芦荟大黄素对人结肠癌细胞SW480增殖周期及凋亡的影响

目的:探讨芦荟大黄素对人结肠癌细胞SW480细胞生长的抑制作用及其对细胞增殖周期和凋亡的影响.方法:采用甲基噻唑(MTT)比色法和生长曲线测定不同浓度芦荟大黄素在不同作用时间内对在体外培养SW480细胞增殖的影响,同时应用流式细胞术检测细胞增殖周期及凋亡率的变化.结果:芦荟大黄素可在G0/G1期阻滞人结肠癌细胞SW480的增殖,使S期细胞比率降低;在一定范围内,芦荟大黄素的浓度越高、作用时间越长,对肿瘤细胞生长的抑制作用越强,凋亡率也越高.结论:芦荟大黄素能抑制人结肠癌细胞SW480细胞生长,并诱导细胞凋亡而阻断细胞周期.     

DADS对人结肠癌SW480细胞凋亡的影响

目的：探讨二烯丙基二硫（diallyl disulfide,DADS）诱导人结肠癌SW480细胞凋亡的作用。方法：采用MTT、细胞计数法,观察不同浓度和作用时间DADS对SW480细胞的生长抑制作用;施用流式细胞术检测不同浓度DADS对SW480细胞的凋亡率。结果：MTT法显示,DADS能明显抑制SW480细胞生长增殖,呈浓度和时间依赖性,细胞生长增殖速度明显减慢。细胞计数表明,当DADS浓度增加时,SW480细胞群体倍增时间延长,与对照组比较,差异有显著性意义（P〈0．05）。流式细胞仪分析显示,随着DADS处理浓度增加,使SW480细胞凋亡率逐渐增高,差异有显著性意义（P〈0．05）。结论：DADS具有诱导人结肠癌SW480细胞凋亡的作用。     

藤黄酸对人结肠癌SW480细胞增殖及VEGFR2表达的影响

目的:观察藤黄酸对人结肠癌SW480细胞增殖和血管内皮细胞受体2(VEGFR2)表达的影响,探讨其可能抗肿瘤的作用机制。方法:以不同浓度的藤黄酸干预体外培养的人结肠癌细胞株SW480,分别于24、36、48h后,应用MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞周期分布和细胞凋亡率,Western-blot分析VEGFR2蛋白的变化。结果:藤黄酸对结肠癌细胞株SW480生长增殖具有明显抑制作用,其效应呈浓度和时间依赖性。流式细胞仪分析显示SW480细胞呈G2/M期阻滞;SW480细胞的凋亡率随藤黄酸浓度增加逐步上升。用不同浓度的藤黄酸处理SW480细胞株24h,VEGFR2蛋白的表达随药物浓度的增加而减少(P<0.01)。结论:藤黄酸能够明显抑制人结肠癌细胞株SW480的增殖,诱导SW480细胞发生G2/M期阻滞,其作用机制可能与抑制VEGFR2表达有关。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对结肠癌细胞株抑制作用的体外研究

目的探讨绿茶提取物表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对结肠癌细胞株(LoVo细胞、SW480细胞、HT29细胞、HCT-8细胞)增殖的抑制作用及对细胞凋亡和细胞周期的影响,研究其对结肠癌的抑癌机制。方法体外培养结肠癌细胞株,采用不同浓度的EGCG(10,20,35μg/ml)对其进行干预,MTT法检测EGCG对结肠癌细胞株增殖的抑制作用;用流式细胞仪检测EGCG对结肠癌细胞株凋亡和细胞周期的影响。结果 MTT法检测EGCG对结肠癌细胞株的抑制作用均具有浓度依赖性,且HT29细胞株尚具有时间依赖性。流式细胞仪检测EGCG能增强结肠癌细胞株的凋亡率,且剂量与凋亡率呈正相关。EGCG能将SW480细胞和LoVo细胞细胞周期阻滞在G0/G1期,阻碍其向S期转换,将HCT-8细胞阻滞在G2/M期,阻碍其向M期转换,将HT29细胞阻滞在S期,阻碍其向G2期转换,抑制结肠癌细胞株的增殖。结论EGCG对体外培养的结肠癌细胞株的增殖有明显抑制作用,其作用机制与增强细胞凋亡和影响细胞周期有关,具体作用机制有待进一步研究。     

