替米沙坦通过上调PPAR-γ促进结肠癌SW480细胞TIMP-1表达的实验研究

目的 探讨替米沙坦能否通过上调PPAR-γ促进结肠癌SW480细胞TIMP-1表达.方法 使用替米沙坦对SW480细胞进行干预.在不同时间点（0、24和72h）使用MTT法对SW480细胞活性进行测定;使用PT-PCR对在不同时间点（0、24和72h）细胞表达的TIMP-1和PPAR-γ mRNA进行测定;使用western blotting对在不同时间点（0、24和72h）细胞表达的TIMP-1和PPAR-γ蛋白进行测定.结果 替米沙坦干预后SW480细胞活性逐渐降低,明显低于对照组（均P＜0.05）,且各时间点间的细胞活性存在显著统计学差异（均P＜0.05）;不同时间点（0、24和72h） TIMP-1、PPAR-γ mRNA和蛋白的表达呈时间依赖性递增（均P＜0.05）.结论 本实验表明,替米沙坦可能是通过上调PPAR-γ的表达促进TIMP-1的合成和分泌,导致SW480细胞生长和侵袭能力的降低.     

乙酰肝素酶反义寡核苷酸对胰腺癌细胞基质金属蛋白酶的影响

目的研究低氧状态下乙酰肝素酶（heparanase,Hpa）反义寡核苷酸（antisenseoligodeoxynu—cleotide,AS—ODN）对胰腺癌高转移细胞株MIAPaCa-2细胞基质金属蛋白酶．2（matrixmetalloproteinase．2,MMP-2）和MMP-9的影响。方法以HpaAS—ODN预先阻断MIAPaCa-2细胞Hpa表达并低氧培养,观察MMP-2、MMP-9mRNA和蛋白表达的变化,明胶酶法检测MMP-2和MMP-9活性的变化,观察阻断Hpa对MMP-2和MMP-9表达及活性的影响。结果低氧培养条件下,MIAPaCa-2细胞MMP-2mRNA及蛋白表达略有上调,但是与常氧条件下培养对比,在6、12和24h差异均无统计学意义（P值均〉0．05）。以ASODN阻断Hpa后,MMP-2mRNA及蛋白表达均无明显变化。低氧后6hMMP-9mRNA及蛋白表达开始升高,12h（P〈0．05）和24h（P〈0．01）更加明显。阻断Hpa表达后,MMP-9mRNA及蛋白表达在各时间段均有下降,而在24h下降明显,差异具有统计学意义（P〈0．01）。低氧后12h和24h,活化型的MMP-2和MMP-9均显著增强,当Hpa表达被抑制后,于12h（P〈0．01）和24h（P〈0．01）活化型的MMP-9活性受到明显抑制,而各时间内,活化型的MMP-2活性均不受HpaAS—ODN的影响（P〉0．05）。结论低氧可刺激MIAPaCa-2细胞MMP-9mRNA及蛋白的表达,增强酶活性。预先阻断Hpa表达在12h和24h可抑制MMP-9mRNA和蛋白的表达,降低MMP-9的活性,而对MMP-2则无明显影响。     

内皮素-1刺激对血管平滑肌过氧化物酶体增殖物激活受体γ表达的作用

目的研究ET-1对血管平滑肌过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPAR-1）表达的影响以及与血管平滑肌增殖的关系。方法以成年16m周Wistar大鼠为研究对象，采用主动脉血管平滑肌原代培养技术，培养大鼠腹主动脉血管平滑肌1～3代，然后加入ET-1进行刺激．使用RT—PCR和Western blot技术观察ET-1作用后0、12、24、48、72h以及不同浓度ET—1刺激48h后PPAR-γ mRNA和蛋白表达变化，同时用MTT法检测血管平滑肌（VSMCs）增殖。结果ET-1刺激后12h．PPAR-γ在mRNA和蛋白水平表达上未见明显变化（P〉0．05），而24h时出现了表达轻度下调，与对照组（无ET-1刺激）差异具有显著性（P〈0．05），48～72h下降更加明显，与对照组相比差异具有高度显著性（P〈0．01）。不同浓度ET-1刺激48h后，随着浓度的增加．PPAR-1表达减低，各组相比具有显著性差异（P〈0．01）。而血管平滑肌的增殖在12h就出现，且随着时间的延长，增殖增强而且随着ET-1浓度的增加，VSMCs增殖增加。结论ET-1在引起VSMCs增殖的同时，可引起PPAR-γ在mRNA和蛋白水平的表达减低，提示ET—1导致的VSMCs增值可能与PPAR-γ有一定的关系。     

