吡喹酮与γ-干扰素对肝纤维化小鼠Smads转录水平的影响

[目的]研究吡喹酮杀虫治疗和γ-干扰素(IFN-γ)抗肝纤维化治疗对日本血吸虫性肝纤维化小鼠体内Smads分子的影响.[方法]日本血吸虫尾蚴感染BALB/c小鼠16周后形成肝纤维化动物模型,随机分成3组:0.85%氯化钠组、吡喹酮组和吡喹酮联合IFN-γ(联合)组,并以10只正常BALB/c小鼠作为正常对照.治疗8周后取小鼠肝组织,进行肝组织病理学检查,观察肝纤维化程度;应用RT-PCR法检测肝组织中Smad2、Smad3、Smad4、Smad7和IFN-7 mRNA水平.[结果]吡喹酮组治疗后,肝纤维化程度、Smad2 mRNA水平与0.85%氯化钠组比较差异无统计学意义,Smad3 mRNA水平下降到正常,IFN-γ mRNA水平明显增高.联合组治疗后,肝纤维化程度明显减轻,但尚未达到正常水平,Smad2 mRNA水平仍低于正常水平,Smad3和Smad7 mRNA水平上调,IFN-γ mRNA处于正常水平.[结论]吡喹酮联合IFN-γ抗纤维化的机制是促进Smad7的表达,但Smad2 mRNA的下调,Smad3 mRNA的上调可能导致联合治疗未能使肝纤维化完全逆转.     

吡喹酮与γ-干扰素对肝纤维化胶原代谢影响的实验研究

目的：探讨吡喹酮杀虫治疗和IFN－γ抗肝纤维化的分子机制。方法：以日本血吸虫尾蚴感染新西兰兔制成肝纤维化动物模型,感染后第16周随机分成3组：感染组,吡喹酮治疗组和吡喹酮联合IFN－γ治疗组,另以10只正常兔为阴性对照组,感染后28周处死,取肝组织进行病理检测以及I型胶原,Ⅲ型胶原,Ⅳ型胶原,MMP－1,MMP－9,TGFβ1和IFN－γmRNA水平检测。结果：吡喹酮治疗后肝纤维化程度明显减轻,但仍显著高于正常组;I型胶原,Ⅲ型胶原和Ⅳ型胶原mRNA水平显著下降,尤其Ⅲ型胶原已接近正常水平,而MMP－1和MMP－9 mRNA水平变化不大;TGFβ1 mRNA水平下降不明显,而IFN-γ mRNA水平显著增高,TGFβ1/IFN-γmRNA比值明显减少,但仍高于正常。杀虫治疗后加IFN－γ后进一步降低I型胶原,Ⅳ型胶原mRNA水平,并使MMP－1和MMP－9 mRNA的表达显著增加,TGFβ1 mRNA水平明显下降。结论： 杀虫治疗后抗肝纤维化仍属必要,IFN－γ主要通过直接抑制胶原合成,促进胶原降解,抑制TGFβ1起抗肝纤维化作用。     

吡喹酮治疗对血吸虫病肝纤维化小鼠血清细胞因子水平的影响

目的　研究吡喹酮治疗血吸虫肝纤维化小鼠前后血清 TNF-α,IFN -γ水平的变化。方法　制备血吸虫肝纤维化小鼠模型 ,应用 EL ISA方法检测血吸虫肝纤维化小鼠在吡喹酮治疗前后血清TNF-α,IFN-γ水平的变化。结果　吡喹酮治疗组 TNF-α含量较感染组显著降低 (P<0 .0 1) ,吡喹酮治疗组 IFN-γ含量较感染组显著增加 (P<0 .0 1)。结论　吡喹酮可通过降低血吸虫肝纤维化小鼠血清 TNF-α的含量 ,提高 IFN-γ的含量从而发挥抗肝纤维化的作用。     