复方肠泰抑制人结肠癌SW480细胞增殖的实验研究

目的:考察复方肠泰(人参、薏苡仁、莪术等)对人结肠癌细胞SW480细胞生长的抑制作用及其对细胞增殖周期和凋亡的影响。方法:采用噻唑蓝比色法测定不同浓度复方肠泰在不同作用时间内对在体外培养SW480细胞增殖的影响,同时应用流式细胞术检测细胞增殖周期及凋亡率的变化。结果:复方肠泰可在G0/G1期以及G2/M期阻滞人结肠癌细胞SW480的增殖,使S期细胞比率降低。结论:复方肠泰在3.51～7.81mg/mL范围内呈现明显的量效关系。     

峨参内酯与5-FU联用对SW480多细胞球模型的影响及机制研究

目的:探讨峨参内酯与5-FU联用对人结肠癌SW480三维立体多细胞球模型的作用及其机制。方法:采用CCK8法检测峨参内酯及峨参内酯与5-FU联用对SW480三维立体多细胞球模型的抑制作用;采用流式细胞仪观察分析峨参内酯与5-FU联用对SW480三维立体多细胞球模型细胞周期和细胞凋亡的影响;采用蛋白质印迹(Western blot)技术检测分析峨参内酯与5-FU联用对SW480三维立体多细胞球模型细胞中FAK、COX2蛋白表达的影响。结论:峨参内酯对人结肠癌SW480三维立体多细胞球模型有明显的抑制作用,呈现出一定的药物剂量依赖性,其半数致死量分别为26.82μg/m L;峨参内酯与5-FU联用时,细胞活力显著降低,且随着峨参内酯浓度的加大而逐渐降低;5-FU可使SW480细胞周期停止在S期,峨参内酯可使SW480细胞周期停止在S期、G2/M期,两种药物配合使用,可使SW480细胞周期停止在S期、GA/M期并最终诱导细胞凋亡,并且能够明显抑制细胞中FAK、COX2两种蛋白的表达。     

蜘蛛香提取物对人结肠癌SW480细胞增殖抑制及抗转移作用

目的:观察蜘蛛香提取物对体外培养人结肠癌SW480细胞增殖抑制及抗转移作用。方法:观察蜘蛛香提取物(400μg/m L)及80μg/m L的5-FU(阳性对照组)对SW480细胞的影响;通过MTT法、细胞脱落实验、病理观察、流式细胞仪检测观察蜘蛛香提取物对结肠癌SW480细胞的增殖抑制、促进凋亡等作用;通过划痕和同质性黏附实验观察其抗结肠癌SW480细胞转移作用。结果:MTT法检测显示蜘蛛香提取物及5-FU均能对SW480细胞产生明显的抑制作用;病理观察发现,经蜘蛛香提取物及5-FU作用后的SW480细胞,呈明显的凋亡状态;流式细胞仪检测发现,蜘蛛香提取物能使S期和G2/M期细胞百分比增加;细胞脱落实验进一步表明,与空白对照组相比,各药物组均能增强细胞的脱落率,抑制细胞的增殖,具有极显著性差异(P<0.01);划痕和同质性黏附实验表明,蜘蛛香提取物能显著降低结肠癌SW480细胞的移动能力(P<0.05)。结论:蜘蛛香提取物对人结肠癌SW480细胞有明显的增殖抑制和抗转移作用。     

通泰合剂对大肠癌细胞增殖抑制及抗转移作用的实验研究

目的:观察通泰合剂对人结肠癌SW480细胞增殖的抑制作用以及对MMP-2、TIMP-2表达的影响,观察其对大肠癌细胞的增殖抑制及抗转移作用。方法:采用四唑盐比色法测定通泰合剂对SW480细胞增殖的影响,应用免疫组化法观察其对MMP-2、TIMP-2阳性表达细胞数的影响。结果:通泰合剂可阻滞SW480细胞的增殖,在一定范围内,通泰合剂的浓度越高,对肿瘤细胞增殖的抑制作用越强;与空白对照组比较,通泰合剂组作用72h后MMP-2表达阳性细胞明显减少,TIMP-2阳性细胞表达率明显增高。结论:通泰合剂能抑制人结肠癌SW480细胞的增殖及转移,其抗转移作用机制可能与调节MMP-2/TIMP-2的平衡相关。     

