抗炎性Th2细胞因子在肾脏疾病防治中的研究进展

Th2细胞因子IL-4、IL-10和IL-13均具有抑制炎症介质产生,抑制细胞免疫反应和促进体液免疫反应的特性,它们与肾脏疾病有着密切关系.目前IL-4、IL-10对肾脏疾病的防治研究已经开始,它们主要在肾小球肾炎的防治中有着重要的作用.IL-13在某些疾病的防治研究也已开始,但在肾脏疾病中的研究仍在体外阶段.     

显性调控下免疫细胞局部微环境的特征

目的 观察显性调控过程中细胞因子谱系的动态变化及不同刺激强度的影响作用，归纳显性调控作用下免疫反应局部微环境的特征。方法 分离外周血单个核细胞，采用不同组合刺激，以ELISA、RT-PCR检测细胞因子表达水平。结果 ELISA结果显示：IL-2、IL-4、IL-12分泌受到抑制，在整个观察期中，无论单刺激组还是共刺激组与未接受IL-10干预的对照组比较，IL-4、IL-12皆呈现显著差异，IL2分泌在单刺激组抑制显著，IFN-γ仅表现为明显抑制，无统计学差异，IL-10促进TGF-β1的合成与分泌，在单刺激时增加明显，而在共刺激组，只在反应72h才显著增加。在基因水平．被测细胞因子呈现相似的结果。结论 显性调控的建立主要通过IL-10抑制IL-12和IL-4过度表达，防止免疫应答在早期产生特定的和特异的单极化免疫效应。     

IL-4与IL-10联合诱导异种骨移植免疫耐受的实验研究

[目的]探讨IL-4和IL-10在诱导异种骨移植免疫耐受中的作用。[方法]取雄性BALB／c小鼠60只（体重20～22g）为骨移植受体，取新西兰兔1只为异种骨供体。实验用小鼠股后肌袋骨移植模型。将动物随机等分为A、B、C 3组，在小鼠左肢股后肌袋植入新鲜异种骨粒（75mg／只）并做如下处理。A组为对照组，腹腔注射生理盐水200 μl；B组腹腔注射IL-4和IL-10各0．5 μg（100 μl）；C组植骨部注射IL-4和IL-10各0．5 μg（100 μl）。于术后1、2、4、6周分批取材。通过检测受者的淋巴细胞刺激指数、细胞因子及组织学变化，观察诱导异种骨移植免疫耐受的效果。另取BALB／c小鼠10只和本地菜兔1只做二次移植实验，确定免疫抑制作用是否有供体特异性。[结果]与A组相比，B和C组注射IL-4及IL-10后均明显抑制了骨抗原二次刺激引起的细胞增殖（P〈0．01），腹腔注射起效早，局部注射作用持久。细胞因子检测，早期B组IL-2和IFN-γ分泌增加（P〈0．05），C组仅IFN-γ分泌增加；2周时两组的IFN-γ和IL-4分泌均明显减少（P〈0．05），C组的IL-2分泌也明显减少（P〈0．001）。组织学检查，注射IL-4和IL-10后植骨部炎细胞浸润少，尤其C组诱导成骨较多。二次移植实验表明，IL4和IL-10的免疫抑制作用有供体抗原特异性。[结论]IL-4和IL-10能有效抑制新鲜异种骨移植免疫反应，促进耐受形成。抑制作用在早期主要通过细胞因子调节，使Th1／Th2达到动态平衡而实现。腹腔注射起效早，局部注射作用持久。     

抗炎白细胞介素与肾小球肾炎

白细胞介素－4，10，13（IL－4，IL－10，IL－13）是主要由Th2细胞产生的三种重要的抗炎细胞因子，它们通过抑制促炎因子的合成，诱导IL－1ra的产生，抑制细胞免疫反应及炎症介质的生成，促进B细胞的增殖和抗体的分泌介导体液免疫反应，因而具有显著的抗炎作用，本文概述它们在肾小球疾病方面的重要作用及其作为治疗性细胞因子潜在的应用前景。     

白细胞介素-8及其与肾脏疾病的关系

白细胞介素-8(Interleukin-8,IL-8)是20世纪80年代后期发现并命名的一种新的细胞因子.IL-8由多种细胞产生,包括外周血淋巴细胞、单核细胞、中性粒细胞等,近来发现肾脏系膜细胞、内皮细胞及肾小管上皮细胞也可产生[1,2].IL-8对T淋巴细胞、中性粒细胞、嗜碱性粒细胞有趋化作用,是趋化因子中活性最强的一种[3],IL-8对T细胞的定位分布、淋巴细胞再循环、炎症或白细胞积聚有重大意义.IL-8参与多种炎症疾患的发病过程[3～6].IL-8作为一种炎症趋化因子,其在肾脏疾病中的作用开始引起重视.     

