慢性支气管炎与肺气肿大鼠肺血管内皮细胞损伤的实验研究

目的研究慢性支气管炎（chronicbronchitis,CB）与肺气肿大鼠肺腺泡内肌型动脉（muscular artery,MA）内皮细胞（en-dothelialcell,ECs）损伤特点及红霉素（erythromycin,EM）的干预作用。方法 18只Wistar大鼠按随机数字表法分成3组：每组6只,正常对照组（A组）,CB与肺气肿组（B组）,EM治疗组（C组）。用气管内注入脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）及烟熏方法制作CB与肺气肿模型。8周后在电镜下观察肺腺泡内MA的ECs结构变化,光镜下观察肺腺泡内MA重塑改变。结果 （1）肺腺泡内MA的EC结构变化：与A组比较,B组肺腺泡内MA的EC变性肿大甚至坏死,胞浆内大量空泡,线粒体肿胀、数目减少。核突起、核异质增多。C组以上改变明显改善。（2）肺腺泡内MA图像分析：以内膜面积/血管总面积（%）描述,A组为21±4,B组为37±3,C组为30±1,三组间比较差异有统计学意义（P均〈0.01）。结论 （1）CB与肺气肿大鼠存在肺血管EC损伤。（2）肺血管EC损伤是CB与肺气肿大鼠肺血管重塑的重要病理基础。（3）EM对CB与肺气肿大鼠肺血管EC损伤及肺血管重塑有一定保护作用。     

苯并芘氧化损伤鼠肺泡细胞及维生素E对其保护作用的机制研究

目的研究苯并芘（Benzo-a-pyrene,BaP）氧化损伤肺泡细胞的作用机制及探讨维生素E对其是否有保护作用。方法成熟雄性ICR小鼠100只随机分为A、B、C、D、E组,每组20只,A、B、C、D组每天BaP灌胃,B、C、D组同时用不同浓度维生素E灌胃,E组橄榄油灌胃,连续15 d后处死小鼠,取肺泡组织测氧化和抗氧化指标。结果 A、C、D组肺泡组织谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）、超氧化物歧化酶（SOD）活性明显高于A组（P〈0.05）,但低于E组（P〈0.05）;B、C、D组中肺泡组织活性氧（ROS）活力高于A、E组（P〈0.05）;B、C、D组中肺泡组织丙二醛（MDA）含量明显低于A组（P〈0.05）,B、C组高于E组（P〈0.05）。结论维生素E能抑制BaP所导致的肺泡组织GSH-PX、SOD活性降低与BaP所导致的肺泡组织MDA含量升高,维生素E能促进BaP所致的肺泡组织ROS活性升高。     

沙美特罗替卡松粉吸入剂对大鼠慢性阻塞性肺疾病气道重塑的影响

目的探讨不同剂量沙美特罗替卡松粉吸入剂（ICS/LABA）对大鼠慢性阻塞性肺疾病（COPD）气道重塑的干预作用。方法将40只Wistar大鼠随机分为对照组（A组）、模型组（B组）、低剂量ICS/LABA组（C组）、高剂量ICS/LABA组（D组）。采用烟熏加气管内注射脂多糖（LPS）法复制COPD模型,C、D组吸入中、高剂量ICS/LABA。观察肺功能和病理变化,肺泡灌洗液（BALF）中细胞计数和百分比,图像分析测量小气道平滑肌和管壁厚度,酶联免疫吸附（ELISA）法测定BALF中转化生长因子β1（TGF β1）的表达,免疫组化法测定肺组织中基质金属蛋白酶9（MMP 9）、分泌性白细胞蛋白酶抑制剂（SLPI）的表达,实时荧光定量聚合酶链式反应 （RT PCR）检测肺组织中MMP 9mRNA的表达。结果B组肺间质大量炎性细胞浸润,肺泡壁破坏,肺大疱形成,气管管壁和平滑肌增厚,C、D组有所减轻;B组TGF β1、MMP 9水平与A组大鼠相比明显升高,SLPI则显著降低（P＜0.05）;干预后C、D组TGF β1、MMP 9水平与B组相比明显降低,而SLPI 则明显升高（P＜0.05） ;D组TGF β1、MMP 9阳性系数和mRNA相对含量［（82.06±4.43）（2.41±0.22）（6.156±8.86）］显著低于C组［（118.59±5.28）（3.09±0.28）（9.616±10.56）］（P＜0.05）,而SLPI（2.95±0.28）明显高于C组（2.11±0.26）（P＜0.05）。结论ICS/LABA对COPD大鼠肺泡破坏及气道重塑有抑制作用,且高剂量优于低剂量,其机制可能与降低TGF β1和MMP 9的表达及提高SLPI的水平有关。     

