小胶质细胞的免疫功能

小胶质细胞是常驻中枢神经系统单核吞噬细胞家族的成员之一。他们与巨噬细胞有许多相同的功能和表形特征 ,参与脑内的固有免疫反应 ,而且能早于外周白细胞的渗透成为CNS抵御病原体入侵的第一防线。小胶质细胞也能作为抗原提呈细胞 ,刺激T细胞活化、增殖。小胶质细胞可以产生多种细胞因子和趋化性细胞因子启动或促进炎症反应在CNS内的进程 ,也能够表达许多细胞因子受体和趋化性细胞因子受体 ,这些受体的平衡在诱导和调节小胶质细胞的免疫功能上起到决定性作用。而且 ,小胶质细胞也能受到神经元的调控 ,以阻止过度的免疫反应对神经元的损害。     

小胶质细胞的发育和功能

小胶质细胞（microglia）广泛分布在中枢神经系统（central nervous system,CNS）,从数量上小胶质细胞占中枢神经系统中整个胶质细胞数目的5%～20%。关于小胶质细胞的起源,目前仍有争议。少数人认为,小胶质细胞起源于外胚层。也有人认为,小胶质细胞来源于骨髓造血干细胞。Hortega的经典见解认为,此种细胞来源于中胚层,是胚胎发育后期开始形成血管时侵入脑内的。小胶质细胞是CNS固有的免疫成分细胞,正常情况下处于静止状态,缺乏吞噬功能,但具有吞饮功能和一定的迁移能力。小胶质细胞活化是CNS在许多病理条件下,有时甚至是非常微弱刺激作用下的常见反应,表现为小胶质细胞在局部不同程度的增生与聚集,同时常伴有细胞形态、免疫表型与功能等一系列的变化。     

小胶质细胞的发育和功能

小胶质细胞(microglia)广泛分布在中枢神经系统(central nervous system,CNS),从数量上小胶质细胞占中枢神经系统中整个胶质细胞数目的5%～20%。关于小胶质细胞的起源,目前仍有争议。少数人认为,小胶质细胞起源于外胚层。也有人认为,小胶质细胞来源于骨髓造血干细胞。Hortega的经典见解认为,此种细胞来源于中胚层,是胚胎发育后期开始形成血管时侵入脑内的。小胶质细胞是CNS固有的免疫成分细胞,正常情况下处于静止状态,缺乏吞噬功能,但具有吞饮功能和一定的迁移能力。小胶质细胞活化是CNS在许多病理条件下,有时甚至是非常微弱刺激作用下的常见反应,表现为小胶质细胞在局部不同程度的增生与聚集,同时常伴有细胞形态、免疫表型与功能等一系列的变化。     

小胶质细胞引起和促进阿尔茨海默病的研究进展

小胶质细胞是神经系统免疫细胞,具有双重特性,既可以通过免疫反应增强吞噬能力、释放抗炎因子维持脑组织的稳态和保护神经元,又可以增加炎性反应、降低有害蛋白清除能力损伤神经元.受衰老的影响,在基因表达方面,小胶质细胞CD33表达增加而髓系细胞触发受体2(TREM2)表达减少;在活化表型方面,衰老环境下的小胶质细胞更倾向活化为...     

microRNA调节小胶质细胞功能参与病理性疼痛的研究进展

病理性疼痛是一种慢性疼痛病症,由感觉神经系统的病变或功能障碍所造成,其特征是自发性疼痛、痛觉过敏和机械性异常性疼痛,小胶质细胞作为中枢神经系统中固有的免疫细胞,在病理性疼痛的发生发展过程中发挥着重要作用。微小RNA (miRNA)被认为是一类重要的基因表达调控因子。miRNA可以通过调节小胶质细胞多种基因的表达,进而影响痛觉感受。本文就该领域的进展进行综述,这有助于从新的视角理解疼痛发生与维持的分子机制。     

bFGF促进内源性神经干细胞增殖改善APP/PS1小鼠认知功能障碍

目的 探究bFGF对APP/PS1转基因小鼠海马内源性神经干细胞增殖及认知功能的影响.方法 将7月龄APP/PS1小鼠20只,随机分为模型组及bFGF组,每组10只;另取同龄C57BL/6小鼠作为对照组,连续鼻腔滴注给药4周,每天一次.TUNEL检测小鼠海马区神经细胞凋亡情况;免疫荧光染色检测小鼠海马区BrdU/Nes...     

