血必净注射液对脓毒症大鼠器官功能及死亡率的影响

[目的]观察血必净注射液对脓毒症大鼠多器官功能及死亡率的影响。[方法]采用大鼠盲肠结扎穿孔(CLP)模型。雄性Wistar大鼠96只按随机数字表法分为正常对照组(n=8)、假手术组(n=8)、模型对照组(n=40),血必净治疗组(n=40),后两组按观察时间点分为2、8、24、48和72 h亚组。另设实验观察血必净注射液对脓毒症大鼠的治疗效果,观察CLP术后7 d存活率。[结果]血必净治疗组血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、肌酸激酶(CK)及心肌型肌酸激酶同功酶(CK-MB)水平呈不同程度降低;与模型未治疗组比较,血必净治疗组及联合治疗组动物死亡率显著降低。[结论]血必净注射液能够明显降低脓毒症大鼠的死亡率,并对重要器官功能具有保护作用。     

血必净注射液改善脓毒症大鼠心脏功能的作用

目的观察血必净注射液对脓毒症大鼠心脏功能的作用。方法将45只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组(Sham组)、脓毒症模型组(CLP组)及血必净治疗组(XBJ组),每组15只。Sham组不结扎穿刺盲肠,余同CLP组;CLP组采用盲肠结扎并穿刺法造模;XBJ组造模后立即经阴茎静脉注射血必净注射液4mL/kg体重。12h后经右颈总动脉左心室内插管监测各组大鼠左心室功能变化,留取左心室心肌组织观察形态学改变,同时检测血清心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β的含量。结果①脓毒症状态下左心室收缩峰压(LVPP)、左心室舒张末期压(LVEDP)、左心室压力上升/下降最大速率(±dp/dtmax)均有不同程度改变,应用血必净注射液后可明显改善各项指标。②CLP组可见细胞变性、炎性细胞浸润,XBJ组上述改变减轻。③脓毒症状态下cTn-Ⅰ、TNF-α、IL-1β水平显著升高,应用血必净后明显降低。结论血必净注射液改善脓毒症状态下心功能障碍,其机制可能与减轻心肌损伤,下调TNF-α、IL-1β水平有关。     

血必净注射液对脓毒症大鼠器官功能及死亡率的影响*

[目的]观察血必净注射液对脓毒症大鼠多器官功能及死亡率的影响。[方法]采用大鼠盲肠结扎穿孔（CLP）模型。雄性Wistar大鼠96只按随机数字表法分为正常对照组（n=8）、假手术组（n=8）、模型对照组（n=40）,血必净治疗组（n=40）,后两组按观察时间点分为2、8、24、48和72 h亚组。另设实验观察血必净注射液对脓毒症大鼠的治疗效果,观察CLP术后7 d存活率。[结果]血必净治疗组血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、肌酸激酶（CK）及心肌型肌酸激酶同功酶（CK-MB）水平呈不同程度降低;与模型未治疗组比较,血必净治疗组及联合治疗组动物死亡率显著降低。[结论]血必净注射液能够明显降低脓毒症大鼠的死亡率,并对重要器官功能具有保护作用。     

血必净注射液对脓毒血症大鼠肺脏组织炎症反应的影响

目的探讨血必净注射液对脓毒血症大鼠炎症反应的影响。方法 将100只雄性Wistar大鼠,随机分为正常对照组、假手术组、盲肠结扎穿孔术(cecum ligation and puncture, CLP)组、血必净组,每组25只大鼠,每组分为5个亚组。CLP组及血必净组大鼠均使用CLP建立脓毒血症大鼠模型。血必净组大鼠分别于术后2、12、24、36、48、60h经阴茎背静脉注射血必净注射液(天津红日药业)4ml/kg,其余各组大鼠经阴茎背静脉注射生理盐水4ml/kg。术后6、12、24、48、72h,分别收集各组实验大鼠的双肺。取大鼠左全肺,测定肺湿干重比(W/D);取大鼠右肺,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组大鼠肺组织匀浆上清液中IL-17及IL-6浓度。结果 脓毒症组大鼠肺湿干重比、IL-17浓度在术后6h开始出现上升,至术后12h达到高峰,在术后12~72h维持在较高水平。肺湿干重比、IL-17浓度上升均有统计学意义(P<0.05) ,血必净组大鼠IL-17浓度在各个时间节点均低于脓毒症组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 血必净注射液可降低脓毒血症大鼠肺脏组织IL-17浓度,对脓毒血症具有一定的治疗作用。     