罗格列酮对哮喘小鼠气道重塑模型气道平滑肌肌动蛋白-α表达的影响

目的探讨哮喘小鼠气道平滑肌肌动蛋白-α（SMA-α）表达与气道重塑的关系,评价罗格列酮治疗对两者的影响。方法将BALB/C小鼠32只随机分为正常对照组（A组,n=8）、哮喘模型组（B组,n=8）、哮喘模型地塞米松雾化吸入干预组（C组,n=8）、哮喘模型罗格列酮雾化吸入干预组（D组,n=8）。采用SABC法免疫组化技术和计算机图像分析系统对小鼠气道SMA-α表达和气道重塑进行研究。结果 （1）与A组比较,B组小鼠气道平滑肌（ASM）厚度和上皮厚度均显著增加（P〈0.05）,而气道直径显著减小（P〈0.05）;C、D组ASM厚度和上皮厚度均增加（P〈0.05）,气道直径减小（P〈0.05）。（2）与B组比较,C、D组小鼠ASM厚度和上皮厚度均显著下降（P〈0.05）,而气道直径显著增大（P〈0.05）;C、D组上述指标比较差异无统计学意义（P〉0.05）。（3）与A组比较,B、C、D组小鼠气道SMA-α表达水平显著升高（P〈0.05）;与B组比较,C、D组小鼠气道SMA-α表达水平显著下降（P〈0.05）;C、D组SMA-α表达水平差异无统计学意义（P〉0.05）。结论气道SMA-α表达水平的上调可能是导致气道重塑反应发生的机制之一,罗格列酮治疗可延缓该反应的发生。     

双通道给予脂多糖致慢性支气管炎模型气道炎症研究

目的 探讨慢性支气管炎模型的造模方法.方法 24只大鼠随机分为正常组(A组)、单通道脂多糖组(B组)、双通道脂多糖组(C组).A、B组分别给予气管内一次性注入生理盐水和脂多糖200μg,C组在B组的基础上,第2天开始,连续4 d经鼻滴人脂多糖50μg·200μ-1弘·d-1.3周后大鼠全部处死,观察大鼠肺支气管HE染色、AB-PAS染色的病理形态学改变,并进行半定量评分.光镜下行支气管肺泡灌洗液(BALF)计数和分类,免疫组化测定肺组织黏液蛋白Muc5ac的表达,并进行半定量评分.结果 与A、B组相比较,C组大鼠肺气道上皮炎性细胞浸润、纤毛粘连脱落、黏膜充血水肿等病理表现明显(P＜0.05),杯状细胞增生计数增加(P＞0.05).BALF 白细胞总数及中性粒细胞百分比均升高(P＜0.05),Muc5ac的表达亦明显增加(P＜0.05).结论 舣通道给脂多糖比单通道更能建立典型的慢性支气管炎大鼠模型.     

