔变窄甚至闭锁，部分细胞纤毛出现退化或脱落，纤毛的横切面9＋2微管系统结构欠清晰，胞质内线粒体肿胀及内质网扩张，胞质内可见空泡。而邻近阻塞部位输卵管（通畅段）：电镜下上皮细胞主要由单层柱状分泌细胞和纤毛细胞构成，纤毛细胞顶端的纤毛排列比较规整，未见明显退化和脱落的现象。结论闭塞的近端输卵管呈多种病理类型改变，其主要病因是输卯管非特异性慢性炎症，其次为输卵管管腔纤维闭塞和结节性输卵管炎。感染及人工流产的增加可能是导致输卵管性不孕发病率增加的因素。