血必净注射液对脓毒症大鼠Claudin4蛋白和辅助性T淋巴细胞1型表达的影响

目的探讨血必净注射液对脓毒症大鼠肺组织Claudin4蛋白表达的影响。方法健康成年Sprague-Dawley大鼠100只,体重(250±25)g,随机分入4组,每组25只:假手术组大鼠只开腹、关腹和复苏,不行盲肠结扎穿孔术(CLP);脓毒症组大鼠行CLP;血必净3h组大鼠于CLP后3h腹腔内注射血必净注射液2mL/kg;血必净12h组大鼠于CLP后12h腹腔内注射血必净注射液2mL/kg。每组随机留取8只大鼠进行生存率分析。假手术组、脓毒症组、血必净3h组大鼠在术后6、15和24h,血必净12h组大鼠在术后15和24h各随机处死5只,分别留取血液和肺组织标本,测定肺组织湿/干质量比(肺水肿指数),对肺组织进行病理学观察并进行肺损伤病理学评分,测定血清促炎细胞因子IL-6和TNF-α水平,采用免疫组织化学方法测定肺组织骨架蛋白Claudin4蛋白表达情况,采用流式细胞术检测辅助性T淋巴细胞1型(Th1)在外周血单核细胞中的表达情况。结果假手术组、脓毒症组、血必净3h组和血必净12h组大鼠的术后72h存活率分别为8/8、0、1/8和0,血必净3h组显著高于脓毒症组(P<0.01),血必净12h组与脓毒症组的差异无统计学意义(P>0.05)。假手术组大鼠术后各项检测指标均基本不变。脓毒症组、血必净3h组和血必净12h组大鼠术后15和24h的肺水肿指数,以及术后6、15和24h的肺损伤病理学评分、血清IL-6和TNF-α水平、肺组织Claudin4蛋白表达阳性率均显著高于假手术组同时间点(P值均<0.01);脓毒症组大鼠术后6、15和24h,以及血必净12h组大鼠术后15和24h的肺水肿指数、肺损伤病理学评分、血清IL-6和TNF-α水平、肺组织Claudin4蛋白表达阳性率均显著高于血必净3h组同时间点(P值分别<0.05、0.01);脓毒症组与血必净12h组术后同时间点间上述指标的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。脓毒症组和血必净3h组大鼠术后各时间点的外周血单核细胞中Th1的表达率均显著高于假手术组同时间点(P值均<0.01);脓毒症组大鼠术后6和15h的外周血单核细胞中Th1的表达率均显著高于血必净3h组同时间点(P值均<0.01),术后24h的外周血单核细胞中Th1的表达率显著低于血必净3h组同时间点(P<0.05)。结论早期使用血必净治疗可以有效地抑制脓毒症大鼠肺组织的炎性反应,减轻肺损伤,提高大鼠存活率,其可能机制与抑制肺组织Claudin4蛋白表达,降低肺泡通透性有关。     

血必净注射液对脓毒症大鼠肠TLR4和NF-κB的影响

目的:探讨血必净注射液对脓毒症大鼠肠的保护作用及机制。方法:Wistar大鼠80只,随机分成4组:正常对照组(N,n=8)、假手术组(S,n=8)、脓毒症组(C,n=32)、血必净治疗组(X,n=32),测定各组大鼠肠组织内TLR4和NF-κB表达,肠组织ICAM-1免疫组织化学染色及观察病理形态。结果:脓毒症组各时间点肠组织内TLR4、NF-κB和ICAM-1表达明显高于假手术组(P<0.01),血必净注射液可明显抑制这种变化(P<0.01)。结论:血必净注射液通过下调肠组织内TLR4、NF-κB和ICAM-1表达减轻脓毒症大鼠的肠损伤。     