高迁移率族蛋白B1对小鼠调节性T细胞与CD4+CD25-T细胞相互作用的影响

目的 观察高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对调节性T细胞(Treg)与CD4+CD25-T细胞相互作用的影响,并初步探讨其影响Treg抑制功能的机制.方法 免疫磁珠法分离正常BALB/c小鼠脾脏CD4+CD25+Treg及CD4+CD25-T细胞.采用固相包被抗CD3/可溶性抗CD28进行辅助活化,以不同时间及浓度HMGB1刺激Treg,ELISA法分析HMGB1刺激对Treg分泌IL-10的影响.将HMGB1(1000μg/L)刺激后的Treg与CD4+CD25-T细胞共培养,MTT法观察其对Treg抑制CD4+CD25-T细胞反应的作用,并分析HMGB1刺激后的Treg对CD4+CD25-T细胞IL-2生成及细胞功能极化的影响.结果 经抗CD3/CD28辅助活化的CD4+CD25+Treg在HMGB1作用下IL-2生成无显著差异(P＞0.05),但随时间延长及剂量增加,IL-10生成明显减少(P＜0.05).经HMGB1刺激的Treg对CD4+CD25-T细胞增殖的抑制反应减弱,同时诱导CD4+CD25-T细胞IL-2产生及细胞功能极化的能力均下降(P＜0.05).结论 HMGB1可通过诱导Treg抑制功能的下调,从而影响CD4+CD25-T细胞功能,进而调节炎症反应过程.     

通脉口服液对肾小球系膜细胞增殖及白细胞介素β1、白细胞介素10表达的影响

目的：探讨中药复方“通脉口服液”对大鼠肾小球系膜细胞（MsC）增殖及其产生白细胞介素融（IL-β1）和白细胞介素10（IL-10）的影响。方法：应用细胞培养技术进行肾小球系膜细胞的传代培养，采用血清药理学方法，制备通脉口服液含药血清，采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法测定通脉口服液含药血清对过度增殖状态下肾小球系膜细胞增殖的影响，酶联免疫吸附法（ELISA）及逆转录聚合酶链反应（RT—PEn）法测定系膜细胞IL—β1 mRNA和IL-10mRNA表达及其蛋白水平。结果：通脉口服液含药血清在5％～20％浓度范围明显抑制脂多糖（LPS）刺激的系膜细胞增殖；在观察的2个时间点（6h、24h）上，LPS均可刺激系膜细胞IL-β1 mRNA的表达及提高IL-β1 分泌水平，在6h时间点上LPS可刺激系膜细胞IL-10mRNA的表达及提高IL-10分泌水平；而通脉口服液在10％浓度上能够明显抑制LPS诱导的系膜细胞IL-β1 分泌及其mRNA的表达，在6h时间点上促进LPS诱导的系膜细胞IL-10分泌及其mRNA的表达。结论：中药复方“通脉口服液”可抑制肾小球系膜细胞的增殖及LPS诱导的系膜细胞IL-β1 的产生，促进LPS诱导的系膜细胞IL-10的产生；肾小球系膜细胞是通脉口服液防治慢性肾炎，延缓肾小球硬化的重要靶细胞之-。     

白介素-6对前列腺癌细胞生长的作用

目的：观察IL-6对前列腺癌细胞生长的影响，对雄激素依赖型和雄激素非依赖型前列腺癌细胞作用的差别。方法：分别测定雄激素依赖的LNCaP细胞和雄激素非依赖的PC-3细胞产生IL-6的能力及外源性IL-6和抗IL-6抗体对此两种细胞生长的影响。结果：LNCaP细胞几乎不产生IL-6，1ml(10^6个)PC-3细胞平均产生IL-6190pg/48h；外源性IL-6对LNCaP细胞生长有明显抑制作用，但对PC-3细胞的生长无明显作用；抗IL-6抗体能明显抑制PC-3细胞的生长，对LNCaP细胞生长无影响。结论：PC-3细胞以自分泌的形式分泌大量IL-6，抗IL-6抗体的封闭作用可抑制PC-3细胞的生长，外源性IL-6能抑制LNCaP细胞的生长。     