吡喹酮对血吸虫病肝纤维化小鼠肝组织Bcl-2和Bax表达的影响

目的观察吡喹酮（Praziquantel）治疗对血吸虫病肝纤维化小鼠肝组织中与凋亡相关基因Bcl-2和Bax表达的影响。方法建立小鼠血吸虫病肝纤维化模型。模型对照组不做治疗，吡喹酮治疗组按500mg／kg给药，1次／d，连用2d。10周后处死小鼠，取肝组织制片，免疫组化染色（SP法），观察小鼠肝组织中Bcl2和Bax的表达水平；HE染色观察肝组织的病理学变化。实验设正常小鼠对照。结果模型对照组和治疗组小鼠肝组织Bcl2、Bax表达水平较正常对照组显著增高（P〈0．01或P〈0．05）；治疗组Bcl-2水平显著高于模型对照组（P〈0．05），而Bax的表达水平2组间差异无显著性（P〉0．05）。结论吡喹酮可能通过促进Bcl-2表达，减少肝细胞的变性坏死，阻止血吸虫病肝纤维化的发生。     

吡喹酮对血吸虫卵肉芽肿与肝纤维化作用的研究Ⅰ吡喹酮对小鼠肺部血吸虫卵肉芽肿的影响

目的探讨吡喹酮对小鼠肺部血吸虫卵肉芽肿的影响。方法48只小鼠均分4组,A组：虫卵致敏组,先于小鼠腹壁皮下注入新鲜日本血吸虫卵,10d后由尾静脉注入虫卵;B组：吡喹酮短期应用组,致敏方法同A组,于尾静脉注入虫卵前1d起灌服吡喹酮300mg/（kg.d）,连续3d;C组：吡喹酮持续应用组,致敏方法同A组,于尾静脉注入虫卵前1d起灌服吡喹酮75mg/kg,1日2次,连续5d,停药2d,反复用药至剖检;D组：第29天起应用吡喹酮组,服法同C组。各组均在尾静脉注射虫卵后7、14、28、56d分别剖杀3只,取肺组织切片、染色,在每组小鼠肺连续切片内选含毛蚴的肉芽肿25～30个,测其面积计算平均值。结果在第7、14天和第28天时,C组的虫卵肉芽肿面积较小,与A组比较,差异有统计学意义;B组的虫卵肉芽肿面积比A组略小,但差异无统计学意义;至第56天时,B、C组与D组的虫卵肉芽肿面积均较小,与A组比较,差异均有统计学意义。结论吡喹酮能够抑制血吸虫卵肉芽肿。     

吡喹酮对血吸虫卵肉芽肿与肝纤维化作用的研究I吡喹酮对小鼠肺部血吸虫卵肉芽肿的影响

 目的探讨吡喹酮对小鼠肺部血吸虫卵肉芽肿的影响。方法48只小鼠均分4组，A组：虫卵致敏组，先于小鼠腹壁皮下注入新鲜日本血吸虫卵，10 d后由尾静脉注入虫卵；B组：毗喹酮短期应用组，致敏方法同A组，于尾静脉注入虫卵前ld起灌服吡喹酮300 mg/(kg．d)，连续3 d;C组：吡喹酮持续应用组，致敏方法同A组，于尾静脉注入虫卵前ld起灌服吡喹酮75 mg/kg，1日2次，连续5d，停药2d，反复用药至剖检；D组：第29天起应用吡喹酮组，服法同C组。各组均在尾静脉注射虫卵后7、14、28、56 d分别剖杀3只，取肺组织切片、染色，在每组小鼠肺连续切片内选含毛蚴的肉芽肿25～30个，测其面积计算平均值。结果在第7、14天和第28天时，C组的虫卵肉芽肿面积较小，与A组叱较，差异有统计学意义；B组的虫卵肉芽肿面积比A组略小，但差异无统计学意义；至第56天时，B、C组与D组的虫卵肉芽肿面积均较小，与A组比较，差异均有统计学意义。结论吡喹酮能够抑制血吸虫卵肉芽肿。         