烟熏诱导大鼠肺气肿模型实验研究

目的观察烟熏复制大鼠肺气肿模型的可靠性。方法Wistar大鼠20只随机分为两组,健康对照组(A)和模型组(B),每组各10只。模型组采用烟熏的方法复制实验性肺气肿模型,12周后观察各组大鼠的血气、肺组织的病理学变化,免疫组织化学法观察增殖细胞核抗原(PCNA)的表达情况。结果模型组和对照组血气比较差异无统计学意义(P>0.05);对照组大鼠单位面积平均肺泡数组明显高于模型组(P<0.05),对照组平均肺泡面积明显低于模型组(P<0.05);PCNA指数对照组为23±5,模型组为54±7,差异有统计学意义(P<0.05)。结论烟熏可以诱发大鼠肺气肿模型。     

氧自由基清除剂对急性肺损伤大鼠核因子-κB的作用及机制研究

目的 探讨氧自由基清除剂依达拉奉对脂多糖诱导的急性肺损伤大鼠核因子-κB（NF-κB）的作用及机制.方法 将30只雄性SD大鼠随机分为3组（n=10）：对照组（A组）、模型组（B组）、依达拉奉组（C组）.B、C组大鼠腹腔注射脂多糖5 mg/kg进行造模,A组大鼠腹腔注射0.9％氯化钠注射液5 mg/kg进行对照.造模后C组大鼠腹腔注射依达拉奉10 ml/kg进行干预,A、B组大鼠腹腔注射0.9％氯化钠注射液10 ml/kg进行对照.6h后处死大鼠,抽取腹主动脉血液行血气分析测定血氧分压（PO2）,用免疫组织化学法测定肺组织中NF-κB的含量,用ELISA测定TNF-α的含量.结果 B、C组大鼠PO2低于A组,差异有统计学意义（P＜0.05）;C组大鼠PO2的下降幅度小于B组,与B组相比,C组的PO2高,差异有统计学意义（P＜0.05）.B、C组大鼠NF-κB、TNF-α高于A组,差异有统计学意义（P＜0.05）;C组大鼠NF-κB、TNF-α的上升幅度小于B组,与B组相比,C组的NF-κB、TNF-α低,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 依达拉奉对脂多糖致急性肺损伤大鼠肺组织起保护作用,其机制与抑制肺组织NF-κB的表达从而抑制肺部炎症反应有关.     

达肝素钠对糖尿病大鼠肾脏的作用及机制研究

目的观察达肝素钠对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其机制。方法 Wistar大鼠40只,随机选10只为对照组（A组）,随机选30只大鼠采用腹腔注射链脲佐菌素（STZ）构建大鼠糖尿病模型并随机分为糖尿病组（B组）、低剂量（100 U/kg）达肝素钠组（C组）和高剂量（500 U/kg）达肝素钠组（D组）,每组10只。分别于第8周及第12周检测各组大鼠的空腹血糖（FPG）、24 h尿白蛋白、血肌酐（Scr）及尿肌酐,并计算内生肌酐清除率（Ccr）;制备肾匀浆,并检测血清及肾匀浆丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）。结果 1 B、C、D组大鼠FPG均高于A组（P〈0.05）。B、C、D组的24 h尿白蛋白量及Scr均高于A组,Ccr均低于A组（P均〈0.05）;2各组大鼠血清及肾匀浆MDA、SOD的差异均有统计学意义（P〈0.05）。B组MDA含量高于A组（P〈0.05）,SOD低于A组（P〈0.05）。给予达肝素钠可显著降低糖尿病（DM）大鼠MDA,升高SOD的活性,且D组更显著（P〈0.05）。结论 1达肝素钠对糖尿病大鼠具有肾脏保护作用,其机制可能与降低糖尿病大鼠MDA,升高SOD表达,降低尿蛋白等因素有关。2达肝素钠对糖尿病大鼠的肾脏保护作用可能与剂量有关。     