小胶质细胞M2型极化相关的调节分子研究进展

<正>中枢神经系统(central nervous system,CNS)的固有免疫反应是对损伤、炎症以及退行性疾病产生的首要免疫应答。多种CNS疾病,如创伤、脑炎、帕金森病(Parkinson's disease,PD)、阿尔茨海默症(Alzheimer's disease,AD)、多发性硬化(multiple sclerosis,MS)等,其发展转归与CNS的免疫与炎症变化有着密切联系。由于免疫与炎症反应的双刃剑效应,对CNS的免疫炎症的调控一直难以解决,而近年来对CNS定居的非专职免疫细胞-小胶质细胞的极化现象研究为CNS固有免疫反应的调节带来新的解题思路。     

创伤性脑损伤和脂多糖引起小鼠小胶质细胞中Bcl2a1表达增加

目的:探索Bcl2a1在创伤性脑损伤(TBI)中的表达变化。方法:采用刀片划伤小鼠前额叶皮层的方法建立小鼠创伤性脑损伤模型,利用划痕及脂多糖(LPS)刺激建立原代小胶质细胞损伤模型。免疫荧光染色检测小鼠受损部位及受损的原代小胶质细胞不同时间点Bcl2a1蛋白及其与CD11b表达的变化。结果:在正常小鼠,Bcl2a1主要表达于神经元,小胶质细胞及巨噬细胞少量表达Bcl2a1。TBI后小鼠神经系统受损部位Bcl2a1~+/CD11b~+及Bcl2a1~+/i NOS~+小胶质细胞数目显著增加(P 0. 001),GFAP阳性的星形胶质细胞不表达Bcl2a1,而Bcl2a1~+/Neu N~+的神经元数量显著减少(P 0. 01)。在体外培养的小胶质细胞,LPS刺激可增加Bcl2a1~+/CD11b~+小胶质细胞数目(P 0. 01)。结论:机械性脑损伤和LPS介导的化学脑损伤均可引起Bcl2a1在小胶质细胞中的蛋白表达水平显著上调。     

长春西汀抑制小胶质细胞M1/M2型极化改善慢性脑缺血大鼠认知功能及神经元损伤

目的 探讨长春西汀抑制小胶质细胞极化改善慢性脑缺血大鼠认知功能的作用机制。方法 将30只SD大鼠随机分为假手术组（sham）、模型组（model）及长春西汀组（Vin）,每组10只,采用双侧颈总动脉结扎法复制慢性脑缺血大鼠模型,长春西汀组术后腹腔注射长春西汀10 mg/kg,共计28d。Morris水迷宫检测认知功能;HE染色观察大鼠海马区病变;免疫荧光染色检测微管相关蛋白2(MAP-2);ELISA测定各组大鼠脑组织匀浆中白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-10(IL-10)及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量;免疫荧光染色检测M1型小胶质细胞极化标志物Iba-1/iNOS和M2型小胶质细胞极化标志物Iba-1/Arg1;Western blot检测Notch/Jagged通路相关蛋白Notch-1、NICD、Rbp-Jk及Jagged-1的表达。结果 与模型组相比,长春西汀显著改善大鼠认知功能,改善大鼠海马区病理损伤,显著增加海马区神经元数量,显著降低大鼠脑内IL-1β与TNF-α水平,显著增加大鼠脑内IL-10水平;显著降低Iba-1/iNOS细胞数量,显著增加Iba-1...     

法舒地尔通过促进APP/PS1双转基因小鼠神经再生改善认知功能

目的:观察Rho激酶抑制剂法舒地尔(fasudil)在治疗阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)模型——淀粉样前体蛋白/早老素1双转基因(amyloid precursor protein/presenilin 1 double transgenic,APP/PS1 Tg)小鼠中促进神经再生并改善认知功能的作用。方法:将8月龄雄性APP/PS1 Tg小鼠作为AD模型,随机分为fasudil组(腹腔注射fasudil 25 mg·kg~(-1)·d~(-1))和生理盐水(normal saline,NS)组(腹腔注射等体积生理盐水),取同月龄同性别野生型(wild type,WT)小鼠为WT组,连续治疗2个月;应用Morris水迷宫(Morris water maze,MWM)实验和SMART 3.0行为学记录系统检测、记录并分析各组小鼠空间认知功能;免疫荧光组织化学染色法检测小鼠脑内海马齿状回和CA3区及大脑皮层p-Tau、ChA T、BrdU和nestin的蛋白表达水平和分布;Western blot法检测小鼠脑组织p-APP(Thr668)和p-Tau的蛋白水平。结果:在MWM实验中,与WT组小鼠相比,NS组10月龄APP/PS1 Tg小鼠从入水点到达平台的时间增加,在平台所在象限活动时间占总活动时间的比例及在平台所在象限游泳距离占总路径的比例减少;而fasudil治疗明显拮抗上述行为学指标,改善APP/PS1 Tg小鼠认知功能。此外,与NS组小鼠相比,fasudil明显减少小鼠p-Tau蛋白水平,增加p-APP蛋白水平,使海马区胆碱能神经元数量增多,促进神经元的轴突再生,动员脑内海马齿状回颗粒下区和脑室下区的内源性神经干细胞增殖。结论:Fasudil通过促进APP/PS1 Tg小鼠中枢神经系统p-Tau蛋白水平下调,增加可溶性APP水平,促进胆碱能神经元再生,动员内源性神经干细胞增殖,从而改善APP/PS1双转基因小鼠空间认知功能。     