吡喹酮对血吸虫肝纤维化小鼠肝脏TGF-β1和胶原表达的影响

目的 研究吡喹酮对血吸虫病肝纤维化小鼠肝脏TGF—β1和Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响及其抗纤维化机制。方法 制备血吸虫病肝纤维化小鼠模型，应用免疫组化染色方法和多媒体彩色病理图文分析系统观察吡喹酮治疗前后肝脏TGF—β1和Ⅰ、Ⅲ型胶原定量表达的变化。结果 吡喹酮治疗组与感染组比较，TGF—β1，Ⅰ、Ⅲ型胶原含量明显降低(P＜0．01)。结论 吡喹酮治疗血吸虫病肝纤维化小鼠可降低其肝脏TGF—β1和Ⅰ、Ⅲ型胶原的含量而发挥抗肝纤维化作用。     

吡喹酮抗肝纤维化作用研究进展

吡喹酮除具有广谱抗吸虫和绦虫作用外,还具有调节炎症反应、抗纤维化等药理作用.本文综述了吡喹酮抗肝纤维化作用及其机制,以期为吡喹酮用于肝纤维化治疗提供理论依据.     

吡喹酮对血吸虫病肝纤维化小鼠肝组织Bcl-2和Bax表达的影响

目的观察吡喹酮(Praziquantel)治疗对血吸虫病肝纤维化小鼠肝组织中与凋亡相关基因Bcl-2和Bax表达的影响。方法建立小鼠血吸虫病肝纤维化模型。模型对照组不做治疗,吡喹酮治疗组按500 mg/kg给药,1次/d,连用2 d。10周后处死小鼠,取肝组织制片,免疫组化染色(SP法),观察小鼠肝组织中Bcl-2和Bax的表达水平;HE染色观察肝组织的病理学变化。实验设正常小鼠对照。结果模型对照组和治疗组小鼠肝组织Bcl-2、Bax表达水平较正常对照组显著增高(P<0.01或P<0.05);治疗组Bcl-2水平显著高于模型对照组(P<0.05),而Bax的表达水平2组间差异无显著性(P>0.05)。结论吡喹酮可能通过促进Bcl-2表达,减少肝细胞的变性坏死,阻止血吸虫病肝纤维化的发生。     

芦荟大黄素和吡喹酮联合治疗对血吸虫肝纤维化小鼠TGF-β/Smad通路的影响

目的:探讨芦荟大黄素和吡喹酮的联合治疗对血吸虫肝纤维化小鼠TGF-β/Smad通路的影响.方法:80只小鼠随机分为4组.前3组每只小鼠感染日本血吸虫尾蚴25条,感染8 wK(后,第一组小鼠以吡喹酮500 mg/(kg·d)治疗2 d(吡喹酮组),第2组小鼠以吡喹酮500 mg/(kg·d)治疗2 d后用芦荟大黄素0.3 mg/(kg·d)治疗8 wk(吡喹酮+芦荟大黄素组),第3组不作任何治疗(实验对照组),第4组小鼠作为正常对照.第16周末处死小鼠留取肝脏组织.应用HE染色法、RT-PCR法和免疫组织化学染色法观察、分析各组小鼠肝脏病理改变与Smad2 mRNA、Smad7mRNA、TGF-β1、TIMP-1、Ⅰ型胶原及Ⅲ型胶原的表达变化.结果.芦荟大黄素治疗后血吸虫肝纤维化程度减轻,肝组织中Smad2 mRNA、TGF-β1、TIMP-1、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原的表达明显低于实验对照组和吡喹酮组(q=6.20,4.38;q=6.22,4.41;q=6.30,4.52;q=6.25,4.44;q=6.29,4.48,P<0.01或0.05);肝组织中Smad7mRNA的表达,明显高于实验对照组和吡喹酮组(q=6.32,4.62,P<0.0 1或0.05).结论:芦荟大黄素可通过降低肝组织中TGF-β1、TIMP-1、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原的表达,抑制Smad2基因的表达,促进Smad7的表达发挥抗肝纤维化作用.     