PPAR-γ配体对特发性血小板减少性紫癜模型小鼠NO生成诱导时间效应的影响

目的探讨ITP模型小鼠体内,过氧化物酶体增生物激活受体γ（PPAR-γ）对一氧化氮（NO）生成的影响及意义。方法90例ITP模型小鼠随机分成罗格列酮试验组、正常对照组和磷酸盐缓冲液（PBS）对照组,每组30例。罗格列酮试验组用20μmol／L的罗格列酮进行灌胃。硝酸还原酶法检测小鼠血液NO含量,RT-PCR法检测血液淋巴细胞PPAR-γmRNA表达情况。结果血清中NO在第6h,12h,18h,24h和30h的含量罗格列酮试验组高于正常对照组及PBS对照组（均P〈0．05）。在罗格列酮试验组中,NO含量及PPAR-γmRNA的表达随着用药时间的延长而增加（均P〈0．05）,NO表达量与PPAR-γ的表达呈正相关（r=0．89,P〈0．05）。结论在ITP小鼠模型内,PPAR-γ活化剂能够以时间依赖的形式增加NO的生成,PPAR-γ可能通过NO途径来发挥相应的生理功能。     

双氢青蒿素对人肺腺癌细胞A549增殖和凋亡的影响

目的探讨双氢青蒿素（dihydroartemisinin, DHA ）对人肺腺癌细胞株A549的作用及其机制。方法将对数生长期的A549细胞分成对照组（control）和双氢青蒿素组（DHA）。对照组细胞常规培养,双氢青蒿素组细胞培养体系中加入双氢青蒿素（500 nmol／L）。各组细胞培养72 h后,采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞增殖,实时荧光定量PCR检测细胞p85、 Akt、 Bax、 Bcl－2基因表达,免疫蛋白印迹法（Western blotting）检测细胞中p85、 Akt、 p－p85, p－Akt、 Bax、 Bcl－2蛋白的变化, Caspase3活性试剂盒检测Caspase3活性。结果与对照组比较, DHA组A549细胞增殖率显著下降（P＜0．01）, p85、 Akt mRNA表达无显著差异, Bax mRNA表达水平增高（P＜0．001）, Bcl－2 mRNA表达水平降低（P＜0．05）; p85、 Akt总蛋白表达无显著变化（P＞0．05）, p－p85、 p－Akt、 Bcl－2蛋白表达显著减少, Bax蛋白表达显著增多（均P＜0．01）, Caspase3活性显著增加（P＜0．001）。结论双氢青蒿素能抑制A549细胞增殖,促进A549细胞凋亡,其作用机制可能是通过抑制PI3K／Akt信号传导通路而促进凋亡。     