间充质干细胞移植减轻大鼠肺气肿及氧化应激的探讨

目的研究间充质干细胞(MSCs)移植在肺气肿大鼠氧化应激和肺气肿发展过程中的作用。方法 26只雌性SD大鼠随机分为对照组(A组,n=8),肺气肿组(B组,n=8),肺气肿+MSCs移植组(C组,n=10),将B与C组大鼠在香烟烟雾中暴露14周,制作肺气肿大鼠模型,C组大鼠予MSCs移植。完成4次MSCs移植后的2、4周分别处死C组大鼠各1只,观察MSCs在肺气肿大鼠肺部的定植情况;MSCs移植8周后同时处死各组大鼠,观察大鼠肺组织病理形态,并进行定量分析;用硫代戊巴比妥法测定血清和肺组织匀浆中丙二醛(MDA)的水平,用WST-1法测定各组血清和肺组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)的水平。结果 MSCs移植后2周及4周,C组大鼠肺组织内均可见标记过的MSCs,随着时间的推移,肺组织内MSCs比例逐渐减少。B组和C组大鼠的肺组织呈现肺气肿样改变,B组和C组大鼠肺组织的平均内衬间隔(MLI)高于A组,平均肺泡数(MAN)明显低于A组,B组大鼠肺组织的MLI高于C组,MAN低于C组(P<0.05)。B组和C组大鼠血清及肺组织中MDA高于A组,SOD低于A组,B组血清及肺组织中MDA高于C组,SOD低于C组(P<0.05)。结论 MSCs移植可能通过降低氧化应激水平对大鼠肺气肿发挥治疗作用。     

脂多糖对幼年哮喘大鼠Toll样受体4及气道炎症的作用

目的探讨不同浓度脂多糖对哮喘大鼠肺组织Toll样受体4表达及气道炎症的影响。方法使用清洁级SD大鼠50只,随机分为对照组（A）、哮喘组（B）、地塞米松组（C）低剂量LPS组（D1）及高剂量LPS组（D2）五组,对哮喘大鼠肺组织的病理变化、炎症细胞改变、OVA-sIgE含量的影响、肺组织TLR4mRNA表达及EOS凋亡的影响进行分析。结果肺组织的病理变化：A组肺间质视野清晰,肺组织形态良好,可见肺泡管、小支气管,未见明显炎症细胞浸润。B组肺间质及肺泡腔内、支气管及血管周围大量炎症细胞浸润,支气管黏膜下水肿,黏膜皱褶增多,粘液腺增生。与B组比较,C组和D2组上述现象明显减轻,D1组无明显变化。BALF中细胞总数、EOS计数及EOS百分比B组均明显高于A组（P＜0．01）;C组和D2组均明显低于B组（P＜0．01）;D1组与B组差异均无统计学意义（P＞0．05）。OVA—sIgE含量：c组、D2组与A相比有明显差异（P＜0．01）,但较B组有明显降低（P＜0．01）。D1组与B组比较差异无统计学意义（P＞0．05）。TLR4mRNA表达能力：A组与B组差异无统计学意义（P＞0．05）;C组、D1组、D2组均明显高于B组（P＜0．01）;D1组明显低于D2组（P＜0．01）。EOS凋亡率：B组和D1组有少许核深染为棕褐色的凋亡细胞。A组、C组、D2纽较B纽增多（P＜0．05或P＜0．01）。结论高剂量脂多糖能降低血清中OVA-sIgE水平,上调TLR4表达,诱导哮喘大鼠肺组织EOS凋亡;低剂量脂多糖虽激活TLR4信号通路,却不能缓解哮喘的气道炎症。     

The effect of N-acetylcysteine (NAC) on liver and renal tissue inducible nitric oxide synthase (iNOS) and tissue lipid peroxidation in obstructive jaundice stimulated by lipopolysaccharide (LPS).