环孢菌素A和吡喹酮联合应用预防小鼠血吸虫性肝纤维化的研究

目的：观察环孢菌素Ａ和吡喹酮联合应用对小鼠血吸虫性肝纤维化的影响。方法：感染第５ｗｋ末给药，吡喹酮８００ｍｇ／ｋｇ１次喂服及环孢菌素Ａ３０ｍｇ／ｋｇ皮下注射，每日１次，连续５日。结果：联合用药组血清游离羟脯氨酸水平在９、１２、１５ｗｋ分别为７．９１±０．２１、９．０３±１．６６、９．６９±１．２３μｍｏｌ／Ｌ，显著低于单独应用吡喹酮组的１０．１３±１．４５、１１．２３±１．３４和１１．８９±１．６２μｍｏｌ／Ｌ（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５）；第９ｗｋ时肝脏虫卵肉芽肿面积（１．０８×１０５μｍ２）和其中胶原纤维的百分含量（１８．９１％±７．８２％），分别显著小于单独应用吡喹酮组（１．７２×１０５μｍ２和２９．４１％±１３．０９％）（Ｐ均＜０．０５）。结论：联合用药组的肝脏纤维化程度较单独用吡喹酮者为轻。     

血吸虫感染不同阶段吡喹酮治疗对宿主肝纤维化的影响

目的探讨日本血吸虫感染宿主不同阶段吡喹酮治疗对肝纤维化影响,为临床选择适宜的治疗时机提供依据。方法建立日本血吸虫感染家兔模型,在感染的急性期、慢性期和晚期用吡喹酮治疗,采用ELISA法检测针对可溶性虫卵抗原(soluble egg antigen,SEA)产生的IgG抗体;放免法检测血清中透明质酸(Hyaluronic acid,HA)含量;ELISA法检测血清TGF-β1水平;RT-PCR检测肝组织中的TGF-β1mRNA水平;制作肝组织病理切片,观察肝脏的病理改变。结果与慢性期和晚期比较,在感染急性期经吡喹酮治疗后,宿主血清抗SEA IgG、HA、TGF-β1水平以及肝组织TGF-β1mRNA表达水平显著降低,肝脏纤维化程度降低及肝组织结构明显改善。结论吡喹酮在血吸虫感染急性期的疗效优于慢性期和晚期,且有预防肝纤维化形成的作用。     

吡喹酮对日本血吸虫病肝纤维化的治疗作用及宿主miRNA表达变化

目的研究吡喹酮对日本血吸虫虫卵引起的肝纤维化的治疗作用及其可能的机制。方法选用BALB/c小鼠建立日本血吸虫感染小鼠模型,实验组以250 mg/(kg·d)吡喹酮连续用药3 d进行杀虫,再以600 mg/(kg·d)连续给药30 d进行抗纤维化治疗;对照组仅进行吡喹酮杀虫。以肝组织羟脯氨酸含量等指标评定小鼠肝纤维化的程度,并通过实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测各组肝组织中某些微小RNA(microRNA,miRNA)的表达水平。各组检测结果以t检验进行统计学分析。结果经过吡喹酮治疗后,小鼠肝脏羟脯氨酸含量等肝纤维化指标明显降低,小鼠肝脏羟脯氨酸含量:感染后第75天,感染组、杀虫组、治疗组依次为(0.86±0.07)、(0.66±0.06)、(O.25±0.05)mg/g肝湿重,治疗组低于感染组和杀虫组(t=12.86,P0.01)。同时小鼠肝脏的部分miRNA表达水平发生了明显改变,治疗组与杀虫组相比较,Col I、miR-223、miR-146b、miR-142-5p、miR-199a-5p、miR-34c*、miR-195依次下调了62%、38%、75%、77%、40%、54%和56%。结论吡喹酮对日本血吸虫病肝纤维化有一定的治疗作用,其作用可能与调节某些宿主miRNA的表达水平有关。     