甘草酸二铵对脓毒症大鼠心功能的保护作用

目的 观察不同剂量甘草酸二铵(DG)对脓毒症大鼠心功能的保护作用.方法 采用盲肠结扎穿孔法(CLP)制作大鼠脓毒症模型,随机分为CLP 24、48及72h3个亚组,并设立正常对照组和假手术组,于不同剂量DG干预性治疗前后,通过超声心动图测定各组大鼠心功能指标:左室舒张末内径(LVIDd)与收缩末内径(LVIDs)、射血分数、左室短轴缩短率(FS)、心率、心输出量的变化.结果 脓毒症组大鼠心功能指标相对于正常对照组和假手术组,差异具有统计学意义(P＜0.05);DG小剂量组与CLP组比较,大鼠的LVIDd与LVIDs减小,差异具有统计学意义(P＜0.05);而射血分数、FS、心率、心输出量两组间比较差异无统计学意义.DG中剂量及大剂量组与CLP组各项指标比较,差异均具有统计学意义(P＜0.05).结论 一定剂量DG可减轻脓毒症大鼠心肌损伤,对脓毒症大鼠心功能具有保护作用.     

脓毒症大鼠DAO与TNF-α变化研究

目的研究TNF-α在脓毒症大鼠肠道损伤中的作用。方法 60只SD大鼠随机分成假手术组(n=30),脓毒症组(n=30)。假手术组仅行盲肠探查术,脓毒症组采用CLP制作大鼠脓毒症模型。各组均于术后3、6、12、24与48 h时相点,经腹主动脉采血检测血清DAO、TNF-α水平。结果血清DAO水平逐渐升高,于48 h时达到最高值,高于假手术组(P0.05);血清TNF-α水平在CLP术后即明显高于假手术组(P0.05),在24 h达峰值,随后虽有下降,但仍显著高于假手术组(P0.05)。TNF-α与DAO具有正相关(r=0.897,P0.05)。结论 TNF-α的异常升高,可能在脓毒症大鼠肠道损伤中具重要作用。     

参麦注射液对早期盲肠结扎穿孔脓毒症大鼠血清IL-6、IL-8水平的影响

目的 研究参麦注射液(Shenmai,SM)对盲肠结扎穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)脓毒症大鼠模型早期促炎性细胞因子IL-6、IL-8水平的影响.方法 96只SD大鼠随机分为A组(假手术组,n=32)、B组(生理盐水组,n=32)和C组(参麦注射液组,n=32),分别于CLP造模后1/2、12、24和36 h向A组、B组大鼠皮下注射生理盐水(5 mL/kg),C组大鼠皮下注射参麦注射液(5 mL/kg),并于术后12、24、36和48 h测量3组SD大鼠血清中IL-6、IL-8的水平.结果 CLP造模后B、C两组血清IL-6、IL-8水平均明显升高,C组在各时点的IL-6、IL-8水平均显著低于B组(P<0.01).结论 参麦注射液可显著降低脓毒症大鼠早期促炎性细胞因子IL-6、IL-8的水平,对早期脓毒症大鼠具有保护作用.     

盲肠结扎穿刺大鼠脓毒症模型改良

目的探索更符合临床脓毒症病生理机制的动物模型。方法将75只雄性sD大鼠随机分为CLP组、实验组及假手术组,每组25只,分别行假手术、盲肠结扎穿刺及改良盲肠结扎穿刺术。3组大鼠中各取5只,于术后12h无菌心脏采血2mL,进行细菌培养及鉴定。剩余大鼠分别于术后6h、12h、24h血清TNF—a和IL一6浓度,并观察大鼠死亡率。结果实验组大鼠血培养均为阳性,术后6h、12h、24h血清TNF—a和IL-6浓度均明显高于假手术组及CLP组（P〈0．01）。结论改良盲肠穿刺结扎术所致大鼠脓毒症模型由于传统CLP模型。     