藤黄酸对人结肠癌LOVO、SW480细胞端粒酶的抑制作用

目的探讨藤黄酸(GA)对人结肠癌LOVO、SW480细胞端粒酶的抑制作用及可能机制。方法用不同浓度的藤黄酸作用体外生长的人结肠癌LOVO、SW480细胞,采用CCK-8法检测两株细胞增殖抑制率,蛋白质印迹法(Western blot)检测两株细胞h TERT蛋白表达,实时荧光定量QRT-PCR法检测h TERT mRNA表达。结果藤黄酸对人结肠癌LOVO、SW480细胞具有显著抑制增殖作用,并呈现明显的浓度及时间依赖性(P0.05或P0.01);Western blot结果显示,藤黄酸能降低LOVO、SW480细胞h TERT蛋白的表达,且呈浓度依赖性(P0.05或P0.01);QRT-PCR测定显示,藤黄酸能降低LOVO、SW480细胞h TERTmRNA的表达,呈浓度依赖性(P0.05或P0.01)。结论藤黄酸能够显著抑制人结肠癌LOVO、SW480细胞的增殖,其机制可能是通过下调h TERT mRNA的表达而有效地抑制癌细胞端粒酶活性。     

马钱子碱对人结肠癌细胞SW480增殖和周期的影响及机制研究

目的探讨马钱子碱对人结肠癌细胞株SW480的增殖和周期的影响及可能的分子机制。方法将试验分为空白对照组和马钱子碱高(8μmol/L)、中(4μmol/L)、低剂量组(2μmol/L),细胞生长曲线检测马钱子碱干预前后各组SW480细胞的增殖情况;流式细胞术检测马钱子碱对各组SW480细胞周期的影响;RT-PCR检测马钱子碱对SW480细胞中Wnt3a、β-catenin、C-myc、CyclinD1的mRNA表达的调节作用;Western Blot试验检测马钱子碱对SW480细胞中Wnt3a、β-catenin、C-myc、CyclinD1蛋白表达的调节作用。结果细胞生长曲线表明,在一定范围内,马钱子碱给药浓度越高,对SW480细胞增殖的抑制作用越显著,以高剂量组为最优。流式细胞术试验表明,马钱子碱可显著升高G2/M期的SW480细胞数量,从而将SW480周期阻滞在G2/M期。RT-PCR和Western Blot试验结果显示,马钱子碱干预后Wnt3a、β-catenin、C-myc、CyclinD1的mRNA和蛋白表达相较于正常对照组其表达明显降低。结论马钱子碱可通过调节Wnt/β-catenin信号通路抑制结肠癌细胞SW480增殖并将SW480细胞周期阻滞在G2/M期。     

姜黄素调控结肠癌SW480细胞skp2-p27kip通路的研究

目的：探讨姜黄素抑制结肠癌细胞增殖并促进其凋亡的分子机制。方法：通过MTT检测不同浓度姜黄素（0,7.5,15,30,60μmol/L）处理结肠癌细胞SW480后凋亡情况;通过蛋白免疫印迹方法检测不同浓度姜黄素（0,7.5,15,30,60μmol/L）处理结肠癌细胞后细胞中skp2、p27kip蛋白表达情况。结果：姜黄素能抑制结肠癌细胞SW480增殖并促进其凋亡,有浓度和时间依赖;姜黄素降低了结肠癌细胞SW480中skp2蛋白的表达（P〈0.05）,而促进了p27kip蛋白的表达,有时间和剂量依赖,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：姜黄素能抑制结肠癌细胞SW480的增殖并促进其凋亡,有时间和剂量依赖,这种抗癌效应可能与干扰skp2-p27kip通路有关。     

冬虫夏草提取液抑制结肠癌细胞增殖的研究

目的:观察冬虫夏草提取液对体外培养的人结肠癌细胞株HT-9、SW480的抑制效应,并利用报告基因技术初步探明其发挥抑制作用的机制。方法:体外培养两种结肠癌细胞株,加入冬虫夏草提取液干扰,使用MTT法检测对肿瘤细胞增殖的抑制作用。利用报告基因技术,检测转染荧光素酶报告基因后的SW480细胞内NF-κB相对活性,观察冬虫夏草提取液对细胞NF-κB活性的影响。分离细胞胞质蛋白,使用免疫蛋白印迹技术检测各组细胞内NF-κB抑制蛋白(IκBα)的含量,观察虫草提取液对IκBα的影响。结果:冬虫夏草提取液可以有效的抑制两种结肠癌细胞的增殖,并具有良好的剂量-效应关系。报告基因检测结果表明TNF-α可明显增强NF-κB活性(P<0.05),而冬虫夏草提取液可抑制这种激活作用(P<0.05);免疫蛋白印迹实验表明,虫草提取液可有效抑制细胞内IκBα的降解。结论:冬虫草提取液可以抑制IκBα的降解,从而抑制NF-κB活性并通过这种作用抑制结肠癌细胞增殖。     