白细胞介素13抑制肾小球系膜细胞增殖及白细胞介素1β的分泌

目的：探讨白细胞介素13（IL-13）对体外培养的大鼠系膜细胞的增殖及其产生白细胞介素1β（IL-1β）的影响。方法：用四甲基偶氮唑（MTT）法测定系膜细胞增殖,用酶联免疫吸附（ELISA）法测定培养系膜细胞的上清液IL-1β蛋白水平。结果：IL-13在1.0、10、100ng/ml浓度范围呈剂量依赖性地抑制系膜细胞的增殖;含5?S的RPMI1640培养状态下的系膜细胞几乎检测不出IL-1β分泌,加入LPS可诱导系膜细胞分泌IL-1β,IL-13在抑制系膜细胞的增殖的相应浓度范围可显地抑制诱导的系膜细胞IL-1β。结论：IL-13对体外培养的系膜细胞增殖具有抑制作用 ,IL-13可能对肾小球系膜细胞炎症具有拮抗作用。     

白细胞介素-36在肾脏疾病中的作用

白细胞介素（interleukin,IL）-36是IL-1家族的重要成员,它是炎症的关键调节器,其促炎激动剂包括IL-36α、IL-36β以及IL-36γ,拮抗剂有IL-36Ra和IL-38,IL-36亚家族成员的共同受体是IL-36受体（IL-36 receptor,IL-36R）。IL-36激动剂和拮抗剂的失衡会导致皮肤疾病、肠道疾病、肺部疾病和肿瘤的发生。近年来有研究发现,IL-36与肾脏疾病的发生发展也密切相关。本文重点综述了IL-36的结构和生物学功能、调控机制及其在肾脏疾病中的作用。     

抑制炎症的细胞因子与肾小球肾炎的关系

在肾小球肾炎发病机理研究中,细胞因子网络调节作用在肾小球肾炎发生发展及肾小球硬化中发挥重要作用。致炎性与抗炎性细胞因子相互作用维持机体免疫系统的平衡,IL－1及TNF是由炎症细胞产生的主要前炎症细胞因子,主要由Th2泌的抗炎性细胞因子如IL－4,IL－10,IL－13也能被用于抑制IL－1及NF合成和增加其拮抗剂产生,抗炎性细胞因子,主要是IL－4,IL－10,IL－13,IL－6与肾脏炎症疾病关系研究亦有一定进展。     

内毒素耐受对人正常前列腺上皮细胞分泌ＩＬ－６和ＩＬ－８的影响

目的 研究发现前列腺组织炎症在前列腺增生的发生与进展中有着重要作用。方法 内毒素耐受（endotoxin tolerance，ET）现象存在于人组织上皮细胞中如肠上皮细胞和人牙龈上皮细胞等，并可能影响组织的炎症和免疫反应。产生内毒素/脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS）的G-菌如大肠埃希菌是影响前列腺炎的主要病原体。因此，本研究拟通过分析LPS反复刺激人正常前列腺上皮细胞RWPE-1中细胞炎性因子IL-6和IL-8表达，探讨是否内毒素耐受现象存在于人前列腺上皮细胞中。结果 采用1 μg/mL大肠杆菌（Escherichia coli）LPS刺激人正常前列腺上皮细胞RWPE-1 24 h，洗涤细胞后，给予1 μg/mL 浓度LPS再次刺激24 h，构建内毒素耐受模型。采用液相芯片技术检测细胞培养液中细胞因子IL-6和IL-8分泌水平的变化。结果 LPS刺激后6 h和24 h，IL-6和IL-8分泌水平均呈现上升趋势（P<0.05），较空白对照组有明显增高（P<0.05），LPS反复刺激后，诱导细胞耐受后，IL-6和IL-8分泌水平较第1次刺激后明显降低（P<0.05）。结论 内毒素耐受现象存在于RWPE-1中，能抑制RWPE-1细胞因子IL-6和IL-8的表达，进而可能影响前列腺组织的炎症和免疫反应。     