胃促生长素对脓毒症大鼠脑功能障碍的影响及相关机制

目的探讨炎性因子在脓毒症大鼠脑功能障碍发病机制中的作用及胃促生长素(ghrelin)对脓毒症大鼠脑功能和脑部炎性反应的影响。方法将64只雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为假手术组(Sham组)、假手术+ghrelin组(Sham+ghrelin组)、盲肠结扎穿孔(CLP)组及CLP+ghrelin组,每组16只。采用CLP法制作大鼠脓毒症脑病模型。Sham+ghrelin组和CLP+ghrelin组于造模后即刻及12h后腹腔注射ghrelin80μg/kg,Sham组及CLP组于相应时间点腹腔注射等量的0.9%氯化钠溶液。将每组再分为3个亚组:第1亚组6只,于术后6h采用动物神经功能评分表对大鼠进行评分,而后麻醉断头取左侧海马组织,采用酶联免疫吸附试验检测肿瘤坏死因子(TNF)-α及白细胞介素(IL)-6的表达情况;第2亚组6只,于术后24h进行上述处理;第3亚组4只,于术后24h灌注取脑组织行尼氏染色后进行病理学检查。结果造模后24h,CLP组及CLP+ghrelin组大鼠的神经功能评分均显著低于Sham组及Sham+ghrelin组(P值均<0.05),CLP+ghrelin组显著高于CLP组(P<0.05),Sham+ghrelin组与Sham组间的差异无统计学意义(P>0.05)。造模后6、24h,Sham组与Sham+ghrelin组间海马组织中TNF-α及IL-6表达的差异均无统计学意义(P值均>0.05),CLP组及CLP+ghrelin组海马组织中TNF-α及IL-6的表达水平均显著高于Sham组及Sham+ghrelin组(P值均<0.05),CLP+ghrelin组显著低于CLP组(P值均<0.05)。CLP组大鼠海马神经元明显变性、坏死、丢失,排列疏松,部分神经元核固缩,细胞质内尼氏小体减少;CLP+ghrelin组与CLP组相比,上述病理改变明显减轻,但未完全消失。结论 ghrelin对脓毒症大鼠的脑功能起到一定的保护作用,其机制可能与下调炎性因子TNF-α及IL-6的表达而减轻海马神经元的损伤有关。     

超声心动图评价慢性饮酒大鼠的心脏结构与功能的改变

目的：采用超声心动图二维成像与组织多普勒成像（TDI）技术探讨慢性饮酒大鼠的心脏结构与功能的改变。方法：将24只雄性Wistar大鼠随机分为对照组（12只）和酒精组（12只）,喂养16周后,应用彩色多普勒超声心动图二维成像与TDI技术测定两组大鼠心脏的结构与功能参数。结果：酒精组与对照组比较,心脏结构和收缩功能差异无统计学意义（P〉0．05）;二尖瓣E峰值降低、IVRT延长,二尖瓣内环TDI舒张早期速度Ea降低,舒张晚期速度Aa增高（P〈0．05或P〈0．01）。对照组的Ea／Aa比值〉1,而酒精组〈1。结论：超声心动图二维成像与TDI技术为饮酒大鼠模型心脏结构和功能早期改变的评价提供了有效的方法。     

盲肠结扎穿孔脓毒症大鼠血清DAO与CGRP变化及其相关性研究

目的通过观察盲肠结扎穿孔脓毒症大鼠血清DAO、CGRP水平变化及相关性分析,探讨CGRP在肠黏膜损害中的作用。方法将60只SD大鼠随机分成脓毒症组和假手术组,每组30只,脓毒症组采用CLP制作大鼠脓毒症模型,假手术组仅行盲肠探查术。各组均于术后3、6、12、24与48 h时点,采集腹主动脉血通过双抗体夹心酶标免疫分析法检测血清DAO、CGRP水平,并做相关性分析。结果脓毒症组中的DAO水平与假手术组比较,CLP术后3 h明显升高(P0.05),呈持续上升趋势,在CLP术后48 h血清DAO水平明显高于假手术组(P0.05)。脓毒症组中的CGRP水平与假手术组比较,CLP术后3 h明显降低(P0.05)呈持续降低趋势,虽随时间推移有所回升,但在CLP术后48 h仍低于假手术组(P0.05)。血浆CGRP、DAO含量的变化,经相关分析,CGRP与DAO具有高度正相关,相关系数为0.904,(P0.01)。结论盲肠结扎穿孔脓毒症大鼠DAO明显高于正常水平、CGRP呈现持续降低状态,CGRP的释放减少可能是导致肠缺血缺氧和肠黏膜损伤的因素之一。     