牛蒡子苷元对结肠癌细胞增殖的影响及相关机制研究

目的：探讨牛蒡子苷元对结肠癌细胞系SW480增殖的影响及相关机制。方法：以结肠癌细胞系SW480为研究对象,通过MTT比色法检测牛蒡子苷元对SW480细胞生长速度和倍增时间的影响;通过软琼脂克隆形成实验观察牛蒡子苷元对SW480细胞软琼脂集落形成率的影响;应用RT—PCR技术探讨牛蒡子苷元对SW480细胞增殖的相关机制。结果：①不同浓度牛蒡子苷元处理的SW480细胞生长速度明显减慢,倍增时间显著延长,并且呈现一定的浓度和时间依赖性;②SW480亲本细胞和牛蒡子苷元（20mg／L）处理24h的SW480细胞的克隆形成率分别为24．933％和4．533％（P〈0．01）,与SW480亲本细胞相比,牛蒡子苷元（20mg／L）处理24小时的SW480细胞形成的克隆体积较小;（3）与SW480亲本细胞相比,20mg／L牛蒡子苷元处理的SW480细胞中,cyclinA基因表达没有明显变化,p21基因表达上调,而cyclinB、cyclinE基因表达下调。结论：①牛蒡子苷元可抑制SW480细胞的增殖能力。②诱导p21基因表达上调,cyclinB和cyclinE基因表达下调是牛蒡子苷元抑制SW480细胞增殖的可能机制。     

人参皂苷CK抑制人结肠癌SW480细胞增殖的机制研究

目的研究人参皂苷CK对人结肠癌SW480细胞增殖及凋亡的影响,并进一步探讨其作用机制。方法采用CCK-8法检测细胞活力;通过流式细胞术检测细胞周期、细胞凋亡、活性氧(ROS)水平和线粒体膜电位(MMP)变化;Hoechst染色检测细胞凋亡;蛋白免疫印迹法检测细胞色素C(CytC)释放以及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和cleaved Caspase-3等的表达。结果人参皂苷CK对SW480细胞的增殖有显著抑制作用。人参皂苷CK诱导SW480细胞周期阻滞于G0/G1期,促进细胞发生早期凋亡。人参皂苷CK可以显著增加细胞内ROS水平,降低MMP水平;人参皂苷CK促进Bax和cleaved Caspase-3的表达,抑制Bcl-2的表达。此外,人参皂苷CK使SW480细胞内CytC大量释放。结论人参皂苷CK对SW480细胞的增殖具有显著的抑制作用,其作用机制可能是通过促进线粒体超氧化物升高,导致胞内ROS水平显著增加和MMP显著下降,进而导致CytC释放,上调Bax的表达,下调Bcl-2的表达,最终导致细胞发生凋亡。     

桔梗皂苷D抑制人结肠癌SW620细胞增殖及其机制的研究

 目的 研究桔梗皂苷D对人结肠癌SW620细胞增殖的影响及作用机制。方法 采用人结肠癌细胞株SW620细胞,分别以四甲基偶氮唑蓝法观察桔梗皂苷D对细胞增殖的抑制作用,以流式细胞术检测桔梗皂苷D对细胞周期分布和凋亡的影响, 蛋白质免疫印迹法检测桔梗皂苷D对细胞周期蛋白和凋亡蛋白表达的影响。结果 与空白对照组比较,桔梗皂苷D呈剂量依赖地抑制人结肠癌SW620细胞的生长;15、20 μmol·L^-1桔梗皂苷D作用细胞24 h后,显著增加G₀/G₁期细胞比例,分别为(72.83±5.26)%和(76.82±5.83)%(P<0.05,空白对照组(56.78±4.92)%,周期蛋白cyclinD1、c-myc、CDK6表达明显下调;10、15、20 μmol·L^-1桔梗皂苷D作用细胞48 h后,明显增加细胞凋亡率,分别为（19.5±5.1）%、（35.8±5.3）%和（43.8±4.0）%(P<0.05,空白对照组（8.93±5.72）%,相关蛋白pro-caspase3、PARP表达下降。结论 桔梗皂苷D通过调控周期蛋白cyclinD1、c-myc、CDK6的表达,将细胞阻滞于G₁期,进而诱导细胞凋亡,抑制人结肠癌细胞SW620的增殖。     