Morbidity and mortality rates are very high in obstructive jaundice when it is associated with sepsis and multiple organ failure. Nitric oxide (NO) formation and increased expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS) also take place in obstructive jaundice (OJ). N-Acetylcysteine (NAC) has a beneficial effect by demonstrating anti-inflammatory activity such as inhibits cytokine expression/release, inhibiting the adhesion molecule expression and inhibiting nuclear factor kappa B (NFkappaB). The aim of this study was to investigate the effects of NAC on liver and renal tissue iNOS, and liver tissue lipid peroxidation in lipopolysaccharide (LPS) induced obstructive jaundice. We randomized 48 rats into six groups. Group A: Sham group; group B: OJ group; group C: OJ+NAC; group D: OJ+LPS (Escherichia coli LPS serotype L-2630, 100mg, Sigma) group E: OJ+NAC+LPS; group F: OJ+LPS+NAC. NAC was started subcutaneously 100mg/kg. LPS was injected intraperitoneally and then at the tenth day we sacrificed the rats.Liver malondialdehyde (MDA) increased and liver ATPase decreased in groups B-D when compared to group A. After the administration of NAC (groups C-E), liver MDA levels decreased, tissue ATPase levels increased as compared to other groups. The liver and renal tissue iNOS expression was increased in groups B, D, and F. After the administration of NAC (groups C-E) the liver and renal tissue iNOS expression were decreased. Our results indicated that NAC prevented the deleterious effects of LPS in OJ by reducing iNOS expression via lipid peroxidation in liver and renal tissue; if it was administrated before LPS. But NAC failed to prevent the iNOS expression and lipid peroxidation if there was established endotoxemia in OJ.     

NF-κB表达水平与大鼠慢性阻塞性肺疾病气道、肺血管重构的相关性

目的探讨NF-κB的表达水平与大鼠慢性阻塞性肺病(COPD)气道、肺血管重构的相关性。方法 24只♂SD大鼠随机分为4组。正常对照组(A):正常饲养4周;慢支组(B):于实验d1、14经气道内注入脂多糖(LPS),200μg/次,4周后检测;COPD组(C):d1、14经气道内注入LPS,200μg/次,熏香烟1h,共4周;COPD并肺动脉高压组(D):d1、14经气道内注入LPS,200μg/次,熏香烟1h/d,共6周,实验的最后2周在熏香烟的同时,给予18%低氧8h/d。各组测定气道阻力、肺血流动力学和右心室肥厚指数,观测气道炎症,气道重构以及肺小动脉的病理形态学改变,用免疫组化检测各组肺组织中NF-κB蛋白的表达,RT-PCR、Western blot检测肺组织中mRNA、蛋白的表达。结果①与A组相比,C、D组气道阻力明显增大(P<0.05)。②C、D组RVSP、mPAP和RV/LV+S都明显高于A组(P<0.05)。③与A组比较,C、D组气道重构指标细支气管管壁厚度与气管外径比值(MT%)、管壁面积和气管总面积比值(MA%)均明显增高(P<0.05)。④与A组相比,C、D组肌化型动脉百分比增多(P<0.05);D组肺小动脉管壁厚度与血管外径比值(WT%)、管壁面积与血管总面积比值(WA%)比值增大(P<0.05)。⑤免疫组化示,C、D组NF-κB蛋白表达强于A组(P<0.05),C、D组间表达差异无显著性。⑥RT-PCR结果说明,与A组相比,C、D组NF-κB mRNA表达明显增强(P<0.05)。C组与D组间NF-κB mRNA表达也有差异(P<0.05)。⑦Western blot电泳结果显示,与A组相比,C、D组NF-κB蛋白表达明显增强(P<0.05),D组较C组NF-κB蛋白表达增强(P<0.05)。结论 COPD早期已出现肺血流动力学变化,随疾病进展出现进行性加重的肺血管、气道重构,同时NF-κB的表达逐渐增强,说明NF-κB与COPD的肺血管、气道重构有关。     