丙泊酚下调水通道蛋白3和基质金属蛋白酶-9表达抑制人肺癌A549细胞的侵袭力

目的探讨丙泊酚对人肺癌A549细胞水通道蛋白3（AQP-3）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）表达及其侵袭力的影响。方法 A549细胞经丙泊酚不同剂量（25、50、100 μmol/L）和不同时间（12、24 h）处理。用RT-PCR方法观察丙泊酚对A549细胞AQP-3 mRNA的作用,用Western Blot方法和Transwell侵袭实验分别检测不同浓度丙泊酚作用24 h对A549细胞AQP-3、MMP-9蛋白 表达和细胞侵袭力的影响。结果与空白组比较,25、50、100 μmol/L 丙泊酚24 h 处理组对AQP-3 mRNA表达的最大抑制比 值为0.13,最小0.41;12 h处理组最大抑制比值0.19,最小0.65,差异有统计学意义（P<0.05）;丙泊酚100 μmol/L组24 h达到最 大抑制效果（0.13±0.035）。25、50、100 μmol/L 丙泊酚24 h处理组AQP-3蛋白表达（0.91±0.009,0.60±0.020,0.57±0.006）和50、 100 μmol/L 丙泊酚24 h处理组MMP-9蛋白表达（0.65±0.006,0.46±0.021）,较空白组明显降低（P<0.05）。25、50、100 μmol/L 丙泊酚 24 h 处理组的穿膜细胞数（122.55±17.20,96.33±5.82,74.33±2.85）,较空白组（199.33±23.88）明显减少（P<0.05）。结论丙泊酚 50、100 μmol/L处理24 h,可下调人肺癌A549细胞AQP-3 mRNA、AQP-3蛋白和MMP-9蛋白的表达,抑制A549细胞的侵袭力。     

活化PPAR-γ对特发性血小板减少性紫癜小鼠NOS的影响

目的探讨在特发性血小板减少性紫癜（ITP）模型小鼠体内,过氧化物酶体增生物激活受体γ（PPAR-γ）对一氧化氮合酶（NOS）生成的影响。方法 ITP模型小鼠分成罗格列酮试验组、GW9662对照组和磷酸盐缓冲液（PBS）对照组,罗格列酮试验组用相同浓度（20umol/L）的PPAR-γ激活剂噻唑烷二酮（thiazolidinediones,TZD）类药物罗格列酮进行灌肠,同时设立的GW9662对照组使用PPAR-γ特异性拮抗剂GW9662的终浓度为10μmol/L,PBS对照组使用相同体积的磷酸盐缓冲液进行灌肠,用药6、12、18、24和30h后,检测小鼠血清中NOS活性和血液淋巴细胞PPAR-γmRNA表达情况。结果血清中NOS在第6,12,18,24和30h的活性,罗格列酮试验组高于GW9662对照组及PBS对照组（P均〈0.05）。在罗格列酮试验组中,NOS活性随着用药时间的延长而升高,各测量时间点NOS活性具有统计学差异（P〈0.05）,PPAR-γmRNA的表达随着时间的延长而增加（P〈0.05）,PPAR-γ的表达与NOS活性呈正相关（r=0.82,P〈0.05）。结论在ITP小鼠模型内,PPAR-γ活化剂能够以时间依赖的形式增加NOS的活性,PPAR-γ可能通过NOS途径来发挥相应的生理功能。     

PPAR-γ在兔二次打击MODS模型中的表达

目的探讨过氧化物酶增殖物激活受体γ（peroxisome proliferator -activated receptor γ, PPAR-γ）在二次打击多器官功能障碍综合征（multiple organ dysfunction syndrome,MODS）中的表达。方法采用Wiggers’法造成兔失血性休克并给予液体复苏,6h后腹腔注射脂多糖（LPS）引起MODS,24h后取肝脏组织,RT—PCR法半定量分析肝脏组织中PPAR-1的表达。结果兔肝脏中PPAR-γmRNA的表达,在创伤失血空白组及二次打击空白组中,其表达较假手术组明显下降（P〈0．05）,但两组之间没有显著差异（P〉0．05）。在创伤失血组及二次打击组中,罗格列酮能上调PPAR-γ的表达（P〈0．05）,GW9662能抑制PPAR-γ的表达（P〈0．05）。结论PPAR-γ在二次打击MODS模型中的表达是下降的,罗格列酮能上调其表达,GW9662能够阻断罗格列酮对PPAR-γ的上调。     