小鼠日本血吸虫性肝纤维化组织TGF-β1及Smads的表达

目的:探讨小鼠日本血吸虫病纤维化肝组织中转化生长因子(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、Smad2/3、Smad4和Smad7的表达和肝纤维化的发病机制.方法:清洁级6-8 wk龄ICR小鼠80只,雌雄各半,随机分为模型组和正常对照组,用血吸虫尾蚴腹部贴附法制成动物模型,正常组未予处理.感染后wk 4、6、8和12末分批处死2组小鼠且称肝脾质量,取部分肝做病理学观察,HE染色和猩红染色,制作组织芯片,免疫组化检测TGF-β1、Smad2/3、Smad4和Smad7在各细的表达状况.结果:与正常组相比,模型组小鼠肝脾质量和肝指数均高(肝,12 wk:2.99±0.28 g vs 1.83±0.13 g;脾,12 wk:0.87±0.15 g vs 0.14±0.02g;肝指数,12 wk:0.09±0.01 vs 0.04±0.00;均P＜0.01),TGF-β1和Smad2/3表达也均高于正常对照组(TGF-β1.12 wk:0.105±0.008 vs 0.024±0.002;Smad2/3.12 wk:0.094±0.009 vs 0.003±0.001,均P＜0.01),以上指数分别与肝纤维化程度呈正相关(r=0.635,0.482,0.646,0.347,0.662;均P<0.01);Smad4表达高于对照组且随着纤维化的发展表达量在逐渐下降(4wk:0.075±0.011 vs 0.023±0.006.6 wk:0.043±0.008 vs 0.010±0.002.8 wk:0.038±0.009 vs 0.003±0.002.12 wk:0.028±0.004 vs 0.013±0.006;均P＜0.01).Smad7仅8 wk表达增强.结论:TGF-β1和Smad2/3表达增强在肝纤维化的发生中起重要作用,Smad4可能主要在纤维化的早中期发挥效应.     

小鼠日本血吸虫性肝纤维化组织TGF-β1及Smads的表达

目的: 探讨小鼠日本血吸虫病纤维化肝组织中转化生长因子(transforming growth factor-beta1, TGF-β1)、Smad2/3、Smad4和Smad7的表达和肝纤维化的发病机制.方法: 清洁级6-8 wk龄ICR小鼠80只, 雌雄各半, 随机分为模型组和正常对照组, 用血吸虫尾蚴腹部贴附法制成动物模型, 正常组未予处理. 感染后wk 4、6、8和12末分批处死2组小鼠且称肝脾质量, 取部分肝做病理学观察, HE染色和猩红染色, 制作组织芯片, 免疫组化检测TGF-beta1、Smad2/3、Smad4和Smad7在各组的表达状况. 结果: 与正常组相比, 模型组小鼠肝脾质量和肝指数均高(肝, 12 wk: 2.99±0.28 g vs 1.83±0.13 g; 脾, 12 wk: 0.87±0.15 g vs 0.14±0.02 g; 肝指数, 12 wk: 0.09±0.01 vs 0.04±0.00; 均P<0.01), TGF-beta1和Smad2/3表达也均高于正常对照组(TGF-beta1, 12 wk: 0.105±0.008 vs 0.024±0.002; Smad2/3, 12 wk: 0.094±0.009 vs 0.003±0.001, 均P<0.01), 以上指数分别与肝纤维化程度呈正相关(r = 0.635, 0.482, 0.646, 0.347, 0.662; 均P<0.01); Smad4表达高于对照组且随着纤维化的发展表达量在逐渐下降(4 wk: 0.075±0.011 vs 0.023±0.006, 6 wk: 0.043±0.008 vs 0.010±0.002, 8 wk: 0.038±0.009 vs 0.003±0.002, 12 wk: 0.028±0.004 vs 0.013±0.006; 均P<0.01), Smad7仅8 wk表达增强. 结论: TGF-beta1和Smad2/3表达增强在肝纤维化的发生中起重要作用, Smad4可能主要在纤维化的早中期发挥效应.     