慢性神经痛大鼠鞘内联合应用吗啡和氯胺酮在脊髓上水平的抗伤害性作用及对吗啡耐受的影响

目的研究鞘内联合应用吗啡和氯胺酮对慢性神经痛大鼠的抗伤害作用机制及对吗啡耐受的影响。方法 40只Wistar大鼠,体质量220～260 g,制备坐骨神经结扎模型并进行鞘内置管,随机分为5组(n=8):B组为空白对照组;C组鞘内注射0.9%盐水10μL;K组鞘内注射氯胺酮50μg;M组鞘内注射吗啡20μg;KM组鞘内注射吗啡10μg和氯胺酮25μg。坐骨神经结扎术后第4天开始鞘内给药,每日1次,连续7 d。用药7d后处死大鼠,取大脑皮质、海马、脑干组织,硝酸还原酶法测定NO浓度和NOS活性。结果与B组比较,C和K组脑干NO浓度升高,M组皮质、海马、脑干中NO浓度均升高;与C组比较,M组皮质、海马NO浓度升高,KM组海马、脑干中NO浓度降低;与M组比较,KM组皮质、海马、脑干NO浓度均降低(P<0.05或0.01)。与B组比较,C、K和M组皮质、海马、脑干中NOS活性均升高;与C和M组比较,KM组皮质、海马、脑干中NOS活性均降低(P<0.05或0.01)。结论神经病理性痛大鼠鞘内联合应用吗啡和氯胺酮可在脊髓上水平产生抗伤害性作用,并可抑制吗啡耐受的形成,这可能与大脑皮质、海马、脑干的NO水平和NOS活性有关。     

γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶在吸烟气道上皮细胞表达的研究

目的通过观察吸烟大鼠支气管上皮细胞及慢性吸烟人气道上皮细胞γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)表达的研究,探讨γ-GCS在吸烟所致慢性气道炎症及氧化/抗氧化失衡中的作用。方法①自制大鼠实验性被动吸烟装置,建立吸烟引起慢性气道炎症的动物模型,将40只大鼠随机分为不吸烟组、吸烟1个月组、吸烟2个月组、吸烟3个月组,每组各10只;②选择2007年9月至2008年10月行支气管镜检查的患者60例。吸烟指数>300支,平均年龄(50±10)岁,分为吸烟组(慢性支气管炎组、非慢性支气管炎组),不吸烟组(慢性支气管炎组、非慢性支气管炎组),每组各15例。通过支气管镜刷检获取支气管气道上皮细胞,分别采用免疫组织化学、免疫细胞化学法检测支气管上皮细胞中γ-GCS蛋白的表达水平。结果 (1)吸烟3个月组大鼠出现了肺气肿的病理改变;吸烟1个月、2个月和3个月组大鼠支气管上皮细胞γ-GCS蛋白表达水平明显高于不吸烟组(均P<0.01)。(2)在气管镜下取人气道上皮细胞γ-GCS蛋白的表达:①吸烟组[慢性支气管炎组(0.20±0.10)、非慢性支气管炎组(0.35±0.11)]的气道上皮细胞γ-GCS的表达水平,低于不吸烟组[慢性支气管炎组(0.40±0.10)、非慢性支气管炎组(0.50±0.15)]差异均有统计学意义(P均<0.05);②慢性支气管炎组(0.40±0.10)的气道上皮细胞γ-GCS的表达水平,低于非慢性支气管炎组(0.50±0.15)的表达,差异有统计学意义(P<0.05)。结论①随着吸烟时间的延长,大鼠支气管上皮细胞中γ-GCS蛋白表达水平逐渐增高;②吸烟者气道内上皮细胞γ-GCS的免疫活性降低,γ-GCS在不吸烟非慢性支气管炎者表达最强,而在吸烟者与慢性支气管炎者的气道内表达下调;γ-GCS在香烟所致慢性气道炎症、氧化应激及氧化/抗氧化失衡中可能发挥一定的作用。     

气道滴入加烟熏法建立慢性支气管炎大鼠模型的实验研究

目的探讨建立大鼠慢性支气管炎模型的新方法。方法采用气道滴入脂多糖加烟熏法建立大鼠慢性支气管炎模型,HE染色观察病理形态并行半定量评分。结果模型组大鼠熏烟4周后即出现体重下降、咳嗽,活动后出现气喘,病理可见肺泡壁水肿明显,气道黏膜上皮纤毛部分粘连、倒伏、脱落,杯状细胞增生,管壁炎细胞浸润,支气管平滑肌增厚。结论气道内滴入脂多糖结合烟熏法可成功建立慢性支气管炎大鼠模型。     