急性ITP患儿外周PPAR-γmRNA表达变化及与IL-18时间相关性的研究

[摘要] 目的 检测急性特发性血小板减少性紫癜(ITP)患儿外周血浆中IL-18对血淋巴细胞PPAR-γmRNA表达变化影响。方法 序贯收集2007年9月至2008年7月在我校附属医院儿科就诊的、符合试验入选标准的急性ITP患儿53例,同时收集相匹配的同期体检儿童50例作为对照。将血液标本平均分为5份,在取样1h,24h,48h,72h后,分别采用RT-PCR法检测ITP患儿外周血淋巴细胞PPAR-γmRNA的表达,蛋白免疫印迹(western blot)检测PPAR-γ蛋白的含量, ELISA 法检测血浆中IL-18水平。结果 急性ITP组白细胞表达PPAR-γ蛋白在第1h,24h,48h,72h与对照组PPAR-γ蛋白分别相比均明显增强,与对照组相比有显著差异 (t1=7.52,t24=16.38,t48=9.65,t72=12.34,均P<0.05);急性ITP患儿在不同的时间点测定的PPAR-γ mRNA表达水平明显均高于正常对照组（t1=9.25,t24=14.24,t48=8.69,t72=16. 14, 均P<0.05）,同样发现急性ITP患儿血浆IL-18水平均显低于正常对照组（t1=6.38,t24=9.65,t48=8.91,t72=7.19,均P<0.05）;血浆IL-18水平与PPAR-γmRNA表达呈负相关(r=0.89,P<0．05)。结论 血浆中IL-18生成量的减少可能导致了急性ITP患儿外周血淋巴细胞PPAR-γ表达的增加,调控Th1/Th2细胞分化功能出现障碍,使有效的免疫抑制作用降低,导致自身反应性T细胞激活增多、凋亡减少,使得浆细胞产生抗血小板抗体增多,促进了血小板的破坏。     

曲格列酮上调PPAR-γ抑制宫颈癌HeLa细胞ICAM-1和MMP-9表达

目的探讨PPARγ激动剂曲格列酮对于宫颈癌HeLa细胞增殖及ICAM-1和MMP-9表达的影响。方法使用曲格列酮和/
或GW9662（PPARγ拮抗剂）对HeLa细胞进行干预。在不同时间点（0、24、48和72 h）使用MTT法对HeLa细胞活性进行测定。
在干预48 h后,使用RT-PCR和western blot对HeLa细胞ICAM-1、MMP-9 和PPARγ mRNA和蛋白进行测定。并使用EMSA对
HeLa细胞PPARγ DNA结合能力（核转录水平）进行分析。结果GW9662组、曲格列酮+GW9662组与空白对照组相比较各时
间点细胞活性未见显著统计学差异（P>0.05）;但曲格列酮组与空白对照组相比较细胞活性呈时间依赖性降低,差异有显著统计
学意义（P均<0.05）。干预48 h 后,曲格列酮组ICAM-1 和MMP-9 mRNA和蛋白表达较空白对照组明显降低（P均<0.05）;但
GW9662组和曲格列酮+GW9662组ICAM-1和MMP-9 mRNA和蛋白表达水平与空白对照组比较未见显著统计学差异（P均>
0.05）。曲格列酮干预后HeLa细胞PPARγ mRNA和蛋白表达水平和PPARγ核转位水平均显著增加,差异有显著统计学意义（P
均<0.05）。结论本实验表明曲格列酮可以通过促进PPARγ表达和PPARγ的核转录水平下调HeLa细胞ICAM-1和MMP-9的合
成,抑制HeLa细胞的增殖。
     