白细胞介素-6抑制白细胞介素-1β诱导的兔纤维环细胞凋亡的研究

目的探讨白细胞介素(IL)-6对IL-1β在体外诱导兔纤维环细胞凋亡作用的影响。方法以10μg/L浓度的IL-1β诱导体外培养的原代兔纤维环细胞发生凋亡,然后分别加入10μg/ L和100μg/L的IL-6以影响纤维环细胞凋亡进程。对细胞行Annexin-V-PI染色和Caspase-9功能染色,采用流式细胞仪检测结果。结果IL-1β诱导下,凋亡纤维环细胞比例由(2.67±1.08)%上升至(20.37±1.57)%,而在两种浓度IL-6的干预下,细胞凋亡比例分别为(18.17±4.68)%和(9.42±1.27)%,与IL-1β诱导退变的纤维环细胞差异有统计学意义(P＜0.05)。而Caspase-9功能阳性细胞也由(19.40±0.98)%分别降至(15.13±1.45)%和(10.17±2.50)%(P＜0.05)。结论IL-6对IL-1β诱导的体外兔纤维环细胞凋亡有明显的抑制作用,这种抑制作用可能是通过抑制纤维环细胞内Caspase-9的激活实现的。对IL-6抑制作用的进一步研究,将有助于明确椎间盘细胞凋亡的调控途径,为椎间盘退变的治疗寻找新切入点。     

乳腺癌中白细胞介素-10和血管内皮生长因子的表达及其对树突状细胞的抑制作用

目的 探讨乳腺癌中自细胞介素（IL）-10和血管内皮生长因子（VEGF）的表达及其对树突状细胞（DC）的影响。方法 应用免疫组织化学方法检测71例乳腺浸润性导管癌中IL-10和VEGF的表达及S100＋DC和CD1a＋DC的分布情况，分析它们之间的关系。结果 IL-10和VEGF的阳性率分别为69．0％（49／71）和70．4％（50／71）。S100＋13（2和CD1a＋DC的阳性率分别为76.1％（54／71）和53．5％（38／71）。IL-10表达仅与CD1a＋DC的密度呈负相关（rs=-0．244，P＜0．05），而VEGF表达与S100＋DC和CD1a＋DC的密度均呈负相关（分别rs=-0．380，P＜0．01和rs=-0．476，P＜0．01）。结论 乳腺癌细胞分泌的IL-10和VEGF可能通过抑制DC的产生和分化成熟而抑制机体对肿瘤细胞的免疫杀伤作用。     

白细胞介素10对重症急性胰腺炎大鼠肾功能的保护作用

目的探讨白细胞介素10(IL-10)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肾功能障碍的保护作用。方法将SD大鼠54只随机分为3组,假手术组(SO)、SAP组、SAP加IL-10治疗组(SAP IL- 10),以5%牛磺脱氧胆酸钠逆行胰胆管注射建立SAP模型,观察各组术后12、24 h血清淀粉酶,肿瘤坏死因子α(TNF-a)、1L-6、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)水平,以及腹水量、胰腺和肾脏的病理改变,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分析肾脏细胞间黏附分子1(ICAM一1)mRNA表达水平。结果SAP组制模后血清TNF-α、IL-6水平明显上升,肾脏ICAM-1 mRNA表达上调(P<0.01),BUN、Cr在12、24 h持续升高。与SAP组比较,SAP IL-10组血清TNF-α、IL-6、BUN、Cr水平明显下降,ICAM-1 mRNA表达下调(P<0.01),肾脏病理改变得到改善。结论IL-10可抑制TNF-α、IL-6血清水平,下调肾脏ICAM-1基因表达,改善SAP肾功能障碍。     

肝炎后肝硬变中细胞因子的作用

细胞因子是一大群由多种细胞自身合成分泌的，进入细胞外液后发挥细胞-细胞之间信息沟通及功能调节的可溶性蛋白分子，具有多种生物学活性，主要由单核细胞或巨噬细胞产生。细胞因子如TNF-α、IL-6、IL-8等在肝炎后肝硬变发生、发展中的作用备受关注，但对它们在肝炎后肝硬变患者中变化水平同时观察的研究报道较少。本研究对2003年1月至2004年12月期间我院收治的30例肝炎后肝硬变患者血清中TNF-α、IL-6和IL-8的水平进行了检测，并对其与肝功能的关系进行了初步探讨，现将结果报道如下。     