红霉素对被动吸烟大鼠肺组织气肿样变的保护作用

目的观察红霉素对被动吸烟大鼠肺组织气肿样变的保护作用并初步探讨其作用机制。方法 40只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、红霉素组、桂龙咳喘宁对照组,每组10只;采用气管内注入脂多糖(LPS)及烟熏的混合刺激方法建立肺气肿大鼠模型,造模3周后进行药物干预,连续14 d。肺组织病理切片观察形态学改变并采用图像分析系统检测平均肺泡面积(MAA),平均肺泡数(MAN)和肺平均内衬间隔(MLI),免疫组化测定肺组织中MMP-2与TIMP-2的表达量,ELISA法测定血清中IL-10与TNF-α的浓度。结果模型组大鼠肺组织可见肺大泡形成,MAA明显增大,MAN明显减少以及MLI显著增大,且有明显的炎症细胞浸润以及血清中TNF-α的浓度明显升高,与正常组比较有显著性差异(P<0.05);红霉素组(100 mg.kg?1)未见肺大泡形成,炎症细胞浸润明显减轻,且能明显降低肺组织中MMP-2表达量与血清中TNF-α的浓度,并能明显的增加肺组织中TIMP-2的表达量与血清中IL-10的浓度,与模型组比较有显著性差异(P<0.05),与桂龙咳喘宁组(450 mg.kg?1)相比无显著性的差异。结论红霉素对被动吸烟大鼠肺组织气肿样变具有明显的保护作用。     

TAL对慢支模型大鼠肺泡巨噬细胞凋亡的影响及部分机制研究

目的探讨枇杷叶三萜酸(TAL)对慢支模型(CB)大鼠肺泡巨噬细胞(AM)活性及凋亡的影响及其可能的作用机制。方法应用BCG联用LPS的方法复制大鼠CB模型,采用体内外给药的方法,观察TAL及MAPK3条通路对CB大鼠AM凋亡及活性的影响。MTT法检测细胞活性,电镜观察AM凋亡,流式细胞技术检测AM凋亡率及AM中凋亡相关基因Bcl-2、Bax的表达。Western blot法检测AM中ERK蛋白磷酸化水平。结果①与正常对照组比较,模型大鼠支气管肺泡灌洗液中AM数增加(P<0.01),而TAL灌胃给药可抑制模型大鼠异常增多的AM数量(P<0.01)。②慢支模型组AM活性较正常组相比明显增强(P<0.01),TAL可抑制CB模型组大鼠AM的活性(P<0.05)。③与正常组比较,模型大鼠AM凋亡率明显降低(P<0.01);TAL给药组及ERK通路抑制剂PD98059组AM凋亡率较模型组比较升高(P<0.05,P<0.01)。而JNK通路抑制剂Curcumin组AM凋亡率降低(P<0.05)。④模型大鼠AMERK磷酸化水平明显升高(P<0.01);TAL(5mg.L-1)体外给药可抑制慢支大鼠AM内ERKMAPK通路的磷酸化(P<0.05)。⑤模型大鼠AMBax表达明显降低而Bcl-2表达升高(P<0.01),TAL给药组可降低慢支大鼠AMBcl-2表达,升高Bax表达。结论慢支模型大鼠AM活性增强、凋亡减少,TAL可诱导AM凋亡,抑制AM活性,使AM内Bcl-2/Bax的表达趋于平衡。ERK、JNKMAPK信号传导通路参与慢支大鼠AM凋亡的调节,JNKMAPK信号通路促进AM凋亡而ERKMAPK信号通路抑制AM凋亡。TAL的促AM凋亡作用可能与其抑制慢支大鼠AMERKMAPK信号通路的磷酸化活化、调节Bcl-2/Bax的表达有关。     