ALDH2在高氧引起的肺泡上皮细胞损伤中的作用

目的探讨线粒体乙醛脱氢酶2（mitochondrialaldehydedehydrogenase2,AI．DH2）在高氧引起肺泡上皮细胞损伤中的作用。方法采用pcDNA3．1ALDH2转染A549细胞增加ALDH2的表达,采用ALDH2siRNA转染A549细胞抑制ALDH2的表达,细胞分组如下：①对照组（A549细胞）,②高ALDH2表达组（A549细胞＋pcDNA3．ALDH2）,③低ALDH2表达组（A549细胞＋ALDH2siRNA）,将3组细胞均置于常氧（95％空气＋5％C02）和高氧（95％O2＋5％C02）中培养72h。ALDH2表达量检测采用Westernblot,ALDH2活性通过在酶标仪上测定A34（）nm下NAD＋转化为NADH的含量变化来得到,细胞脂质过氧化程度检测采用硫代巴比妥酸法测定丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量进行,细胞损伤情况通过检测细胞培养液和细胞内乳酸脱氢酶活力来计算,细胞凋亡检测采用AnnexinVFITC及PI染色后流式细胞术进行,细胞死亡率检测采用台盼蓝染色法。结果转染pcDNA3．1-ALDH2后A549细胞中ALDH2表达显著增多（P〈0．05）,活性显著增强（P〈0．05）,转染ALDH2siRNA后A549细胞中ALDH2的表达显著减少（P〈0．05）,活性显著减弱（P〈0．05）,高氧暴露可显著降低ALDH2的表达及活性（P〈0．05）。转染pcD—NA3．1-ALDH2显著减轻了A549细胞高氧暴露后的脂质过氧化和细胞损伤程度（P〈0．05）,降低了细胞凋亡率及死亡率（P〈0．05）;转染ALDH2siRNA则显著加重了A549细胞高氧暴露后的脂质过氧化和细胞损伤程度（P〈0．05）,增加了细胞凋亡率及死亡率（P〈0．05）。结论ALDH2可以减轻高氧引起的肺泡上皮细胞损伤,其机制可能与ALDH2清除了细胞脂质过氧化产物有关。     

白三烯D4在体外对A549肺泡上皮细胞增殖及迁移的影响

目的：观察炎症介质白三烯D4（LTD4）对人肺泡上皮细胞株A549细胞增殖及迁移的影响。方法：以免疫荧光染色鉴定A549细胞上半胱氨酰白三烯（CysLT）受体的表达;以不同浓度（001～100 nmol/L）的CysLT受体激动剂LTD4处理A549细胞不同时间后,以MTT还原法检测细胞活性反映细胞增殖,以改良的划痕法观察细胞迁移的变化。结果：A549细胞表达CysLT1受体及CysLT2受体。001～100 nmol/L LTD4处理A549细胞24～72 h,细胞增殖无明显变化（均P>005）;100 nmol/L LTD4处理A549细胞24、48、72 h后,细胞活性分别为不加LTD4处理的A549细胞的（103.00±446）%、（107.00±945）%、（105.00±902）%,差异均无统计学意义（均P>005）。虽然001～100 nmol/L LTD4处理的第1个24 h内A549细胞的修复速率远高于第2个及第3个24 h内的细胞修复速率,但同一时间段组间差异无统计学意义（均P>005）。100 nmol/L 的LTD4处理A549细胞24、48、72 h后,细胞迁移率分别为不加LTD4处理的A549细胞的115、121、106倍（均P>005）,说明LTD4处理后细胞迁移亦无明显变化。结论：在体外给予001～100 nmol/L LTD4处理72 h,不影响A549细胞的增殖及迁移。     

白介素1-β对人肺腺癌细胞COX-2表达的作用及调节机制

目的 探讨细胞因子白介素-1β（IL-1β）对人肺腺癌细胞株A549细胞环氧合酶2（COX-2）表达的影响及调节机制。方法 A549细胞培养达80％融合后，用不同浓度的IL-1β（0、0.1、1、5和10ng／mL）干预或用5ng/mL IL-1β干预不同时间（0、3、6、9、12和24h）观察白介素-1β（IL-1β）对A549细胞COX-2表达的影响；用5ng／mL IL-1β与有丝分裂原激活的细胞外调节激酶（ERK）抑制剂PD098059、P38有丝分裂原激活的蛋白激酶（MAPK）抑制剂SB203580、蛋白激酶C（PKC）抑制剂H-7共同干预A549细胞观察IL-1β诱导A549细胞COX-2表达的信号传导途径；用COX-2系列报告基因质粒及对照质粒转染A549细胞后予以IL-1β干预，以不加IL-1β干预的细胞为对照组观察IL-1β对COX-2启动子的影响；westem blot检测COX-2蛋白表达，RT—PCR检测COX-2 mRNA表达。COX-2报告基因活性应用荧光素酶活性分析法测定。结果 A549细胞COX-2蛋白表达和mRNA表达呈IL-1β浓度依赖性表达增加，干预9h表达达高峰；SB203580、H-7可明显抑制IL-1β诱导A549细胞COX-2表达，PD098059对IL-1β诱导A549细胞COX-2表达无影响；IL-1β对COX-2报告基因无影响。结论 PKC途径和P38 MAPK途径参与IL-1β诱导A549细胞COX-2蛋白表达。     