Tg2576小鼠海马发育过程中小胶质细胞和血管的变化

目的 探讨Tg2576转基因小鼠发育过程中海马CA1区小胶质细胞增殖和血管变化的规律。方法 取不同发育时间(P0、P7、P30、P180、P360) Tg2576转基因模型鼠与同时间点野生鼠,通过应用免疫组织化学、TUNEL、墨汁灌注、RT-PCR和透射电镜等方法研究海马发育过程中小胶质细胞和血管的变化。结果 随着小鼠的生长发育,P180后转基因组海马CA1区小胶质细胞密度和血管体密度高于对照组小鼠,RT-PCR结果显示,P360时转基因组海马CA1区小胶质细胞更多处于激活状态。 结论 小胶质细胞与血管改变的共同作用加重了阿尔茨海默病。     

Circ0005512促进雌性大鼠脊髓损伤后小胶质细胞/巨噬细胞焦亡

背景：神经炎症是导致继发性脊髓损伤的重要因素,小胶质细胞/巨噬细胞焦亡是介导脊髓损伤后神经炎症的重要部分,研究显示脊髓损伤后小胶质细胞/巨噬细胞发生焦亡,但circ RNA对脊髓损伤后小胶质细胞/巨噬细胞焦亡的调控机制尚不清楚。目的：探讨circ0005512在脊髓损伤后调节小胶质细胞/巨噬细胞焦亡中的作用和机制。方法：将雌性Wistar大鼠随机分为假手术组和脊髓损伤组,BBB评分评估运动功能,苏木精-伊红染色检测脊髓空洞面积,二代测序筛选脊髓组织中差异表达的circ RNA,Real-time PCR验证circ0005512的表达。免疫荧光、Western blot、ELISA、Real-time PCR检测脊髓损伤大鼠的细胞焦亡情况以及脂多糖诱导的小胶质细胞系HAPI细胞的焦亡情况,基因敲降验证circ RNA0005512对小胶质细胞焦亡的调控作用。结果与结论：(1)脊髓损伤7 d后,脊髓损伤部位出现明显空洞,脊髓损伤后即刻大鼠运动功能完全缺失,随着时间的推移,脊髓损伤组大鼠运动功能逐渐部分恢复,BBB评分与假手术组比较有显著差异;(2)二代测序筛选到circ0005512明显...     

淫羊藿总黄酮通过抑制小胶质细胞/巨噬细胞介导的氧化应激反应促进髓鞘再生

目的:探讨淫羊藿总黄酮(TFE)通过抑制小胶质细胞氧化应激(OS)促进髓鞘再生的作用及机制.方法:BV2、原代小胶质细胞和骨髓来源的巨噬细胞(BMDMs)以1×106个/ml接种于6孔板,贴壁后加入LPS、TFE 37℃孵育24 h:C57BL/6小鼠用含0.2％ CPZ饲料喂养6周诱导脱髓鞘模型,4周末TFE治疗组小...     