血必净注射液对心肺复苏后大鼠心肌肌钙蛋白T、心肌细胞Ca2+水平的影响

目的探讨血必净注射液对大鼠心肺复苏后心肌肌钙蛋白T(cTnT)、心肌细胞Ca2+水平及心肌病理改变的影响。方法建立心肺复苏大鼠模型,并将其随机分为3组,假手术组(大鼠在麻醉后仅行气管切开插管、颈动脉血管穿刺,而不进行窒息及心肺复苏试验,n=6)、模型组(大鼠在心肺复苏即刻通过尾静脉缓慢注射生理盐水4mL/kg,n=6)、血必净组(大鼠在心肺复苏即刻通过尾静脉缓慢注射血必净注射液4mL/kg,n=6)。检测心肺复苏前、后各组cTnT值、Ca2+荧光强度平均值及心肌病理变化。结果心肺复苏后6h,模型组、血必净组大鼠心肌细胞Ca2+荧光强度平均值高于假手术组(P<0.01)。与心肺复苏前比较,心肺复苏后6h模型组、血必净组大鼠的cTnT值均明显升高(P<0.01),尤以模型组升高幅度最大。血必净组大鼠心肌损害较模型组轻。结论血必净注射液可通过抑制心肌细胞钙超载,下调cTnT水平而发挥保护心肌的作用。     

血必净对大鼠下肢缺血再灌注损伤的影响

目的研究血必净对大鼠下肢缺血再灌注损伤的影响。方法制备大鼠下肢缺血再灌注模型,观察实验组不同组间血清中髓过氧化酶（MPO）、乳酸脱氢酶（LDH）、总一氧化氮合酶（TNOS）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、结构型一氧化氮合酶（cNOS）活性的变化。结果与SOG组比较,I/R组XBJ组血清中MPO、LDH、TNOS、iNOS的活性均增高（P〈0.05）,I/R中血清中cNOS活性降低（P〈0.05）,XBJ组血清中cNOS活性增高（P〈0.05）。与I/R组相比较,XBJ组血清中MPO、LHD、iNOS活性均降低（P〈0.05）,XBJ组血清中TNOS、cNOS活性增高（P〈0.05）。结论血必净可以稳定中性粒细胞,降低iNOS活性,减少iNOS源性NO;增高cNOS活性,使eNOS源性NO增加,减轻对细胞的毒性,对下肢缺血再灌注损伤有保护作用。     

血必净注射液对大鼠肝缺血-再灌注损伤的干预作用

目的探讨血必净注射液对肝脏缺血-再灌注损伤的保护作用及其机制。方法将90只健康雄性Wistar大鼠随机分成3组：假手术组（SOG组）30只，缺血再灌注组（I／R组）30只，血必净组（XBJ组）30只。血必净组术前3d经尾静脉注射血必净注射液5ml/kg／d。于再灌注6h、12h、24h各组分别随机选取10只大鼠进行标本检测：观察动物肝脏组织病理切片；测定血清中谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）、测量肝脏组织中脂质过氧化产物丙二醇（MDA）；超氧化物歧化酶（SOD）的含量。结果光镜下I／R组、XBJ组与SOG组在相同时相点比较，肝细胞水肿、变性，肝小叶结构紊乱，I／R病理改变较XBJ组严重；XBJ组与I／R组在相同时相点鄙较MDA含量显著下降，均有显著性差异（P〈0．01）。结论血必净注射液对肝脏缺血-再灌注损伤具有保护作用，该作用与减少氧自由基的产生有关。