抑癌方对结肠癌转移潜能及血管生成拟态的影响

目的:观察结肠癌细胞的转移潜能(迁移、侵袭力)是否和血管生成拟态(VM)存在相关性;探讨抑癌方对结肠癌转移潜能的影响,及其机制是否与VM有关。方法:以实验中可以形成VM的人结肠癌细胞为VM(+)组,不能形成VM的人结肠癌细胞为VM(-)组,划痕、Transwell侵袭实验观察其迁移、侵袭能力;对VM(+)组细胞进行后续实验,分组如下:抑癌方处理过的中药组和未经处理的空白对照组,划痕、侵袭实验观察其迁移、侵袭能力,体外三维培养法观察其血管生成拟态的形成情况。结果:三维培养环境下,人结肠癌细胞株HCT116可以形成VM为VM(+)组,HT29不能形成VM为VM(-)组,VM(+)组的迁移、侵袭力明显强于VM(-)组(P<0.05),且VM密度和细胞的迁移呈正相关(r=0.994,P<0.05),VM密度和侵袭力呈显著正相关(r=0.998,P<0.05);经抑癌方处理的中药组其迁移、侵袭力明显弱于未处理的对照组(P<0.05),中药组的VM密度和对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:结肠癌的迁移、侵袭能力和VM存在相关性,抑癌方可以抑制结肠癌细胞的迁移和侵袭能力,其机制可能和抑制VM的形成有关。     

蜂毒素对人胃癌细胞株BGC-823凋亡及其细胞周期的影响

目的：观察蜂毒素体外对人胃癌细胞株BGC-823增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法：采用MTT法观察不同浓度的蜂毒素（32,16,8,4,2μg/mL）体外对人胃癌细胞株BGC-823增殖的影响,并用流式细胞仪检测其诱导的细胞凋亡和周期阻滞效应。结果：①与对照组比较,蜂毒素有抑制人胃癌细胞株BGC-823增殖的作用（P〈0.01）,随着药物浓度的增大,其对细胞的抑制率也明显增大,呈现剂量依赖性。②蜂毒素浓度从4μg/mL开始,即可诱导细胞产生凋亡,随着剂量的增加诱导凋亡的效果更加明显。③在细胞周期方面,与阴性对照比较,蜂毒素作用24小时后S期细胞比例上升,而G0/G1期比例明显下降,蜂毒素浓度达到16μg/mL时G0/G1期前出现明显的亚二倍体区。结论：蜂毒素对人胃癌细胞株BGC-823的增殖具有抑制作用,且能够引起该细胞的凋亡及改变其细胞周期。     

贝母素甲抑制人乳腺癌细胞MCF-7/TAM增殖及其对细胞凋亡的影响

目的:探讨贝母素甲抑制耐三苯氧胺人乳腺癌细胞MCF-7/TAM的增殖及其机制。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色分析法检测贝母素甲作用于MCF-7/TAM细胞后的抑制率;用流式细胞术检测细胞周期和凋亡率;用免疫细胞化学法检测Bcl-2表达变化。结果:贝母素甲对MCF-7/TAM细胞有明显的抑制作用,呈浓度和时间依赖性。作用48h后能诱导细胞凋亡,细胞周期被阻滞于G1期(P0.05)。免疫细胞化学法检测Bcl-2表达减弱(P0.01)。结论:贝母素甲可抑制MCF-7/TAM细胞的增殖,并诱导其凋亡。     

透骨草提取物对人结肠癌SWⅢ-C细胞增殖及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的:观察透骨草提取物对人结肠癌SWⅢ-C细胞增殖的影响,探讨透骨草提取物对SWⅢ-C细胞增殖影响的分子机制。方法:MTT法检测透骨草提取物对SWⅢ-C细胞增殖的影响,荧光显微镜观察透骨草提取物对SWⅢ-C细胞形态的影响,免疫组化方法检测SWⅢ-C细胞Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果:6.25~100μg/mL透骨草提取物处理的SWⅢ-C细胞增殖抑制率与对照组相比显著增加(P0.05),而且随透骨草浓度的增加,抑制率逐渐增加。透骨草提取物对SWⅢ-C细胞的半数抑制浓度(IC50)为38.36μg/mL。荧光显微镜下可见,38.36μg/mL透骨草提取物处理的SWⅢ-C细胞,体积缩小,细胞核固缩、呈新月状且边集。38.36μg/mL透骨草提取物处理的SWⅢ-C细胞Bcl-2蛋白表达显著低于对照组(P0.05),而Bax蛋白表达明显高于对照组(P0.05)。结论:透骨草提取物可以抑制人结肠癌SWⅢ-C细胞增殖,诱导SWⅢ-C细胞凋亡,其机制可能与下调Bcl-2蛋白表达、上调Bax蛋白表达有关。