基于齿状回神经元树突棘形态探讨ROCK2敲减改善APP/PS1小鼠认知功能的作用机制

目的：观察海马区敲减Rho相关激酶2(ROCK2)对阿尔茨海默病模型APPswe/PS1dE9(APP/PS1转基因小鼠的干预效果,并探索其对海马齿状回区神经元树突棘形态的影响及潜在机制。方法：选用雄性8月龄的C57BL/6及APP/PS1小鼠,随机分为4组,分别为野生型（WT）组（8只）、APP/PS1小鼠生理盐水（NS）组（8只）、APP/PS1小鼠敲减对照（shRNA）组（12只）和APP/PS1小鼠ROCK2敲减（shROCK2）组（12只）。通过腺相关病毒共转染shRNA的方法,下调APP/PS1转基因小鼠双侧海马区神经元ROCK2蛋白表达,实现海马区局部神经元ROCK2敲减。利用水迷宫和Y迷宫实验检测小鼠的认知功能;免疫荧光染色和Western blot检测AD相关病理改变;激光共聚焦和Imairs软件观察并分析海马齿状回区神经元的树突棘形态变化;Western blot检测海马组织中突触相关蛋白的表达水平。结果：水迷宫实验中,与WT组的小鼠相比,NS和shRNA组小鼠到达平台的时间、到达平台的距离及第一次进入平台所在象限的时间均显著增加（P<0.05或P<0....     

Suvorexant通过调控PER1蛋白表达改善APP/PS1小鼠昼夜节律紊乱行为

目的:探讨orexin双受体拮抗剂suvorexant对9月龄APPswe/PS1dE9(APP/PS1)双转基因小鼠行为昼夜节律紊乱的影响及机制。方法:8月龄APP/PS1小鼠和具有同样遗传背景的野生型(WT)小鼠随机分为4组,在ZT0口服灌胃suvorexant或等体积溶剂28 d,采用跑轮行为学观察小鼠昼夜节律变化,免疫组织化学和Western Blot分别检测SCN脑区Aβ斑块和PER1蛋白的表达。结果:(1)在光暗交替环境中,给予suvorexant后APP/PS1小鼠相对振幅(P 0. 01)和鲁棒值(P 0. 01)明显升高,昼夜变异性明显降低(P 0. 01)。(2)在持续黑暗环境中给予suvorexant后,APP/PS1小鼠的自由运转周期明显缩短(P 0. 05),活动持续时间缩短(P 0. 01),相对振幅增大(P 0. 01),昼夜变异性减小(P 0. 01)。(3)免疫组化结果显示各组动物的SCN脑区未检测到Aβ阳性斑块。(4) APP/PS1小鼠给予Suvorexant后部分恢复了PER1蛋白表达的昼夜节律性。结论:suvorexant通过恢复SCN脑区PER1的昼夜节律性表达改善APPswe/PS1dE9小鼠的昼夜节律紊乱,增强其昼夜节律稳定性。     

骨髓基质细胞移植改善APP/PS1转基因小鼠的认知功能

目的探究骨髓基质细胞(Bone marrow stromal cells,BMSCs)移植治疗对APP/PS转基因的阿尔兹海默病(Alzheimer's disease,AD)模型小鼠认知功能障碍的改善作用。方法分离培养C57BL/6小鼠的BMSCs,诱导其分化为神经细胞,通过相差显微镜技术和免疫细胞化学荧光染色技术鉴定其表型与分化。通过显微注射技术,将绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,eGFP)转基因小鼠(生后3个月)来源的BMSCs注入APP/PS转基因小鼠(生后12个月)侧脑室内后,以荧光显微镜技术检测移植细胞的存活和整合情况,HE染色检测AD模型小鼠海马区萎缩的恢复程度并以Morris水迷宫试验与旷场试验检测移植治疗后小鼠认知功能障碍的改善情况。结果分离自C57BL/6小鼠的BMSCs在增殖培养基中贴壁生长,形态呈纺锤形,免疫表型CD271+/CD45-++,经神经分化诱导培养可形成β-tubulin-III神经元和GFAP星形胶质细胞。GFP转基因小鼠来源的BMSCs移植入APP/PS1转基因小鼠脑内可存活并与宿主海马区神经组织有效整合。移植治疗3周后宿主小鼠海马区面积显著增加(<0.001),水迷宫实验逃生潜伏期明显缩短(<0.01),旷场试验评分显著提高(<0.05)。结论骨髓基质细胞移植治疗可有效改善APP/PS1转基因的AD模型小鼠的认知功能障碍。     