Anti-miR-155反义寡核苷酸对A549细胞Weel表达的影响

目的观察anti-miR-155反义寡核苷酸（AMOs）对A549细胞Weel表达的影响。方法采用特异性an—ti-miR-155反义寡核苷酸抑制A549细胞内成熟miR一155的活性,realtimequantitiveRT—PCR测定WeelmRNA表达量,Westernblot测定Weel蛋白和Phospho—cdc2（Tyrl5）蛋白的表达量。结果lOOnmol／L浓度的AMOs处理的A549细胞中Weel1TIRNA表达量与对照组A549细胞中WeelITIRNA表达量相比无显著性差异（P〉0．05）;与对照组相比,100nmol／L浓度的AMOs处理的A549细胞Weel蛋白和Phospho—cdc2（Tyrl5）蛋白的表达量显著增加（P〈O．05）。结论采用AMOs抑制A549细胞内高水平表达miR-155活性后,可显著增强Weel蛋白的表达。     

大鼠脑出血后MMP-2和MMP-9的动态表达及七叶皂苷钠对其表达的影响

目的观察大鼠脑出血（ICH）后基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、MMP-9蛋白动态表达及其与血肿周围脑组织含水量的关系,以及观察七叶皂苷钠对MMP-2、MMP-9表达的影响。方法Wistar大鼠250只随机分为4组：正常对照组10只、假手术组80只、ICH组80只和七叶皂苷钠治疗组80只,于制模后6、12、24、48、72、120h、7d和15d 8个时间点,测定各组血肿周围脑组织含水量、MMP-2和MMP-9的蛋白表达。结果治疗组神经功能缺失较ICH组明显改善（P〈0.05）;6-120h治疗组血肿周围脑组织含水量较ICH组明显减少（P〈0.05）;ICH后MMP-2蛋白表达在6h达到高峰,12h时下降,与正常对照组相比,MMP-2蛋白表达具有统计学意义（P〈0.01）;治疗组MMP-2蛋白表达在各时间点较ICH组明显减少（P〈0.01）;ICH后MMP-9蛋白表达在6h开始上升,24-48达高峰,72h时下降,与正常对照相比,具有统计学意义（P〈0.01）,其表达水平与血肿周围脑组织含水量呈正相关（r=0.949,P〈0.05）;治疗组MMP-9蛋白表达在各时间点ICH组明显减少（P〈0.01）。结论大鼠ICH后MMP-2、MMP-9蛋白的表达是ICH后早、中期脑水肿形成主要因素,七叶皂苷钠能降低MMP-2、MMP-9蛋白表达和脑组织含水量,对ICH具有保护作用。     

罗格列酮对尿酸致腹膜间皮细胞损伤的干预作用

目的观察PPAR-γ激动剂罗格列酮对尿酸致腹膜间皮细胞（HPMC）增殖、损伤作用的影响。方法①细胞培养及分组：待生长状况良好的HPMC株60％-80％细胞贴壁后,无血清培养基同步24h,采用15μmol／L罗格列酮预处理细胞4h后,给予600μmol／L尿酸不同作用时间（24h、48h、72h）进行干预。②指标检测：采用细胞活性检测法检测HPMC增殖情况;采用乳酸脱氢酶测定试剂盒,检测培养液中乳酸脱氢酶（LDH）水平。结果①600μmol／L尿酸作用HPMC24h、48h、72h后,抑制HPMC增殖;与对照组比较,抑制增殖作用明显（P〈0．05）,差异有统计学意义;罗格列酮干预后,各不同时间点,尿酸对HPMC抑制作用减弱。②600μmol／L尿酸作用HPMC24h、48h、72h后,HPMC培养液中LDH水平增高,与对照组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）;罗格列酮干预后,各不同时间点,HPMC培养液中LDH水平降低（P〈0．05）。结论罗格列酮能够降低尿酸对HPMC增殖抑制、损伤作用。     