IL-4与IL-10联合诱导异种骨移植免疫耐受的体外研究

目的　探讨 IL - 4和 IL - 10在诱导异种骨移植免疫耐受中的作用。方法　反应细胞为 BAL B/c小鼠脾淋巴细胞 ,刺激细胞为新西兰白兔血淋巴细胞 ,刺激抗原为兔骨上清液。采用经典的混合淋巴细胞培养法及骨上清液与淋巴细胞混合培养法作为异种骨移植的体外实验模型。在各培养液中分别加入 IL - 4、IL - 10及两者联合应用 ,通过测定其 3H- Td R掺入率 ,观察不同细胞因子对刺激淋巴细胞增殖的影响。结果　无论在细胞刺激组还是骨上清液刺激组 ,IL- 4对淋巴细胞增殖均有显著抑制作用 (P<0 .0 0 1和 P<0 .0 5 ) ,IL- 10未表现出抑制作用 (P>0 .0 5 )。在两组 IL- 4和 IL - 10联合应用均产生比 IL - 4单独应用更为明显的细胞增殖抑制作用 (P<0 .0 0 1和 P<0 .0 5 )。结论　 IL - 4对由细胞或骨上清液刺激产生的淋巴细胞增殖均有很好的抑制作用 ,IL- 10没有表现出抑制作用 ;IL- 4与 IL- 10联合应用有协同抑制作用。     

食管癌手术患者围术期IL-6、IL-8、IL-10的变化与术后并发症的关系

目的 研究开胸食管癌手术患者围术期的细胞因子变化与术后并发症的关系。方法择期食管癌手术患者25例,按有无并发症发生分为A、B两组。B组入选患者包括肺部感染2例、胸腔积液3例、吻合口出血1例、心律失常2例。监测麻醉前（T0）、手术开始切皮时（T1）、进胸后2h（T2）、鼓肺后 60min（T3）、术后 1h（T4）、术后 6h（T5）、术后24h（T6）血清IL-6、IL-8、IL-10的浓度。观察围术期血流动力学变化及全身性炎症反应综合征（SIRS）的持续时间（SIRS为ACCP/SCCM标准）。结果 两组患者围术期的血液动力学变化相似,SIRS持续时间A组少于B组。进胸后各时点IL-6、IL-8、IL-10均较术前显著增加（P<0.01）,T4达到高峰后回落;IL-6组间T2-T5比较无显著差异,T6B组较A组明显上升（P<0.01）,B组IL-8T3至 T6均较A组显著上升（P<0.05或0.01）。IL-10的变化趋势与IL-6、IL-8一致,在T4达到峰值后回落,B组术中各时点IL-10水平与A组比较无显著性差异,T6时低于A组。A组IL-6/IL-10、IL-8/IL-10比值在T5、T6时显著低于B组（P<0.01）。结论 开胸食管癌手术患者术后并发症的发生,不仅是由于炎症介质的大量产生,更在于抗炎性介质的不足。围术期IL-6/IL-10、IL-8/IL-10比值对于判断预后具有一定的价值。     

Th1/Th2类细胞因子在胰腺癌组织中的表达模式及临床意义

自Th1和Th2的概念提出以来，人们对其在机体免疫应签中的作用进行了大量的体内外实验研究，但未见有胰腺癌组织中T1/Th2偏移的研究报道。我们以IFN-γ和IL-2代表Th1类细胞因子，IL-4和IL-10代表Th2类细胞因子，以免疫组织化学方法检测胰腺癌组织中Th1/Th2类细胞因子的表达，观察Th1/Th2类细胞因子在胰腺癌中的表达特征，探讨胰腺癌的发病的机制。     

不同镇痛方法对子宫切除术后病人血清细胞因子和HSP70水平的影响

目的 评价不同镇痛方法对子宫切除术后患者血清细胞因子IL-6、IL-10和热休克蛋白70（HSP70）水平的影响。方法 择期行子宫切除术患者48例，随机分为4组（n=12）；术后分别采用罗哌卡因混合芬太尼硬膜外镇痛（Ⅰ组）；芬太尼静脉镇痛（Ⅱ组）；罗哌卡因混合曲马多硬膜外镇痛（Ⅲ组）；曲马多静脉镇痛（Ⅳ组）。所有患者均行硬膜外麻醉，手术关腹时开始病人自控镇痛（PCA），均以LCP模式给药：负荷剂量5ml＋背景剂量lml／h＋PCA剂量1ml，锁定时间10min。检测麻醉前、术后2、24、48和72h时患者血清IL-6、IL-10和HSP70水平。结果四组术后VAS评分均在4分以下，术后患者血清IL-6、IL-10和HSP70水平均升高。术后24h，Ⅰ、Ⅲ组血清IL-6和HSP70水平低于Ⅱ、Ⅳ组（P〈0，01）；术后2、24h，Ⅳ组血清IL-10水平高于其它各组，且Ⅳ组IL-6／IL-10小于Ⅱ组（P〈0．05）。结论 硬膜外镇痛较静脉镇痛更能有效地降低子宫切除术后患者血清IL-6和HSP70水平升高程度。硬膜外罗哌卡因复合曲马多更适合用于术后镇痛。