戈米辛A通过调控TLR-4、Akt/FoxO1信号通路降低LPS诱导的大鼠急性肺损伤

目的：探究戈米辛A对脂多糖（LPS）诱导的大鼠急性肺损伤（acute lung injury,ALI）的保护作用及作用机制。方法：将40只SD大鼠随机分为4组,A组（正常组）、B组（模型组）、C组（1.5 mg·kg^-1戈米辛A组）、D组（3 mg·kg^-1戈米辛A组）。C组和D组造模前半小时左侧颈静脉给予不同浓度的戈米辛A,A组和B组给予等量的生理盐水,造大鼠急性肺损伤模型,麻醉处死大鼠,肺组织取材,进行HE染色。采用Realtime PCR法对TLR-4、pAkt、FoxO1 mRNA水平进行检测。采用Western blot法对四组大鼠肺组织TLR-4、pAkt/Akt、FoxO1蛋白进行检测。结果：HE结果显示,C、D组肺泡结构尚可见,渗出物及炎症细胞浸润较B组明显改善;D组比C组肺泡结构更清晰,炎性细胞浸润也较少。Realtime PCR检测结果显示,B组与A组TLR-4、pAkt/Akt、FoxO1 mRNA水平比较,差异有显著性（P<0.05）。C、D组与A组TLR-4、pAkt/Akt、FoxO1 mRNA水平比较,差异无显著性（P>0.05）。C、D组与B组TLR-4、pAkt/Akt、FoxO1 mRNA水平比较,差异有显著性（P<0.05）,D组与C组FoxO1 mRNA水平比较,差异有显著性（P<0.05）。Western blot结果显示,B组与A组TLR-4、pAkt/Akt、FoxO1 蛋白表达水平比较,差异有显著性（P<0.05）。C、D组与B组TLR-4、pAkt/Akt、FoxO1蛋白表达水平相比较,差异有显著性（P<0.05）,D组与C组TLR-4、pAkt/Akt、FoxO1蛋白表达水平比较,差异无显著性（P>0.05）。结论：戈米辛A通过对TLR-4、Akt/FoxO1通路的调控作用从而对LPS诱导的大鼠肺损伤起到缓解作用。     

硫化氢对大鼠内毒素性急性肺损伤的影响

目的观察硫化氢(H2S)对脂多糖(LPS)所致大鼠内毒素性急性肺损伤(ALI)的影响,探讨其对肺脏的作用机制。方法♂SD大鼠共64只,随机分为8组,每组8只:Ⅰ:3h空白对照组;Ⅱ:LPS3h组;Ⅲ:6h空白对照组;Ⅳ:LPS6h组;Ⅴ:LPS+NaHS低剂量组;Ⅵ:LPS+NaHS中剂量组;Ⅶ:LPS+NaHS高剂量组;Ⅷ:LPS+PPG组。LPS3h和LPS6h组给予LPS,其相应空白对照组给予生理盐水,分别在3h或6h时处死大鼠;LPS+NaHS低、中、高剂量组和LPS+PPG组分别在给LPS3h时腹腔注射低、中、高剂量氢硫化钠(NaHS)或炔丙基甘氨酸(PPG),再观察3h后处死大鼠。光、电镜下观察肺组织形态学改变,检测肺系数、肺湿/干重比(W/D)、血浆中H2S含量、肺组织胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)活性,以及肺组织中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性的变化。结果LPS3h和LPS6h组与相应的空白对照组比较,光、电镜下肺组织明显受损,超微结构明显改变,肺系数、肺湿/干重比和肺组织MDA含量升高,血浆中H2S的含量、肺组织CSE以及SOD、GSH-Px活性降低。LPS+NaHS低、中、高剂量组与LPS6h组比较,光、电镜下肺组织受损情况均有不同程度改善,肺系数、肺湿/干重比和肺组织MDA含量降低,血浆H2S含量、肺组织CSE以及SOD、GSH-Px活性升高。LPS+PPG组与LPS6h组比较,光、电镜下肺组织损伤无改善,肺系数、肺湿/干重比和肺组织MDA含量升高,血浆中H2S的含量、肺组织CSE和SOD活性降低,肺组织GSH-Px活性无明显变化。结论CSE/H2S体系可能参与内毒素性ALI的病理生理过程,外源性补充H2S可减轻内毒素性ALI。