多次吡喹酮治疗抗血吸虫病肝纤维化疗效观察

目的观察多次吡喹酮治疗对抗血吸虫病肝纤维化的作用。方法选择60例血吸虫病肝纤维化患者(临床诊断病例),随机分成治疗组和对照组,每组30人。治疗组在常规护肝、对症治疗的基础上连续3年每年给予吡喹酮60 mg/kg,分2 d服完;对照组予以常规的护肝、对症治疗,2组疗程均为36个月。观察治疗前后2组患者临床症状、肝功能及血清透明质酸(HA)、层粘蛋白(LN)、4型胶原(IV-C)、Ⅲ型前胶原肽(PCIII)等肝纤维化指标的变化,并作统计分析。结果治疗组患者临床症状、肝功能及HA、LN、IV-C、PCIII水平均有不同程度下降,总有效率93%(26/28),对照组总有效率60%(16/27),两组差异有统计学意义(P0.05)。结论多次吡喹酮治疗对抗血吸虫病肝纤维化有较好的治疗效果。     

Smads在日本血吸虫病小鼠肝纤维化形成过程中的表达

目的　从转录水平研究参与转化生长因子β1(transforminggrowthfactor beta 1,TGF β1)信号传导的Smads分子在日本血吸虫病小鼠肝纤维化形成过程中的表达。　方法　以日本血吸虫尾蚴感染BALB/c小鼠形成肝纤维化动物模型,分别于感染后第 8、12、16和24周取小鼠肝组织 ,作病理学检测,观察肝纤维化程度,采用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)的方法检测模型组和正常组小鼠肝组织中Smad2、Smad3、Smad4和Smad7的mRNA水平。　结果　Smad 2mRNA水平在感染12周后表达下降(P<0.05),16周后恢复正常,2 4周后再次下降(P<0.05)。Smad 3mRNA水平在感染后 16周开始明显升高 ,达正常水平的2倍(P<0.05)。Smad4和Smad7的mRNA水平在肝纤维化形成过程中与正常组比较无明显差异。　结论　Smad3促进肝纤维化形成。Smad2对肝纤维化形成具有双效性 ,即感染初期属于促进因子 ,感染后期属于抑制因子。     

血吸虫对吡喹酮抗药性的研究X日本血吸虫中国大陆株对吡喹酮敏感性的现场调查

目的现场评价日本血吸虫中国大陆株对吡喹酮的敏感性.方法在云南、江苏、江西、湖南和湖北等5个省的血吸虫病流行区,选择11个村作为调查现场.在血吸虫病非传播季节,采用粪检法（Kato-Katz法和/或尼龙袋集卵孵化法）筛选出病人;以吡喹酮40 mg/kg 一次顿服对粪检阳性病人实施抗血吸虫治疗;治疗后6周采用相同方法复查粪便;阳性者仍按40 mg/kg吡喹酮顿服进行第2次治疗;首次治疗后12周,对所有已治者（包括第2次治疗者）进行再次粪便复查.结果在11个流行村共粪检村民4 760人,阳性者584人,其中505人经吡喹酮首次治疗后6周复查粪便, 480人转阴, 治愈率为95.1%;21例首次治疗后粪检仍然阳性者予以第2次治疗.在首次治疗后12周,对所有已治者（包括第2次治疗者）进行再次粪便复查,未发现粪检阳性者.结论尽管在我国血吸虫病主要流行区采用吡喹酮实施大规模化疗已达10余年,但现场至今尚未发现日本血吸虫中国大陆株对吡喹酮敏感性下降的证据.     

吡喹酮对血吸虫病肝纤维化小鼠血清NO及肝内iNOS活性的影响

目的:研究吡喹酮治疗血吸虫病肝纤维化小鼠前后血清一氧化氮及肝内诱导型一氧化氮合酶活性的变化。方法:制备血吸虫病肝纤维化小鼠模型,应用免疫组化染色方法和多媒体彩色病理图文分析系统定量观察吡喹酮治疗前后肝脏诱导型一氧化氮合酶含量的变化,并通过化学还原反应检测血清一氧化氮的水平变化。结果:吡喹酮治疗组肝内iNOS和血清NO的含量均低于感染组,P均小于0.01。结论:吡喹酮可显著降低血吸虫病肝纤维化小鼠肝脏诱导型一氧化氮合酶活性及血清NO含量而发挥抗血吸虫病肝纤维化的作用。