有氧运动通过调节海马小胶质细胞表型极化缓解青春期间歇性酒精暴露所致的成年期大鼠认知障碍

目的：探究有氧运动对青春期间歇性酒精暴露（AIE）大鼠成年期海马小胶质细胞活化水平和表型极化的影响。方法：出生后28 d(P28)的雄性Wistar大鼠随机分为生理盐水安静（SS）组、生理盐水运动（SE）组、酒精安静（AS）组和酒精运动（AE）组。从P28到P55,AS和AE组大鼠进行酒精灌胃（200 g/L乙醇,5.0 g/kg,2 d灌胃,2 d休息,共灌胃4周）,SS和SE组大鼠在同一时点接受等体积的生理盐水灌胃。从P28到P83,SE和AE组大鼠进行8周跑台运动干预。八臂迷宫实验检测大鼠学习记忆能力;免疫荧光染色检测海马组织小胶质细胞数量、形态和表型;ELISA检测海马组织促炎因子和抗炎因子的表达。结果：运动减少AIE大鼠八臂迷宫实验中的工作记忆错误和完成时间（P<0.05或P<0.01）。运动减少AIE大鼠海马组织小胶质细胞数量（P<0.01）,降低小胶质细胞形态指数（P<0.01）。运动减少AIE大鼠海马组织M1型小胶质细胞数量（P<0.01）,增加M2型小胶质细胞数量（P<0.01）。运动减少AIE大鼠海马组织促炎因子白细胞介素1β(I...     

雷公藤甲素调节小胶质细胞极化反应保护损伤的神经元

背景：将小胶质细胞从M1表型转变为M2表型被认为是治疗神经退行性疾病的一种有希望的策略。多项研究表明,雷公藤甲素可以抑制神经炎症,改善多种神经退行性疾病,但是其机制尚不明确。目的：探讨雷公藤甲素对脂多糖激活小胶质细胞诱导SH-SY5Y细胞损伤的保护作用及其机制。方法：CCK8法检测BV2细胞活性筛选最佳的雷公藤甲素使用浓度;然后将BV2细胞分为3组：对照组,模型组(1μg/mL脂多糖),雷公藤甲素组(1 nmol/L雷公藤甲素+1μg/mL脂多糖),收集上清液,采用Griess法检测一氧化氮水平,ELISA法检测促炎因子白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β和抗炎因子白细胞介素10水平;免疫荧光染色和Western blot法检测BV2细胞诱导型一氧化氮合酶和精氨酸酶1的表达。收集3组小胶质细胞条件培养液并分别作用于SH-SY5Y细胞：分为对照条件培养液组、模型条件培养液组和雷公藤甲素条件培养液组,TUNEL染色法检测SH-SY5Y细胞凋亡率,免疫荧光染色和Western blot法检测caspase3、Bax和Bcl-2的表达。结果与结论：(1)与对照组比较,模型组BV2细胞上...     

长托宁抑制NLRP3炎症小体调节脑缺血再灌注大鼠小胶质细胞极化改善脑损伤

目的 探究长托宁对大鼠脑缺血再灌注致脑损伤的保护作用及可能的机制。方法 30只SD大鼠随机分成假手术组、模型组及长托宁组,每组10只。水迷宫实验检测大鼠认知能力变化;HE染色观察脑组织形态学变化;TUNEL方法检测脑组织神经元细胞凋亡;免疫荧光检测脑组织小胶质细胞极化;ELISA方法检测脑组织炎症因子水平;Western blot检测NLRP3炎症小体相关蛋白表达。结果 长托宁治疗增加脑缺血再灌注损伤大鼠认知能力,改善大鼠脑组织形态,降低脑组织神经元细胞凋亡水平、M2型小胶质细胞比例、IL-1β和IL-18水平及NLRP3、caspase-1和ASC蛋白表达水平,增加脑组织M1型小胶质细胞比例。结论 长托宁减轻大鼠脑缺血再灌注脑损伤,其作用机制可能与抑制NLRP3炎症小体有关。     

雷公藤氯内酯醇对阿尔茨海默病大鼠小胶质细胞活化的影响

目的:探讨雷公藤氯内酯醇对阿尔茨海默病大鼠学习记忆障碍及小胶质细胞活化的影响.方法:通过大鼠海马注射β类淀粉蛋白(Aβ)1-40建立阿尔茨海默病大鼠模型,Morris水迷宫测定大鼠学习记忆能力,免疫组织化学方法检测小胶质细胞.结果:Aβ组大鼠较假手术组逃避潜伏期延长,而跨越原平台位置次数明显减少;T4组大鼠较Aβ组第2天～5天平均逃避潜伏期明显缩短,跨越原平台位置次数明显增多.Aβ组大鼠海马小胶质细胞较假手术组明显增多;T4组大鼠海马小胶质细胞较Aβ组明显减少.结论:雷公藤氯内酯醇可以抑制Aβ所致小胶质细胞活化,改善阿尔茨海默病大鼠的学习记忆能力.