过氧化酶体增殖因子活化受体γ和环氧化酶2在幽门螺杆菌相关性疾病中的表达及意义

目的研究幽门螺杆菌（Hp）感染及其相关性疾病中过氧化酶体增殖因子活化受体1（PPAR-γ）、环氧化酶2（COX-2）的表达及其相互关系以探讨Hp的致病机理。方法采用二步法免疫组化方法检测了209例内镜活检的胃黏膜内COX-2、PPAR-1的表达。209例包括：浅表性胃炎（CSG）75例（其中Hp阳性50例、Hp阴性25例）,萎缩性胃炎（CAG）24例（其中Hp阳性13例、Hp阴性11例）,肠化与异型增生（IM＋DYS）90例（其中Hp阳性45例、Hp阴性45例）以及20例Hp阴性组织学大致正常的胃黏膜。同时还检测了36例Hp持续感染10年以上的CSG患者10年前后胃黏膜内COX-2、PPAR-1的表达。结果（1）从对照组→CSG→CAG→IM＋DYS,腺细胞内的COX-2表达逐渐较强,阳性率分别为20％、42．7％、25．8％和61．1％（P〈0．01或P〈0．05）;炎症细胞中COX-2阳性率分别为0、32％、29．2％和36．7％,各疾病组均高于对照组（均P〈0．05）。（2）CSG组及IM＋DYS组Hp阳性者腺细胞和炎细胞中COX-2的表达均显著高于Hp阴性者（P〈0．01或P〈0．05）。（3）从对照组→CSD→CAG→IM＋DYS,腺细胞内PPAR-1阳性率分别为0、18．7％、29．2％和45．6％（P〈0．01或P〈0．05）;炎细胞内PPAR-γ阳性率分别为0、22．5％、20．8％和22．2％（各疾病组问比较,P〉0．05）。（4）炎症细胞中PPAR-γ表达在CSG组、IM＋DYS组Hp阳性者均显著高于Hp阴性者（P〈0．01）;腺细胞中PPAR-γ的表达在CSG组、IM＋DYS组Hp阳性者均显著高于Hp阴性者（P〈0．05）。（5）Hp持续感染的CSG患者,炎症细胞内COX-2的表达10年后显著低于10年前（P〈0．05）,而炎症细胞内PPAR-γ的表达10年前后差异无统计学意义（P〉0．05）。（6）Hp持续感染的CSG患者,10年后腺细胞内COX-2、PPAR-γ的表达均显著高于10年前（P〈0．01）。（7）Hp阴性的各疾病组,炎细胞内COX-2和PPAR-γ的表达相互间均无相关性（r=0．006和0．149,均P〉0．05）;在腺细胞内它们的表达在IM＋DYS组呈显著正相关（r=0．336,P〈0．05）,其余各疾病组COX-2和PPAR-γ的表达均无相关性（r=0．035和0．126,均P〉0．05）。（8）Hp阳性的各疾病组,炎细胞和腺细胞内COX-2、PPAR-γ的表达相互间呈显著正相关性（r=0．348和0．645,P〈0．05或P〈0．01）。结论（1）Hp感染可诱导胃黏膜炎细胞和腺细胞内COX-2和PPAR-γ的过度表达,Hp可能通过上调COX-2和PPAR-γ的表达参与胃癌发生的早期进程。（2）Hp感染诱导的COX-2的表达与Hp感染所致的急性炎症有关;随着感染时间延长,COX-2、PPAR-γ的表达变化可能比病理形态学检查更早的反映Hp感染引起的CSG→CAD→IM→DYS→胃癌这一病变过程。     

盐酸戊乙奎醚抑制白细胞介素-1β诱导A549细胞分泌细胞间黏附分子-1及其机制的研究

目的探讨盐酸戊乙奎醚（PHC）抑制白细胞介素-1β（IL-1β）诱导A549细胞分泌细胞间黏附分子-1（ICAM-1）及其作用机制。方法体外培养A549细胞株,分别用培养液（A组）、PHC（B组）、IL-1β（C组）和IL-1β＋PHC（D组）处理,NF-κB DNA结合活性试剂盒检测刺激后1 h NF-κB DNA结合活性;反转录-聚合酶链反应检测刺激后4 h ICAM-1 mRNA表达;酶联免疫吸附法检测刺激后24 h ICAM-1蛋白表达。结果 IL-1β刺激后,C组NF-κB DNA结合活性、ICAM-1 mRNA和蛋白明显升高（P〈0.01）,D组NF-κB DNA结合活性、ICAM-1 mRNA和蛋白高于A组（P〈0.05）,但低于C组（P〈0.05）,PHC预处理能抑制IL-1β诱导的NF-κB DNA结合活性、ICAM-1 mRNA和蛋白表达升高。结论 PHC可抑制IL-1β诱导A549细胞分泌ICAM-1,其机制可能通过抑制NF-κB激活。     

PPAR-γ配体对胆管癌细胞侵袭相关基因MMP-7、TIMP-1表达的调控

目的探讨PPAR-γ经其配体吡咯列酮（pioglitazone,PGZ）激活后,对胆管癌细胞侵袭相关基因MMP-7、TIMP-1表达的影响以及可能机制。方法以体外培养的人肝门胆管癌细胞系QBC939细胞为研究对象：MTT法检测PGZ对QBC939细胞的增殖抑制率;PT-PCR了解QBC939细胞中MMP-7、TIMP-1表达情况;荧光定量PCR（FQ-PCR）检测PGZ对MMP-7、TIMP-1表达的影响。结果MTT提示在12h干预点、浓度（5-40μmol/L）时,PGZ的细胞毒性作用不明显（P〉0.05）。PT-PCR证实QBC939细胞中存在MMP-7、TIMP-1 mRNA水平的表达,前者的表达水平高于后者;荧光定量PCR结果显示,PGZ能分别下调和上调MMP-7 mRNA、TIMP-1 mRNA的表达,但后者无统计学意义（P=0.125）。结论PPAR-γ经其配体PGZ激活后能调控QBC939细胞的MMP-7、TIMP-1表达,从而可能改变其体外侵袭力。     

PPA Rγ激动剂干预对急性胰腺炎小鼠肝损伤的影响

目的：探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）激动剂罗格列酮对急性胰腺炎小鼠肝损伤的影响并对其机制进行初步研究。方法72只健康雄性昆明小鼠分为3组,急性胰腺炎组（AP组）、罗格列酮预处理组（AP‐ROS组）和生理盐水组（N S组）,每组24只。分别于建模后6 h、12 h和24 h处死小鼠,全自动生化分析仪检测血清淀粉酶、丙氨酸氨基转移酶（A L T ）和天门冬氨酸氨基转移酶（AST ）水平。运用RT‐PCR方法检测肝脏组织NF‐κB和PPARγmRNA表达,应用Western blot技术检测肝脏组织PPARγ和NF‐κB p65蛋白表达。结果小鼠血清淀粉酶、ALT 和AST水平在相对应的各时间点AP组比NS组明显升高（P＜0．01）,AP‐ROS组较AP组明显降低（P＜0．01）。AP组肝脏组织PPARγmRNA和蛋白表达在造模后6 h和12 h均低于NS组（P＜0．05）;AP‐ROS组PPARγmRNA和蛋白表达在各时间点均明显高于AP组和NS组（P＜0．01）。AP组肝脏组织NF‐κB mRNA和NF‐κB p65蛋白表达水平在各时间点与AP‐ROS组和NS组相比较均升高（P＜0．01）。结论 NF‐κB与小鼠急性胰腺炎肝损伤有明显关系,PPARγ在肝损伤中的表达受到抑制;罗格列酮在AP早期能增强PPARγ表达,抑制NF‐κB的表达。